Abstract
Innledning
humant antigen R (Hur) regulerer stabiliteten til mRNA og er forbundet med celleproliferasjon, angiogenese, og lymphangiogenesis. Imidlertid er det fortsatt uklart hvilken klinisk betydning og patologisk rolle Hur i blærekreft. Hovedmålet med denne undersøkelsen var å avklare forholdet mellom Hur uttrykk og klinisk betydning og kreftcelle spredning, angiogenese, lymphangiogenesis, og uttrykk for cyklooksygenase (COX) -2 og vaskulær endotelial vekstfaktor (VEGF) -A, -C, og -D.
Metoder
Alle uttrykk ble undersøkt av immunhistokjemiske teknikker i 122 formalinfikserte eksemplarer av blærekreftpasienter. Hur uttrykk ble evaluert separat med cytoplasma og nukleær farging. Celleproliferasjon, ble angiogenese og lymphangiogenesis målt som prosentandelen av Ki-67-positiv celle (spredning indeks, PI), CD34-farget fartøy (microvessel tetthet, MVD), og D2-40-farget fartøy (lymfe fartøy tetthet, LVD) . Relasjoner mellom hver Hur uttrykk og clinicopathological funksjoner, prognose, og uttrykk for COX-2 og VEGFs ble analysert ved multi-varians analyser. Hur uttrykk ble også undersøkt i 10 mus N-Butyl-N- [4-hydroxybutil] nitrosamine (BBN) indusert blærekreft modell.
Resultater
I menneskelig vev, høy cytoplasma uttrykk var sett i 5% og 25,4% av de normale celler og kreftceller, respektivt. Nuclear Hur uttrykk fødte ingen signifikant sammenheng til eventuelle patologiske funksjoner. Men cytoplasma Hur uttrykk dukket positivt assosiert med PT scenen og Karakter (
P
0,001). I musevev ble tilsvar tendenser bekreftet. Cytoplasmatisk ekspresjon korrelerte med PI, MVD, og LVD, så vel som ekspresjon av VEGF-A og -C, men ikke VEGF-D. Høy cytoplasma uttrykk for Hur var en signifikant prediktor for metastasering og årsaksspesifikk overlevelse, og ble identifisert som en prognostisk samsvarende faktor for metastaser (hazard ratio 4,75, P = 0,028). I en multivariat analyse modell som inkluderte patologiske funksjoner
Konklusjoner
Cytoplasmatiske Hur ser ut til å spille en viktig rolle i celleproliferasjon, progresjon og overlevelse av blærekreftpasienter. Uttrykket var forbundet med angiogenese, lymphangiogenesis, og uttrykk for VEGF-A og C
Citation. Miyata Y, Watanabe S-i, Sagara Y, Mitsunari K, Matsuo T, Ohba K, et al. (2013) Høy Expression of Hur i cytoplasma, men ikke Nuclei, er assosiert med malignt Aggressivitet og prognose i blærekreft. PLoS ONE 8 (3): e59095. doi: 10,1371 /journal.pone.0059095
Redaktør: Kaustubh Datta, University of Nebraska Medical Center, USA
mottatt: 11 juli 2012; Godkjent: 11 februar 2013; Publisert: 13 mars 2013
Copyright: © 2013 Miyata et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Denne forskningen ble støttet delvis av en Grant-in-Aid fra Japan Society for Promotion of Science (nr 22591771). Men de bevilgende myndighet hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet. Ingen ekstra ekstern finansiering ble mottatt for denne studien
Konkurrerende interesser:. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
Regulering av mRNA råte er en viktig mekanisme. for å kontrollere genekspresjon. Kontrollen av mRNA-stabilitet avhenger av sekvensene i transkripsjon seg og på RNA-bindende proteiner som dynamisk binder seg til disse sekvenser. Menneskelig antigen R (Hur) er et medlem av embryonale-dødelige, unormalt syn (ELAV) -lignende protein familie av RNA-bindende proteiner, og er rapportert å være en multifunksjonell protein som har vært innblandet i reguleringen av ulike aspekter av RNA metabolisme. Det vil si, Hur er involvert i post-transkripsjonell regulering av omsetningen og stabiliteten av RNA [1].
