Abstract
kreft drepe effekten av standard kjemoterapeutiske midler som cisplatin (CDDP) er begrenset av sine bivirkninger til normalt vev. Derfor forskningsinnsats optimalisere sikkerheten og effekten av disse agentene er klinisk relevant. Vi gjorde skjermen for agenter som spesifikt beskytter normale menneskelige mesothelial cellene mot CDDP uten å redusere kreftcellen drepe effekt. Lovastatin ble identifisert fra skjermen. Lovastatin på en farmakologisk relevant konsentrasjon sterkt arrestert spredning av normale celler, mens kreftcellene var mindre berørt. CDDP-indusert DNA-skade respons ble ikke aktivert og normale celler viste forbedret toleranse til CDDP når normale celler ble behandlet med en kombinasjon av CDDP og lovastatin. Vi viser at interferere med protein geranylgeranylation er involvert i lovastatin-mediert CDDP beskyttende effekt på normale celler. I motsetning til normale celler, i kreftceller lovastatin endret ikke CDDP-indusert respons, og kreftceller ble ikke beskyttet av lovastatin. Videre lovastatin ved farmakologiske aktuelle konsentrasjon
per se
induserte DNA-skade, oksidativt stress og autophagy i kreftceller, men ikke i normale celler mesothelial. Derfor våre data tyder på at lovastatin har et potensial til å forbedre den terapeutiske indeks av cisplatin-basert terapi
Citation. Shi Y, Felley-Bosco E, Marti TM, Stahel RA (2012) Differensial Effekter av Lovastatin på cisplatin Responses i Normal menneskelig mesothelial celler versus kreftceller: implikasjoner for terapi. PLoS ONE 7 (9): e45354. doi: 10,1371 /journal.pone.0045354
Redaktør: Abdelilah Aboussekhra, King Faisal Specialist Hospital Research Center, Saudi-Arabia
mottatt: May 14, 2012; Godkjent: 20 august 2012; Publisert: 17.09.2012
Copyright: © Shi et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Dette arbeidet ble støttet av Stiftung für Angewande Krebs Forschung (3.41718.14), Winkelwiese 6, 8001 Zürich. Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
cisplatin (CDDP) er et standard kjemoterapeutisk middel for behandling av forskjellige faste tumorer. Imidlertid bivirkninger til normale vev resulterer i begrenset toleranse hos pasienter [1]. Dermed vil terapeutiske strategier omgå giftige bivirkninger av CDDP være velkommen, og kanskje forbedre den terapeutiske utfallet.
tap eller svekket cellesyklus sjekkpunkter er blant de mest universelle endringer i kreftceller, noe som resulterer i redusert følsomhet for proliferation- hemmende signal som normalt sette i gang en rekke tiltak, inkludert spredning arrest, aktivering av selvbeskyttelsesmekanismer mot påkjenninger, differensiering, eller celledød [2]. Under visse spredningsbegrensende forhold, normale celler arrestere sin replikasjon og dermed kan være beskyttet mot toksisitet av spredning avhengige midler, f.eks DNA-skadende midler. Imidlertid kreftceller, på grunn av deres reduserte følsomhet for spredning-inhiberende signalering, kan ikke riktig arrestere deres cellesyklus og er derfor selektivt drept under disse betingelser [3] – [6].
Vårt mål var å finne stoffer som kan beskytte normale celler mot cisplatin cytotoksisitet og samtidig tillate å drepe kreftceller. Derfor har vi satt opp en to-trinns skjermen: først, vi skjermet en rekke forbindelser for forskjellige effekter på spredning av normal mesothelial
versus
mesothelioma celler; andre, ble kombinert handlingene CDDP med de differensierende agenter testet i normale celler til å identifisere stoffer som gjør normale celler tolerant til CDDP cytotoksisitet samtidig som kreftceller drap.
Lovastatin ble identifisert fra vår skjerm. Som et kolesterolsenkende medikament, lovastatin virker ved å inhibere HMG-CoA-reduktase, det hastighetsbegrensende enzym av cholesterol biosyntesebanen [7]. Blokkering av kolesterolsynteseveien også resulterer i nedbryting av isoprenoid grupper derved interfererer med protein isoprenylation, noe som er et viktig regulatorisk trinn i mange biologiske prosedyrer [7]. Derfor, utover den kolesterolsenkende funksjon, lovastatin utfører også pleiotropiske biologiske rolle i kontrollen av celleproliferasjon, apoptose, overlevelse, differensiering, migrering og celle vesikkel-handel [7] – [9]. Våre data viser at lovastatin har et potensial for å øke den terapeutiske indeks av CDDP.
