Abstract
Bakgrunn
transkripsjonsfaktor gaffelhodeboks A1 (FOXA1) er foreslått å være viktig i hormonavhengige kreftformer, selv med lite data for livmorkreft. Vi undersøkte uttrykk nivåer av FOXA1 i grunnskolen og metastatisk livmorkreft i forhold til klinisk fenotype, og transkripsjons endringer relatert til FOXA1 status.
Metoder
Protein uttrykk for FOXA1 ble utforsket av immunhistokjemi i 529 primær og 199 metastatiske endometrial carcinoma lesjoner. mRNA nivåer fra tilsvarende 158 Dypfryst grunnskolen og 42 metastaselesjoner ble analysert ved hjelp av Agilent Mikromatriser (44k) i parallell.
Resultater
Lav FOXA1 protein uttrykk i primære svulster signifikant korrelert med lav FOXA1 mRNA, høy alder, ikke-endometrioid histologi, høy klasse, tap av ERα og PR og dårlig overlevelse (alle p-verdier 0,05). Gjennom en Connectivity kart søk, ble HDAC hemmere foreslått som potensiell behandling for pasienter med lav FOXA1 uttrykk. En økning i FOXA1 uttrykk ble observert fra grunnskole til metastatiske lesjoner og det korrelert med CDKN2A uttrykk i metastaser.
Konklusjon
Lav FOXA1 er assosiert med dårlig overlevelse og antyder et potensial for HDAC hemmere i livmor carcinoma. Bryter FOXA1 uttrykk fra grunnskole til metastatiske lesjoner er observert og genuttrykk viser en kobling mellom FOXA1 og CDKN2A i metastaselesjoner
Citation. Tangen IL, Krakstad C, Halle MK, Werner HMJ, Øyan AM, Kusonmano K, et al. (2014) Bryter i FOXA1 Status Associates med livmorkreft progresjon. PLoS ONE 9 (5): e98069. doi: 10,1371 /journal.pone.0098069
Redaktør: Natasha Kyprianou, University of Kentucky College of Medicine, USA
mottatt: 28 januar 2014; Godkjent: 18 april 2014; Publisert: 21. mai 2014
Copyright: © 2014 Tangen et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Denne studien ble støttet av Helse Vest, Universitetet i Bergen, den Norske Kreftforening og Norges forskningsråd Norge. Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
i den vestlige verden livmorkreft er den vanligste gynekologiske kreft, og forekomsten er økende [1]. Livmorkreft er grovt klassifiseres i to grupper. Type I endometrial cancer er vanligst og er karakterisert ved gode resultatet, endometrioid histologi, lav stadium og grad og ofte intakte ekspresjon av hormonreseptorer. Type II endometrial cancer er assosiert med dårlig resultat, ikke-endometrioid histologi, høy stadium og grad, og har vanligvis tapt ekspresjon av hormonreseptorer [2]. Pasientene er standardly kirurgisk behandlet med hysterektomi med bilateral salpingoophorectomy med eller uten lymphadenectomy. Effekten av adjuvant systemisk behandling er mindre studert for endometrial forhold til kreft i eggstokkene, selv om lignende platina basert kjemoterapiregimer i kombinasjon med paklitaxel ofte brukes i adjuvant og systemisk sykdom omgivelser.
østrogenavhengige livmorkreft er tenkt å oppstå ved langvarig uhindret eksponering for østrogen. Østrogenavhengig aktivering av østrogenreseptoren α (ERα) har blitt rapportert å føre til spredning ved oppregulering av vekstfaktorer så som epidermal vekstfaktor (EGF) [3], dens reseptor EGFR [4], insulinlignende vekstfaktor (IGF-1) [5] og vekstfremmende proto-onkogener som c-myc [6]. Regulering av ERα aktivitet er også kjent for å involvere flere kofaktorer inkludert både coactivators og corepressors. I tillegg pioneren faktor gaffelhodeboks A1 (FOXA1) har vist seg å være en viktig regulator av ERα aktivitet gjennom tilrettelegging binding av ERα [7].