hur er også rapportert å regulere celleproliferering og tumor-assosiert betennelse [2], [3]. I tillegg har Hur blitt funnet å være involvert i regulering av angiogenese ved å kommunisere med utskrifter av tallrike angiogenese fremmende faktorer, og er også kjent for å korrelere med lymphangiogenesis i en rekke patologiske tilstander, inkludert kreft [3], [4 ]. Basert på disse fakta, er det blitt foreslått at hur spiller viktige roller i karsinogenese, tumorvekst, metastase, og prognose i maligniteter. Egentlig har flere rapporter beskrevet Hur uttrykk som viser positive assosiasjoner med malignt aggressivitet og fungerte som en prognostisk faktor for dårlig klinisk utfall i ulike kreft [5] – [7]. På den annen side har markert forskjellige funn blitt rapportert hos pasienter med brystkreft [8]. De patologiske roller og prognostisk verdi av Hur uttrykk hos kreftpasienter dermed fortsatt omstridt, og den kliniske betydningen og prediktiv verdi for prognosen hos pasienter med blærekreft har ennå ikke avklart.
Som mekanismer for disse patologiske aktiviteter, vaskulær endoteliale vekstfaktorer (VEGFs) og cyklooksygenase (COX) -2 er de mest kjente Hur-assosierte faktorer [5], [7], [9] – [11]. Disse proteinene har også blitt rapportert å være assosiert med malign aggressivitet og prognosen hos pasienter med blærekreft [12], [13]. Imidlertid har lite informasjon blitt samlet om forholdet mellom Hur uttrykk, VEGF-A, C og D, og COX-2 i humane blærekreft vev.
Den intracellulære plasseringen av Hur har blitt rapportert til være overveiende atom i mange typer av kreftceller [14], [15]. Men Hur flybusser fra kjernen til cytoplasma i respons på ulike stimuli, forlenge mRNA halveringstid og legge til rette for effektiv oversettelse av proteiner [15]. Gitt disse fakta, er etterforskningen som til de kliniske, patologiske, og prognostiske roller kjernekraft og cytoplasma uttrykk for Hur garantert.
Hovedformålet med denne studien var å avklare patologisk betydning og prognostisk verdi for kjernekraft og cytoplasma Hur uttrykk hos pasienter med blærekreft. For å bekrefte patologisk betydning Hur under et gitt vev mikromiljø, ble kjemisk indusert blærekreft musemodell brukes for flere eksperimenter. I tillegg er forholdet mellom disse Hur uttrykk, angiogenese og lymphangiogenesis, og VEGF-A, -C, -D, og COX-2 uttrykk ble også undersøkt i pasienter med blærekreft.
Materialer og Metoder
Etikk Godkjenning
studien ble utført i henhold til Helsinki II erklæringen og den ble godkjent av Etisk Review Committee av Nagasaki universitetssykehus, Nagasaki, Japan.
Skriftlig informert samtykke var innhentet fra pasienter som er involvert i vår studie før påmeldingen. Dyr i denne studien ble håndtert i henhold til retningslinjer for dyreforsøk av Nagasaki University, og forskrift av Animal Care og bruk komité godkjente studieprotokollen.