Den eksperimentelle protokollen for etterforskningen av agenter som beskytter normale celler mot CDDP cytotoksisitet er vist i (A). Cellecyklus profiler av normal SDM104 (B) og (C), og ZL55 kreftceller (D) og (E) fra kontroll uten behandling (B) og (D), eller 24 timers behandling med 2 uM lovastatin (C) og ( E) er vist (n = 3). Cellene ble eksponert for 10 mikrometer BrdU i én time før høsting for FACS analyse.
Materialer og metoder
cellekulturer og reagenser
Normale menneskelige mesothelial primære celler og kreftceller ble dyrket i M199 (Invitrogen) /MCDB105 (Sigma) (01:01) blandet medium supplementert med 15% FCS, 10 ng /ml EGF, og 0,4 ug /ml hydrokortison, som beskrevet [10]. Den humane cellelinje mesothelioma ZL55 [11] og det primære normal cellekultur SDM104 [12] ble samlet i vårt laboratorium. Brystkreft-cellelinje MCF-7 [13], og human lunge adenokarsinom-cellelinje A549 [14] ble anskaffet fra American Type Culture Corporation (Manassas, VA). Den primære normal cellekultur LP9 [15] var fra Dr. James Rheinwald laboratorium. Den primære normal cellekultur SDM85 ble etablert fra en normal pleural vev mottatt fra en pasient som gjennomgår kreft urelatert thoraxkirurgi. Studien ble godkjent av Zürich universitetssykehus moral utvalg og et skriftlig informert samtykke ble innhentet fra pasienten. Alle cellelinjer brukt i denne studien ble godkjent av fingeravtrykk (Microsynth, Balgach, Sveits). Lovastatin (Alexis Biochemicals) ble omdannet til aktiv syreform, som beskrevet [16] og anvendt i en konsentrasjon på 2 uM i de fleste eksperimenter. Cisplatin (0,5 mg /ml saltvann) ble innkjøpt fra Ebewe Pharma; mevalonat, GGPP og FTI-277 fra Sigma; GGTI-298 fra Calbiochem. Anti-ATM-Ser1981 (Epitomics), anti-ATM (2C1) (Gene Tex), anti-γ-H2AX (Ser139) (Millipore), anti-LC3B (Abcam), anti-fosfor-p53 (Ser15) (Cell Signaling -teknologi), anti-p53, anti-β-Actin, anti-Heme oksygenase 1 (HO 1), anti-p21, anti-H-Ras, anti-Rap1a og anti-vinculin (Santa Cruz) ble anvendt i henhold til produkt bruksanvisning. For western blot påvisning av ATM, ble proteinekstrakter kjørt i 5% SDS-polyakrylamidgel mens for resten 13,5% SDS-polyakrylamid gel ble brukt.
Resultater av MTT analyser med primært dyrkede normale celler ( SDM104, SDM85 og LP9) og kreftceller (ZL55, A549 og MCF-7) etter behandling med CDDP alene, lovastatin (2 uM) alene, eller begge sammen som vist i (A) (n = 6; * for P 3,0 × 10
-5). I (B), ble MTT-analyser utført etter SDM104 celler ble behandlet med forskjellige konsentrasjoner av lovastatin alene eller lovastatin sammen med 20 uM CDDP (n = 6; * for P 0,002, ** for P 3,0 x 10
-5); L0.5, L1, L2 og L4 står for 0,5 uM, 1 uM, 2 uM og 4 um lovastatin, henholdsvis; og C for CDDP. I (C), ble MTT-analyser utført etter SDM104-celler ble behandlet med 2 uM lovastatin alene, CDDP av forskjellige konsentrasjoner alene, eller begge sammen (n = 6; * for P 0,02, ** for P 1,0 x 10
-5); C5, C10 og C20 stå i 5 mikrometer, 10 mikrometer og 20 mikrometer CDDP hhv.
En ordning for kolesterol biosyntese veien er vist i (A). I (B) og (C), 20 uM CDDP ble tilsatt etter 8 timer preinkubering med 2 uM lovastatin i nærvær eller fravær av 200 pM mevalonat (B), eller 100 pM S10 (C), og deretter ble cellene dyrket til en annen 16 timer i nærvær av CDDP og de andre midler som sammen (n = 6; * for P 7,0 x 10
-7). MTT-analyser ble utført etter behandlingene ble avsluttet, og cellene ble dyrket på nytt i friskt medium i 24 timer. I (B) og (C), «L» står for lovastatin, «M» for mevalonat.