FOXA1 er medlem av gaffelhode Box transkripsjonsfaktor familie, tidligere kjent som hepatocytter Nuclear Factor (HNF) familie. FOXA1 proteiner binder DNA og indusere nukleosomale omleiring som ofte resulterer i en åpen kromatinstruktur [8], [9]. Dette letter bindingen av ytterligere transkripsjonsfaktorer, inkludert ERα [7]. FOXA1 har vist seg å bli rekruttert til nesten halvparten av alle ER bindende regioner [7].
Sammenhengen mellom hormonreseptorer og kjente prognostiske variabler som FIGO stadium, histologisk grad og overlevelse har blitt godt dokumentert i livmorkreft [10] – [12]. Mer kunnskap om molekylære mekanismene som er involvert i østrogen signalering og østrogen-relaterte kofaktorer i hormonrelaterte kreftformer er nødvendig for å utvikle nye terapeutiske strategier. Flere studier har foreslått en rolle for FOXA1 i forskjellige hormonavhengige cancere [13]. Høy FOXA1 ekspresjon er korrelert med god prognose i ER-positiv brystkreft, men i prostatakreft FOXA1 nivå har vært assosiert med enten god eller dårlig prognose avhengig av pasientgruppen, og har blitt foreslått som en kontekstavhengig markør for å overleve i hormonavhengige cancere [ ,,,0],14] – [17]
Videre sammenhengen mellom FOXA1 og ER i brystkreft og FOXA1 og androgen reseptor (AR) i prostata kreft tyder på at uttrykket nivåer av FOXA1 kan påvirke reaksjonsevne til antihormonale behandling i hormonavhengig. kreft. På denne bakgrunn, undersøkte vi uttrykket nivået av FOXA1 i livmorkreft i forhold til fenotype og etablerte biomarkører inkludert hormonreseptor status; og deretter utforske transkripsjons endringer knyttet til FOXA1 protein nivåer i grunnskolen og metastatisk livmorkreft lesjoner.
Materialer og metoder
Etikk uttalelse
Alle deler av studiet er godkjent i henhold til norsk lovgivning. Studien ble godkjent av norske Datatilsynet, Norsk samfunnsvitenskapelig datatjeneste og Regional komité for medisinsk forskningsetikk, REC West (NSD15501; REK 052,01). Alle deltakerne ga skriftlig informert samtykke.
Pasient serie
En populasjonsbasert pasient-serien, inkludert 529 pasienter diagnostisert med livmorkreft i Hordaland (Norge) i perioden 2001-2011, ble studert . Vev fra primærsvulster ble inkludert prospektivt fra samtykket pasienter kirurgisk iscenesatt ifølge International Federation of gynekologi og obstetrikk (FIGO) 2009 kriteriene. De clinicopathological variabler, alder ved diagnose, FIGO stadium, histologisk subtype og grad, behandling og oppfølging ble samlet ved gjennomgang av journaler som rapportert tidligere [18]. For 91 pasienter med avansert eller residiverende sykdom, biopsier var tilgjengelig fra metastatisk vev (totalt 199 FFPE- lesjoner). Dypfryst vev (158 grunnskoler og 42 metastaselesjoner) ble samlet og utarbeidet parallelt med de formalinfiksert parafin innebygd vev (FFPE) når tilgjengelig.
Tissue microarrays
microarray (TMA) ble fremstilt fra FFPE vev fra primærsvulster og metastaser. Arealet av høyeste svulst klasse ble identifisert på hematoxylin og eosin farget lysbilder. Tre vev sylindere fra primærsvulster, og en vev sylinder fra metastaser (0,6 mm) ble stanset ut fra utvalgte områder, og montert i en mottaker parafin blokk ved hjelp av en spesiallaget presisjonsinstrument (Beecher instrumenter, Silver Spring, MD, USA). Denne metoden for fremstilling av TMA har tidligere blitt beskrevet og validert [19].