Pasienter
Alle lysbilder av 122 blærekreft prøver hentet fra transurethral reseksjon (TUR) ved våre sykehus mellom 1993 og 2004 ble gjennomgått. Alle pasientene hadde klinisk diagnostisert med ikke-muskel invasiv blærekreft (NMIBC) uten metastaser. Vi ekskluderte pasienter som hadde fått neoadjuvant terapi. I tillegg prøver som kreft celle nummer var under 500 ble også ekskludert fra denne studien. På den annen side, blant de 122 pasientene, ble adjuvant behandling inklusive systematisk kjemoterapi, intravesikal kjemoterapi, og intravesikal Bacillus-Calmette-Guérin utført i 14 (11,5%), 67 (54,9%), og 19 pasienter (15,6%), respektivt . Alle pasientene ble evaluert av brystet røntgen, ultralyd, og computertomografi (CT) i urinblæren og magen, og cystoskopi. I tillegg CT i lunge eller hjerne, magnetisk resonansavbildning (MRI), dryppe-infusjons pyelografi og bein skanner ble utført som anses nødvendig. Svulster ble iscenesatt i henhold til den amerikanske Joint Committee on Cancer og gradert i henhold til Verdens helseorganisasjon og International Society for Urologisk Pathology klassifiseringssystemet. I denne studien ble svulster gruppert for statistisk analyse inn i følgende grupper: lav (PTA + 1) og høy-stage (≥T2); eller lav- (grad 1 og 2) og høyverdig (grad 3). Vi undersøkte også 20 vevsprøver av normal urinblæren erholdt fra tilsynelatende normale områder av blæren av pasienter med overgangs cellekarsinom i øvre urinveiene. Alle kontrollpasienter viste G1 og ikke-muskel invasiv sykdom, og de viste tilbakefall innen en oppfølgingsperiode på 10-17 år. Median varighet av oppfølging var 51 måneder (variasjon, 2-182 måneder).
Animal
Hur uttrykk ble undersøkt i 10 prøver av normale urotelialceller (uten BBN), 5 av NMIBC (BBN løsning i 14 uker), og fem av muskel invasiv blærekreft (MIBC) (i 24 uker) av kjemisk indusert blærekreft musemodell. Denne modellen ble brukt i en tidligere rapport [16].
Immunohistochemistry
Immunohistokjemiske undersøkelser ble utført ved hjelp av formalinfikserte, parafininnstøpte seksjoner. Vi brukte anti-Hur antistoff (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, California) som det primære antistoff (kanin polyklonale, reaktive for både mennesker og mus Hur). Fem mikrometer tykke seksjoner ble deparaffinized i xylen og rehydratisert i graderte løsninger av etanol. Antigen gjenfinning ble utført ved 100 ° C i 15 min. i 0,01 M natrium-citrat-buffer (pH 6,0). Alle delene ble deretter nedsenket i 3% hydrogenperoksid i 30 minutter for å blokkere endogen peroksidase-aktivitet. Seksjoner ble inkubert over natten med det primære antistoff ved 4 ° C, deretter vasket i 0,05% Tween 20 i fosfat-bufret saltvann (PBS). Deretter seksjoner ble inkubert med peroksidase ved hjelp av den merkede polymer-metoden med Dako EnVision + ™ peroksidase (Dako, Carpinteria, CA) i 60 min. Den peroksidase Reaksjonen ble visualisert med det flytende 3,3′-diaminobenzidin tetrahydroklorid (DAB) substrat-sett (Invitrogen Corporation, Carlsbad, CA). Seksjoner ble kontra hjelp hematoxylin. Andre fremgangsmåter ble utført som beskrevet tidligere [13], [17], [18]. I korthet, evaluerte vi også VEGF-A, -C og -D og COX-2 uttrykk i tilsvarende prøver ved hjelp av immunohistokjemiske teknikker. I tillegg ble microvessel tetthet (MVD) og lymfe fartøyet tetthet (LVD) estimeres ved bruk av CD34-positive lumina og D2-40-positive lumina, respektivt. Detaljer om metoder for å bestemme MVD og LVD var som beskrevet tidligere [13]. Vi utførte all evaluering på nytt for denne studien. En rekke kreft prøver som hadde blitt bekreftet i preliminære studier som immunreaktive for de undersøkte antigener ble anvendt som positive kontroller for Hur (lever), VEGFs (nyrecellekarsinom), COX-2 (colon), D2-40 (mandel), og CD34 (nyre). Særegenheter av disse prøvene som positive kontroller ble bekreftet i våre tidligere rapporter [13], [17], [18]. En etterfølgende avsnitt fra hver prøve behandlet uten det primære antistoff ble anvendt som en negativ kontroll. Positive og negative kontroller ble satt opp for hvert parti av eksperimenter. I tillegg for å bekrefte spesifisiteten av Hur immunreaktivitet, utførte vi lignende undersøkelse ved bruk av geit polyklonalt antistoff (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) i prøver av humant (n = 40) og musevev (n = 20), og de det ble også inkubert med å blokkere peptid for denne anti-Hur antistoff (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, California).
