Abstract
Bakgrunn
Den potensielle prognostiske verdien av menneskelig nukleosidlikevektstransportør transporter1 i bukspyttkjertelen kreft motta gemcitabin-basert kjemoterapi er variabelt rapportert.
mål
Formålet med denne studien var å foreta en systematisk gjennomgang av litteratur vurdere menneskelig nukleosidlikevektstransportør transporter1 uttrykk som en prognostisk faktor i kreft i bukspyttkjertelen mottaker gemcitabin-basert kjemoterapi og å gjennomføre en etterfølgende meta-analyse for å kvantifisere den totale prognostisk effekt.
Metoder
Relaterte studier ble identifisert og evaluert for kvalitet gjennom flere søkestrategier. Bare studier analyserer kreft i bukspyttkjertelen mottar gemcitabin-basert kjemoterapi var kvalifisert for inkludering. Data ble samlet inn fra studier som sammenligner samlet, sykdomsfrie og progresjonsfri overlevelse (OS, DFS og PFS) hos pasienter med lav menneskelig nukleosidlikevektstransportør transporter1 nivåer og de som har høye nivåer. Hazard ratio (HR) og 95% konfidensintervall (95% KI) ble brukt for å vurdere styrken av assosiasjoner. Hazard ratio større enn 1 reflektere negativ overlevelse forbundet med lav menneskelig nukleosidlikevektstransportør transporter1 nivåer.
Resultater
I alt 12 studier (n = 875) var involvert i denne meta-analyse (12 for OS, 5 for DFS, 3 for PFS). For generell og sykdomsfri overlevelse, de samlede timer med menneskelig nukleosidlikevektstransportør transporter1 var signifikante på 2,93 (95% konfidensintervall [95% CI], 2,37 til 3,64) og 2,67 (95% KI, 1,87 til 3,81), henholdsvis. For progresjonsfri overlevelse, den samlede HR i høyere menneskelig nukleosidlikevektstransportør transporter1 uttrykk i bukspyttkjertelkreft motta gemcitabin-basert kjemoterapi var 2,76 (95% KI, 1,76 til 4,34). Ingen tegn på betydelig heterogenitet eller publikasjonsskjevhet ble sett i noen av disse studiene.
Konklusjon
Disse resultatene støtter saken for en lav menneskelig nukleosidlikevektstransportør transporter1 nivå representerer en betydelig og reproduserbar markør for negativ prognose i bukspyttkjertelkreft motta gemcitabin-basert kjemoterapi
Citation. Liu ZQ, Han YC, Zhang X, Chu L, Fang JM, Zhao HX, et al. (2014) prognostisk verdi av menneskelige Equilibrative NucleosideTransporter1 i bukspyttkjertelen Motta Gemcitabin kjemoterapi: A Meta-Analysis. PLoS ONE 9 (1): e87103. doi: 10,1371 /journal.pone.0087103
Redaktør: Balraj Mittal, Sanjay Gandhi Medical Institute, India
mottatt: 20 september 2013; Godkjent: 18 desember 2013; Publisert: 27 januar 2014
Copyright: © 2014 Liu et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Denne artikkelen er støttet av Natural Science Foundation National of China (NO 30872591) og Shanghai Science and Technology Commission (NO: 11411950602). Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
bukspyttkjertelen karsinom, en av de mest dødelige kreftformer, er den fjerde største årsaken til kreft-relaterte dødsfall på verdensbasis [1], delvis på grunn av motstand mot de fleste cellegifter. Til tross for nylige fremskritt kirurgiske forblir suksessraten utilfredsstillende på 9% til 20% [2], [3]. Gemcitabin (GEM), nukleosidet pyrimidin analog, er godkjent for bruk i ikke-småcellet lungecancer, brystcancer og ovariecancer. Det er en av de mest brukte kjemoterapeutiske midler, og er den mest effektive middel i lindring av avansert kreft i bukspyttkjertelen, hvor det har vist seg å forbedre kliniske symptomer og beskjedent forlenge overlevelse [4]. Men behandlingsresultater og gode resultater med GEM forbli variabel. Svarprosenten med GEM varierer fra 5,4% til 16,7% [4], [5] i avansert eller metastatisk kreft i bukspyttkjertelen. GEM forlenget median overlevelsestid (MST) av pasientene som ble behandlet med 5-FU fra 4,2-4,5 måneder [4] til 5,9-6,5 måneder [5], [6] i lokalavansert eller metastatisk kreft i bukspyttkjertelen. En stor randomisert fase III studie, Charite Onkologie 001 (CONKO-001) studie viste at pasienter med komplett reseksjon av kreft i bukspyttkjertelen, bruk av adjuvant gemcitabin i 6 måneder resulterte i økt total overlevelse samt sykdomsfri overlevelse [ ,,,0],7]. Den andre store randomisert fase III studie, den europeiske Study Group for kreft i bukspyttkjertelen 3 (ESPAC-3) studie, også bekreftet utfallet [8]. Gemcitabin er sterkt hydrofilt, og derfor, i forbindelse med langsom passiv diffusjon gjennom hydrofobe cellulære membraner. Effektiv gjennomtrengning av gemcitabin over cellemembraner krever spesialiserte integrerte membran transportørproteiner [9]. Blant disse transportører, menneske nukleosidlikevektstransportør 1 (hENT1) er den viktigste formidler av gemcitabin opptak i menneskeceller [10]. Celler som mangler hENT1 er svært motstandsdyktig mot gemcitabin [11].
