Abstract
Formål
Denne studien ble gjennomført for å undersøke effekten av genetisk polymorfisme (CYP1B1 * 2 G355T, CYP1B1 * 3 C4326G, og CYP2E1 * 5 G-1293C) og miljøfaktorer (røyking og drikking) på følsomheten for strupekreft i en Han-kinesere studiegruppe.
Metoder
Dette case-control studien inkluderte 552 han-kinesere pasienter diagnostisert med strupekreft og 666 friske kontrollpersoner av samme etnisitet, samme alder og kjønn. Genetisk polymorfisme ble undersøkt ved hjelp av multi-PCR og matrise pasning Laser desorpsjon ionisering – Time of Flight (MALDI-TOF MS) metodikk. Foreningen av disse genetiske og miljømessige faktorer med mottakelighet for strupekreft ble evaluert ved hjelp av en statistisk tilnærming.
Resultater
Hyppigheten av alle tre polymorfismer i pasientens kohorten var signifikant forskjellig fra de i kontrollgruppen. Sammenlignet med kontrollgruppen, bærere av variant alleler av CYP1B1 * 2 355T og CYP2E1 * 5 -1293C viste en høyere risiko for å utvikle strupekreft (for CYP1B1 * 2 355T, justert OR = 2,657, P 0,001; for CYP2E1 * 5 -1293C, justert OR = 1,938, P 0,001), mens bærere av mutasjonen allelet CYP1B1 * 3 4326G viste en lavere risiko (justert OR = 0,562, P 0,001). Felles effektene av disse polymorfismer ble observert. Sammenlignet med haplotype G
355C
4326G
-1293, haplotyper T
355C
4326G
-1293 (justert OR = 1,809, P 0,001), G
355C
4326C
-1293 (justert OR = 1,644, p = 0,044), og T
355C
4326C
-1293 (justert OR = 3,104, P 0,001) var assosiert med en betydelig høyere strupekreft risiko. De justerte ORS for ikke-røykere, ikke drikker, røyker og drikker med GT /TT genotype på CYP1B1 * 2 G355T var 2.190 (P = 0,006), 2,008 (P = 0,001), 5.875 (P 0,001), og 4,518 (P 0,001), henholdsvis
Konklusjoner
CYP1B1 * 2 355T og CYP2E1 * 5 -1293C er assosiert med økt strupekreft risiko, mens CYP1B1 * 3 4326G er tilknyttet. med en redusert risiko. Disse polymorfismer viste felles effekter på strupekreft risiko. Røyking og drikking viste samarbeids effekter med to høyrisiko alleler (CYP1B1 * 2 355T og CYP1B1 * 3 4326G) for å fremme strupekreft risiko
Citation. Jin J, Lin F, Liao S, Bao Q, Ni L (2014) Effekter av SNPs (CYP1B1 * 2 G355T, CYP1B1 * 3 C4326G, og CYP2E1 * 5 G-1293C), Røyking og drikking på følsomheten for Strupekreft kreft~~POS=HEADCOMP blant han-kinesere. PLoS ONE 9 (10): e106580. doi: 10,1371 /journal.pone.0106580
Redaktør: Qing-Yi Wei, Duke Cancer Institute, USA
mottatt: 27 januar 2014; Godkjent: 07.08.2014; Publisert: 09.10.2014
Copyright: © 2014 Jin et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Dette arbeidet er støttet av stiftelsen av Wenzhou i Zhejiang-provinsen, Kina (H20090025, URL: https://www.wzkj.gov.cn) Science and Technology og Foundation Science and Technology of Health bureau of Zhejiang-provinsen, Kina (2012ZB106, URL: https://zgj.zjtcm.net). Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
Strupekreft kreft~~POS=HEADCOMP er den vanligste ondartet hode-hals-kreft, er også en vanlig ondartet svulst i Kina [1]; men etiologien av strupekreft er fortsatt uklart. Mens flertallet av strupekreft pasienter har en lang historie med røyking og alkohol antakelse [2], bare en liten prosentandel av slike individer hvert utvikle strupekreft. Dette tyder på at en persons genetiske sminke spiller en viktig rolle deres mottakelighet for strupekreft [3], og støtter den nåværende oppfatningen at mottakelighet for strupekreft er assosiert med interaksjoner mellom gener og miljø. Derfor er bruk av molekylærgenetiske fremgangsmåter og genetisk assosiasjon analyse for å identifisere gener som muligens relatert til strupekreft skal hjelpe i å avsløre etiologien av sykdommen.