Evaluering
Hur uttrykk ble evaluert av immunoreactive poengsum som rapportert tidligere [19]. Kort fortalt ble cytoplasmatiske og nukleære fargemønstre scoret ved hjelp av følgende skalaer: 0, ingen farging; 1, svak og /eller fokal farging ( 10% av cellene); 2, moderat eller sterk farging (10-50% av cellene); og 3, moderat eller sterk farging (mer enn 50% av cellene). Poeng 0 og 1 ble bedømt som lav ekspresjon, og score 2 og 3 ble bedømt som høy ekspresjon. Denne evalueringen metoden ble brukt for mus vev. Med hensyn til andre uttrykk, ble resultatene positiv hvis fargeintensitet var sterk, og andelen av positivt fargede kreftceller ble bestemt ved hjelp av en kontinuerlig skala ifølge tidligere rapporter [13], [17]. Kort sagt ble ekspresjonsnivåer vurdert semi-kvantitativt fra prosentandelen av uttrykk carcinomceller (fra ≥500 carcinoma celler). Disse cellene ble undersøkt ved hjelp av en E-400 mikroskop (Nikon, Tokyo, Japan) og digitale bilder ble tatt (DU100, og Nikon). I tillegg brukte vi en dataassistert bildeanalyse system (Win TAK versjon 5.0, Mitani, Fukui, Japan) for å beregne statistiske variabler. To etterforskere (S.W. og Y.M.), blindet for kliniske funksjoner og overlevelse data, uavhengig utført semi-kvantitative analyser og farging tolkninger. Frekvensen av uenighet i analysen mellom disse to etterforskerne var. 10% og gjennomsnittlig tetthet ble brukt for statistiske analyser
Statistical Analysis
Data er uttrykt som middel (standardavvik [SD] ). Student t-test ble anvendt for analyse av kontinuerlige variabler. Chi-kvadrat test og Fishers eksakte test ble brukt for sammenligninger av kategoriske data. Spearmans korrelasjonskoeffisient ble anvendt for å bestemme relasjoner mellom to kontinuerlige variabler. Crude og justerte effekter ble estimert ved logistisk regresjonsanalyse og beskrevet som odds ratio (OR) med 95% konfidensintervall (95% CIS), sammen med
P
-verdier. Overlevelsesanalyse ble evaluert med Kaplan-Meier analyse og log-rank test, og variabler som oppnådde statistisk signifikans (
P
0,050) i univariate analyser ble inngått en multivariat analyse ved hjelp av Cox analyse ( rives som hazard ratio [HR] med 95% CI, sammen med
P
-verdier) (Model A). I tillegg til å undersøke den prediktive verdien av Hur uttrykk i større detalj, analysen inkluderte en multivariat modell inkludert alle risikofaktorer (Modell B). Alle statistiske tester var tosidig og signifikans ble definert som
P
0,050. Alle statistiske analyser ble utført på en personlig datamaskin med Statview for Windows versjon 5.0 software (Abacus Concepts, Berkeley, CA).
Resultater
Lokalisering og Expression of Hur
I normale urotelialceller, svak til moderat atom Hur uttrykk ble oppdaget, sammen med fraværende i svak cytoplasma uttrykk (fig. 1a). Til slutt ble 90% (18/20) bedømt som viser høy atom ekspresjon i normale urotelialceller. I motsetning til dette ble høy cytoplasmisk ekspresjon sett i bare 5% (1/20) av normale vev. Med hensyn til atom Hur uttrykk i kreftceller, uttrykk var høy i 88 prøver (72,1%, scorer 2, n = 64, scorer tre, n = 24) og lav i 34 (27,9%, scorer 0, n = 1; poengsum 1, n = 33). På den annen side, med hensyn til cytoplasmatisk ekspresjon i kreftceller, ekspresjon var høy i 31 prøver (25,4%, ballen 2, n = 24; ballen 3, n = 7) og lav i 91 (74,6%, 0 poeng, n = 37, scorer ett, n = 54). Representative eksempler på lav og høy Hur ekspresjon i kreftvevet er vist i figur 1B og C, respektivt.