Immunhistokjemi
fem mikrometer tykke seksjoner TMA ble avvokset med xylen og rehydrert i gradert etanolserie. For FOXA1 deteksjon, ble antigen gjenfinning utføres av mikrobølge koking i 20 minutter i citrat-buffer (pH 6). Endogen peroksidase og ikke-spesifikk binding av primært antistoff ble blokkert med peroksidase blokk (S2023, Dako, Danmark) og serumfritt proteinblokk (X0909, Dako, Danmark). Glassene ble inkubert med anti-FOXA1 primære antistoff (ab23738, Abcam, UK) fortynnet 1:800, i 30 minutter ved romtemperatur. Sekundært antistoff, kombinert anti-mus og anti-kanin (K5007, Dako, Danmark), ble benyttet i 30 minutter, etterfulgt av 8 minutter med Diaminobenzidin (DAB +, K4007, Dako, Danmark) før kontra med hematoksylin. Immunhistokjemisk farging av ERα er tidligere blitt beskrevet for 477 primærtumorer og 78 metastaser. Ytterligere 92 primære tumorer ble farget i henhold til den metode som er rapportert tidligere [12].
Evaluering av flekker
IHC-farging ble evaluert ved hjelp av en semikvantitativ system hvor både intensiteten av fargingen, og området av tumor celler med positiv farging ble vurdert. Fargeintensitet ble gradert fra 0 (ingen farging) til 3 (sterk farging). Andelen av farget tumorceller ble gradert som 0, 1 ( 10%), 2 (10% til 50%) og 3 ( 50%). En fargeindeks ble beregnet som produktet av intensiteten og farging område. I den statistiske analysen ble flekker indekser for FOXA1 kategorisert i tertiles vurderer frekvensfordeling for markøren, størrelse på undergrupper og antall hendelser i hver kategori. De to nederste tertiles, viser like overlevelsesestimater, ble senere fusjonert. Cut-off-verdi for ERα ble påført som tidligere definert, [12]. For å evaluere reproduserbarhet, to uavhengige observatører (ILT og CK) scoret tilfeldige TMA skred, noe som gir κ-verdi på 0,80 for FOXA1 og 0,82 for ERα [12]. Ved vurdering av heterogene flere metastatiske lesjoner fra samme pasient, ble FOXA1 definert som lav hvis noen av de metastatiske lesjoner påvist lavt uttrykk.
Microarray analyse
Fersk frosset vev fra 158 primærsvulster og 42 metastaser ble samlet parallelt med FFPE-vev. Utvinning av RNA ble gjort ved hjelp av RNeasy Mini Kit (Qiagen, Hilden, Tyskland). RNA ble hybridisert til Agilent Hele menneskelige genom Mikromatriser 44k (kat. Nr. G4112F) i henhold til produsentens instruksjoner, og arrays ble skannet med Agilent microarray Scanner Bundle. J-express programvare (Molmine, Bergen, Norge) ble brukt til å analysere dataene. Median sted signalet ble brukt som intensiteten tiltaket og uttrykk data ble normalisert ved hjelp quantile normalisering. Microarray data har blitt deponert i ArrayExpress Arkiv database, https://www.ebi.ac.uk/arrayexpress/med tilgangsnummeret E-mtab-2532. Gener forskjellig uttrykt mellom grupper ble identifisert ved SAM (Betydningen Analyse av microarray) analyse og ble ansett som vesentlig dersom False Discovery Rate (FDR) 0,01. Dersom antall prøver ikke tillate bruk av SAM, FSS (Feature Subset Utvalg) analyse ble brukt, og P 0,01 ble betraktet som signifikant
Tilkobling kart
Sammenheng mellom genuttrykk og potensial. therapeutics ble undersøkt ved hjelp av narkotika signaturdatabasen Tilkobling Map [20]. Stoffet signaturene i denne databasen genereres av gener som uttrykkes differensielt i cellelinjer behandlet med legemidler sammenlignet med ubehandlede cellelinjer, og reflekterer gener antas å bli endret av stoffet. Gener uttrykt forskjellig i henhold til FOXA1 status, både i hele pasientpopulasjonen og i ERα negative gruppen ble grunnlaget for analysen i Connectivity kart.