CYP1B1 og CYP2E1 er to cytokrom P450-enzymer som katalyserer hydroksylering av pro- karsinogener som polysykliske aromatiske hydrokarboner (PAH), heterosykliske aromatiske aminer (Haas), aromatiske aminer, og N-nitrosaminer [4] – [7]. Disse reaksjonene kan gi cytostatika, indusere mutasjoner i proto-onkogener eller tumorsuppressorgener, resultere i DNA-skade, intensivere lipid og protein peroxidation, og til slutt føre til en økt risiko for utvikling av ulike kreftformer [8], [9]. Foreløpig 50 polymorfe varianter har blitt rapportert å påvirke koding av CYP1B1 protein, og blant disse, fire enkeltnukleotidpolymorfi (SNPs) (CYP1B1 * 2 C142G, CYP1B1 * 2 G355T, CYP1B1 * 3 C4326G og CYP1B1 * 4 A4390G) resultat i endring i amino sammensetningen av enzymet og derved påvirke metabolismen av kreftfremkallende [10], [11]. SNP CYP1B1 * 3 (Leu
432) har blitt rapportert å resultere i en høyere katalytisk aktivitet for oksydasjon av benzo [α] pyren til 7,8-dihydoxy-7,8-dihydrodiol, sammenlignet med den Val
432 form av enzymet [12]. Helmig et al. gjennomført en studie som undersøkte sammenhengen mellom gen-miljø interaksjoner og kreft mottakelighet, og rapporterte at røykere hadde en høy frekvens av villtype-allelet C ved nukleotid 4326 (nt4326) locus av CYP1B1 [13]. Studier av menneskelig hode og nakke plateepitel-celle kreft (HNSCC) viste at polymorfisme CYP1B1 * 3 C4326G er forbundet med tobakk eksponering [14]. Singh et al. rapportert at mens CYP1B1 * 2 G355T og CYP1B1 * 3 C4326G både økt individuell mottakelighet for HNSCC ble mottakelighet også påvirket av samspillet mellom gener og miljøfaktorer (hovedsakelig tobakk og alkohol eksponering) [15]. Videre er en sammenheng mellom disse SPNer og andre plateepitel-celle kreft også blitt foreslått. En meta-analyse utført av Xu et al. fant at homozygot mutasjoner av CYP1B1 * 2 G355T og CYP1B1 * 3 C4326G kan være lav penerisikofaktorer for lungekreft forekomst [16], som er konsistent med resultatene som er rapportert av Chen et al. [17]. I tillegg CYP1B1 * 2 G355T og CYP1B1 * 3 C4326G har også blitt rapportert å være assosiert med følsomhet for hormonrelaterte krefttyper så som prostatakreft, blærekreft, og karsinom i endometrium [18] -. [20]
Mens en G-1293C mutasjon ved 5 «promotor regionen CYP2E1 vil endre genets uttrykk [21], virkningen av denne SNP på en persons risiko for å utvikle hode-hals-kreft er fortsatt kontroversielt. Gajeka et al. rapporterte at CYP2E1 ikke var forbundet med mottakelighet for enten strupekreft eller nasopharyngeal carcinoma [22], og Cury et al. rapporterte at CYP2E1 ikke var forbundet med mottakelighet for hode og nakke kreft [23]. Imidlertid ble det rapportert at tilstedeværelse av mutasjonen allel CYP2E1 * 5 kan øke risikoen for å utvikle HNSCC, og en felles effekt mellom denne genetisk polymorfisme og miljøfaktorer som røyking og alkoholbruk ble også lagt merke til [24].