Hur var hovedsakelig påvist i kjernen av både normale celler og kreftceller i blæren vev. Moderat eller sterk cytoplasmatisk ekspresjon var tydelig i kreftceller (C), men var sjelden i normale urotelialceller (A). Enkelte kreftceller er også vist svak cytoplasmisk ekspresjon, selv om atom ekspresjon ble påvist (B). I tillegg viste vi representative tall til Hur uttrykk (C) og forhold knyttet til denne; (D) cyklooksygenase-2 (E) vaskulær endotelial vekstfaktor-A, (F), vaskulær endotelial vekstfaktor-C i samme område. (Alle forstørrelse, x400).
I dyreforsøk, ble høyt atom uttrykk funnet i 80% (8/10) og 70% (7/10) av normale uroteliale og kreftceller, henholdsvis. På den annen side ble høy cytoplasmisk ekspresjon i normale celler påvises i 10% (1/10). I kreftceller, ble høy ekspresjon i NMIBC og MIBC påvist i 40% (2/5) og henholdsvis 80% (4/5). Representative eksempler på Hur ekspresjon i mus vev ble vist i figur 2A og B. Det er viktig å Lignende resultater ble oppnådd ved bruk av en annen anti-Hur antistoff og dets farging ble redusert ved konkurranse med blokkering av peptidet.
(forstørrelse, x400) . Beising mønsteret var nær menneskelig vev.
Klinisk og Patologisk Betydningen av Hur Expression
Forholdet mellom patologiske funksjoner og Hur uttrykk i kjernen og cytoplasma er vist i tabell 1. Nuclear Hur uttrykk viste ingen signifikant sammenheng til Pt scenen eller Karakter (
P
= 0,471 og
P
= 0,773, henholdsvis). Motsatt cytoplasma Hur uttrykk var positivt assosiert med PT scenen (
P
0,001) og klasse (
P
0,001).
Som vist i Tabell 2, cytoplasma Hur uttrykk ble positivt assosiert med uttrykk for COX-2 (
P
= 0,011), VEGF-A (
P
= 0,021) og VEGF-C (
P
= 0,004), men ikke med VEGF-D uttrykk (
P
= 0,134). I tillegg cytoplasma Hur uttrykk vises også positive korrelasjoner med MVD (
P
= 0,010) og LVD (
P
= 0,023). På den annen side, atom ekspresjon av hur viste ingen signifikant korrelasjon med en hvilken som helst av disse uttrykk eller variabler (tabell 2). Dermed er representative eksempler på disse viktige molekyler som vises i høy Hur uttrykk prøve (Figur 1D-F).
Relasjoner mellom Hur-relaterte molekyler og Angiogenese eller Lymphangiogenesis
I vår studiepopulasjonen, MVD var nært forbundet med VEGF-A (r = 0,40,
P
0,001), VEGF-C (r = 0,41,
P
0,001), og COX -2 uttrykk (r = 0,31,
P
0,001), men ikke med VEGF-D (r = 0,17, p = 0,652). Tilsvarende LVD var også assosiert med VEGF-A (r = 0,39,
P
0,001), VEGF-C (r = 0,58,
P
0,001), og VEGF- D (r = 0,53, P 0,001), men ikke med COX-2 uttrykk (r = 0,15,
P
= 0,103). Skjemaet slike sammenhenger var showen i Figur 3.
MVD, microvessel tetthet; LVD, lymphvessel tetthet; VEGF, vaskulær endotelial vekstfaktor; COX, cyklooksygenase.
For å klargjøre betydningen av uttrykk for VEGF-A, VEGF-C, og COX-2 for MVD og LVD i større detalj, multivariat analyse ble utført med modeller inkludert disse faktorene, pT scenen, og klasse. Med hensyn til MVD, selv om VEGF-C og COX-2 ble assosiert med MVD (OR = 1,05, 95% CI = 1.2 til 1.8,
P
= 0,002 og OR = 1,05, 95% KI = 1.00- 1.11,
P
= 0,043, henholdsvis), VEGF-A uttrykk viste den sterkeste foreningen (OR = 1,05, 95% CI = 01.03 til 01.11,
P
0,001). Tilsvarende analyse viste at VEGF-C ble tettest forbundet med LVD (OR = 1,05, 95% CI = 1.1 til 1.8,
P
= 0,001), mens VEGF-A uttrykk ble også forbundet (OR = 1,05, 95% CI = 1.1 til 1.8,
P
= 0,011).