Gemcitabin er et deoksycytidin analog, som krysser cellemembranen gjennom nukleosid transportører. Kinetiske studier av humane cellelinjer med definerte nukleosid transporter prosesser har vist at gemcitabin intracellulære opptaket ble formidlet av hENT1, hENT2, hCNT1, og hCNT3, den hENT1 protein, som lokaliserer i plasma og mitokondrielle membraner, formidler de fleste av gemcitabin transport i prekliniske modeller [11] – [13]. De nukleosid transport inhibitorer nitrobenzyl thioinosine eller dipyridamol nedsatt følsomhet for gemcitabin ved 39- til 1800-ganger [11]. Inne i cellen, er gemcitabin omdannes til sin aktive difosfat (dFdCDP) og trifosfat metabolitter (dFdCDP). I denne reaksjonen, deoksycytidinkinase (dCK) er det hastighetsbegrensende enzym, og cytidindeaminase (CDA) og 5’nucleotidase (5′-NT) er styringsrentene begrensende enzymer [14]. Den dFdCTP inkorporeres i DNA med en etterfølgende tilsetning av en naturlig nukleotid, og dermed gjøre strengen mindre utsatt for DNA-reparasjon ved basepar eksisjon [15]. Imidlertid er cytotoksisitet forsterkes gjennom flere mekanismer. For eksempel hemmer dFdCDP ribonukleotid reduktaser (RRM1 og RRM2 subenheter), som er de viktige enzymer i syntesen av dNTP, som hemmer de novo DNA-syntese og reparasjon av veier [16]. Redusert dCTP øker frekvensen av inkorporering av dFdCTP i DNA, for å overvinne den negative feedback dCK [17]. Chemoresistance av kreft i bukspyttkjertelen cellelinje til gemcitabin var relatert til balansen av dCK, RRM1, RRM2 og hENT1, som er de viktigste enzymer involvert i gemcitabin transport og metabolske veier [16].
Nylig lav hENT1 var assosiert med dårlig prognose i bukspyttkjertelkreft motta gemcitabin-basert kjemoterapi (PCGC) [18]. Andre studier viste ingen signifikant sammenheng mellom hENT1 og overlevelse i PCGC [19]. Men begge studiene involverte en liten utvalgsstørrelse. Vi har derfor foretatt en systematisk gjennomgang og meta-analyse for å vurdere den totale risikoen for lav hENT1 for å overleve i PCGC.
Materialer og metoder
1 Søkestrategi
En systematisk litteratursøk opp til September2013 ble utført i MEDLINE og EMBASE å identifisere relevante studier. En innledende søk strategi ved hjelp av anerkjente søkeord [(hENT1 eller menneskelig nukleosidlikevektstransportør transporter1) og «prognose» og ( «kreft i bukspyttkjertelen» eller «bukspyttkjertelkreft») og gemcitabin] ble gjennomført.
2 Utvalgskriteriene
studier ble ansett som egnet, hvis de møtte de følgende kriterier: (i) måling av forbehandling hENT1 verdier; (Ii) vurdering av potensialet sammenheng mellom forbehandling hENT1 og overlevelse utfallet av PCGC; (Iii) prospektiv eller retrospektiv studie design; og (iv) gemcitabin terapi. Artikler ble ekskludert basert på følgende kriterier: (i) bokstaver eller oversiktsartikler, (ii) laboratoriestudier, (iii) ikke-engelsk eller kinesisk artikler, eller (iv) fravær av nøkkelinformasjon som utvalgsstørrelse, hazard ratio (HR ), 95% CI, og P-verdi.
