Abstract
somatostatinreseptorer (SSTS) er uttrykt i skjoldbruskkjertelen kreftceller, men deres biologiske betydningen er ikke godt forstått. Hensikten med denne studien var å vurdere SSTS i godt differensiert (WDTC) og dårlig differensiert skjoldbruskkjertelkreft (PDTC) ved hjelp av bildebehandling og molekylære verktøy og sitt forhold til effekten av somatostatin analog behandling. Tretti-ni tilfeller av skjoldbruskkreft ble evaluert (20 PDTC og 19 WDTC). Depreotide scintigrafi og mRNA-nivåer i SST-undertyper, inkludert den avkortede variant sst5TMD4, ble utført. Depreotide skanninger var positive i tilbakevendende svulst i halsen i 6 av 11 (54%) PDTC, og hos pasienter med lungemetastaser i 5/11 tilfeller (45,4%); sst5TMD4 var til stede i 18/20 (90%) av PDTC, som er den tettest uttrykt SST-subtype, med en 20-dobling i forhold til sst2. I WDTC, sst2 var mest representert, mens sst5TMD4 ikke ble funnet; sst2 ble betydelig økt i PDTC i forhold til WDTC. Fem depreotide positiv PDTC mottatt oktreotid for 3-6 måneder i en pilotstudie med noen endringer i størrelsen av lesjonene i tre av dem, og en betydelig økning i lunge og celleforandringer i de andre 2. Alle PDTC pasienter behandlet med oktreotid viste høy uttrykk for sst5TMD4. ROC kurven analyse viste at bare sst5TMD4 diskriminerer mellom PDTC og WDTC. Vi konkluderer med at sst5TMD4 er overuttrykt i PDTC og kan være involvert i mangel på respons på somatostatin analog behandling
Citation. Puig-Domingo M, Luque RM, Reverter JL, López-Sánchez LM, Gahete MD, Culler MD, et al. (2014) den avkortede isoformen av Somatostatin Receptor5 (sst5TMD4) er assosiert med dårlig differensiert skjoldbruskkjertelen. PLoS ONE 9 (1): e85527. doi: 10,1371 /journal.pone.0085527
Redaktør: Miguel López, Universitetet i Santiago de Compostela School of Medicine – CIMUS, Spania
mottatt: 13 september 2013; Godkjent: 28 november 2013; Publisert: 21 januar 2014
Copyright: © 2014 Puig-Domingo et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. M. Puig-Domingo, JP Castaño, RM Luque og I. Halperin har fått forelesninger avgifter fra Novartis og Ipsen. M. Puig-Domingo har mottatt honorarer for deltakelse i rådgivende styrene fra Genzyme. Dette arbeidet har vært finansiert av følgende tilskudd: BIO-0139, CTS-5051, PI-036-2012, BFU2010-19300, CIBERobn, (til R.M. Luque og J.P. Castaño); «Sara Borrell» program CD11 /00 276 (til M.D. Gahete) og «Juan de la Cierva» program JCI-2009-05675 (til L.M. López-Sánchez). Dette arbeidet ble delvis støttet av Novartis Oncology Spania (M. Puig-Domingo og I. Halperin). Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:. M. Puig-Domingo, J.P. Castaño, R.M. Luque og I. Halperin har fått forelesninger avgifter fra Novartis og Ipsen. M. Puig-Domingo har mottatt honorarer for deltakelse i rådgivende styrene fra Genzyme. Dette arbeidet har vært finansiert av følgende tilskudd: BIO-0139, CTS-5051, PI-036-2012, BFU2010-19300, CIBERobn, (til R.M. Luque og J.P. Castaño); «Sara Borrell» program CD11 /00 276 (til M.D. Gahete) og «Juan de la Cierva» program JCI-2009-05675 (til L.M. López-Sánchez). Dette arbeidet ble delvis støttet av Novartis Oncology Spania (M. Puig-Domingo og I. Halperin). Dette endrer ikke forfatternes tilslutning til alle PLoS ONE politikk på deling av data og materialer.