Overlevelsesanalyser
Nuclear Hur uttrykk ble ikke identifisert som en signifikant prediktor for residiv i urinveiene, metastaser, eller årsaksspesifikk overlevelse (log-rank
P
= 0,156,
P
= 0,058 og
P
= 0,940, henholdsvis). Omvendt, høy cytoplasmisk Hur ekspresjon var en signifikant prediktor for hver av disse parametere (fig. 4 A-C). Hvis du vil vise mer detaljerte verdier av prediktive faktorer, ble tilsvarende analyser også utført for patologiske funksjoner og adjuvant behandling. I tillegg viste vi multivariate analysemodeller, inkludert alle disse faktorene (Model A) og cytoplasma Hur uttrykk og patologiske funksjoner (Modell B) er vist i tabell 3. I begge modellene, ble Hur uttrykk identifisert som en prognostisk faktor for metastaser, men ikke for tilbakefall til urinveiene (HR = 2,00, 95% CI = 0,98 til 4,11,
P
= 0,057 i modell A og HR = 1,82, 95% CI = 0,90 til 3,72,
P
= 0,094 i Modell B) og årsaksspesifikk overlevelse (HR = 5,42, 95% CI = 0,29 til 6,71,
P
= 0,688 i modell A og HR = 1,26, 95% CI = 0,42 til 3,75,
P
= 0,683 i Modell B).
Diskusjoner
Denne studien viste at cytoplasma Hur uttrykk var nært forbundet med malignt potensial, tumorprogresjon og utfallet for pasienter med blærekreft. Motsatt ble ingen slik betydning funnet for atom uttrykk for Hur. Tidligere studier har påvist cytoplasma opphopning i flere kreftformer, viser at nucleocytoplasmic trans Hur var avgjørende for RNA stabilitet [20], [21]. Våre resultater støtter en tilsvarende rolle i menneskelige blærekreft vev.
Dette er den første rapporten om forholdet mellom Hur uttrykk og patologiske funksjoner, tilbakefall og overlevelse hos pasienter med urothelial carcinoma av kreft i urinblæren. Med hensyn til patologisk betydning og prognostiske roller Hur, har flere tidligere studier har rapportert at over-uttrykk er forbundet med høy grad av malignitet, avansert stadium, og dårlig overlevelse hos pasienter med tykktarmskreft [6], brystkreft [5], og nyrecellekarsinom [7]. Men Hur uttrykk ikke ut til å være assosiert med patologisk status hos pasienter med brystkreft, med høy uttrykk for Hur forutsi en bedre prognose [8]. Våre resultater støtter tidligere situasjon i pasienter med blærekreft. Som et underliggende mekanisme slike patologiske aktiviteter Hur, har regulering av angiogenese er foreslått i forskjellige cancere [3], [4]. Spesiell oppmerksomhet ble betalt til relasjonene mellom Hur uttrykk, malignt potensial og patologiske funksjoner fordi stimulering av angiogenese har vært knyttet til tumorvekst og progresjon hos pasienter med flere maligniteter, inkludert blærekreft [13], [22]. Til slutt viste Våre resultater muligheten for at cytoplasma uttrykk for Hur var positivt assosiert med malignt atferd og utfall i blærekreftpasienter. I tillegg er det en mulighet for at slike ondartet aggressivitet er forbundet med hur-relaterte angiogenese.
En av de mest interessante funn i denne studien var det cytoplasmisk ekspresjon hur positivt korrelert med lymphangiogenesis i blærekreft vev. Så langt vi kjenner til, er denne studien den første til å rapportere et forhold mellom Hur uttrykk og lymphangiogenesis hos pasienter med blærekreft, selv om lignende funn er påvist i lungekreft i tidligere rapporter [4]. I tillegg interessant, både som rapporterer og studien viste at cytoplasma Hur uttrykk korrelert med både angiogenese og lymphangiogenesis. Gitt disse resultatene, vi en hypotese om at co-faktorer som kan påvirke både angiogenese og lymphangiogenesis kan assosiere med slike funn i kreftvevet.