Her rapporterer vi resultatene av en case-control studie som undersøkte sammenslutning av tre viktige SNPs av P450 (CYP1B1 * 2 G355T, CYP1B1 * 3 C4326G, og CYP2E1 * 5 G-1293C) og to store miljøfaktorer (røyking og drikking ) med mottakelighet for strupekreft. Målet med denne studien var å forbedre bidra til å forbedre tidlig diagnose, og til slutt redusere forekomsten av strupekreft i en høy risiko befolkning i Kina.
Studie fag og metoder
forsøkspersonene
den eksperimentelle protokollen ble etablert, i henhold til de etiske retningslinjene i Helsinkideklarasjonen. Denne studien ble godkjent av Institutional Review Board av den andre Affiliated Hospital og Yuying Children Hospital of Wenzhou Medical University, og alle fag i begge kohorter tegnet et informert samtykke før innmelding. Pasienten kohort i denne studien inkluderte 552 han-kinesere personer diagnostisert med strupekreft mellom august 2007 og 2014 august på ulike sykehus tilknyttet Wenzhou Medical College (WMC). Fag var kvalifisert for inkludering i studien basert på følgende kriterier: (1) en diagnose for strupe plateepitel-celle kreft som en primær sykdom basert på en histopatologi eksamen; (2) tilgjengeligheten av en perifer blodprøve som ble samlet inn før radiochemotherapy og ble riktig bevart; (3) tilgjengeligheten av komplette kliniske poster; (4) faget var ikke relatert til andre han-kinesiske pasienter. Kontrollen kohorten inkluderte 666 friske personer som hadde gjennomgått en rutine helse checkup i samme periode i Second Hospital tilknyttet WMC. Utvalgskriteriene som brukes til bekjempelse kohorten var de samme som de som brukes for pasienten årsklasse, bortsett fra at kontrollpersoner ble pålagt ikke å ha en personlig historie av kreft, en familiehistorie med kreft, eller en historie av eksponering for radioaktiv eller giftig gass eller andre kjente karsinogener. Pasienten og kontroll kohorter ble matchet for kjønn og alder, og det var ingen statistisk signifikant forskjell mellom deres demografiske kjennetegn. Denne studien ble godkjent av Institutional Review Board of Second Hospital tilknyttet WMC, og alle fag i begge kohorter tegnet et informert samtykke før innmelding.
Primer design
Primere for Multiplex Polymerase Chain Reaction (Multi-PCR) ble designet av den analysen 3.1 system (Sequenom, Inc., San Diego, CA, USA) og syntetisert av TsingKe Inc, (Beijing, Kina). Primersekvensene brukt i denne studien er oppført i Tabell 1.
Genomisk DNA-ekstraksjon
Prøver av perifert blod ble samlet i EDTA-belagte rør og lagret ved -70 ° C. DNA ble ekstrahert fra blodceller ved hjelp av AxyPrep Blood Genomisk DNA Maxiprep Kit (Axygen BioScience, Inc., Union City, CA, USA)
Geneamplifikasjon og polymorfisme analyse.
DNA-områder som inneholder målrettede SNPs ble forsterket ved hjelp av Multi-PCR med GeneAmp PCR System 9700 (Applied Biosystems, Inc., Carlsbad, CA, USA). Betingelser for PCR var som følger: initial inkubering ved 95 ° C i 2 minutter, etterfulgt av 45 sykluser på 95 ° C i 30 s og annealing ved 56 ° C i 30 s og 72 ° C i 60 sek. Endelig ekstensjon ble utført ved inkubasjon ved 72 ° C i 5 minutter. PCR-produktene ble renset ved hjelp av tilsetning av SAP enzym, som ble brukt som et templat for amplifikasjon av SNP av primer-forlengelsesreaksjoner med ddNTP. Den primer-ekstensjon ble utført ved anvendelse av de følgende sekvensielle trinn: første inkubering ved 95 ° C i 30 s; denaturering ved 95 ° C i 5 s; fem sykluser av annealing ved 52 ° C i 5 s og forlengelse ved 80 ° C i 5 s; 40 sykluser med denaturering ved 95 ° C i 5 sekunder, annealing ved 52 ° C i 5 s og forlengelse ved 80 ° C i 5 s; endelig forlengelse ved 72 ° C i 53 min. Genotyping av skjøtereaksjonsprodukter ble gjort ved hjelp av matrise assistert laser desorpsjon ionisering tiden av fly MS (MLDI-TOF MS) [25].
