Abstract
PRR11 er en potensiell kandidat onkogen som har vært innblandet i patogenesen av lungekreft, men rollen PRR11 i magekreft er foreløpig uklart. I denne studien undersøkte vi hvilken rolle PRR11 i magekreft ved å evaluere sitt uttrykk status i prøver fra en kohort av 216 pasienter med magekreft. PRR11 ble funnet å være overuttrykt i 107 (49,5%) pasienter ved immunohistokjemi av microarray som genereres ved hjelp av pasientprøvene. Videre ble PRR11 overekspresjon funnet å korrelere signifikant med clinicopathologic funksjoner som tumorinvasjon, tumor differensiering, og sykdom scenen. Overlevelsesanalyse av kullet viste at PRR11 er en uavhengig prognostisk faktor for magekreftpasienter. PRR11 ble stabilt stilnet i en gastrisk karsinom cellelinje ved hjelp av en shRNA basert tilnærming, og behandlede celler viste nedsatt cellulær proliferasjon og kolonidannelse in vitro og cellevekst in vivo, companied ved redusert ekspresjon av CTHRC1 og økt ekspresjon av LXN, proteiner involvert i tumorprogresjon. Evaluering av menneskelige magekreft prøvene viste at PRR11 uttrykk var også assosiert med økt CTHRC1 og redusert LXN uttrykk. Disse dataene indikerer at PRR11 kan bli mye aktivert i human magekreft og er konsistent med hypotesen om at PRR11 fungerer som et onkogen i utvikling og progresjon av magekreft
Citation. Song Z, Liu W, Xiao Y Zhang M, Luo Y 1, Yuan W, et al. (2015) PRR11 Er en prognostisk markør og potensial Oncogene hos pasienter med magekreft. PLoS ONE 10 (8): e0128943. doi: 10,1371 /journal.pone.0128943
Redaktør: Keping Xie, The University of Texas MD Anderson Cancer Center, UNITED STATES
mottatt: 13 januar 2015; Godkjent: 01.05.2015; Publisert: 07.08.2015
Copyright: © 2015 Song et al. Dette er en åpen tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Data Tilgjengelighet: All relevant data er i avisen og dens saksdokumenter filer
finansiering:.. forfatterne har ingen støtte eller finansiering for å rapportere
konkurrerende interesser:. forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
Magekreft kreft~~POS=HEADCOMP (GC) er den fjerde vanligste kreftformen i verden med en estimert forekomst på en million nye tilfeller i 2008, sto for 8% av nye krefttilfeller. Dødeligheten i forbindelse med GC er også svimlende, med 0,73 millioner dødsfall sto for 10% av totale kreftrelaterte dødsfall anslått for 2008. Av notatet, ca 70% av nye GC saker og GC-relaterte dødsfall forekommer i utviklingsland [1] . Selv om det har vært viktige medisinske fremskritt i diagnose og behandling av GC i løpet av de siste tiårene, forblir denne sykdommen den nest hyppigste årsak til kreft-relaterte mortalitet i verden, delvis på grunn av det faktum at det vanligvis detektert i pasienter med sent stadium sykdommen, abrogere vellykket kurativ kirurgi for mange pasienter [1, 2].
Mens forekomsten av GC prisene er vesentlig redusert i Nord-Amerika og i de fleste Nord- og Vest-Europa, er sykdommen fortsatt utbredt i Øst-Europa , Russland, Sentral-og Sør-Amerika, og Øst-Asia [3]. Foreløpig er det flere nye vev-baserte prognostiske og terapeutiske markører for magekreft. Disse innbefatter human epidermal vekstfaktor-reseptor-2 (HER2) [4, 5], vaskulær endotelial vekstfaktor reseptor 2 (VEGFR-2) [6], excision reparasjon kryss-komplementering gruppe 1 (ERCC1) [7], B-celle- lymfom-2 (Bcl-2) og Ki-67 [8]. Men de fleste av disse markørene er ikke rutinemessig ble brukt i klinisk praksis, fordi de ikke nøyaktig og effektivt forutsi utfallet eller terapeutisk effektivitet. Det er for tiden en stor klinisk etterspørsel etter nye molekylære markører som kan forbedre deteksjon, diagnose, og prognostication av magekreft og eliminere behovet for kostbare og ineffektive endoskopiske screeningmetoder. I 2013 ble prolin-rik protein 11 (PRR11) identifisert som en ny gen og funksjonelt karakterisert ved Ji Ying et al. som oppdaget at PRR11 har en viktig rolle i både cellesyklusprogresjon og tumorigenesis. Dette protein, på grunn av dets onkogene rolle, er blitt angitt som en mulig ny mål i diagnose og behandling av human lungekreft. Gjennom å regulere viktige gener som er involvert i cellesyklus og tumorigenesis deltar PRR11 i initiering og progresjon av lungekreft [9] og epitelial til mesenchymale overgang i brystkreft [10].