Detaljerte regulerende mekanismene for angiogenese og lymphangiogenesis av Hur i humane kreft vev er fortsatt ikke fullt ut forstått . Flere molekyler har blitt rapportert å være Hur-relatert, for eksempel VEGF-A [10], VEGF-C, og COX-2 [7], [9]. Disse faktorene er kjent for å være assosiert med MVD og LVD i blærekreft. Men forholdet mellom Hur uttrykk og disse angiogenesis- og lymphangiogenesis relaterte molekyler i menneskeblærekreft vev er fortsatt uklart. Våre resultater viste at cytoplasma Hur uttrykk positivt korrelert med uttrykk for VEGF-A og C, men ikke VEGF-D. Vi har tidligere rapportert at VEGF-A og -C var signifikant assosiert med MVD og LVD i humane blærecancer vev [13]. I tillegg ble slike signifikante sammenhenger ikke oppdaget for atom Hur uttrykk. Gitt disse funn spekulert vi at translokasjon fra kjernen til cytoplasma er en viktig prosess i å stimulere angiogenese og lymphangiogenesis. Videre oppregulering av VEGF-A og -C uttrykk kan være forbundet med et slikt fenomen i blærekreft.
En ytterligere viktig resultat i denne studien var det faktum at cytoplasmisk Hur ekspresjon var en nyttig indikator for prognose i blærekreftpasienter som gjennomgikk TUR. Spesielt ble uttrykket nært knyttet til postoperativ metastaser. Mange forskere har identifisert økt MVD og LVD som sterke prediktorer for utfall i blærekreftpasienter [13], [23], [24]. Basert på disse funnene, tenkte vi at slike prognostiske roller MVD og LVD var rimelig. På den annen side ble cytoplasmisk ekspresjon av hur identifisert som et betydelig prediktor for årsak spesifikk overlevelse i univariat analyse, men ikke som en uavhengig prediktor i multivariat analyse. Vi er ikke sikker på hvorfor slike forskjeller ble påtruffet i denne studien. Men postoperativ overlevelse ble påvirket av en rekke faktorer. Vi spekulerte dermed at cytoplasma Hur kan spille ulike roller i pasientens overlevelse, mens en rekke andre faktorer og molekyler kan ha sterkere virkning i å bestemme utfallet for pasienter med blærekreft.
I denne studien, viste vi at cytoplasmatiske Hur uttrykk i blærekreftceller var høyere enn i normale epitelceller. Biologiske funksjoner av Hur i mennesker og mus har blitt rapportert å være lik i forrige rapport [25]. Imidlertid er validering av spesifisitet Hur målet ikke fortsatt helt klart. Videre er nylig og detaljert patologisk funksjon av Hur i kreftcellene blir mer tydelig de siste årene [26]. Dermed videre studier om molekylære mekanismen og cellebiologi eksperimenter er nødvendige for å forstå mer detaljerte patologiske roller Hur i blærekreft.
I konklusjonen, våre resultater viste at cytoplasma Hur uttrykk var signifikant assosiert med malignt aggressivitet og blærekreft pasientens utfall, mens kjernekraft HUR uttrykk var det ikke. I tillegg er cytoplasmatisk ekspresjon Hur forbundet med angiogenese, lymphangiogenesis, og disse-relaterte molekyler, inkludert VEGF-A, VEGF-C, og COX-2. Våre resultater tyder på at cytoplasmisk hur ekspresjon var nyttig som en prediktiv markør for metastaser etter TUR i pasienter med blærekreft. For å oppnå ytterligere mekanistisk innsikt, videre
in vivo Hotell og
in vitro
studier i blærekreft er nødvendig.
Takk
Vi er takknemlige for Mr. Takumi Shimogama og Mrs. Miho M. Kuninaka for deres enestående støtte.
