Abstract
sulfatidantistoffer er et glykosfingolipid kjent for å interagere med flere ekstracellulære matriksproteiner, slik som tenascin-C som blir overuttrykt i mange typer av kreft inkludert det i tykktarmen. I lys av den begrensede suksess for kjemoterapi i tykktarmskreft og høy toksisitet av doksorubicin (DOX), ble en sulfatidantistoffer-inneholdende liposomer (SCL) innkapsling tilnærmingen for å overvinne disse barrierer. Denne studien vurderes in vitro-cytotoksisitet, biodistribusjon, terapeutisk effekt og systemisk toksisitet in vivo av sulfatidantistoffer holdige liposomal doksorubicin (SCL-DOX) ved anvendelse av humane kolon adenocarcinoma HT-29 xenograft som den eksperimentelle modell. In vitro, ble SCL-DOX vist seg å bli overgitt i kjerner og vises langvarig oppbevaring sammenlignet med gratis DOX. Bruken av denne nanodrug leveringssystem for å levere DOX for behandling av tumorbærende mus ga en mye bedre terapeutisk effekt når det gjelder tumorveksthemming og forlenget overlevelse i kontrast til fritt medikament. Videre behandling av tumorbærende mus med SCL-DOX resulterte i en lavere DOX opptaket i de viktigste områder på toksisitet av det frie medikament, nemlig hjerte og hud, så vel som redusert myelosuppresjon og redusert kardiotoksisitet. Slike naturlige lipid-guidet nanodrug leveringssystemer kan representere en ny strategi for utvikling av effektive kreft kjemoterapeutika rettet mot svulsten mikromiljøet for både primær tumor og mikrometastaser
Citation. Lin J, Yu Y, Shigdar S, Fang DZ , Du JR, Wei MQ, et al. (2012) Forbedret Antitumor effekt og reduserte systemisk toksisitet av sulfatidantistoffer holdig Nanoliposomal Doxorubicin i en Xenotransplantat Modell av tykktarmskreft. PLoS ONE 7 (11): e49277. doi: 10,1371 /journal.pone.0049277
Redaktør: Maurilio Sampaolesi, Stem Cell Research Institute, Belgia
mottatt: 22 juli 2012; Godkjent: 08.10.2012; Publisert: 07.11.2012
Copyright: © 2012 Lin et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Dette arbeidet ble støttet med tilskudd fra National Health and Medical Research Council (# 479505); Australia-India Strategic Research Fund (ST01-0013). Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
tykktarms~~POS=TRUNC kreft~~POS=HEADCOMP er den tredje vanligste årsaken til kreftrelaterte dødsfall i verden [1], [2], med opp til 25% av pasienter med metastatisk sykdom. Til tross for kirurgi og kjemoterapi, mange av disse pasientene til slutt bukke under for metastatisk sykdom. Adjuvant behandling, inkludert strålebehandling og kjemoterapi, er designet for å målrette gjenværende kreftceller. I fase III pasienter med kolorektal kreft, kjemoterapi fortsatt den viktigste behandlingsstrategi [3]. Imidlertid er suksessen til disse terapi begrenset av fremveksten av behandlingsresistente kreftceller samt dosebegrensende toksisitet [4]. I løpet av de siste tiårene, har nanoskala terapeutiske systemer dukket opp som nye terapeutiske modaliteter for å bekjempe kreft [4]. Den nanopartikkel preparater av tradisjonelle frie anticancer-medikamenter kan ha forbedret farmakokinetikk og biofordelingsstudier profiler, forbedret antitumor effekt, samt redusert toksisitet hos friske vev.
Liposomale legemidler var de første godkjent og mye brukt slike nanomedisin til behandling av -kreft [5], [6]. Liposomer er mikroskopiske fosfolipidvesikler med bilayered membran struktur. Prekliniske og kliniske studier har vist at de farmakokinetiske profiler, så vel som de målretting særegenheter, av liposomer kan styres og modifiseres for å redusere bivirkningene av innkapslede legemidler og forbedre deres effekt [7], [8], [9].