Innledning
Thyroid cancer i sin papillær og follikulær godt differensierte former (WDTC) har en utmerket prognose med svært høye kur priser etter kirurgisk behandling etterfulgt av radiojod [1], [2]. Men behandling av pasienter med dårlig differensiert (PDTC) radiojod (RAI) -refractory skjoldbruskkjertelkreft er kontroversielt og vanskelig, med ingen effektiv behandling tilgjengelig før den siste opptreden av multi-target tyrosinkinasehemmere [3]. Det er vanligvis akseptert at PDTC oppstår enten
de novo
eller fremgang fra en pre-eksisterende WDTC gjennom en flertrinnsprosess av genetiske og epigenetiske forandringer. Nye molekylære stier og mål er under forskning for å oppdage dedifferentiation prosessen med skjoldbruskkjertelen kreftceller [4].
Somatostatin er en allestedsnærværende peptid fra sentralnervesystemet-mage-tarmkanalen som utøver mange biologiske funksjoner i både endokrine og ikke -endocrine vev ved å binde seg til sine fem reseptor-subtyper (sst1-5) [5]. Ekspresjon av somatostatin-reseptorer (SSTS) i tumorer som oppstår fra forskjellige vev har vært grunnlaget for ved hjelp av somatostatin-analoger som en bio-terapeutisk alternativ for derved fører til stabilisering av tumorvekst og øke pasient overlevelsestid i noen typer kreft [6], [7 ]. Nyere og gamle studier indikerer tilstedeværelse av SSTS i prøver av ulike patologiske tilstander i skjoldbruskkjertelen inkludert ikke-medullær skjoldbruskkjertelkreft [8], [9]
SST reseptoren familie har vært fullstendig karakterisert, og klassisk, 5 undertyper har blitt identifisert med ulike biologiske konsekvenser i cellesyklusen [8]. SST subtyper 2 og 5 er involvert i kontrollen av hormon, så vel som cellevekst, mens SST1, 3 og 4 er stort sett implisert i ikke-hormonelle funksjoner [10] – [12]. Somatostatin analoge behandlinger som brukes i klinisk praksis involverer binding av sst2 og 5 med forskjellig affinitet [13], [14], med sst2 å ha maksimal bindingsaffinitet til den mest for tiden brukes forbindelser, oktreotid og lanreotid [15], mens pasireotide er en ny forbindelse målretting sst5 med høyere affinitet [16], [17]. Nylig har to nye funksjonelle menneskelige sst5 varianter er identifisert, den såkalte sst5TMD4 og sst5TMD5, generert gjennom ikke-kanoniske spleising, og viser unike molekylære /funksjonelle egenskaper [18], [19]. Interessant, sst5TMD4 er oppdaget hos pasienter med GH-sekresjon adenomer og brystkreft [19] – [21]. sst5TMD4 uttrykk har vært knyttet til dårlig respons på oktreotid behandling i akromegali. Imidlertid er funksjonell betydning ikke godt beskrevet i andre typer svulster.
Her gjennomførte vi en retrospektiv studie på molekylært nivå for å undersøke mulighetene sammenslutning av SST subtyper fenotype, og spesielt sst5TMD4, i WDTC og PDTC pasienter, dens potensielle bruk som en biologisk markør og dens terapeutiske implikasjoner.
Materialer og metoder
undersøkelsen ble utført i henhold til prinsippene i Helsinkideklarasjonen, (revisjon av Edinburgh 2000) og ble godkjent av human forskningsetiske komité for Hospital Clinic de Barcelona (Comité Ético de INVESTIGACION Clínica, CEIC), Barcelona, Spania. Naturen av studien ble forklart til pasientene, og skriftlig informert samtykke ble innhentet i hvert enkelt tilfelle.
