Abstract
Sirkulasjonsblodplater er rikelig kilder til angiogensis molekyler for tumorvaskulatur påvirker tumorvekst og metastasering. Forholdet mellom ikke-småcellet lungekreft (NSCLC) og intra-plate nivåer av VEGF, TSP-1 og netto platelet angiogen aktivitet (NPAA) er uklart. Målet med denne studien var å bedre forstå hvilken rolle disse faktorene i utviklingen av NSCLC kreft og for å vurdere klinisk betydning. Blodplate VEGF og TSP-1 og NPAA ble målt preoperativt i 68 pasienter med NSCLC ved ELISA eller Kapillarrør formasjon assay. VEGF, ble TSP-1 og NPAA distribusjoner i kreftpasienter og friske frivillige sammenlignet med Mann-Whitney
U
test. Kaplan-Meier metoden, univariat og multivariat regresjonsanalyse ble brukt til å analysere sammenhengen mellom disse faktorene og clinicopathological funksjoner, total overlevelse og sykdomsfri overlevelse. Gjennomsnittlig intra-plate TSP-1 nivået var litt høyere hos pasienter enn hos friske personer (p = 0,092). Intra-plate TSP-1 nivåene var signifikant høyere hos pasienter med engasjement større enn T2 eller stadium III, sammenlignet med andre pasienter. Gjennomsnittlig intra-platelet VEGF nivå var 40,8 pg /10
6 i pasienter sammenlignet med 21,9 ng /10
6 hos friske personer (p = 0,041). Medianverdi av NPAA hos pasienter som var signifikant høyere enn hos friske kontroller (p 0,001). Pasienter med høy NPAA er mer sannsynlig vise aggressive kliniske patologiske funksjoner. NPAA større enn medianen er assosiert med dårlig prognose. Den forhøyede NPAA ha bedre sammenheng med tumor microvessel tetthet (MVD) enn plate avledet VEGF. Arealene under mottaker driftskurve (AUROC) av NPAA var høyere enn den for blodplateavledet VEGF i forskjellige grupper. En multivariat analyse viste at NPAA er uavhengige prognostiske faktorer. Resultatene indikerte at NPAA kan være en klinisk nyttig indikator for diagnostisk og prognostisk vurdering i NSCLC
Citation. Yao L, Dong H, Luo Y, Du J, Hu W (2014) Netto Blodplate angiogen aktivitet ( NPAA) korrelerer med Progresjon og prognose av ikke-småcellet lungekreft. PLoS ONE 9 (4): e96206. doi: 10,1371 /journal.pone.0096206
Redaktør: Rossella Rota, Ospedale Pediatrico Bambino Gesu «, Italia
mottatt: 20 januar 2014; Godkjent: 03.04.2014; Publisert: 30 april 2014
Copyright: © 2014 Yao et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Dette arbeidet ble støttet av Utdannings Commission of Anhui-provinsen i Kina (Grant KJ2011A163), Science Foundation i Anhui-provinsen i Kina (Grant 11040606M208) Natural, og Foundation Natural Science of China (Grant 30672437). Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
Lungekreft er en av de mest vanlige ondartede sykdommer i verden, med en stadig økende frekvens, spesielt i Kina. Det er rangert som den første ledende årsak til kreft dødsfall blant menn i Kina [1], [2]. Til tross for fremskritt i kjemoterapi, prognose for lungekreftpasienter er fortsatt dårlig, med 5-års relativ overlevelse mindre enn 14% blant menn og mindre enn 18% blant kvinner i de fleste land [3]. Dermed vil evnen til å forutsi individuell prognose være kritisk for å lede kirurgisk og kjemoterapeutisk behandling. Angiogenese, eller newblood kar dannelse, et essensielt trinn i tumorvekst og metastase, er regulert av en balanse mellom pro-angiogene faktorer så som VEGF og bFGF, og anti-angiogene faktorer som endostatin og TSP-1. Blodplater har lenge vært kjent for å være primære mediatorer av trombose og hemostase. Nylig har de vist seg å ha mange angiogenese promo og