Vi har nylig utviklet en ny liposomal bæresystem som er sammensatt av to lipider som finnes i mennesker, sulfatidantistoffer og 1,2-dioleoyl-
sn
-glycero-3-phosphoethanolamine (DOPE) [12 ], [1. 3]. Under fysiologisk pH, overfører DOPE stabilitet til sulfatidantistoffer-inneholdende liposomer (SCL) via sine inhiberende virkninger på liposom fusjon, som inkorporering av sulfatidantistoffer inn i DOPE vesikler i stor grad forbedrer stabiliteten av liposomene som dannes, selv i nærvær av plasma, antagelig på grunn hydratiseringen av den negativt ladede sulfathodegruppe av glykosfingolipid [10]. Vi har også vist at interaksjonen mellom sulfatidantistoffer og tenascin medierer binding av SCL til ECM og endocytiske opptaket av liposomene ved tumorceller i det minste in vitro [10], [11].
målrettet levering av cytostatika til svulsten mikromiljøet er en lovende avenue for behandling av metastatisk kolorektalcancer. Tenascin-C, en stor ekstracellulær matriks hexabracchion glykoprotein, er høyt uttrykt i mikromiljøet av de fleste faste tumorer, inkludert kolorektal kreft, men er fraværende eller sterkt redusert i de fleste voksent vev [14]. Vår sulfatidantistoffer holdig liposomal bærersystem representerer således en ny klasse av naturlige lipid styrt intracellulær levering system rettet mot svulsten mikromiljøet. I å utforske en slik ny retning for utvikling av mer effektive anticancer kjemoterapeutika, er det viktig å forstå in vivo oppførselen til nanocarrier, som det unike fordeling styres av egenskapene til det nanocarrier endre terapeutisk effekt, så vel som endrer toksisitet profil av det innkapslede stoffet. I denne studien vi anvende en mus xenograft modell for menneskelig kolorektal adenokarsinom (HT-29) som er kjent for å uttrykke tenascin-C [15], [16] og en mye brukt kjemoterapi medikament, doxorubicin (DOX), som en modell nyttelast å studere biodistribusjon antitumor effekt og toksisitet av sulfatidantistoffer holdig liposomal bæresystem.
Materialer og metoder
Etikk erklæringen
Deakin universitet Animal Welfare Committee har godkjent alle dyr protokollene som brukes i denne forskningen.
Cell Culture
Den menneskelige tykktarms adenokarsinom cellelinje HT-29 ble kjøpt fra American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA). McCoys 5A (modifisert) medium ble kjøpt fra Invitrogen ™ (Australia). Føtalt bovint serum (FBS) ble anskaffet fra Hyclone (Canada). Trypsin ble kjøpt fra Invitrogen ™ (Australia). Vevsdyrkingskolber ble kjøpt fra BD Falcon ™ (Australia). Glassbunn retter ble kjøpt fra Mattek Corporation (Ashalnd, MA, USA). HT-29 celler ble dyrket i McCoys 5A medium supplert med 10% føtalt bovint serum, penicillin (50 U /ml) og streptomycin (50 ug /ml) i en fuktet atmosfære inneholdende 5% CO
2 og 95% luft ved 37 ° C.
Fremstilling av SCL-DOX
Liposomer ble fremstilt ifølge en tidligere publisert metode med noen endringer [10]. Kort sagt ble DOPE unilamellære vesikler inneholdende 30% (molforhold) sulfatidantistoffer fremstilt ved en hydrering metode etterfulgt av polykarbonatmembran ekstrudering. DOPE (13,35 mM) og sulfatidantistoffer (6 mM, Avanti Polar Lipids, Inc.) ble oppløst i en blanding av kloroform og metanol (02:01, v /v), og lipid-blanding, bestående av DOPE /sulfatidantistoffer (3: 7, mol /mol), ble overført til glassrør. Prøvene ble deretter redusert til et minimum volum under en nitrogenstrøm og lagret under vakuum i 24 timer ved 4 ° C for fullstendig å fordampe det organiske løsningsmiddel. De tynne Lipidfilmene ble hydrert ved tilsetning av 1 ml av 250 mM ammoniumsulfat (pH 8,5). Prøvene ble deretter plassert i et is-vannbad og ultralydbehandlet under nitrogen i 2,5 min med 50% amplitude ved hjelp av en sonikator (Sonics 0,05
Resultater
Karakterisering av SCL
Diameteren SCL innlemme DOX ble funnet å variere innenfor 92,3 ± 1,3 nm (middelverdi ± SE, n = 10) med polydispersitetsindeks (PDI) på 0,15 ± 0,01 (gjennomsnitt ± SE). Med en utgangsvektforhold av DOX til DOPE av 0.3:1, SCL hadde en gjennomsnittlig DOX-omsluttende effektivitet av 94,11 ± 2,27% (gjennomsnitt ± bred singlett). Zeta potensielle verdien av SCL var -26,38 ± 2,20 mV (gjennomsnitt ± bred singlett.). Den DOX å dope vekt-forhold etter DOX innkapsling i SCL var 0.5:1.