Alle søk ble utført uavhengig av 2 anmeldere (ZL og YH) .De studier identifisert var dobbelt-sjekket av begge. Uenighet ble løst ved konsensus mellom de 2 anmeldere eller i samråd med en tredje anmelder (Q.X.). I tillegg ble et manuelt søk utført ved hjelp av referanser fra relevant litteratur, inkludert alle de identifiserte studier, anbefalinger, og ledere. Når dupliserte studier ble funnet, studiet med rapporterte HRS eller involverer flere pasienter (vanligvis den siste), ble brukt for meta-analyse for å hindre overlapping mellom kohorter og overvurdering av den samlede HR.
3 Kvalitetsvurdering
Vi systematisk vurdert kvaliteten på alle de inkluderte studiene, ifølge en viktig gjennomgang sjekkliste over den nederlandske Cochrane Centre foreslått av MOOSE [20]. Hovedpunktene i den nåværende sjekkliste inkluderer (i) klar definisjon av studiepopulasjonen og opprinnelsen til landet; (Ii) klar definisjon av studiedesign; (Iii) klar definisjon av utfallet vurdering, total overlevelse (OS), sykdomsfri overlevelse (DFS) og progresjonsfri overlevelse (PFS), med feil hendelse for DFS definert som sykdom tilbakefall (lokal eller regional), fjernt sykdom ( inkludert mage ascites, peritoneal seeding og andre mage nettsteder), andre primær eller død uavhengig av årsak; (Iv) klar definisjon av cutoff for hENT1, og (v) tilstrekkelig periode på oppfølging. Studier ser bort fra alle 5 av disse punktene ble ekskludert for å sikre høy kvalitet på meta-analyse.
Et flytdiagram av studien utvelgelsesprosessen er vist i figur 1.
4 Data utvinning og konvertering
følgende data ble samlet: (i) publiserings detaljer, inkludert første forfatterens etternavn, årstall, studiepopulasjonen, landet hvor studien ble utført; (Ii) studie design; (Iii) egenskaper ved den undersøkte populasjon, inkludert sample størrelse, alder og antall høy ekspresjon; (Iv) behandling innstilling, regime, måling av prøven, og cutoff; og (v) HR av forhøyet hENT1 for OS, DFS og PFS samt deres 95% CIS. Den enkleste metoden bestod av den direkte samling av HR og deres 95% CI fra den opprinnelige litteraturen, med en HR på mer enn 1associated med en dårlig prognose. Når disse dataene ikke var direkte rapportert, hentet vi det totale antall observerte dødsfall og antall pasienter i hver gruppe til å beregne HR [21]. Data ble hentet fra overlevelses tomter når data var bare tilgjengelig som Kaplan-Meier-kurver, etterfulgt av estimering av HR bruker den beskrevne metoden [21].
5 Statistisk analyse
heterogenitet kombinerte HRS ble utført ved bruk av Cochran Q test og Higgins «I-squared statistikken. En P-verdi på mindre enn 0,05 ble betraktet som signifikant. Vi brukte en tilfeldig effekt-modell (Der Simonian og Laird metode) hvis observert heterogenitet (P 0,05). En med fast effekt-modell ble anvendt i fravær av mellom-studie heterogenitet (P ≥ 0,05). Publikasjonsskjevhet ble evaluert av trakten tomten med Egger dømming indikator test [22]. Alle analysene ble utført ved hjelp av statistisk programvare Stata (versjon 12.0).