Statistisk analyse
Programvarepakken SPSS 19.0 (SPSS Inc, Chicago, IL) ble brukt for statistiske analyser. Statistisk signifikans ble definert som sannsynligheten 0,05. Sammenheng mellom gruppene ble evaluert ved bruk av Pearson χ
2 test for kategoriske variabler. Univariat overlevelse analyse ble utført ved hjelp av Kaplan-Meier (produkt-grense) metode med dato for primær kirurgi som Påmeldingsfrist og tid til død på grunn av livmorkreft som endepunkt (sykdomsspesifikk overlevelse). Pasienter som døde av andre årsaker ble sensurert på tidspunktet for dødsfallet. Den log-rank test (Mantel-Cox) ble brukt til å sammenligne overlevelse mellom gruppene. Den Cox proporsjonal hazard regresjonsmodell ble brukt til å evaluere den prognostiske betydningen av FOXA1 justert for andre prognostiske markører i livmorkreft. På grunn av et samspill mellom FIGO stadium og histologisk type ble utført Cox analyse i endometrioid subtype.
Resultater
Lav FOXA1 uttrykket er assosiert med dårlig prognose i livmorkreft
FOXA1 har tidligere vist seg å være en pioner faktor for eR i brystkreft (figur S1). Vi har undersøkt en stor og unik samling av endometriekreft prøver å belyse en mulig tilsvarende rolle for FOXA1 i disse sykdommene. Protein uttrykk for FOXA1 var først og fremst kjernekraft. Proteinet uttrykket ble sett både i stromal og kjertelvevet, men bare flekker i kjernen av kjertelvevet ble scoret. Når man sammenligner FOXA1 status med tilgjengelige clinicopathological variabler, lav FOXA1 uttrykk (poengsum index 0-4) var signifikant korrelert med høy alder (P = 0,04), ikke-endometrioid histologi (P = 0,002), høy histologisk grad (P = 0,003) , tap av pr (P = 0,02) og ERα (P = 0,003) (tabell 1). Lav FOXA1 protein-ekspresjon ble signifikant assosiert med redusert sykdomsspesifikk overlevelse (p = 0,004) (figur 1A) og lav FOXA1 mRNA ekspresjon (P = 0,001) (figur 1B). For pasienter med ERα positive tumorer, fant vi ingen påvirkning av FOXA1 (figur 2A) i motsetning til den ERα negativ gruppe hvor lav FOXA1 ekspresjon var signifikant assosiert med dårligere resultat (figur 2B). I en multivariat analyse, i endometrioid gruppen, ved hjelp av Cox proporsjonal risikomodell med alderen, FIGO stadium, histologisk grad, FOXA1 og ERα uttrykk som variabler, ble FOXA1 uttrykk funnet å ha prognostisk effekt som ligner på karakteren og ERα status, selv uten uavhengig prognostisk effekt (tabell S1).
(A) Kaplan-Meier kurve som viser sykdomsspesifikk overlevelse etter FOXA1 protein nivå. Lav FOXA1 uttrykk er signifikant korrelert med redusert overlevelse for pasienter med livmorkreft. Venstre og høyre innsats viser lav og høy kjernefysisk uttrykk for FOXA1 hhv. (B) Lav protein uttrykk for FOXA1 er signifikant korrelert med lav FOXA1 mRNA uttrykk.
(A) Lav FOXA1 uttrykk blant ERα positive pasienter derimot ikke signifikant overlevelse. (B) Blant ERα negative pasienter FOXA1 uttrykk betydelig påvirket overlevelse med verste prognosen for pasienter med lav FOXA1.
Gene uttrykk knyttet til FOXA1 og ERα uttrykk ikke overlapper
som for brystkreft har ERα tap er konsistent assosiert med dårlig overlevelse hos pasienter med endometrial cancer [2], [11], [12]. Som FOXA1 er vist å være viktig for ERα-kromatin interaksjoner i brystkreft, vi videre undersøkt om FOXA1 relatert genuttrykk ligner ERα regulert genekspresjon i livmorkreft. SAM analyse identifisert 468 gener forskjellig uttrykt i svulster med intakt ERα uttrykk i forhold til tap, mens 506 gener ble uttrykt forskjellig i svulster med høy FOXA1 uttrykk i forhold til lavt. Bare tre overlappende gener ble identifisert i ERα og FOXA1 relatert gen lister (Tabell S2 og S3).