Cell Proliferation og Cell Cycle Analysis
MTT celleproliferasjon Analysen ble utført som beskrevet [17]. For forbindelsen skjermen, ble analysen av cellesyklusfordelingen gjøres som følger: cellene ble høstet etter 24 timers behandling med forskjellige midler, vasket med PBS og fiksert i 70% etanol over natten ved 4 ° C. Etter propidiumjodid (PI) (Sigma) farging, flowcytometri (FACS) analyse ble utført med FACSCalibur (FACScan, BD Biosciences) og data ble analysert med ModFit LT 3.2.1 programvare. For detaljert FACS-analyse av lovastatin-behandlede celler, ble cellene eksponert for 10 uM BrdU i en time før høsting. Cellene ble høstet etter 24 timers lovastatin-behandling og fikseres i 70% etanol. Etter anti-BrdU antistoff (BD Biosciences) /Secondary Alexa488 geite-anti-mus (Invitrogen) og PI farging, ble FACS analyse utført med FACSCalibur og data ble analysert med Summit v4.3 programvare. Den statistiske signifikans ble utført med to-halet t-test.
Resultater av Western blot med anti-H-Ras-antistoff (A) og anti-Rap1a antistoff (C) er vist. Proteinekstrakter ble gjort rett etter normal SDM104 celler ble behandlet med forskjellige forbindelser i 16 timer. P-Actin brukes som lasting kontroll for Western. I (B), 20 uM CDDP ble tilsatt etter 8 timer pre-inkubering med 10 uM GGTI-298 (GGTI) eller 10 pM FTI-277 (FTI), og deretter ble cellene dyrket i ytterligere 16 timer i nærvær av CDDP og inhibitorene sammen (n = 6; * for P 3,0 × 10
-4; ** for P 2,0 × 10
-6). I (D), var 20 uM CDDP tilsettes etter 8 timer preinkubering med 2 uM lovastatin i nærvær eller fravær av 10 pM GGPP, og deretter ble cellene dyrket i ytterligere 16 timer i nærvær av CDDP og forbindelsene sammen (n = 6; ** for P 2,0 × 10
-6). I (B) og (D), ble MTT-analyser utført etter behandlingene ble avsluttet, og cellene ble dyrket på nytt i friskt medium i 24 timer. «L» står for lovastatin.
Western blot-analyse av komponenter i DNA-skade respons i SDM104 normale celler (A) og kreftceller (B) etter behandling med CDDP i nærvær eller fravær av lovastatin er vist. Vinculin og β-actin ble brukt som lasting kontroll. For CDDP behandling ble cellene dyrket i nærvær av 8 pM CDDP i 16 timer; for lovastatin, ble cellene dyrket i nærvær av 2 uM lovastatin i 24 timer; for kombinasjonen av CDDP og lovastatin, 8 uM CDDP ble det tilsatt 8 timer etter 2 uM lovastatin pre-inkubasjon, deretter ble cellene dyrket i ytterligere 16 timer i nærvær av CDDP og lovastatin sammen.
Resultater
Lovastatin Forskjellig påvirket Cell Proliferation of Normal
versus
kreftceller og spesielt fredede normale celler fra CDDP Cytotoksisitet
in vitro
skjermen for agenter som kunne beskytte normale celler mot cisplatin-indusert cytotoksisitet ble utført i to trinn. I det første trinnet, studerte vi litteratur og utvalgte kandidatmidler som vi har funnet indikasjoner på at de kanskje ulikt påvirker spredning av normale
versus
kreftceller. Cellecyklus profiler av normale humane mesothelial SDM104 celler og humane mesothelioma ZL55 celler ble analysert 24 timer etter eksponering for kommersielt tilgjengelige midler som er kjent for å interferere med celleproliferasjon. Noen av de stoffer som viser forskjellige effekter på cellesyklusfordelingen i normal
versus
kreftceller er angitt (tabell 1). I det andre trinnet, testet vi hvilke av de valgte stoffer beskyttet normale celler fra CDDP (figur 1A). Lovastatin, et FDA-godkjent kolesterol-senkende legemiddel, ble identifisert i det andre trinnet.