angiogenesehemmere, være en av de største enkeltkildene angiogene faktorer in vivo [4]. VEGF ekspresjon har blitt funnet å være høy i forskjellige ondartede tumorer, og serum VEGF-nivåer korrelerer med sykdoms stadium og prognose i brystkreft, tykktarmskreft og prostatakreft [5], [6]. Det har blitt rapportert at høy VEGF-immunreaktivitet i tumorvev er forbundet med prognosen hos pasienter med NSCLC [7], [8]. Trombospondin-1 (TSP-1) var den første endogene inhibitor av angiogenese som skal identifiseres [9], [10]. Dette 450-kDa glykoprotein produseres og utskilles av mange typer av tumorceller og celler som befinner seg i tumoren stroma. Ekspresjonen av TSP-1 i humane tumorer er modulert av onkogener og microenvironmental faktorer, og i flere typer humane tumorer TSP-1 er til stede i både stroma og tumorceller [11]. Dessuten har høye sirkulerende nivåer av TSP-1 blitt forbundet med sykdomsprogresjon og avanserte kliniske stadier av sykdommen [12], [13]. Selv om serum VEGF og TSP-1, er de mest studerte pro- og anti-angiogene faktorer, henholdsvis, og sterkt forhøyet i angiogenese-relaterte sykdommer, studier angående blodplate-avledet VEGF og TSP-1 er mangelvare i lungekreftpasienter. Nyere studier har vist at i tillegg til frigjøring av pre-eksisterende forbindelser, kan blodplatene syntetisere nye ved stimulering på grunn av en stor mengde av messenger-RNA [14]. Dette faktum tyder på at blodplater kan spille en tidligere ukjent rolle ved regulering av vaskulær respons. Heri, har vi undersøkt VEGF og TSP-1, men også netto blodplate angiogen aktivitet (NPAA) i blodplatene av lungekreftpasienter sammenlignet med friske kontroller. For å evaluere den NPAA, testet vi in vitro effekten av blodplate-lysater fra pasienter med lungekreft på dannelsen av humane navlestreng endotelceller (HUVECs) kapillær-lignende strukturer.
Materialer og metoder
Cell isolasjon og kultur
menneske~~POS=TRUNC navlestreng endotelceller (HUVECs) ble hentet fra navlestrengen ledninger gitt av den lokale avdelingen for obstetrikk. Skriftlig informert samtykke ble innhentet fra giverne, og studien ble godkjent av etikkomiteen i Anhui Medical University. Isolering og dyrking ble utført som beskrevet tidligere [15]. Celler ble dyrket i RPMI-medium supplert med FBS (10%), L-glutamin (2 mM), streptomycin (100 ug /ml) og penicillin (100 U /ml) ved 37 ° C i en fuktet 5% CO
2 inkubator.
Kapillarrør formasjon analysen
røret formasjon analysen ble utført i henhold til produsentens instruksjoner (Chemicon International, Hampshire, UK) med små modifikasjoner. Endotelceller (1 x 10
4) ble sådd ut i vekstfaktor-redusert Matrigel belagte plater (Becton Dickinson Biosciences, Bedford, MA, USA) og utsatt for blodplate lysater i 18 timer. Tubule dannelse ble undersøkt under et invertert mikroskop lys og antallet forgreningspunkter i fire ikke-overlappende felt ble målt. Fotografier av alle brønnene ble tatt ved bruk av et invertert mikroskop lys. Forsøk ble utført in triplo, og variasjonen var mindre enn 10%. For å evaluere test reproduserbarhet, kapillarrør formasjonen (CTF) av HUVEC ble gjentatt 3 ganger, i nærvær av 9 utvalgte pasientblodplater (3 med stimulatorisk aktivitet, 3 med stimulatorisk aktivitet i området fra friske donorblodplater, og tre med hemmende aktivitet) . I alle de gjentas, de valgte blodplater opprettholdt sin opprinnelige aktivitet. Å inhibere aktiviteten av utvalgte blodplater, ble de preimcubated med 5 ng /ml VEGF monoklonalt antistoff (Sigma) eller 200 ug /ml TSP-antistoff (Sigma).