intracellulære opptaket og oppbevaring av SCL-DOX i HT-29 Cells
Å dra nytte av den naturlige fluorescerende eiendom DOX den cellulært opptak og oppbevaring av gratis DOX eller SCL-DOX ble undersøkt ved hjelp av laser scanning konfokalmikroskopi. HT-29 celler ble inkubert med 2 ug /ml DOX eller SCL-DOX i 24 timer. Etter vasking ble det cellulære opptak av forskjellige formuleringer av DOX undersøkt. Som vist i figur S1 (lav forstørrelse) og figur 1 (høy forstørrelse), både fritt DOX og SCL-DOX ble tatt opp av kolorektal adenokarsinom celler, og det var ansamlinger av DOX i kjernen i begge gruppene (figur 1), enskjønt celler behandlet med gratis DOX viste litt sterkere rød fluorescens (DOX) enn de som ble behandlet med SCL-DOX etter 24 timers inkubering. Interessant, oppbevaring av SCL-DOX i HT-29-celler var bedre enn den for fritt DOX. Som vist i fig S2A (lav forstørrelse) og figur 2A (høy forstørrelse), etter vasking med PBS og inkubering i friskt medium i 4 timer, det DOX fluorescens i fritt DOX gruppen sunket betraktelig. Videre celler behandlet med fritt DOX viste redusert rød fluorescens 24 timer etter vask. Omvendt, den røde fluorescens for SCL-DOX var mer stabil sammenlignet med den frie DOX-gruppen. Selv 24 timer etter vask, kan DOX fluorescens lett bli observert i kjernen av celler behandlet med SCL-DOX (figur S2B og figur 2B). Den forbedrede retensjon av SCL-DOX in vitro tyder på at SCL formulering av DOX kan oppvise bedre behandlingseffekt in vivo.
HT-29-celler ble inkubert med 2 mg /ml fritt DOX eller tilsvarende SCL-DOX i 24 h. Etter to vaskinger med PBS, ble cellene avbildes med et konfokalt mikroskop fluorescens. (A) celler behandlet med fritt DOX. (B) celler behandlet med SLC-DOX. Red: fluorescens fra DOX; blå: kjerner farget med Hoechst 33342. Scale barer: 10 mikrometer
HT-29 celler ble først inkubert med 2 mg /ml gratis DOX eller tilsvar SCL-DOX i 24 timer.. Etter to vaskinger med PBS for å fjerne de stoffer, ble cellene dyrket i friskt komplett kulturmedium, etterfulgt av tenkelig serielt på 1 time, 2 timer, 4 timer og 24 timer ved hjelp av fluorescens konfokal mikroskopi. (A) celler behandlet med fritt DOX. (B) celler behandlet med SLC-DOX. Red: fluorescens fra DOX; blå: kjerner farget med Hoechst 33342. Scale barer:. 10 mikrometer
In vitro Cytotoksisitet
For å studere in vitro cytotoksisitet, ble HT-29 celler eksponert for ulike konsentrasjoner av fri DOX eller SCL-DOX i 48 timer, og cellenes levedyktighet ble målt ved anvendelse av MTT-analysen. Som vist i tabell 1, IC
50 av DOX for HT-29-celler var 1,74 ± 0,10 pg /ml, mens IC
50 av SCL-DOX var 2,77 ± 0,06. Således, under in vitro betingelser hvor cellene ble eksponert for en konstant konsentrasjon av midlene gjennom hele analyseperioden, fritt DOX ble mer toksisk enn SCL-DOX. Tom SCL viste ingen effekter på celleoverlevelse (data ikke vist).