Western blot-analyse av autophagy markør LC3B-II og oksidativt stress markør HO-1 i normal (SDM104) celler (A) og kreft (ZL55) celler (B) etter behandling med CDDP i nærvær eller fravær av lovastatin er vist. P-Actin ble brukt som lasting kontroll. For CDDP behandling ble cellene dyrket i nærvær av 8 pM CDDP i 16 timer; for lovastatin, ble cellene dyrket i nærvær av 2 jum lovastatin i 24 timer; for kombinasjonen av CDDP og lovastatin, 8 uM CDDP ble det tilsatt 8 timer etter 2 uM lovastatin pre-inkubasjon, deretter ble cellene dyrket i ytterligere 16 timer i nærvær av CDDP og lovastatin sammen.
Lovastatin ved den farmakologiske aktuelle konsentrasjonen [18] av 2 uM i normale celler redusert mer enn 98% av S-fase-celler og omtrent 14% av G2 /M-celler, mens det var omtrent 47,8% økning av G0 /G1-celler (figur 1C ), sammenlignet med ubehandlet kontrollgruppe (figur 1B). I motsetning til dette, i kreftceller var det fortsatt omtrent 20% av S-fase celler som var tilbake, og begge G0 /G1-celler og G2 /M-celler ble øket 58% og 77,7%, respektivt (figur 1E) etter lovastatin-behandling, sammenlignet ubehandlet kontroll (figur 1D). Dermed lovastatin viste ulike effekter på spredning av normale celler
versus
kreftceller. I samsvar med endringene som er observert i cellesyklusen, behandling med lovastatin alene, undertrykte betydelig spredning av normal (P 1,0 × 10
-6) og kreft ZL55 (P 0,001) og MCF-7 (P 0,001) celler , sammenlignet med ubehandlede kontroller (figur 2A).
antall normale SDM104 celler etter den kombinerte behandling av CDDP og lovastatin var 3,8 ganger høyere sammenlignet med celletallet ble observert etter behandling med CDDP alene. Denne beskyttende effekt mot CDDP toksisitet ble også observert i ytterligere to normale primære kulturer SDM85 og LP9 (figur 2A). Den lovastatin-mediert beskyttende virkning virket bestemt for normale celler, siden ingen av de testede cancercellelinjene, human mesothelioma ZL55, human brystcancer MCF-7 og human lunge adenokarsinom A549, ble beskyttet (figur 2A).
En lovastatin doserespons for beskyttende effekt mot CDDP cytotoksisitet ble utført med SDM104 celler. Lovastatin doseavhengig redusert cellevekst var imidlertid den maksimale beskyttende virkning observeres allerede ved 2 uM (figur 2B). Således ble 2 pM lovastatin konsentrasjonen som blir benyttet i de fleste av våre eksperimenter. Fordi lovastatin-mediert beskyttelse av normale celler var knyttet til cellesyklus arrest, CDDP-beskyttende effekten var synlig kun ved høy CDDP konsentrasjon (10-20 mm), hvor reduksjonen i celle nummer grunnet cytotoksisitet var høyere enn lovastatin-indusert celle nummer reduksjon på grunn til spredning arrest (figur 2C).
Blokkere Kolesterol Biosyntetiske Pathway men ikke Ubiquinone Synthesis er nødvendig for lovastatin-mediert beskyttelse av normale celler fra Cisplatin Toxicity
Som et lipidsenkende middel, lovastatin virker til å inhibere HMG-CoA-reduktase, det hastighetsbegrensende enzym av cholesterol-biosyntese-veien [7] (figur 3A). Vi undersøkte hvorvidt blokkerer kolesterol-biosyntese-veien er nødvendig for lovastatin-mediert beskyttelse av normale celler mot CDDP ved å teste effekten av mevalonat, som er det umiddelbare produkt av HMG-CoA-reduktase-katalysert reaksjon i kolesterol-biosyntese-veien [7] ( Figur 3A). Tilsetning av mevalonat helt snudd de inhiberende virkninger av lovastatin på celleproliferasjon. Lovastatin beskyttet ikke normale celler mot CDDP i nærvær av mevalonat (figur 3B), noe som indikerer at lovastatin beskytter normale celler ved blokkering av kolesterol-biosyntese-veien. Tilsetningen av ubikinon (koenzym Q10) i normale celler ikke endre enten den hemmende effekten av lovastatin på celleproliferasjon eller beskyttelse mot CDDP (figur 3C) som indikerer interferens med ubikinon syntese er ikke involvert i den observerte beskyttelse av normale celler.