pasienter og prøver
seksti-åtte pasienter med histologisk eller cytologisk bekreftet NSCLC ved vårt sykehus mellom september 2006 og juli 2007 ble inkludert i studien. De 68 pasientene bestod av 46 menn og 22 kvinner (alder 61 ± 12,8 år [gjennomsnitt ± SD]). Kontrollgruppen bestod av 68 friske givere meldt fra Blood Transenhet samme sykehus i samme periode. Både friske donorer og pasienter ikke har en tidligere historie av ondartet sykdom. Klinisk-patologiske karakteristika for pasienter ble rapportert. Histologiske klassifikasjon av svulstene var basert på Verdens helseorganisasjons kriterier [16]. Histologisk 37 svulster var adenokarsinom, 28 var plateepitelkarsinom, og tre var store cellekreft. Metastaser til lymfeknuter var N0 + N1 på 49 pasienter, N2 + N3 i 19. Postoperativ sykdom scenen var stadium I + stadium II på 38 pasienter, scene III + stadium IV i 30. Parafin-embedded, formalinfiksert kirurgiske prøver ble samlet for immunhistokjemisk farging for intratumorale microvessel endotelceller. Histopatologien til stede i de arkiverte frosne vev ble bekreftet av en patolog for å være lik den som er i de parafininnstøpte vev. Overlevelsestiden for pasienter ble beregnet fra datoen for operasjonen til dødsdato. Oppfølgingen varte i opptil 60 måneder. Perifere blodprøver fra pasienter med NSCLC ble trukket i løpet av en uke før kirurgi eller kjemoterapi. Alle blodprøver fra pasienter og kontroller ble tatt tidlig om morgenen etter faste over natten og en hvileperiode på minst 30 min. Prøvene ble behandlet i henhold til standard metoder. Skriftlig informert samtykke ble innhentet fra alle deltakerne, og de studieprotokoller har blitt godkjent av etikkomiteen i Anhui Medical University.
Utarbeidelse av humane blodplater
Standard «blue top» antikoagulerende Prøver ble samlet fra hver enkelt, og behandlet i henhold til standardmetoder for blodplatesamling i løpet av 1-2 timer etter innsamling. I korthet ble en blodprøve (ca. 4 ml) ved venepunktering trukket inn i et vakuum-rør inneholdende 105 mM sitrat (pH 5) antikoagulant i et forhold på 01:09 (volum /volum) buffer til blod. Rørene ble forsiktig blandet og holdt på en langsom rocker ved omgivelsestemperatur (20 til 28 ° C) mens de venter på behandling. Blodplaterikt plasma oppnås fra citrert plasma ved sentrifugering (1000 rpm, 10 minutter) i løpet av en time av samling, volumet registrert og en legemer utført. Den blodplaterike plasma sentrifugeres deretter i nærvær av PGI2 (75 nM) ved 2000 rpm i 20 minutter for å oppnå en blodplatepellet som vaskes deretter to ganger i fosfat-bufret saltvann (PBS) og resuspendert forsiktig i PBS for å gi en konsentrasjon på 2 x 10
8 blodplater /ml. en ml av denne blodplate-suspensjon ble blandet med 1 ml 0,1% Triton X-100 (Sigma) ved 37 ° C i 20 minutter. Dette lyserer effektivt alle blodplater. Dette blodplatelysatet lagres deretter ved -80 ° C før analyse ved hjelp av ELISA.