Forbedret farmakokinetiske egenskapene til SCL i Sunne SD Rats
De farmakokinetiske egenskapene til både gratis DOX og SCL- DOX ble studert i friske mannlige SD-rotter. Serum clearance kinetikk gratis DOX og SCL-DOX ble sammenlignet som vist i tabell 2. I vår studie Avklaringen frekvensen av DOX innkapslet av SCL-DOX (1,39 l /time /kg) var betydelig lavere enn for DOX-løsning ( 2,68 l /time /kg,
p
0,01), noe som tyder på en annen pris av clearance av SCL-DOX sammenlignet med fritt medikament. Videre arealet under plasmakonsentrasjon-tidskurver i løpet av studieperioden (AUC
0-48 h) DOX levert gjennom SCL var 2,37 ganger høyere enn fritt DOX (
p
0,01) . Dermed DOX kunne vise en betydelig redusert clearance samt forbedret biotilgjengelighet når det gis fanget i SCL.
biodistribusjon og tumoropptak Fordeler med SCL-DOX
Studier som sammenligner opphopning av fritt DOX eller SCL-DOX i tumorer og organer ble utført i en BALB /c nakne mus HT-29 tumor xenograft modell. Dyrene ble injisert intravenøst med en enkelt dose av fritt DOX eller SCL-DOX (5 mg /kg), og det var ingen statistisk signifikant forskjell i DOX konsentrasjon i nyrene mellom de to behandlingsgruppene 24 timer etter administrering. Lungene og leveren viste høyere DOX akkumulering (4,74 ganger og 12,94-fold, henholdsvis) med SCL-DOX behandling (figur 3A), og milten, en viktig organ i det retikuloendoteliale system, viste en 17-ganger høyere DOX opphopning med SCL-DOX behandling. Imidlertid, SCL-DOX behandling i de to hovedorganer som viser dosebegrensende toksisitet av DOX klinisk, nemlig hud og hjerte, redusert DOX opphopning til 59,0% (0,039 ± 0,001 ug /g versus 0,066 ± 0,003 pg /g) og 77,4% (0,956 ± 0,073 ug /g versus 1,235 ± 0,083 ug /g) sammenlignet med fritt DOX, henholdsvis (figur 3A og 2B). Videre SCL innkapsling betydelig forbedret DOX akkumulering (1,3 ganger; 0,060 ± 0,005 mg /g versus 0,047 ± 0,003 mg /g) i xenograft tumor i forhold til den frie DOX (figur 3D), tydelig bekrefter den forbedrede intratumoral DOX levering av SCL -DOX in vivo.
Nude mus med menneskelige kolorektal kreft HT-29 xenografter ble behandlet med 5 mg /kg gratis DOX eller SCL-DOX iv Musene ble avlivet 24 timer senere. Organer og vev ble høstet, vasket, veid, og DOX ble ekstrahert og kvantifisert. Data er vist som gjennomsnitt ± S.E. (N = 5~6). *,
P
0,05 sammenlignet med gratis DOX; **
P
. 0,01 i forhold til gratis DOX
Forbedret terapeutisk effekt av SCL-DOX
Vi har evaluert antitumor aktivitet av SCL-DOX hjelp BALB /c nakne mus HT-29 tumor xenograft modell. Når tumoren hadde vokst til omtrent 35 mm
3, delt vi dyrene tilfeldig i fire grupper (n = 5~10) for å minimere forskjell i vekt og tumorstørrelse mellom gruppene. Følgende regimer ble administrert intravenøst to ganger i uken i 3 uker: (
i
) saltvann; (
ii
) tom SCL; (
iii
) gratis DOX (5 mg /kg) og (
iv
) SCL-DOX (5 mg /kg). Kroppsvekten til dyrene og tumorstørrelsen ble deretter overvåket inntil størrelsen av tumor hos kontrolldyrene nådd endepunktet for undersøkelsen. Som vist i figur 4, for kontroll grupper av mus som fikk saltløsning eller tom SCL, gjorde behandlingen ikke viser noen effekt, og de midlere tumorstørrelser på slutten av studien ble 1129.03 ± 55,06 mm
3, og 1188,63 ± 137.54 mm
3, henholdsvis (gjennomsnitt ± SE, n = 5~6). Den SCL-DOX behandlingsgruppen viste overlegen effekt, med en avsluttende gjennomsnittlig tumorbelastning på 586.52 ± 29,63 mm
3, sammenlignet med 809.13 ± 43,75 mm
3 i fritt DOX gruppen. Således, i forhold til saltoppløsning eller fritt DOX behandling, var effekten av SCL-DOX å undertrykke tumorvekst i en dose på 5 mg /kg ble betydelig forbedret ved ~1.9 ganger og henholdsvis ~1.4-fold,.