HDAC hemmere er foreslått som potensielle medikamenter for behandling av livmorkreft med lav FOXA1
Genes differentially uttrykt relatert til FOXA1 status ble brukt til å søke Connectivity kart for forbindelser med potensial for å hente den genet signaturen til pasienter med lav FOXA1 status. To HDAC hemmere kom opp blant de fem beste rangert forbindelser (tabell 2). Disse to HDAC hemmere var også de to øverste rangert anticorrelated forbindelser til lav FOXA1 uttrykk innenfor ERα negative pasientgruppen (tabell 2) (tabell S4).
metastatisk spredning er assosiert med et skifte i FOXA1 uttrykk
metastaselesjoner fra 91 pasienter ble farget for FOXA1 uttrykk for å undersøke FOXA1 status i metastatiske lesjoner. Når du definerer FOXA1 så lavt hvis noen av de metastatiske lesjoner påvist lavt uttrykk, ble ingen signifikant endring i uttrykket sett mellom hele befolkningen av primære svulster og metastatiske lesjoner (figur 3A). Overraskende, når man sammenligner FOXA1 nivåer for primære svulster fra pasienter med systemisk sykdom med sine metastatisk lesjon kolleger, uttrykk for FOXA1 ble funnet å være betydelig høyere i de metastatiske lesjoner sammenlignet med tilsvarende primær lesjon. Dette var også tilfellet når alle metastatiske lesjoner, uavhengig av antall metastaser per pasient, ble undersøkt (figur 3B). Vi har tidligere funnet at det er et betydelig tap av ekspresjon av ERα fra primær til metastatiske lesjoner [12]. Når man sammenligner FOXA1 og ERα uttrykk i metastatisk lesjon ingen sammenheng mellom uttrykket nivåer ble funnet (r
2 = 0,012) (Figur 3C). Det samme ble observert når man sammenligner FOXA1 nivåer i metastaser fra bare ERα positive primære endometrial svulster (r
2 = 0,11) (Figur 3D).
(A) FOXA1 uttrykk beholdes fra primærsvulster til metastaser, mens uttrykket er betydelig økt fra sammenkoblede primære svulster til deres tilsvarende metastaser. FOXA1 er definert som lav hvis noen av de metastatiske lesjoner fra de enkelte tilfellene utforsket (n = 78) viste lav uttrykk. (B) Ser vi på alle metastaser (n = 199) er det en betydelig økning i uttrykk fra grunnskole til metastatiske lesjoner. Tallene angir antall tilfeller som er undersøkt med antall tilfeller med høy uttrykk i parentes. (C) Det er ingen sammenheng mellom FOXA1 og ERα uttrykk i metastaser og korrelasjonen mellom FOXA1 og ERα uttrykk i metastaser kun fra ERα positive primære svulster er lav (D).
FOXA1 og CDKN2A nivåene er knyttet sammen i metastatiske lesjoner
for å undersøke forskjeller i transkripsjonseffekter knyttet til FOXA1 nivåer i grunnskolen og metastaselesjoner vi videre utforsket genene forskjellig uttrykt i henhold til FOXA1 status i primære svulster i forhold til metastaser (tabell S3 og S5). Overlappingen mellom genene forskjellig uttrykt var lav (bare 26 gener). Interessant, en av de beste rangerte genene forskjellig uttrykt i henhold til FOXA1 protein uttrykk i metastatiske lesjoner var CDKN2A. FOXA1 ble nylig vist å kontrollere CDKN2A uttrykk [21]. For å undersøke om denne foreningen ble begrenset til metastatisk setting, undersøkte vi en mulig kobling mellom FOXA1 og CDKN2A også i primærsvulster (figur 4). En signifikant sammenheng mellom FOXA1 og CDKN2A ble bare observert i metastatiske lesjoner.
Protein uttrykk for FOXA1 er signifikant assosiert med CDKN2A mRNA uttrykk i metastaser, men ikke i primærsvulster.