Målinger av VEGF og TSP-1
Alle prøvene ble testet i det samme laboratorium, innenfor samme tidsramme (2 uker). Kreft og kontrollgruppeprøver ble randomisert før testing for å unngå testing bias. Blodplatekonsentrasjoner ble bestemt ved bruk av kvantitative ELISA kits (Quantikine immunanalyser, R D Systems, Wiesbaden, Tyskland). Alle analyser har intra-assay co-efficients av variasjon (CV) på mindre enn 5% og inter-assay CV 10%. Den nedre påvisningsgrense for hver enkelt assay er 10 pg (VEGF) og 5 ng (TSP-1). Alle testene ble utført i henhold til produsentens instruksjoner. Alle forsøk ble gjort minst i to eksemplarer på riktig fortynnede prøver.
microvessel Density (MVD)
microvessels ble farget ved hjelp musepolyklonalt anti-CD34 antistoff (1:20 fortynning) (Novocastra, Newcastle, UK) som det primære antistoff, og bindingen visualisert gjennom avidin-biotin-peroksidase-komplekset metode. Enhver røde flekker endotelceller klynge som var tydelig skilt fra tilstøtende microvessels, kreftceller og andre elementer bindevev ble betraktet som en singel, tellbar microvessel. Årehulrom var ikke nødvendig for en struktur som skal defineres som en microvessel. Vi valgte tre vaskulære hotspots både intratumorally og peritumoralt for telling CD34 microvessels.
Statistical Analysis
Statistiske analyser ble utført med SPSS 11.0 (SPSS, Inc, Chicago, IL) programvare. Dataene ble testet for normalitet og ble funnet å være ikke-normalfordelt. VEGF, ble TSP-1 og NPAA distribusjoner i kreftpasienter og friske frivillige sammenlignet med Mann-Whitney
U
test. Korrelasjoner ble evaluert med Spearman rank-sum test. Sensitiviteten og spesifisiteten av NPAA ble bestemt ved mottagerdrifts karakteristiske (ROC) kurver, og områdene under kurven ble beregnet [17]. Overlevelseskurver ble oppnådd ved Kaplan-Meier-metoden og Cox-modellen ble brukt for å identifisere faktorer som er uavhengig av hverandre forbundet med overlevelse. Resultatene er presentert som middelverdier med interkvartilt områder. Betydning ble antatt ved p-verdier på mindre enn 0,05.
Resultater
NPAA, plate avledet VEGF og TSP-1-nivåer i lungekreftpasienter og friske kontroller
NPAA , blodplate-avledet VEGF og TSP-1-nivåer ble påvist i alle friske kontroller. Deres medianverdier av NPAA, plate avledet VEGF og TSP-1 nivåene var 65,4 no. avdelings punkter /10
6, 21,9 pg /10
6 og 8,5 ng /10
6, henholdsvis. Median verdi av NPAA og VEGF i lungekreftpasienter var 156,2 no. /10
6 (range, 66,4 til 250,2) og 40,8 pg /10
6 (område, 15,85 til 85,9), og avdelings punkter vesentlig høyere enn friske kontroller (P henholdsvis 0,001 og p = 0,041, ; Tabell 1). Det var ingen signifikant forskjell i plate avledet TSP-1 nivåer mellom lungekreftpasienter og friske kontroller (p = 0,092, Tabell 1).