Statistisk analyse
Hardy-Weinberg likevekt ble benyttet for å bestemme om genotype og allelfrekvenser i både pasient og kontroll kohortene var representative for frekvenser i den generelle befolkningen. Evalueringer av haplotype konstruksjon og koblingsulikevekt ble utført ved bruk av Haploview 3.2 programvare (https://www.broad.mit.edu/mpg/haploview/). Forskjeller i genotype og allelfrekvenser ble undersøkt ved hjelp av chi kvadrat (χ
2) test. Justerte ORS basert på alder, kjønn, røykevaner, og drikker status ble beregnet ved hjelp av logistisk regresjon og ubetinget logistiske regresjonsanalyser. Ubetinget logistisk regresjonsanalyse ble brukt for å få tilgang til den kombinerte effekten av SNPs og tobakk /alkohol eksponering [26], [27].
Røyking ble kvantifisert ved hjelp av røyking indeksen formel (SI = pakke-år = antall sigaretter per dag /20 x år med røyking), og individene ble klassifisert som lette eller tunge røykere basert på SI verdier av ≤ 20 eller 20, henholdsvis [28]. Drikking ble kvantifisert ved hjelp av drikke indeks (DI = ml drinker per dag x år med drikking), og individene ble klassifisert som lette eller tunge drinkers basert på DI verdier av ≤ 60 eller 60, henholdsvis [29].
Alle statistiske analyser ble utført ved hjelp av SPSS 20.0 programvare. En P-verdi. 0,05 ble ansett som statistisk signifikant
Resultater
emne egenskaper
Demografisk informasjon for forsøkspersonene i begge gruppene er oppsummert i tabell 2. Det var ingen statistisk signifikante forskjeller med hensyn til kjønn (P = 0.643) eller alder (gjennomsnittlig = 63,5 år i pasientgruppen vs. 62,3 år i kontrollgruppen, P = 0,678) av pasientene i de to gruppene. Men menn sto for 96,7% av pasientene som deltok i pasient kohorten (P 0,001). Flertallet av pasientene i begge gruppene rapporterte en lang historie med røyking og /eller drikke, men det var flere røykere i pasientens kohorten enn i kontrollgruppen (86,4% vs. 65,6%, P 0,001). Tunge røykere viste en signifikant (P 0,001) økt risiko for strupekreft (OR = 5,552, 95% KI: 4,069 til 7,574), mens risikoen for lette røykere var ikke signifikant (OR = 1,299, 95% KI: 0.913- 1,848, P = 0,164). Effekten av å drikke alkohol på risiko for strupekreft var lik som produseres av røyking (P 0,001), og det var flere drinkers i pasientens kohort enn i kontrollgruppen (69,4% vs. 49,4%, henholdsvis P 0,001). I tillegg ble mye drikking forbundet med en betydelig risiko for å utvikle strupekreft (OR = 4,085, 95% KI: 3,113 til 5,361, P 0,001), mens denne risikoen blant lette drinkers var ikke signifikant (OR = 0,949, 95% KI .: 0,693 til 1,298, P = 0,741)
allel og genotype distribusjon
allel og genotypefrekvensene for tre SNP loci (CYP1B1 * 2 G355T, CYP1B1 * 3 C4326G, og CYP2E1 * 5 G-1293C) er oppsummert i tabell 3. fordelinger av allel og genotypefrekvensene av disse tre loci var i samsvar med Hardy-Weinberg likevekt (χ
2 = 0,270, P = 0,603; χ