Diskusjoner
FOXA1 har blitt anerkjent som en viktig transkripsjonsfaktor som modulerer funksjonene til steroidreseptorer slik som østrogen reseptor i brystkreft og AR i prostata kreft. FOXA1 som en prognostisk markør i brystcancer er blitt grundig undersøkt [14], [22], og høy ekspresjon av FOXA1 er korrelert med bedre sykdomsspesifikk overlevelse, ERα positivitet og den luminale undertype A. I prostatakreft høy ekspresjon av FOXA1 spår dårlig prognose, og korrelerer med AR positivitet [15]. Også den siste publikasjonen av The Cancer Genome Atlas (TCGA) Research Network viste lav ER /FOXA1 signale å bli assosiert med dårlig overlevelse i livmorkreft [23]. Våre funn at lav FOXA1 uttrykk er signifikant assosiert med markører for dårligere resultat, så vel som dårlig overlevelse synes å være i tråd med TCGA data og resultater ved brystkreft, men i motsetning til prostatakreft og en foregående liten, og potensielt seg svak studie av 109 endometrial carcinoma tilfeller viser ingen signifikant prognostisk virkningen av FOXA1 uttrykk [24].
i brystkreftceller FOXA1 har vist seg å være nødvendig for østrogenrespons [7]. I likhet med brystkreft, livmorkreft er en østrogenavhengig kreft og type 1 endometrial cancer er assosiert med ekspresjon av ERα. ERα positive pasienter har en betydelig bedre overlevelse enn pasienter med ERα tap og ERα er en sterk prognostisk markør i livmorkreft [2]. Studier i brystkreft har vist at ERα positive pasienter med høy ekspresjon av FOXA1 har en betydelig bedre overlevelse sammenlignet med pasienter med lav ekspresjon av FOXA1 [14], [25]. Vi kunne ikke finne en lignende sterk overlevelseseffekt for FOXA1 innenfor ERα positiv gruppe, men bare innenfor ERα negative pasientgruppen. Dersom redusert overlevelse observert for FOXA1 negative gruppen bare var på grunn av tap av ERα en signifikant sammenheng mellom FOXA1 og overlevelse innenfor ERα negative gruppen ville ikke ha vært forventet. Dette kan tyde på at FOXA1 i livmorkreft kan ha en funksjon som ikke er knyttet til ERα, og effekten av FOXA1 kan være organ spesifikke. FOXA1 har tidligere vist seg å regulere forskjellige transkripsjonsprogrammer i celler i ulike linages [26], og klinisk erfaring med økt risiko for endometriekreft blant kvinner med ERα positiv brystkreft behandlet med tamoxifen støtter også organspesifikke forskjeller i hormonregulering. Videre støtter dette, gjorde genuttrykk relatert til FOXA1 nivåer ikke overlapper med uttrykk mønster relatert til ERα. Hvis FOXA1 er viktig for regulering av ERα aktivitet i livmorkreft, som er sett i brystkreft, vil en overlapping mellom de differensielt uttrykte genene kan forventes. I tillegg er våre data tyder HDAC hemmere som potensiell behandling for pasienter med lav FOXA1 uttrykk, både i hele pasientpopulasjonen og innenfor ERα negative gruppen. Dette er interessant, som PI3K og mTOR inhibitorer nylig har blitt foreslått som lovende medikamenter for pasienter med ERα negative tumorer spesielt [11]. Den påviste antyder at FOXA1 engasjement i ERα regulering kan være annerledes i livmorkreft i forhold til hva som er funnet i brystkreft. Dette synes å være på linje med en endometrial cancer cellelinje studie viser at innføringen av FOXA1 undertrykker både proliferasjon og migrering [24] i motsetning til ERα som fører til proliferasjon. Rollen til FOXA1 som et pioner faktor for ERα har også blitt funnet å være forskjellig i forskjellige cancercelletyper. Rekrutteringen til kromatin ble vist å være avhengig av FOXA1 i brystkreftceller, men i en osteoblast liknende cellelinje (U2OS-ERα) FOXA1 blir ikke uttrykt og ERα bindingen er uavhengig av FOXA1 [27]. I livmorkreft, er FOXA1 viktig for inhibering av celleproliferasjon og migrasjon [24], og i prostata cancer-cellelinjer FOXA1 ble nylig vist å hemme celle motilitet og epiteliale til mesenchymale overgang (EMT) ved regulering av transkripsjonsfaktoren SLUG [17] . Lite er kjent om bindingpartners for FOXA1 i livmorkreft, og mer arbeid er nødvendig for å belyse dette.