Resultater
1 Datamottak
Vi identifiserte 127 poster for hENT1 etter en primær søk i PubMed og EMBASE . Etter å ha lest titler og sammendrag, ble 113 studier ekskludert. Av de som er valgt for detaljert evaluering studier, ble en studie ekskludert som replikere [23] og en studie ble ekskludert på grunn av manglende HR data [24]. Den avsluttende meta-analyse som er involvert 12 studier for hENT1 [1], [18], [19], [25] – [33] (fig. 1). Åtte publikasjoner spesielt involvert to studier [18], [19], [26] -. [30], [33]
2 Studie egenskaper
Det som kjennetegner opptjent studier er oppsummert i tabell 1. Vi samlet inn data fra 12 studier som inkluderte totalt 875 pasienter med en median antall 55,5 pasienter per studien (spredning = 21-222). Fem studier ble utført i Japan [19], [27] – [29], [32], 2 i USA [18], [33], en i Kina [26], en i Frankrike [31] og 2 i Belgia [1], [30] og en i Italia [25]. Seks artikler uttalte oppfølgingsperioden, og avklares median oppfølgingsperiode. I de 12 studiene (n = 875), ble verdier for hENT1 analysert av ulike virkemidler i hver studie. I 8 studier ble hENT1 nivå målt ved immunhistokjemi (IHC). I de andre 4 studiene ble hENT1 mRNA målt ved hjelp av polymerase kjedereaksjon (PCR). Alle artikler relatert til IHC vurdert og scoret hENT1 intensitet. Men positive hENT1 farging i IHC ble definert ulikt i ulike studier. Tre av IHC studiene innebar en samstemmighet analyse for hENT1 positivitet med minst to observatører, for 100% enighet. Men ingen artikkel rapporterte Kappa koeffisienter. I 9 studiene ble gemcitabin brukes som adjuvant behandling, ble det brukt som neoadjuvant terapi i en studie og som palliativ behandling i to andre studier. Tre av studiene var prospektive analyser og 9 var retrospektive analyser. Elleve av de utvalgte studiene presenteres timer. I de resterende studie beregnet vi HRS fra de tilgjengelige data eller overlevelseskurver.
3 OS
Studier som evaluerer OS ga ikke noe tegn på betydelig heterogenitet for hENT1 (I
2 = 0,0%, p = 0,977). Derfor ble en med fast effekt modell som brukes til å beregne en samlet HR og dens 95% CI. Den lave hENT1 nivået var signifikant korrelert til OS med en samlet HR estimat på 2,93 (95% KI: 2,37 til 3,64) (Fig. 2).
Overlevelsesdata er rapportert som total overlevelse, sykdomsfri overlevelse, . og progresjonsfri overlevelse
i undergruppe meta-analyser utført separat, lavt hENT1 nivået var signifikant korrelert til OS med en samlet HR estimat på 3,06 (95% KI: 2,37 til 3,93) i IHC gruppe. Den sammenslåtte HR var 2,63 (95% KI: 1,75 til 3,97) i PCR-gruppen. Foreningen av lav hENT1 med OS i kreft i bukspyttkjertelen heller ikke forskjellig fra studiested, studier type eller behandlingsmetode (tabell 2).
4 DFS og PFS
En fast effekter modellen ble brukt i DFS og PFS analyser som P-verdier på mellom-studie heterogenitet var 0,87 og 0,86. Som illustrert i figur 2, den kombinerte HR på 2,67 (95% CI: 1,87 til 3,81) viste signifikant sammenheng mellom lavt nivå hENT1 og DFS i PCGC pasienter. Den sammenslåtte HR var 2,76 (95% KI, 1,76 til 4,34) for lav hENT1.
5 publiseringsskjevheter
Til slutt søkte vi trakt plott og Egger test for å evaluere publikasjonsskjevhet av de inkluderte studiene . Som vist i figur 3, er alle de trakt plott var symmetrisk. Vi observerte ingen bevis for betydelig publikasjonsskjevhet i OS, DFS og PFS, siden P-verdier for Egger er regresjon fanger var mer enn 0.05 (P = 0,22, 0,769 og 0,707, henholdsvis).
A) total overlevelse, B) sykdomsfri overlevelse, og C) progresjonsfri overlevelse.
Diskusjoner
Tidligere metaanalyser av studier undersøkt den prognostiske verdien av molekylære markører i ulike kreftformer. Disse inkluderer VEGF [34] og p53 [35]. Til dags dato, ingen slike meta-analyse evaluert ENT1 i bukspyttkjertelkreft behandlet med gemcitabin. Videre har lav hENT1 vært assosiert med dårlig prognose i bukspyttkjertelkreft forvaltes med gemcitabin-basert kjemoterapi [18]. Andre studier har ikke vist noen signifikant sammenheng mellom hENT1 og PCGC overlevelse [19]. Men det antall pasienter som inngår i hver studie var liten. Derfor var det viktig å kombinere og analysere data for å få akseptable resultater.