Forholdet mellom NPAA, plate avledet VEGF eller TSP- 1-nivåer og kliniske patologiske profiler
for å vurdere sammenslutning av NPAA, plate avledet VEGF eller TSP-1 med tumorbiologi, ble sammenligninger av de kliniske patologiske funksjoner med NPAA, plate avledet VEGF eller TSP-en laget . Som forventet har pasienter med høy NPAA var mer sannsynlig vise aggressive kliniske patologiske funksjoner: høy NPAA var signifikant korrelert med dårlig tumor differensiering (P = 0,004), patologisk stadium (P 0,001), patologisk T-faktor (P 0,001) og patologisk N-faktor (P 0,001), mens høy blodplate-avledet VEGF ble signifikant korrelert med dårlig tumor differensiering (P 0,001) og patologisk trinnet (P 0,001) (tabell 2). Konsentrasjonene av blodplate-avledet TSP var høyere hos pasienter med patologiske stadium III + IV og patologisk T-faktor T2-4 enn i pasienter i stadium patologisk I + II (P = 0,002) og patologisk T-faktor T1 (P = 0,008) , henholdsvis (tabell 2). I denne studien fant vi at medianverdier av NPAA og VEGF i lungekreftpasienter er betydelig høyere enn hos friske kontroller. I motsetning til TSP-1 ble ikke hevet i kreftpasienter, sammenlignet med kontrollprøvene. Pasienter med høy NPAA var mer sannsynlig vise aggressive kliniske patologiske funksjoner.
Receiver-driftskurve (ROC) analyse av VEGF og NPAA i deteksjon av lungekreft
Figur 1 viste at arealet under mottaker-driftskurve (AUROC) av NPAA for å differensiere lungekreft fra helsekontroller var 0,892 (95% CI, 0,874 til 0,961), som var høyere enn 0,823 (95% CI, 0,786 til 0,941) av VEGF. (P 0,0001).
(A, B) ROC analyse av lungekreftpasienter og friske kontroller, og friske kontroller som en negativ gruppe, og pasienter med lungecancer som en positiv gruppe. NPAA hadde den beste prediktiv diagnostisk nøyaktighet (AUC = 0,893, P 0,0001). AUROC. Arealet under mottaker-driftskurve
Korrelasjoner mellom NPAA, plate avledet VEGF eller TSP-1-nivå og pasient total overlevelse eller sykdomsfri overlevelse
Univariat Cox regresjonsanalyse viste regional lymfeknute, patologisk stadium, NPAA, og plate avledet VEGF nivåer for å være viktige faktorer som påvirker total overlevelse (tabell 3). Log-rank-analyse viste at forhøyet NPAA større enn median var assosiert med dårlig sykdomsfri overlevelse og dårlig total overlevelse (p = 0,012, p = 0,002;. Figur 2), mens blodplateavledet VEGF og TSP-1 ikke vise denne assosiasjon. I tilfelle av multivariabel analyse for histologisk differensiering, T faktor, regional lymfeknute, patologisk stadium, NPAA, blodplate-avledet VEGF og TSP-1, bare regional lymfeknute, patologisk scene og NPAA var fremdeles er relatert til samlet overlevelse i en viss grad ( tabell 3). I kontrast, regional lymfeknute, patologisk stadium, NPAA var viktige faktorer som påvirker sykdomsfri overlevelse (tabell 4).
Sykdomsfri overlevelse (A) og total overlevelse (B) for lav NPAA og høye NPAA pasienter . P-verdier ble bestemt ved log-rank test.
Forholdet mellom NPAA eller Blodplatederiverte VEGF og Tumor MVD hos pasienter
Det var en signifikant korrelasjon mellom NPAA eller plate avledet VEGF og tumor MVD i kreftpasienter (r = 0,78, P 0,001, r = 0,521; P 0,01;. figur 3A, B). NPAA ha bedre sammenheng med svulst MVD enn plate avledet VEGF. Disse resultatene tyder på at NPAA eller blodplatederivert VEGF kan fremme tumor angiogenese. MVD i NSCLC vev og normalt vev ble bestemt ved CD34 immunhistokjemisk farging
(A) God korrelasjon mellom MVD og NPAA i 68 NSCLC pasienter (r = 0,78; P 0,001) (figur 3C, D.).. (B) Den signifikant korrelasjon mellom svulst MVD og plate avledet VEGF nivåer (r = 0,521, P 0,01). (C) MVD i NSCLC vev og (D) normalt vev ble bestemt ved CD34 immunhistokjemisk farging. Arrow, positiv flekk av MVD.