Beskyttelse av normale celler fra Cisplatin Toxicity er mediert gjennom Lovastatin-Induced Forstyrrelse av protein Geranylgeranylation
Lovastatin forstyrrer protein isoprenylation (inkludert farnesylering og geranylgeranylation) gjennom tappe isoprenoid givere farnesylpyrofosfat (FPP) og geranylgeranyl pyrofosfat (GGPP) [7] (figur 3A og 4A og 4C). Famesyltransferase inhibitor (FTI-277) inhiberer spesifikt farnesyleringen av små G-proteiner, f.eks farnesyleringen av H-Ras (figur 4A), men ikke protein geranylgeranylation, f.eks, den geranylgeranylation av Rap1a i normale SDM104 celler (figur 4C). FTI-277 viste mye svakere proliferasjonsinhiberende effekt på normale celler (figur 4B) enn lovastatin (figur 3B), og dens CDDP-beskyttende effekt på normale celler (figur 4B) var også svakere enn lovastatin (figur 3B). Men den spesifikke inhibering av geranylgeranylation ved en geranylgeranyltransferase-I-inhibitor (GGTI-298) (figur 4C), som ikke påvirker farnesylering (figur 4A), sterkt hemmet proliferasjonen av normale celler og beskyttet dem mot cisplatin toksisitet (figur 4B) i likhet med lovastatin (figur 3B). I samsvar med disse observasjonene, celleproliferasjon-hemmende effekter og CDDP beskyttende effekt av lovastatin for normale celler ble dramatisk undertrykket ved tilsetning av GGPP (figur 4D), som reversert lovastatin-mediert inhibering av geranylgeranylation (figur 4C), men ikke farnesylering (Figur 4A). Dermed demonstrerer vår data som lovastatin-mediert beskyttelse av normale celler fra CDDP toksisitet er hovedsakelig på grunn av GGPP uttømming-indusert hemming av geranylgeranylation.
Lovastatin Hindrer Aktivering av CDDP-indusert DNA skade Responses i normale celler, men induserer DNA-skader Responses i kreftceller
for ytterligere å undersøke mekanismen lovastatin-mediert forskjellige effekter på normal
versus
kreftceller, svarene av normal
versus
kreftceller var undersøkt i flere detaljer. Som forventet, CDDP aktivert DNA-skade responser [19] – [22] i normale celler: fosforyleringen av ATM, den derav følgende akkumulering av DNA-skade markør fosfo histon H2AX på serin 139 (γ-H2AX), fosforylering og akkumulering av p53, og akkumulering cellesyklusen inhibitor p21 (figur 5A). Men bortsett fra p21 oppregulering, DNA-skade respons ble ikke detektert når cellene ble behandlet med lovastatin 8 timer før og under CDDP behandling (figur 5A), som indikerer at lovastatin, ved å stanse cellevekst, undertrykkes den DNA-skade respons og som er beskyttet av normale celler fra CDDP-indusert cytotoksisitet. Lovastatin-indusert oppregulering av p21 ble sannsynligvis via en p53-uavhengig bane, da ingen påvisbar aktivering av p53 ble observert i normale celler behandlet med lovastatin alene (figur 5A).
i kreftceller, i motsetning til vanlig celler, CDDP-indusert DNA skade respons inkludert aktivering av ATM, opphopning av γ-H2AX og p53 ble ikke endret i den kombinerte behandlingen med lovastatin (figur 5B). Viktigere, mens lovastatin alene ikke indusere ytterligere respons bortsett p21 oppregulering i normale celler (figur 5A), det resulterte i økte nivåer av P-ATM, p53 og γ-H2AX i kreftceller (figur 5B) indikerer at lovastatin på den farmakologiske relevant konsentrasjon på 2 mikrometer
per se
induserer DNA-skader i kreftceller.
Lovastatin induserer autofagi og oksidativt stress i kreft, men ikke normale celler
i samsvar med andre studier som rapporterer lovastatin- indusert autofagi [23] – [25], observerte vi at lovastatin utløste oppregulering av autophagy markør LC3B-II [26] i kreftceller (figur 6B). Men LC3B-II var ikke oppregulert i lovastatin-behandlede normale celler (Figur 6A). Lovastatin også induserte oksidativt stress angitt ved ekspresjon av heme oksygenase-1 (HO-1) [27] i kreftceller (figur 6B), noe som ikke ble detektert i normale celler SDM104 enten (figur 6A). Derfor induserer lovastatin autofagi og oksidativt stress i kreft, men ikke normale celler.