Pasienter
Studiegruppen besto i 39 pasienter (29 kvinner /10 menn) fra to universitetssykehusene. Blant disse 39 fagene, 20 pasienter hadde PDTC (tabell 1) med gjennomsnittsalder 57 ± 13 år, (12 kvinner /8 menn); fra de 20 PDTC tilfeller, 18 var papillærtumorer og to var av follikulær opprinnelse. Alle hadde aktiv sykdom (stadium IV av TNM-klassifikasjon), med en oppfølging fra 6 til 21 år og ni av dem døde under oppfølging. Tyreoglobulin konsentrasjoner i disse pasientene varierte 4-29595 ng /ml. Alle pasientene ble behandlet med en lignende terapeutisk protokoll følgende internasjonale retningslinjene anbefalinger [1], [2]. De pasientene peiling PDTC kreves flere operasjoner når indikeres og mer enn én dose av RAI; RAI terapi ble ikke lenger brukes når RAI opptaket ble negativt til tross for sykdomsprogresjon. PDTC pasienter ble behandlet med tyroksin ved undertrykkende doser, mens det godt differensierte tilfeller mottatt tyroksin ved en dose rettet mot TSH en normal lav verdi (mindre enn 2 mlU /ml). Alle PDTC tilfeller viste negativ RAI fangst kapasitet i løpet av deres utvikling, og alle hadde lokoregionalt hals tilbakefall og /eller extracervical metastaser, enten i det sentrale nervesystemet, bein, lunge eller mediastinum oppdaget av ulike bildeteknikker, inkludert ultralyd, CT-scan, MRI, og
18F-FDG-PET scan. For å delta i en pilotstudie der somatostatin analog oktreotid ville bli administrert i 11 av disse 20 pasientene ble en
99mTc-depreotide scintigrafi utført for evaluering av SST nærvær i rest primære svulstvev og metastaser. Fem av de 11 pasientene i hvilken
99mTc-depreotide scintigrafi viste et positivt bilde av det gjenværende primærtumor og /eller metastatisk vev og progressiv sykdom etter RECIST kriterier mottok behandling med den langtidsvirkende somatostatinanalog oktreotid i doser på 30 mg IM /måned for en periode på 3-6 måneder i 2007 og 2008 (tabell 1)
de resterende 19 av de 39 pasientene inkludert i studien utgjorde kontrollgruppen.; alle hadde godt differensierte tumorer, å være fri for sykdom ved tidspunktet for undersøkelsen og tilsynelatende herdet etter den første og eneste behandling utført ved tidspunktet for diagnose som består av totalt thyroidectomy, etterfulgt av 100 mCi av RAI gitt 3 måneder etter operasjonen. Gjennomsnittlig alder av denne gruppen var 48 ± 8 år (10 menn og 10 kvinner).
Imaging teknikker
99mTc-depreotide scintigrams ble utført i 11 ut 20 pasienter bærer en PDTC ( tabell 1). Depreotide er en somatostatinanalog binding til SSTR 2, 3 og 5 på celleoverflater, mer effektivt enn Octreotide radiomerkede forbindelser. Alle pasientene var på hormonell undertrykkende behandling med tyroksin når imaging prosedyrer ble utført.
99mTc-depreotide ble fremstilt fra en kommersielt tilgjengelig kit (NeoSpect®, Amersham Health, Buckinghamshire, UK). Den iv-injisert dose per pasient var 740 MBq (50 ug peptid) av
99mTc-depreotide. Scintigrafer bildebehandling ble kjøpt med en dobbel-head gamma-kamera og en høy oppløsning collimator.