Men i dag, kunnskap når det gjelder rollen til PRR11 i mage kreft har ikke tidligere blitt rapportert. I denne studien evaluerte vi den PRR11 ekspresjonsstatus i en kohort av 216 pasienter med GC og analyseres forholdet mellom PRR11 ekspresjon og clinicopathological parametre for å bestemme hvorvidt PRR11 kan forutsi GC pasient prognose. I tillegg stanse av PRR11 i flere gastrisk carcinom cellelinjer inhiberte cellulær proliferasjon rater, kreftcellemigrering i cellekolonidannelse, og tumorvekst in vivo-eksperiment. Disse funnene er viktige fordi de er i samsvar med tidligere hypoteser som PRR11 kan være en viktig onkogen faktor i en rekke av kreft.
Metoder
Cohort utvalg og vev oppkjøpet
kohorten besto av 216 pasienter med GC som fikk kirurgiske reseksjoner ved Changhai Hospital i Shanghai, Folkerepublikken Kina, fra 2001 til 2005. pasienter oppfølging ble mottatt i kliniske rapporter frem til mars 2010, og hver pasienter ble bekreftet å ha tilstrekkelig mengde av GC butikken for å konstruere en vev microarray (TMA) blant de pasientinformasjon samlet var kjennetegn som alder, kjønn, tumorstørrelse, T scenen, N scenen, M scenen, og tumor differensiering (tabell 1). Alle vevsprøver ble oppnådd etter pasienter gitt skriftlig informert samtykke. Den eksperimentell design ble godkjent av Changhai Hospital Institutional Review Board før studien.
TMA og Immunohistochemistry og poeng
Tissue microarrays ble konstruert på en måte som tidligere [11]. Kort, H E-fargede objektglass fra alle pasienter ble gjennomgått og identifisert av to anatomiske patologer og representative tumor inneholder deler ble pre-merket i parafinblokker. Tissue sylindere med en diameter på 1,5 mm ble stanset ut av de merkede områder i hver blokk og innlemmet i en mottager parafinblokk. §§ 4-mikrometer tykke ble plassert på lysbilder belagt med 3-aminopropyltrietoksysilan. Parafinsnitt ble deparaffinized i xylen og rehydrert ved bruk av avtagende konsentrasjoner av etanol (100%, 95% og 85%, 5 min hver). Antigen-gjenfinning ble oppnådd ved mikrobølgebestråling i 3 minutter i buffer pH 6,0 sitronsyre og ble avkjølt ved romtemperatur i 120 min. Endogen peroksidaseaktivitet ble blokkert ved inkubering av lysbildene i 3% H2O2 /fosfat-bufret saltvann, og ikke-spesifikke bindingsseter ble blokkert ved hjelp av geiteserum. Primære antistoffer ble fortynnet som følger: anti-PRR11 (1: 100; HPA023923, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), anti-LXN (Latexin) (1: 100; GT39981-16, Sigma-Aldrich); anti-CTHRC1 (1: 100; 11165-1G12, Sigma-Aldrich). En IHC farging S-P kit (KIT-9710; MAIXIN biologi Corporation, Fuzhou, Kina) ble brukt til å visualisere antistoffbinding på lysbildene. Kontra ble utført med hematoksylin. IHC farging av PRR11, LXN, og CTHRC1 i disse prøvene ble evaluert med et Olympus CX31 mikroskop (Olympus, Center Valley, PA). Svulster som viste 10% farging for PRR11 ble ansett som å ha positive uttrykk status
Cellelinjer og kulturforhold
Protein uttrykket ble oppdaget ved hjelp av de fem GC cellelinjer SGC7901, MKN45, MKN28, HGC27, og MGC803, som ble kjøpt fra Cell Bank, Chinese Academy of Sciences. GC-cellelinjer ble opprettholdt i Dulbeccos modifiserte Eagles medium (DMEM) (Hi-klon) pluss 10% FBS ved 37 ° C med 5% CO2.