Diskusjoner
Bivirkninger av kreft narkotika svekke pasientenes livskvalitet og påvirke terapeutisk effekt [28]. Vi identifiserte lovastatin fra en skjerm for midler som reduserte cisplatin-indusert toksisitet i normale celler, mens slik at kreftcellene for å bli drept. Lovastatin ikke bare mediert CDDP beskyttende effekt for normale celler, men også indusert DNA skade, oksidativt stress og autofagi spesielt i kreftceller.
beskyttelse av normale celler mot CDDP er i samsvar med tidligere observasjoner som lovastatin beskyttet humane endotelceller (HUVEC) fra de toksiske effekter av legemidler mot kreft doksorubicin og etoposid og avliving av ioniserende stråling
in vitro product: [29], [30]. Lovastatin også redusert ioniserende stråling-indusert normal vevsskade og beskyttet mot antracyklinindusert kardiotoksisitet
in vivo product: [31], [32].
Vi viste at lovastatin formidlet CDDP beskyttende effekt i normal celler ved en konsentrasjon på 2 uM, noe som er i området av den farmakologisk oppnåelige serumkonsentrasjon av lovastatin (2,3 ± 1,27 uM) [18], som betyr umiddelbare muligheten for klinisk gjennomføring av lovastatin behandling av kreftpasienter som får dette stoffet. Lignende konsentrasjon hadde blitt brukt for å beskytte mus fra CHO-celler doxorubicin, og inhibering av geranylgeranylation ble foreslått å være involvert i den beskyttende virkning [33]. Vi viser her at en lignende mekanisme fungerer også i lovastatin-mediert beskyttelse av normale humane celler fra CDDP. Vi videre bekreftet at den beskyttende effekten av lovastatin skyldes i hovedsak en geranylgeranylation avhengig mekanisme siden GGTI men ikke FTI viste en lignende effekt som lovastatin i å beskytte normale humane celler fra CDDP toksisitet.
Geranylgeranylated proteiner er involvert i kontroll av celleproliferasjon [9]. Reduksjonen av denne post-translasjonell modifikasjon kan være ansvarlig for celleformering arrest observert i normale celler etter behandling med lovastatin. Det er kjent at behandling av CDDP-DNA-addukter i replikerende celler fører til skade på DNA [19], [34]. Derfor replikering-hvilende eller -inhibited celler blir resistente mot CDDP. Dette kan også forklare hvorfor lovastatin ikke beskytter kreftceller, der spredningshemmende effekten av lovastatin kan motvirkes ved onkogene mutasjoner [35].
Nyere studier har fornyet den terapeutiske interesse for hemmere av kolesterol biosyntese i brystkreft med p53 mutasjoner siden de blir svært avhengige av denne veien [36]. I to av testede cancercellelinjer (ZL55 og MCF-7) vi observert en signifikant reduksjon av celleproliferasjon etter behandling med lovastatin, noe som indikerer at selv p53-dyktig tumorer kan være følsomme for en viss grad til veksthemmende virkninger av lovastatin terapi. I motsetning til normale celler, der effekt på proliferasjonen et resultat av inhibering av DNA-replikasjon, kan den lovastatin-formidlet reduksjon av celleproliferasjon i kreftceller tilbakeføres til DNA skade-avhengig G
0 /G
1 rest . På grunn av den mindre reduksjon i S-faseceller ble kreftceller ikke er beskyttet av lovastatin fra den cytotoksiske effekt av CDDP.
Det er kjent at lovastatin undertrykker proliferasjon, og induserte oksidativt stress, autophagy og apoptose i kreftceller
in vitro product: [24], [37] – [45]. I samsvar med disse observasjonene, lovastatin inhiberte tumorvekst [25] og forsterket antitumor-aktivitet av doxorubicin og CDDP
in vivo product: [46], [47] og langvarig bruk av statin er forbundet med lavere risiko for mange kreftformer [48], [49]. Her viser vi videre at de lovastatin-induserte skadevirkninger skje spesielt i kreft, men ikke normale celler.
Derfor våre data viser at lovastatin har et potensial for å beskytte normale celler fra CDDP toksisitet uten å redusere følsomheten for kreft celler til CDDP basert terapi og dermed forbedre den terapeutiske indeks.
takk
Våre spesiell takk går til alle medlemmer i Laboratory of Molecular Oncology USZ for deres slag hjelper og stimulerende diskusjoner. Vi er takknemlige for Dr. James Rheinwald (Harvard Medical School) for vennlig å gi oss LP9 celler.