99mTc-depreotide bilder ble oppnådd ved 1 time og 3 timer etter injeksjon. Planar oppkjøp av hele kroppen og single-foton emisjon computertomografi (SPECT) i hode, nakke, thorax og abdomen ble utført. For å evaluere hypermetabolsk tumor aktivitet,
18F-FDG-PET-skanninger ble dessuten erholdt ved 1 time etter intravenøs injeksjon av 370 MBq 18F-FDG ved hjelp av en engasjert ring PET-skanner, med et aksielt synsfelt på 15,2 cm og en maksimal oppløsning på 3,8 mm transaxially og 4,0 mm aksialt.
Expression of SSTS i skjoldbruskkjertelen vev og normal skjoldbruskkjertelen
Fastsettelse av SSTS uttrykk av kvantitativ real-time RT-PCR (qrtRT -PCR) ble utført i tumor parafininnstøpte prøver av alle WDTC og PDTC pasienter. I PDTC pasienter ble prøver oppnådd på tidspunktet for kirurgisk reintervensjon for å fremme sykdomstilstand fra tumorvevet av livmorhals tilbakefall i alle tilfeller. I tillegg prøver av normal skjoldbruskkjertelen (n = 7) hentet fra Tumor Biobank av tyskerne Trias Hospital og fra en pool av prøver av normal skjoldbruskkjertelen fås ved Universitetet i Córdoba ble også inkludert i studien. Spesielt ble tumor og normal thyroid prøver (4 deler av fem mikrometer tykt) behandlet for en utvinning av total RNA bruker RNeasy FFPE Kit, med DNAase behandling (Qiagen, Barcelona, Spania). Detaljer om RNA kvantifisering, revers transkripsjon (RT, en mikrogram total RNA) og qrtRT-PCR for alle SST-subtyper tidligere har blitt rapportert i detalj 18,22. Det skal bemerkes at en bestemt standardkurve for hvert transkript ble kjørt med hvert sett av prøver for å estimere kopiantall. Totalt RNA prøver som ikke var omvendt-transkribert ble kjørt for å kontrollere for genomisk og /eller teknisk DNA forurensning (bakgrunn). For å kontrollere for variasjoner i mengden av RNA anvendt i RT-reaksjonen og effektiviteten av RT-reaksjonen, ekspresjonsnivået (kopitall) av 3 husholdningsgener (glyceraldehyd-3-fosfat-dehydrogenase – GAPDH, β-actin og 18S) var bestemt for hver prøve som tidligere rapportert (19,20). GeNorm® 3.3 Visual Basic program for Microsoft Excel (https://medgen.ugent.be/jvdesomp/genorm) [23] ble brukt for å vurdere stabiliteten av renhold gener. De geometriske hjelp av kopiantall for GAPDH og β-aktin innenfor hver prøve ble benyttet som en endelig normaliseringsfaktor (NF). Resultatene ble deretter rapportert som sst kopi nummer minus bakgrunn dividert med tilsvarende NF.
Respons på oktreotid behandling
En undergruppe av PDTP pasienter ildfaste til radiojod behandling, progressiv sykdom ved radiologiske kriterier og positiv depreotide skanner mottatt oktreotid behandling i 3-6 måneder i en pilot medfølende protokoll akseptert av pasienter og sykehus etisk komité (tabell 1). Effekten ble evaluert ved hjelp av RECIST kriterier (https://www.recist.com/index.html) og i henhold til SSTS undergrupper.
Statistiske analyser og Receiver Operating Characteristic (ROC) kurver av SSTS uttrykk
Kategoriske data ble beskrevet ved hjelp av frekvenser og prosenter. For kvantitative variabler, tiltak for sentral tendens og spredning (gjennomsnitt og standardavvik) er gitt.
bivariat analyse av de viktigste variablene ble utført ved bruk av 2 × 2 krysstabeller med χ2 tester for å evaluere signifikante forskjeller i frekvenser for kategoriske variabler. Den parametrisk t-test ble brukt for å sammenligne kvantitative data. I de kvantitative variabler normalt ikke distribuert og ikke-parametrisk Mann Whitney U-test ble brukt da indikert.