Vår opplever at FOXA1 protein uttrykk økning fra primærsvulster til metastaser, kan fremstå som motstridende til våre funn at høy FOXA1 kollegaer med godt resultat hos pasienter med livmorkreft. ERα uttrykk tap har blitt rapportert å øke fra grunnskole til metastatiske endometrial carcinoma lesjoner [12]. Den lave korrelasjonen mellom ERα og FOXA1 ekspresjon i metastatiske lesjoner, antyder at FOXA1 er mindre kritisk for ERα funksjon i endometrial cancer i forhold til det som har blitt observert for brystkreft [28]. I begge prostata og bryst kreft høy ekspresjon av FOXA1 i metastatiske lesjoner ble imidlertid funnet med beholdt ekspresjon av AR og ERα henholdsvis [28], [29]. Samlet tyder dette på at rollen som pioner faktorer i reguleringen av kjernereseptorer i hormonavhengige kreftformer er vev relatert. I brystkreft synes FOXA1 viktig for ER mediert transkripsjon, og stanse all FOXA1 fører til hemming av ER bindende og transkripsjonen aktivitet [30]. I prostatakreft FOXA1 har vist seg å være en pioner faktor for AR for noen bindende hendelser, men også en repressor. Endring i FOXA1 uttrykk i prostatakreft synes derfor å føre til omprogrammering av AR bindende hendelser [15].
Jo høyere uttrykk for FOXA1 i metastaser i forhold til sine primære tumor kolleger, og sammenhengen mellom protein uttrykk for FOXA1 og CDKN2A mRNA bare i metastatiske lesjoner, kan tyde på en endring i rollen som FOXA1 under livmorkreft progresjon. Metastaser med høyt uttrykk for FOXA1 har også høy uttrykk for CDKN2A. CDKN2A er kjent for å kode flere forskjellige proteiner, inkludert p16
INK4A, p15
INK4B og P14
ARF. Interessant FOXA1 ble nylig vist å kontrollere p16
INK4A uttrykk under cellealdrings [21]. Som proteinet kodet for av CDKN2A som uttrykkes i metastaser er imidlertid ukjent, og behov for å bli undersøkt videre.
FOXA1 synes å ha vev spesifikke roller som også kan forandre seg i løpet av endometrial cancer progresjon. I tillegg er det sannsynlig at andre ukjente faktorer enn FOXA1 er nødvendig for regulering av ERα funksjon i endometrial cancer. Identifisere flere av disse vil forbedre vår forståelse av vev bestemt hormon reseptor signalisering og vil være av betydning ved utvikling av målrettede behandlingsformer i ERα relatert ondartet sykdom, inkludert livmorkreft. Dermed kan FOXA1 legge klinisk relevant informasjon som en biomarkør i livmorkreft og peker på en rolle for HDAC hemmere for behandling.
Hjelpemiddel Informasjon
Figur S1.
Skjematisk illustrasjon av faktorer involvert i reguleringen av ER mediert transkripsjon (E2: østradiol).
doi: 10,1371 /journal.pone.0098069.s001 plakater (TIF)
Tabell S1.
Cox analyse av prediktorer for livmorkreft spesifikk overlevelse. effekter av FIGO stadium, alder, histologisk grad, FOXA1 og ERα uttrykk innenfor endometrioid undergruppe
doi: 10,1371 /journal.pone.0098069.s002 product: ( DOCX)
Tabell S2.
SAM analyse av ER positiv versus ER negative saker (FDR 0,01)
doi:. 10,1371 /journal.pone.0098069.s003 plakater (XLSX)
tabell S3.
SAM analyse av FOXA1 høy versus FOXA1 lave tilfeller (FDR 0,01)
doi: 10,1371 /journal.pone.0098069.s004 plakater (XLSX)
Tabell S4..
FSS analyse av FOXA1 høy versus FOXA1 lave tilfeller i ER negative prøver (p-verdi 0,01)
doi:. 10,1371 /journal.pone.0098069.s005 plakater (XLSX)
Tabell S5.
FSS analyse av FOXA1 høy versus FOXA1 lave tilfeller i metastaser (p-value 0.01).
doi:10.1371/journal.pone.0098069.s006
(XLSX)
Acknowledgments
We takke Ellen Valen, Britt Edvardsen, Kadri Madissoo, Tormund S Njølstad, Gerd Lillian Hallseth, Bendik Nordanger og Hua Min Hoang for teknisk assistanse.