Stimulering av kapillarrør dannelse (CTF) av plate avledet cytokiner
For å vurdere nettoplate angiogen aktivitet (NPAA), vi testet in vitro effekten av blodplatelysatene fra pasienter med lungekreft og friske kontroller på CTF av HUVECs. Den NPAA var signifikant høyere i pasienter enn friske kontroller. (P 0,001;. Tabell 1, Figur 4A, B)
Representative fotografier av røret dannelsen analysen etter 18-inkubasjon med plate utgitt cytokiner vises i paneler A (pasientenes plate utgitt cytokiner lagt til) og B (friske kontroller plate utgitt cytokiner tilføyd). Preinkubasjon av blodplate lysater med IgG-kontroll (C) og antiTSP-1-antistoff (D). Den statistiske analyse (E). Barer er midler ± SD fra 4 eksperimenter. *
P .
0,05 kontroll versus behandling
The Role of VEGF eller TSP-1 i blodplater Lysates fra Pasienter med NSCLC i NPAA
preinkubasjonstid av høy-VEGF-blodplate-lysater med antistoffer mot VEGF resulterte i en markert reduksjon (mer enn 48%) i CTF av HUVEC, mens bare en svak inhibering ( 16%) eller ingen inhibering av CTF av HUVEC ble observert når stimulerende plate lysatene med lav VEGF-nivåer ble preinkubert med anti-VEGF-antistoffer. Den preinkubasjon av disse hemmende blodplate lysater fra kreftpasienter viste forhøyede nivåer av TSP-1 i begge tilfeller med antistoffer mot TSP-l (200 ug /ml) resulterte i en økning i CTF av HUVEC sammenlignet med disse hemmende blodplate lysater preinkubert med IgG kontroll (5 gg /ml) (
P
0,05, n = 3) (Figur 4. C, D, E). Disse funnene tyder på at intraplatelet TSP-l bidrar til den generelle anti-angiogen effekt utløst av blodplatelysatene.
Diskusjoner
Tumor angiogenese studier har også vist at sirkulerende blodplater er rikelig kilder til pro-angiogen molekyler for tumorvaskulatur, og at tumorcellene indusere plateaktivering og aggregering av utslipp av blodplateaktiverende faktorer, noe som resulterer i frigjøring av a-granulater og deres innhold, som på sin side direkte påvirker tumorvekst og metastase [18] – [ ,,,0],21]. Forhøyede blodplatetall har blitt assosiert med dårlig prognose i lungekreft og i magekreft, noe som tyder på at et prokoagulerende tilstand, og blodplateaktivering kan bidra til utvikling av tidlig kreft [22], [23]. Det har blitt rapportert at VEGF i blodplater er forhøyet og er uavhengige prediktorer for kolorektal karsinom [24]. Fordi angiogenese er regulert av balansen mellom hemmere og aktivatorer, en Målet med studien var å evaluere TSP-1 (hemmer) /VEGF (aktivator) balanse i blodplater. Imidlertid skal det minnes om at tumoral angiogenese reguleres ikke bare av VEGF og TSP-1-nivå, men også ved et antall identifiserte og uidentifiserte aktivatorer og inhibitorer som kan innvirke på nettet angiogene balansen [25], slik at et annet formål med vår studie var å vurdere NPAA.
i denne studien undersøkte vi nivået av blodplate VEGF og NPAA i platelysatene av 68 pasienter med NSCLC. Vi fant at median-verdier for NPAA og VEGF i lungecancerpasienter er signifikant høyere enn hos friske kontroller. Vår studie viste videre at pasienter med høyt NPAA er mer sannsynlig vise aggressive kliniske patologiske funksjoner og at NPAA større enn medianen er assosiert med dårlig prognose. Den forhøyede NPAA ha bedre sammenheng med svulst MVD enn plate avledet VEGF. Mens forhøyede trombocytter har blitt observert i visse typer kreft, gjorde vi ikke observere noen signifikante forskjeller i blodplatetall mellom friske kontrollpersoner og pasienter i vår befolkning (data ikke vist).