Alle analysene ble utført ved hjelp av statistikkprogrammet for samfunnsvitenskap (SPSS) versjon 17.0 (SPSS®, Chicago, IL, USA). Vi vurderte p 0,05 for å være statistisk signifikant
ROC (Receiver Operating Characteristic) ble utført for evaluering av diagnostisk test følsomhet og spesifisitet.. Det ble brukt som et verktøy for å måle hvor godt ekspresjon av SSTS kunne skille mellom de to diagnosegruppene (pasienter med aktiv sykdom /pasienter fri for sykdom). Den statistiske analysen av ROC kurver ble utført ved å beregne arealet under kurven (AUC) for hver reseptor, og sammenligner dem med AUC for referanselinjen ved hjelp av student-t-test.
Resultater
SSTS identifikasjon i dårlig differensiert skjoldbruskkreft med
99mTc-depreotide bildebehandling
i de 11 pasientene (5 menn og 6 kvinner) fra PDTC gruppe der en
99mTc-depreotide ble utført, 9 viste cervical lokoregionalt tilbakefall og alle presenterte metastaser av forskjellen størrelse i lungene eller bein identifisert enten ved CT scan og /eller MR og /eller bein scintigrafi.
99mTc-depreotide scintigrafi var positiv i halsen i seks av disse 11 pasientene (54%), og i lungen positive bilder ble funnet i 5/11 (45,4%) (figur 1). Disse 6 tilfeller med negative lungebilder hadde mikrometastaser, som dokumentert av CT scan. I den eneste pasienten har skjelettmetastaser der
99mTc-depreotide scintigrafi ble utført, bildet var negativ.
18F-FDG-PET scan var positive i 8/11 i lungene og i nakken i 5/11 (tabell 1).
Respons på behandling med somatostatin analog
Fem pasienter hvor
99mTc-Depreotide scintigrafi positive bilder ble funnet enten i halsen og /eller lungen ble behandlet med den langtidsvirkende somatostatin-analog oktreotid i doser på 30 mg i løpet av en periode på 3-6 måneder i en pilotstudie. Behandlingsrespons ble evaluert ved hjelp av lunge CT scan og livmorhalsultralydavbildning i henhold til RECIST kriterier. Hos 3 pasienter, ble ingen endring i størrelsen på lesjoner funnet. I de resterende 2 pasienter, var det en betydelig økning i lunge lesjoner i den ene og i den andre en viktig økning i størrelsen av cervikale lesjoner med tegn på intratumoral nekrose i ett av lesjoner. Behandlingen ble godt tolerert i alle tilfeller, med ingen bestemt metabolsk komplikasjon; Selv om en pasient presentert abdominalt ubehag som forsvant etter tidsmessige reduksjon av den dose av oktreotid. Alle behandlinger ble stanset da ingen åpen modifikasjon av utviklingen av sykdommen ble funnet og hos 2 pasienter bevis for progresjon virket sannsynlig. På grunn av resultatene av denne første sett av behandlinger, ble ingen nye PDTC tilfeller inngår i pilotstudien.