2 = 0,045, P = 0,832; χ
2 = 3,127, P = 0,077, henholdsvis). Allelfrekvensene for CYP1B1 * 2 355T, CYP1B1 * 3 4326G, og CYP2E1 * 5 -1293C var 35,2, 8,2, og 15,5%, henholdsvis i pasient årsklasse, og 20,2, 13,2 og 8,3%, henholdsvis i kontrollgruppen ( P 0,05). Frekvensen av genotypene på disse tre loci i de to kullene var signifikant forskjellig (P 0,001, respektivt), og frekvensen på villtypegenotype i pasient og kontrollkullene var også signifikant forskjellige (64,5% vs. 36,6 %, P 0,001; 15,2% vs. 24,8%, P 0,001; 20,3% vs. 15,3%, P . 0,001, henholdsvis)
Individuelle SNPs og risiko for strupekreft
personer med GT eller TT (GT + TT) genotype ved CYP1B1 * 2 G355T locus viste en betydelig høyere risiko for å utvikle strupekreft enn personer med GG genotype (råolje OR = 3,141, 95% KI: 2,483 til 3,974, P 0,001), og denne forskjellen mellom genotypgruppene forble signifikant selv etter justering for forskjeller i alder, kjønn, røykevaner og alkoholvaner (justert OR = 2,657, 95% KI: 2,078 til 3,398, P . 0.001)
i motsetning til personer med CG eller GG genotype på CYP1B1 * 3 C4326G locus viste en betydelig lavere risiko for å utvikle strupekreft sammenlignet med personer med CC genotypen (råolje OR = 0,545, 95 % KI: 0,407 til 0,729, P 0,001). Justerte verdiene viste også statistisk signifikans: (justert OR = 0,562, 95% KI: 0,414 til 0,763, P 0,001)
Personer med GC eller CC genotype på CYP2E1 * 5 G-1293C locus også. viste en signifikant høyere risiko for strupekreft sammenlignet med personer med genotype GG (råolje OR = 1,773, 95% KI: 1,330 til 2,362, P 0,001), mens individer heterozygote for genotype CC viste en mye høyere risiko (råolje OR = 6,240 , 95% KI: 2,876 til 13,540, P 0,001). De justerte verdiene viste også statistisk signifikans: (for GC + CC, justert OR = 1,938, 95% KI: 1,426 til 2,633, P 0,001; for CC, justert OR = 8,718, 95% KI: 3,785 til 20,076, P 0,001). I tillegg er T
355C
4326C
-1293 haplotype, som inneholder tre høyrisiko alleler, viste en enda sterkere assosiasjon (justert OR = 3,104, 95% KI: 2,135 til 4,512, P 0,001) . Følgelig haplotype G
355G
4326G
-1293, som inneholder tre beskyttende alleler, viste en svakere tilknytning til strupekreft enn de store haplotype G
335C
4326G
-1293 (justert OR = 0,573, 95% KI: 0,391 til 0,841, P = 0,004).
genotyper ved de tre loci ble definert for enkeltpersoner i pasienten og kontrollere kohorter. Personer med genotype GT /TT + CC + GG eller GT /TT + CG /GG + GC /CC, som inneholder to risiko alleler i to loci, viste en betydelig høyere risiko for å utvikle strupekreft sammenlignet med personer med genotype GG + CG /GG + GG (justert OR = 3,331, 95% KI: 2,144 til 5,176, P 0,001 og justert OR = 2,418, 95% KI: 0,999 til 5,856, P = 0,050, henholdsvis). Videre personer med tre risiko alleler på alle tre loci (GT /TT + CC + GC /CC) viste høyest risiko for å utvikle strupekreft (justert OR = 5,297, 95% KI: 3,123 til 8,986, P 0,001).