Vi målte TSP-1 nivåer av blodplate lysates i NSCLC og fant en ikke-signifikant økning i TSP-1-nivå. Imidlertid nivåene av blodplate-avledet TSP-1 var høyere hos pasienter med patologiske stadium III + IV og patologisk T-faktor T2-4 enn i pasienter i stadium patologisk I + II og patologisk T-faktor T1. Det er to mulige forklaringer på dette funnet. Først kan aggressive svulster generere mer TSP-en enn ikke-aggressive svulster. For det andre kan TSP-1-nivåer være direkte korrelert med bruttovolum på sykdom, og pasientene i denne studien med aggressive svulster generelt hadde en stor tumormengde. Vi har evaluert platelysatene fra kreftpasienter og friske donorer for deres evne til å øke eller redusere CTF av HUVEC som en enkel og reproduserbar
in vitro
tilnærming, få informasjon om NPAA. Faktisk ikke alle plate prøver med høye nivåer av VEGF indusert CTF, sannsynligvis på grunn av tilstedeværelsen av antiangiogenic molekyler. Omvendt, ikke alle av de stimulerende blodplater viste høye nivåer av VEGF, noe som indikerer at andre faktorer enn VEGF er involvert. Mens tester for å identifisere positive og negative regulatorer av angiogemesis er tungvint, til vår in vitro assay måle NPAA av kreftpasient på HUVEC CTF en enkel vei å funksjonell informasjon på nettet balanse mellom angiogene og anti-angiogene faktorer. Slik informasjon kan være av verdi ved prognose av kreft og i overvåking av tumorrespons til cancerterapi.
For ytterligere å evaluere klinisk verdi av NPAA, vi bestemt og sammenlignet den diagnostiske nytte av NPAA og blodplateavledet VEGF i kreft og friske kontrollgrupper. NPAA nivåer preget lungekreftpasienter fra normale individer svært pålitelig. NPAA var en betydelig bedre prediktor for lungekreft enn plate avledet VEGF i denne studiepopulasjonen. Overlevelsesanalyse av lungekreftpasienter ble undersøkt i denne studie basert på nivåene av NPAA. I vår studie, overlevelsen av pasienter med høyt NPAA var betydelig lavere enn pasienter med lav NPAA. Av notatet, gjorde preoperative nivåer av blodplater avledet VEGF hos disse pasientene ikke korrelerer med dårlig resultat (data ikke vist) .For vi kjenner til, er dette den første rapporten om NPAA i NSCLC.
Det er flere mekanismer av hvor de forskjellige angiogenese-regulerende proteiner kan bli øket i blodplatene til kreftpasienter. Først blodplater kan direkte få en faktor fra svulsten via endocytose. For det andre, kan svulsten stimulere megakaryocytt å oppregulere syntesen av en angiogenese regulatorisk protein. Tredje, fordi blodplater inneholder mRNA og translasjonsforskning maskiner, blodplater kan også bli stimulert til å syntetisere en angiogenese regulatorisk protein [24].
I konklusjonen, resultatene av denne studien viste at mens NPAA, plate avledet VEGF og TSP- 1 nivåene var høyere hos NSCLC pasienter før operasjon enn hos friske kontroller, bare både NPAA og blodplater avledet VEGF nivåer viste en statistisk signifikant forskjell mellom de to gruppene. Den viste også at NPAA større enn medianen var assosiert med dårlig prognose. Selv om plate avledet TSP-1 nivå synes ikke å være en markør for NSCLC, kan NPAA være mer av verdi enn plate avledet VEGF i den diagnostiske og prognose av ikke-småcellet lungekreft.