Expression of SSTS i godt differensiert, dårlig differensiert skjoldbruskkjertelen vev og normal tyroideavev
rest~~POS=TRUNC primær kreft vev og metastaser prøver fra undergruppe av pasienter med bildediagnostikk og
99mTc-Depreotide scintigrafi pluss 9 flere pasienter (totalt = 20, Tabell 1) som bærer PDTC ble gjenvunnet for SSTS uttrykk studier. Prøver fra 19 pasienter med WDTC fri for sykdom tilstand ved oppfølging var også inkludert i studien og i tillegg prøver fra 7 normale skjoldbruskkjertelen og fra en pool av normale thyroids. En variabel mengde av mRNA for hver av de fem SST-subtyper ble funnet med ingen signifikante forskjeller mellom aldersgrupper og kjønn (data ikke vist) innenfor WDTC og PDTC grupper, samt blant normal skjoldbruskkjertelen vev. Bety mRNA-innholdet i SST-subtyper i WDTC og PDTC er vist i figur 2. I WDTC, sst2 var den dominerende sst-subtype representert, etterfulgt av SST1 sst5 sst3 = sst4, mens ekspresjonen av sst5TMD4 og sst5TMD5 ble ikke funnet i WDTC prøver. I gruppen av PDTC, de mest representerte sst-undertypen var langt sst5TMD4, som ble funnet å vise en 23 fold-økning i ekspresjon sammenlignet med den neste mest uttrykte sst-subtype som ble sst2, etterfulgt av SST1 sst3 sst4 sst5. Uttrykk for sst5TMD5 ble ikke påvist i PDTC. I to av 20 pasienter (10%) med PDTC ble sst5TMD4 ikke oppdaget. Ved sammenligning av SST-subtype mRNA nivåer mellom WDTC og PDTC fant vi at sst2 uttrykk var høyere i WDTC sammenlignet med PDTC (317 ± 80
vs
158 ± 42, henholdsvis. P = 0,08). Også uttrykk for SST1 og sst5 tendens til å bli økt i PDTC gruppen sammenlignet med de WDTC pasienter (173 ± 98 vs. 24 ± 4 for SST1 og 202 ± 62 vs. 114 ± 18 for sst5; p = 0,16 og 0,12, henholdsvis). Ingen forskjeller eller trend til forskjell ble funnet i uttrykket nivåer av sst3 eller sst4 mellom PDTC og WDTC. Til slutt, alle 5 pasienter hvor oktreotid behandlingen ble utført viste høy uttrykk nivåer av sst5TMD4 (gjennomsnitt = 2286 ± 896).
mRNA kopier antall kanoniske (sst1-5) og avkortet (sst5TMD4) somatostatinreseptorer ble målt av qrtRT-PCR i et batteri av godt differensierte skjoldbrusk kreft (WDTC) og dårlig differensiert skjoldbrusk kreft (PDTC). Absolutte mRNA nivå verdier ble justert med en normaliseringsfaktor (NF) oppnådd som geometriske hjelp av kopiantall for GAPDH og β-aktin. Verdier representerer gjennomsnitt ± SEM (n = 19-20 pasienter). Stjernene (***, p 0,001) indikerer verdier som vesentlig avviker fra WDTC
Når det gjelder studie utført i normal skjoldbruskkjertelen vev, resultatene viser tydelig at uttrykket nivåer av sst5TMD4 er ganske lav i. de normale prøver (20 ± 7 kopier av sst5TMD4 /50 ng av total RNA), som støtter tidligere data som rapporteres av vår gruppe [18].
ROC-kurver ble brukt for å estimere ytelsen til de forskjellige SSTS ekspresjonsnivåer for å skille mellom de to diagnosegruppene (pasienter med aktiv sykdom /pasienter fri for sykdom; figur 3). Jo nærmere ROC kurven er til øvre venstre hjørne av grafikken (dvs. høyere sensitivitet og spesifisitet), jo høyere den generelle nøyaktigheten av markør som brukes. Mens ekspresjon av den kanoniske SST1-sst5 hadde en lavere evne til å skille mellom de to diagnosegruppene (ROC-kurver som ligner på referanselinjen), ROC-kurven av det avkortede sst5TMD4 ekspresjonsnivåene var signifikant forskjellig fra referanselinjen (areal under kurven = 0,957; p 0,0001). Faktisk et snitt stillingen av 5 kopier av sst5TMD4, som sammenfaller omtrent med gjennomsnittet av ekspresjonen av pasientene frie for sykdom, ga en følsomhet på 90% og en spesifisitet på 84%. En optimal resultatet er større enn eller lik 8,5 kopier hadde 90% sensitivitet og spesifisitet. Derfor våre resultater viser tydelig at uttrykket av avkortet sst5TMD4 variant er den eneste markøren som kan brukes på en sensitiv og spesifikk måte.