Gene-miljø interaksjoner og risiko for strupekreft
den felles effekter av de tre SNPs og miljøfaktorer er vist i Tabell 5. Vår analyse viste at 58,5% av pasientene utsettes for tobakk røyking hadde GT eller TT genotype på CYP1B1 * 2 G355T locus, og 38,3% hadde genotype GG på det locus. Blant pasienter som forbrukes alkohol, 47,6% hadde GT eller TT genotype og 21,7% hadde GG genotype. Ikke-røykere med GT eller TT genotype viste en høyere risiko for å utvikle strupekreft enn ikke-røykere med GG genotype (justert OR = 2,190, 95% KI: 1,257 til 3,816, P = 006). De tilsvarende verdier for ikke-drikkere var OR = 2,008, 95% KI: 1,361 til 2,963, og P = 0,001, og for røykere, var verdiene OR = 5,875, 95% KI: 3,950 til 8,739, og P 0,001. Dette ELLER verdi, noe som gjenspeiler den felles effekten av å ha GT eller TT genotype og også å være en røyker, er større enn verdien produsert ved å multiplisere eller verdi for å ha genotype alene med OR verdi for å være en røyker alene (5,875 2,190 × 2,098 = 4,595). Blant dem som drikker, de tilsvarende verdiene OR = 4,518, 95% KI: 3,181 til 6,415, P 0,001. Dette ELLER verdien var også større enn verdien produsert ved å multiplisere eller verdi for å ha genotype alene med OR verdi for å være en røyker alene (4,518 2,008 × 1,414 = 2,839). Den ELLER verdier for storrøykere og stordrikkere med GT + TT genotypen var 9,995 (P 0,001) og 8,668 (P 0,001) henholdsvis. Lignende felles effekter av tunge røyking eller tung drikking kombinert med genetiske faktorer ble også indikert (9,995 2,190 × 3,515 = 7,700 og 8,668 2,008 × 2,312 = 4,642, henholdsvis). Disse data viser at tilstedeværelsen av en SNP ved CYP1B1 * 2 G355T locus, når kombinert med røyking eller drikking, produserer en felles effekt på en persons mottakelighet for strupekreft. Også tilstedeværelse av allelet 335T, når kombinert med røyking eller drikking, øker samarbeide risikoen for strupekreft. Våre resultater viser at den felles virkning av to risikofaktorer er sterkere enn den enkle additive virkning av to enkeltfaktorer.
På samme måte, både røyking og drikking viste en samarbeidende virkning for å øke risikoen for strupekreft hos pasienter med villtype-allelet 4326C på CYP1B1 * 3 C4326G locus. For eksempel personer med CG + GG genotype på dette locus presentert med en lavere risiko for strupekreft enn de med CC genotype og opplever de samme miljømessige eksponeringer, som røyking (OR = 1,542 vs. OR = 2,959, P 0,001). Det mutante allelet CYP1B1 * 2 4326G viser en beskyttende virkning mot utvikling av strupekreft (P 0,001). De genetiske risikofaktorer og røyking /drikking viser felles effekter på strupekreft forekomst.
Diskusjoner
Våre case-control studie av Han-kinesiske befolkningen avslørte at tre SNPs på CYP1B1 * 2 G355T, CYP1B1 * 2 C4326G, og CYP2E1 * 5 G-1293C er knyttet til en persons mottakelighet for strupekreft. I pasient årsklasse, frekvensen av alleler CYP1B1 * 2 355T og CYP2E1 * 5 -1293C var høyere enn de i kontrollgruppen, og frekvensen av allelet CYP1B1 * 3 4326G i pasientens kohorten var lavere enn i kontrollgruppen. I tillegg har alle disse forskjeller var statistisk signifikante. Disse resultatene antyder sterkt at alleler CYP1B1 * 2 355T og CYP2E1 * 5 -1293C øke risikoen for strupekreft, mens allelet CYP1B1 * 3 4326G kan redusere risikoen.