mus med HT-29 xenografter ble injisert iv med saltvann, 5 mg /kg av fri DOX, SCL-DOX eller tom SCL to ganger i uken i 3 uker som angitt, starter på den dagen da tumorvolumet nådde ~35 mm
3. Data som vises er midler ± S.E. (N = 5~6). *,
P
0,05 sammenlignet med saltvann; **
P
0,01 sammenlignet med saltvann; #
P
0,05 sammenlignet med gratis DOX; ,
P
0,01 sammenlignet med blank SCL; ,
P
. 0,001 sammenlignet med blank SCL
Neste, vi sammenlignet overlevelse av tumorbærende mus etter de fire ulike behandlingsregimer. Som vist i figur 5, median overlevelsestid for de fire forskjellige grupper var 26 dager (saltvann), 33 dager (fritt DOX), 36 dager (SCL-DOX) og 32 dager (blank SCL), henholdsvis. Således, SCL-DOX behandlingen økte medium levetid med 38,5% i forhold til kontrollgruppen med saltløsning, med 12,5% i forhold til den tomme SCL gruppen og med 9,1% i forhold til den fritt DOX-gruppen. Disse eksperimentene viste at administrasjon av SCL-DOX i 6 doser over en tre ukers periode, ikke bare gis bedre hemming av tumorvekst, men også bedret overlevelsen av xenograft bærende dyr.
Kaplan-Meier overlevelseskurve viser forbedring av levetiden xenograft-bærende mus behandlet med SCL-DOX (n = 9~10 per gruppe). Mus ble behandlet som vist i Figur 3 og ble avlivet i løpet av studietiden ved oppnådd vår studie sluttpunkt.
Redusert systemisk toksisitet av SCL-DOX
DOX-indusert kardiomyopati er en av de viktigste dosebegrensende toksisitet av stoffet [27]. Cardiac troponin-T er gitt ut fra DOX-skadede muskelceller [28], derfor måling av serumnivåer av dette proteinet gir en sensitiv vurdering av tidlig kardio av DOX. Den anvendes i den foreliggende undersøkelse metoden har en cut-off-terskel på 0,01 ug /l normal [29]. Som vist i tabell-3, den frie DOX behandlingen resulterte i en 75-ganger høyere troponin serumnivå sammenlignet med kontroller, noe som bekrefter den kjente kardiotoksisitet av det frie medikament. Imidlertid ble ingen økning i serum troponin observert for SCL-DOX behandlingsgruppe, som forble under cut-off-nivået, som med kontrollgruppene, noe som indikerer at behandling av xenograft-bærende mus med 6 doser av SCL-DOX i løpet av en periode på fire uker hadde minimal kardiotoksisitet. For å undersøke om innkapsling av DOX i SCL hatt noen innvirkning på alvorlighetsgraden av benmargssuppresjon (myelosuppresjon), den vanligste negative effekten av DOX kjemoterapi [27] studerte vi endringer i perifere hvite blodceller telle. Som vist i figur 6, var det ingen statistisk signifikant forskjell i det totale antall hvite blodlegemer mellom den saltvannsbehandlede eller SCL-DOX-behandlede grupper. Videre sammenlignet med mus behandlet med gratis DOX, de som ble behandlet med SCL-DOX hadde en 2,0 ganger og 3,3 ganger høyere teller for lymfocytter og monocytter, henholdsvis. Således våre data tyder på at SCL-DOX har minimal kardiotoksisitet og betydelig redusert myelosuppresjon.
HT-29 xenograft-bærende mus ble behandlet som vist i figur 3. Blod ble samlet opp umiddelbart etter at musene ble avlivet ved å nå sluttpunkt. Data som vises er midler ± S.E. (N = 3~5). *,
P
0,05 sammenlignet med saltvann; ***,
P
0,001 sammenlignet med saltvann; #
P
0,05 sammenlignet med gratis DOX; ##,
P
. 0,01 i forhold til gratis DOX
Diskusjoner
Denne studien er den første til å vurdere vevet distribusjon, in vivo anticancer aktivitet og toksisitetsprofilen av SCL-DOX i en xenograft musemodell for human kolorektal adenokarsinom. Vi har vist flere viktige punkter: (a) SCL-DOX ble lett tatt opp av tykktarmskreftceller, og som vises en forlenget retensjon; (B) innkapsling av DOX i SCL resulterte i en redusert fordeling av medikamentet til de viktigste områder på akutt og kronisk toksisitet av fritt DOX, nemlig hjertet og hud, så vel som markert redusert kardiotoksisitet og myelosuppresjon; (C) sulfatidantistoffer holdige liposomal legemiddel vist en forbedret terapeutisk virkning i en musemodell for human kolorektal adenokarsinom.