I denne meta-analyse, vi registrert 12 studier knyttet til effektene av lav hENT1 uttrykk på PCGC overlevelse. I alle disse studiene ble hENT1 uttrykk oppdaget av immunhistokjemi eller PCR med kirurgiske prøver. Meta-analysen antydet at lav hENT1 var en faktor assosiert med dårlig prognose i PCGC. Vi videre gjennomført subgruppe analyse, der hENT1 uttrykk ble målt ved IHC. Resultatene viste at lave ekspresjon av hENT1 var nært assosiert med dårlig prognose i pasienter med PCGC. Videre hENT1 uttrykk ved PCR viste også betydelig innvirkning på pasientenes OS.
De siste PRODIGE 4 /Accord 11 forsøksresultater har utvidet de terapeutiske muligheter i metastatisk PAC, ved å demonstrere overlegenhet FOLFIRINOX diett sammenlignet med gemcitabin alene [36]. Denne studien inkluderte bare pasienter som var i alderen under 76 år, med en god allmenntilstand (ECOG 0 eller 1), ingen hjerte iskemi, og normal eller nesten normal bilirubin nivåer. Men ingen studie undersøkt om dette regimet eller andre regimer (Fluoropyrimidiner eller erlotinib) ble indikert for pasienter med lav hENT1 uttrykk i en adjuvant. Flere studier rapporterte metoder som involverer histopathologic eller cytopathologic diagnose, inkludert US- og CT-veiledet perkutan biopsi, transpapillary bukspyttkjertelen duct biopsi, og cytologic evaluering av bukspyttkjertelen juice innhentet via ERCP [37] – [39]. Evnen til å visualisere små lesjoner med EUS er utmerket, og, i motsetning til andre metoder, er hele bukspyttkjertelen lett avbildes [37], [39], [40]. Dermed er EUS-FNA mye brukt som en cytologisk og histologisk prøvetaking verktøy i bukspyttkjertelkreft. Evaluering av hENT1 i kreft i bukspyttkjertelen vev anskaffet med minimalt invasive prosedyrer (endoskopisk ultralydveiledet finnålsaspirasjon eller datastyrte tomografi-veiledet biopsi) garanterer videre studier for å fastslå potensialet til å individual gemcitabin behandling i de fleste av kreft i bukspyttkjertelen pasienter som presenterer med lokalt fremskreden eller metastatisk sykdom.
meta-analyse av prognostisk litteratur er forbundet med en rekke iboende begrensninger. Retrospektiv studie design er en av de viktigste begrensninger. Bare tre av studiene som inngår i den aktuelle meta-analyse innebære en potensiell design. Tilgjengeligheten og kvaliteten på tilsvarende clinicopathological data er også en viktig faktor i retrospektive studier av denne typen. Vi identifiserte flere studier som rapporterer ufullstendige histopatologiske datasett. Andre ulemper inkluderer følgende: Først må vi klarte en anmeldelse upubliserte artikler og sammendrag, som de fleste av dataene ikke var nødvendig. For det andre, vi inkludert kvalifiserte engelsk og kinesiske studier bare, noe som tyder et språk bias. Tredje, HR beregning fra data eller ekstrapolering fra overlevelseskurver i artiklene, i fravær av direkte rapporterte HR verdier, introduserte et element av redusert driftssikkerhet.
Vår meta-analyse viste også betydelige styrker. Først, kvaliteten på studiene som inngår i meta-analysen var tilfredsstillende og strengt oppfylte inklusjonskriteriene. Sekund, sammendrag risikoestimater av vår studie de ikke viser noen tegn på heterogenitet og publikasjonsskjevhet. Tredje, vi utførte subgruppeanalyse ved å måle hENT1.
Konklusjon
I konklusjonen, vår meta-analyse viste at lav hENT1 uttrykk var signifikant assosiert med dårligere PCGC overlevelse. hENT1 var en sterk prediktor for alle 3 overlevelses utfall. Den kritiske rollen hENT1 i kreft prognose kan bidra til klinisk nytte. Tatt i betraktning de begrensningene i den foreliggende meta-analyse, videre forskning med standardiserte, objektive metoder og større, blir hele verden utvalgsstørrelsene nødvendig for å bekrefte resultatene.
Hjelpemiddel Informasjon
Sjekkliste S1.
doi: 10,1371 /journal.pone.0087103.s001 plakater (DOC)
Takk
Vi takker Bangbao Tao og Lin Ma for deres utmerkede teknisk support; Dongqing Zuo for statistisk rådgivning; samt Fei Hu og Chunyan Li for fruktbare diskusjoner.