CYP1B1 * 2 G355T finner på andre exon av den CYP1B1 genet og bevirker en Ala119Ser aminosyre forandring i det kodede enzym. Den CYP1B1 * 2 C355T mutasjon har blitt rapportert å øke risikoen for hode og nakke kreft [15], og Jawarowska et al. rapportert at CYP1B1 * 2 355T allelet øker en persons mottakelighet for strupekreft [30]. I tillegg er en studie av plateepitelkarsinom i luftveiene funnet en høy frekvens av CYP1B1 * 2 355T allelet hos pasienter med lungekreft, noe som tyder på at tilstedeværelsen av dette allelet øker risikoen for å utvikle lungekreft [31]. Til slutt, CYP1B1 * 2 355T allelet ble også rapportert å være assosiert med en økt mottakelighet for andre krefttyper, for eksempel brystkreft og livmorkreft [32]. I vår studie fant vi at blant personer med en historie med lignende miljømessige eksponeringer, de individene som bærer CYP1B1 * 2 355T allelet (genotype GT + TT) viste en signifikant økt risiko for strupekreft sammenlignet med personer med villtype-genet (GG ) (Tabell 5). Dermed data fra vår studie og andre studier har konsekvent vist at CYP1B1 * 2 G355T allelet er knyttet til kreft mottakelighet. Mutation allel (CYP1B1 * 2 355T) kan også øke risikoen for strupekreft, muligens på grunn av økt katalytisk aktivitet for 17β-østradiol 4-hydroksylering bidratt med at mutasjon [12]. Imidlertid er mekanismen bak effekten av dette allel på å fremme kreftrisikoen er fortsatt uklar og krever videre undersøkelser.
CYP1B1 * 3 C4326G finner på det tredje ekson av genet og bevirker en Leu432Val aminosyre forandring i det kodede enzym . Mens CYP1B1 * 3 C4326G mutasjon har blitt rapportert å øke en persons mottakelighet for hode og nakke kreft [8], [33], Tai et al. rapportert at denne mutasjonen ikke var forbundet med følsomhet for enten hypopharynx plateepitelkarsinom eller strupekreft [28]. Men en annen studie fant en lavere frekvens av mutasjonen allel CYP1B1 4326G hos pasienter med kreft i tykktarmen, noe som indikerer at dette allel kan redusere risikoen for tykktarmskreft og selv utøve en beskyttende virkning [34]. Det er fullt mulig at de avvik som finnes blant disse resultater om effekten av mutasjonen allel CYP1B1 4326G på kreftrisiko kan stamme fra ulike etniske grupper, emne tall og flere SNPs som inngår i studiene.
I vår studie, mutasjon allel CYP1B1 4326G var assosiert med en redusert risiko for strupekreft (tabell 3). En mulig mekanisme som ligger til grunn av denne beskyttende virkning kan være at det endrede enzym konformasjon som produseres av aminosyresubstitusjon kan føre til en redusert eller redusert enzymatisk kapasitet for aktivering av kreftfremkallende.
CYP2E1 * 5 G-1293C, også kjent som rsa i /Pst i rflp (RFLP), lokaliserer ved 5′-UTR (ikke-translaterte region) av CYP2E1 genet. Nukleotid Endringen G-1293C skaper et gjenkjenningssete for restriksjonsenzymet Pst I, og forstyrrer et Rsal-gjenkjenningssete, og dermed å endre genekspresjon [21], [35]. En meta-analyse inkludert 12562 tilfeller ble utført for å undersøke sammenhengen mellom CYP2E1 Rsa I /Pst jeg RFLP og mottakelighet for hode og nakke kreft [36]. Resultatene fra studien viste at OR for personer som bærer en mutasjon allel (CYP2E1 * 5 -1293C) og har et hode og nakke kreft ble 1,11 sammenlignet med personer med homozygot villtype CYP2E1 * 5 -1293G allelet. Dette resultatet indikerer at CYP2E1 * 5 -1293C allelet er forbundet med en økt risiko for hode-hals-kreft. En annen meta-analyse av case-control studier på sammenhengen mellom CYP2E1 polymorfismer og hode og nakke kreftrisiko viste at enkeltpersoner, særlig asiater, homozygote for CYP2E1 * 5 -1293C hadde en økt risiko for å utvikle hode-hals-kreft [37]. Vår case-control studie viste at CYP2E1 * 5 -1293C allelet er assosiert med økt risiko for strupekreft, og er derfor en genetisk faktor for strupekreft mottakelighet (tabell 3).