Diskusjoner
RAI-ildfast PDTC er funnet i omtrent 5-10% av alle follikulære celle-stammer skjoldbrusk-kreft [1], [2]. Disse pasientene har en dårlig prognose, som ingen effektive behandlinger er tilgjengelig i dag 24,25 og dermed jakten på nye behandlingsmetoder mål, mest for stadium III og IV tilfeller, er for tiden pågår [3], [4].
Somatostatin regulerer mange fysiologiske funksjoner i de fleste organer av pattedyr og ikke-pattedyrarter gjennom sine sst1-5 reseptorer [10]. I tillegg, somatostatin og dets analoger viser antiproliferative aksjoner, som gjør dem nyttige som koadjuvans behandling, spesielt for nevroendokrine tumorer [7], bortsett fra deres brukbarhet i akromegali [26]. I akromegali, er langtidsvirkende somatostatinanaloger assosiert med en reduksjon på ca 20% i størrelsen av adenomer etter 6-12 måneder med behandling i en tredjedel av tilfellene [27]. Videre radiomerket peptid reseptor målrettet terapi er en annen potensiell alternativ for noen svulster som bærer SSTS [28]. Tilstedeværelsen av SSTS har blitt rapportert i normal skjoldbruskkjertelen vev og i skjoldbruskkjertelkreft [8]. Videre, i skjoldbruskkjertelen carcinom cellelinjer, er somatostatin i stand til å hemme celleproliferasjon, selv i anaplastiske thyroid karsinom-cellelinjer [8]. Kvantitativ evaluering av SSTS uttrykk i skjoldbruskkjertelkreft har vist noen avvik, med noen forfattere rapporterer uttrykk for SST1, 3 og 5 og andre utelukkende sst5 ved hjelp immunocytokjemiske teknikker [8], [10]. Selv med disse avvikene, har uttrykk for SSTS i både follikulær og parafollicular opprinnelse skjoldbrusk kreft vev nylig blitt bekreftet av andre laboratorier [9], [11], [12], [29] -. [31]
i løpet av det siste tiåret tilstedeværelsen av SSTS i skjoldbruskkjertelkreft har også blitt utforsket av skjoldbrusk scintigrafi, for det meste ved hjelp av radiomerket oktreotid og depreotide, men også med andre forskjellige forbindelser [32], [33], legge til rette for lokalisering av metastatisk vev ikke oppdages med RAI skanne. Depreotide har en høy affinitet for sst2, 3 og 5, og dermed gir en effektiv anskaffelse av bilder i vev som uttrykker slike reseptorer. I våre PDTC pasienter, depreotide scintigrafi viste positive bilder i ca 40-50% av dem i nakken tilbakevendende vev og /eller extracervical metastaser, disse sistnevnte mest i lungene. Derfor har vi besluttet å gjennomføre en pilotstudie behandling 5 PDTC depreotide positive pasienter har store metastaser med somatostatin analog oktreotid, i et forsøk på å stabilisere eller redusere tumorvekst med resultatet av enten ingen forbedring eller enda en tilsynelatende rask vekst i to av saker. Som en konsekvens, ble behandling med oktreotid trukket tilbake i alle pasienter og nye pasienter ble ikke inkludert. I den eneste tidligere lignende pilot studie publisert så langt, Kolhfuerst
et al.