intracellulære opptaket av SCL i glioma-celler ble vist å være et resultat av endocytiske opptaket av liposomene i foregå arbeider [11]. I denne studien, bekreftet at det intracellulære opptaket av SCL-DOX av humane kolorektale adenokarsinomceller, HT-29, ved hjelp av konfokal mikroskopi. Viktigere, vi vist at det innkapslede kjemoterapi stoffet ble levert intracellulært til virkningsstedet, av kjernene av HT-29-celler (figur 1 og 2). Videre ble det levert liposomale medikamenttilbakeholdes av tumorcellene selv 24 timer etter vask. Vår in vitro cytotoksisitet studie sammenlignet levedyktigheten av kolorektal kreft celler behandlet med SCL-DOX og gratis DOX ved hjelp av MTT-analysen, og viste at begge former har overt cytotoksisitet. Interessant nok har SCL-DOX en IC
50 59% høyere enn den for fritt DOX (tabell 1). Dette stemmer overens med observasjonene fra andre at IC
50 av den fri og liposomal legemiddel, ved måling in vitro, varierer avhengig av cellelinjer som benyttes og typen av liposomene. For eksempel Wang et al. funnet i rotteprostatacancer cellelinje MLLB2, IC
50 av den liposomale formuleringen var signifikant lavere enn fritt DOX [30]. I en studie av resistente MCF-7 /ADR celler, liposomal DOX viste en 30 ganger lavere IC
50 i forhold til gratis DOX [31]. Imidlertid, i andre studier fritt DOX ser ut til å ha høyere intracellulære opptaket, og viser høyere cytotoksisitet enn for liposomal DOX. For eksempel, i den leverkreft cellelinje, HepG2, fritt DOX er blitt antydet å ha en høyere cytotoksisitet i forhold til det av DOX-lastede snike liposomer [24]. Videre er polyetylenglykol (PEG) belegges-liposomal DOX har vist seg å ha lavere toksisitet enn fritt DOX i glioma cellelinje U-87-celler [10]. Det er viktig å sette pris på at in vivo farmakokinetikk er svært forskjellig mellom liposomal- DOX og gratis DOX. Halveringstiden av liposomal DOX kan være flere dager, mens fritt DOX kan elimineres i løpet av få minutter in vivo [32], [33], [34]. I cellekulturskåler, blir cellene utsatt for en konstant legemiddelkonsentrasjon gjennom hele analyseperioden, og ofte ta opp fritt DOX hurtigere enn liposomformulering [35]. Videre celler for MTT-analyser er for det meste dyrket i monolag som har en romlig organisasjon drastisk forskjellig fra in vivo-3-dimensjonal vevsarkitektur [36]. Således sammenligning av IC
50 mellom et fritt medikament og en nanopartikkel-formulering av legemidlet in vitro tilveiebringer en måling av cytotoksisiteten under en konstant konsentrasjon i løpet av en valgt analyse periode, og derfor kan det ikke være i stand til å gi en pålitelig prediksjon av den terapeutiske effekt in vivo [37]. I den foreliggende undersøkelse, selv om den IC
50 av SCL-DOX var høyere enn for fritt DOX i HT-29 celler in vitro, ble det SCL formuleringen vist seg å vise en mye bedre tumorhemmende virkning over fritt DOX i HT -29 tumor-bærende nakne mus (figurene 4 og 5).
gastrointestinale svulster er kjent for å være forholdsvis motstandsdyktig mot kjemoterapeutika. I 80% av ubehandlede tykktarmskreft, er det et forhøyet nivå av multilegemiddelresistente I (MDR I) genet [38]. Sammenligningen av farmakokinetiske egenskaper mellom den frie DOX og SCL-DOX i friske SD-rotter viste betydelig redusert klaring rate på SCL-DOX i forhold til gratis DOX (
p
0,01).