Vår haplotype analyser viste at G
355C
4326G
-1293 ble den vanligste haplotype funnet i både pasient og kontrollgruppene (tabell 4), og også bekreftet at begge mutasjonslene, CYP1B1 * 2 355T og CYP2E1 * 5 -1293C er høy risiko genetiske faktorer for utvikling av strupekreft, mens mutasjon allelet CYP1B1 * 3 4326G er en beskyttende genetisk faktor. Disse funnene tyder på at villtype-allelet CYP1B1 * 3 4326C kan være en høy risiko genetisk faktor for strupekreft. Den haplotype T
355C
4326C
-1293, som omfatter alle tre høyrisiko alleler, var assosiert med en betydelig høyere risiko for strupekreft sammenlignet med andre haplotyper og andre single-locus genotyper, noe som tyder på rollen en gen-gen samspill i utviklingen av strupekreft. Haplotype G
355G
4326G
-1293 var assosiert med en lavere strupekreft risiko enn haplotype G
355C
4326G
-1293, som er konsistent med den beskyttende effekten av CYP1B1 * 3 4326G allelet, og også foreslått en additiv genetisk effekt blant disse alleler. Våre analyser av disse haplotyper og genotyper viste at strupekreft risikoen øker med økende antall av høy risiko alleler, og reduseres når flere beskyttende alleler var til stede. Disse analyser bekreftet ikke bare risiko effekten av hvert enkelt allel som sett av enkelt allel analyser, men også foreslått en additiv felles virkning av alle tre alleler.
Epidemiologiske studier har vist at miljøfaktorer, spesielt røyking og alkoholforbruk , spiller viktige roller i utviklingen av kreft. Pro-kreftfremkallende som PAH, HAA, aromatiske aminer, N-nitrosamin, og nitrerte polysykliske aromatiske hydrokarboner avledet fra tobakk og acetaldehyd produsert av alkohol metabolisme kan aktiveres og bli metabolisert til å danne kreftfremkallende av ulike cytokrom P450-enzymer [38], [39 ]. Våre studere resultatene viste at røyking og alkoholforbruk, spesielt tunge røyking og høyt alkoholforbruk, er forbundet med en betydelig økt risiko for utvikling av strupekreft (tabell 5). Analyser for felles effekten av de tre SNPs pluss røyking /drikking på risiko for strupekreft viste at røykere med to av de nevnte høy risiko alleler (mutasjon allel CYP1B1 * 2 355T og villtype-allelet CYP1B1 * 3 4326C) var på et betydelig økt risiko for utvikling av strupekreft (tabell 5). I tillegg gir denne risikoen var mye større enn risikoen gitt av enten alene faktor, noe som tyder på at når det kombineres med tobakk eksponering, de to allelene hadde en synergistisk effekt for å øke risikoen for strupekreft. CYP1B1 er en induserbar metabolske enzym som er ansvarlig for aktivering av flere pro-kreftfremkallende, og CYP1B1 oversettelsen er regulert av aryl hydrokarbon reseptor (AhR), AhR atom Translocator (ARNT), og Sp1 transkripsjonsfaktor [32]. Dermed kan den høyere risiko for strupekreft funnet hos røykere eller drikker som bærer alleler CYP1B1 * 2 355T og CYP1B1 * 3 4326C resulterer fra det faktum at eksponering for tobakk eller alkohol ikke bare fører til høye cellulære nivåer av pro-kreftfremkallende avledet fra tobakks og alkohol metabolisme, men også et resultat av økt uttrykk og aktivitet av P-450 metabolske enzymer som er modulert gjennom ulike positive tilbakekoblingsmekanismer. Kjemikalier som etanol, aromatiske stoffer, og nitrosamine avledet fra tobakk og alkohol metabolisme er også underlag og indusere for CYP2E1 [40]; imidlertid bare et begrenset antall studier er utført undersøke kryss samspillet mellom genetiske faktorer og røyking eller drikking. Våre data viser at felles effekter av CYP2E1 * 5 G-1293C og røyke eller drikke på strupekreft risikoen er ikke vesentlig forskjellig fra virkningene av individuelle genetiske eller miljømessige faktorer (tabell 5). I tillegg viste resultatene ingen samarbeids effekt mellom CYP2E1 * 5 G-1293C og røyking /drikking, som er konsistent med resultatene av en meta-analyse rapportert av Tang et al.