[13] fant lignende resultater og konkluderte med at det var ingen indikasjon for somatostatinanaloger behandling hos pasienter med avansert PDTC.
senere i 2009 etter disse pasientene ble undersøkt og behandlet, vår gruppe [18] identifisert to nye funksjonelle avkortede varianter av sst5 med 5 og 4 transmembrane domener. Viktigere, ved hjelp av akromegali modellen, demonstrerte vi at tilstedeværelsen av disse SST-varianter ble etiologisk forbundet med en mangel på respons til veksthormon-inhibering, så vel som til de antiproliferative virkningene av somatostatin analog behandling [20]. Basert på disse resultatene, hypotese vi at pasienter med PDTC potensielt kan uttrykke sst5TMD4, og som et resultat, kan de vil respondere oktreotid behandling. Vi har derfor senere undersøkt i en retrospektiv måte tilstedeværelsen av slike forkortede varianter av sst5, og demonstrert for første gang sitt eksklusive uttrykk i PDTC vev som ingen tilstedeværelse ble funnet i WDTC prøver og normal skjoldbruskkjertelen vev. Dette funnet antyder at sst5TMD4 kan vises i skjoldbruskkjertelkreft som dedifferentiation prosessen utvikler seg, selv om den ultimate mekanismen for sin avvikende uttrykk er foreløpig ukjent. Således kan deteksjon av sst5TMD4 benyttes som en ekstra markør for dårlig prognose. Dette konseptet er støttet av ROC-kurver analyser som indikerer at sst5TMD4 identifiserer nøyaktig PDTC, med en sensitivitet på 90% og en spesifisitet på 84%. I denne forbindelse, sst5TMD4 har også nylig blitt funnet i dårlig differensiert brystkreft [21], hvor det også er assosiert med en dårlig prognose. Videre uttrykk for sst5TMD4 i MCF-7 brystkreft cellelinjen øker malignitet funksjoner som invasjon og spredning evner. Dette forsterkes ondartet biologisk oppførsel antas å være relatert til økning i aktiviteten av fosforylerte ekstracellulære signalregulerte kinaser 1 og 2, p-Akt nivåer, og cyklin D3 og Arp2 /3-komplekset uttrykk [34]. Dessuten, sst2 uttrykk, som er forbundet til en god respons på somatostatin-analoger, ble funnet å være nedregulert i PDTC i sammenligning med WDTC. Interessant nok sst5TDM4 er blitt vist å interagere med fysisk sst2, forandre dets signaloverføringsmekanismer og, som en konsekvens, blokkerer dens antiproliferative medierte effekter. Eliminering av sst2 signale også resulterer i nedsatt en autokrint hemmende feedback loop, som kan endre mobil fenotype og øke celleproliferasjon [23], [35]. Dette kan delvis forklare den tilsynelatende økning i tumorstørrelse i to av de pasienter som ble behandlet med oktreotid, som sin binding til sst5TMD4 ville ha ytterligere stimulert den funksjonelle undertrykkelse av sst2 aktivitet.
Selv om utformingen av det terapeutiske del av denne studien kan ha noen begrensninger, for det meste fraværet av en kontrollgruppe, som det var en pilotstudie, de molekylære funn av PDTC prøver studert retrospektivt ser ut til å forklare den tilsynelatende mangelen på respons av oktreotid behandling og støttet den kliniske beslutningen om å stoppe inkludering av flere pasienter i pilotstudien. Dermed, med hensyn til de terapeutiske implikasjonene av våre funn, tror vi at konklusjonene fra Kolhfuerst
et al
. [13] være gyldig. Det er tilstrekkelig klinisk og nå molekylær informasjon til staten som avanserte dedifferensieres skjoldbruskkjertelkreft har biologiske funksjoner (dvs. høy sst5TMD4 og lav sst2) som kan forklare den manglende effekt eller mulige skadelige effekter av somatostatin analog behandling i slike pasienter, eller i det minste i de uttrykker sst5TMD4 i sine svulster. Som den molekylære heterogenitet av skjoldbrusk svulster er mer og mer tydelig, videre forskning på sst5TMD4 variant kan bane vei for å bedre forstå sin molekylære funksjoner og potensiell bruk som et diagnostisk eller terapeutisk verktøy i skjoldbruskkjertelen.
Takk
forfatterne takker Montserrat Gilabert (Novartis Onkologi, Spania), for hennes støtte til dette arbeidet.