knockdown av PRR11 ved lentiviral vektor-loaded shRNA i GC-celler
Pakking av lentiviral partikkel ble utført på følgende måte. I korthet, lentivirus ekspresjonsplasmid inneholdende små forstyrrelser RNA (5′-ACGCAGGCCUUAAGGAGAATT-3 «) som målretter PRR11 ble konstruert ved GENECHEM Corporation (Shanghai, Kina) og anvendt for å infisere GC cellene i nærvær av 6 ug /ml polybrene. Infiserte mage kreftceller ble valgt for å bruke puromycin, og knockdown av PRR11 ble bekreftet av immunoblotting cellelysatene med anti-PRR11 antistoff.
Celleproliferering analyse og kolonidannelse analysen
Celler med stably- transfekterte PRR11-shRNA (PRR11-KO) eller tom vektor (kontroll) ble sådd ut i 96-brønners plater i en tetthet på 5000 celler per brønn. CCK8 assays (Dojindo Kumamoto, Japan) ble utført som et mål for proliferasjon, som ble beregnet som forholdet mellom absorbansen ved 48 timer, sammenlignet med det i 24 h.
kolonidannelse analyser ble utført på en lignende måte. PRR11-KO og kontrollcellene ble utsådd i 6-brønners plater i triplikat ved en tetthet på 500 celler per brønn. To uker etter inkubering ble koloniene fiksert med metanol /aceton (1: 1), farget med krystallfiolett og tellet. Kolonier med mindre enn 50 celler per brønn ble vurdert negativt for kolonidannelse.
Western blot
Totalt protein ble fremstilt fra lysater av SGC7901, MKN45, MKN28, HGC27, og MGC28 mage carcinom cellelinjer . Western blots ble utført på standard måte ved hjelp av en geit polyklonalt antistoff mot humant PRR11 (fortynning 1: 1000), LXN (fortynning 1: 1000), CTHRC1 (fortynning 1: 1000), og et pepperrotperoksidase-konjugert anti-geite- IgG-antistoff fortynnet 1: 10000 som det sekundære antistoff. Uttrykk for ß-aktin ble evaluert for å normalisere målinger av protein uttrykk. Proteinene ble visualisert ved hjelp av Amersham forbedret chemiluminescence system i henhold til produsentens instruksjoner med bilde J programvare.
Real-Time Kvantitativ Revers transkripsjon (QRT) -PCR analysen
Real-time kvantitativ PCR-reaksjon ble utført ved anvendelse SYBR1 Premiks Eks TaqTM sett (Takara, Kyoto, Japan) i henhold til produsentens instruksjoner og konvensjonelle PCR-analyser ble utført som tidligere beskrevet [12]. GAPDH ble anvendt som en indre standard. PCR-syklus-protokoll benyttet de følgende parametere: 95 grader i 1 minutt, 40 sykluser med 15 sek ved 95 graders og 31 sek ved 60 grader. Fold-uttrykket ble beregnet ved hjelp av ΔCt metoden. Reaksjoner og analyse ble utført ved anvendelse av ABI PRISM 7300 PCR og deteksjonssystem (Applied Biosystems, Carlsbad, CA). Primere som brukes er som følger: PRR11: fremover: 5’CGT ATC TGC CAC CGA GAA CTT-3 «, omvendt: 5’GAG ATG GTC TTC AGT GCT TCC T-3′; GAPDH: fremover: 5»-TGA CTT CAA CAG CGA CAC CCA-3 «, omvendt. 5’CAC CCT GTT GCT GTA GCC AAA-3
Dyremodeller
Subkutan svulst xenograft modellene ble utført for å evaluere in vivo-funksjonen endring av PRR11-knockdown i SGC-7901 cellelinje. PRR11-KO SGC-7901 celler og kontroller (1 x 106 celler i 0,1 ml PBS) ble injisert subkutant i den venstre flanken av fire uker gamle Balb /c nakne mus (Animal Center of the Second Military Medical University) ( n = 5). Tumor diameter ble målt hver tredje dag. To uker etter implantering, ble alle dyr avlivet. Tumorene ble oppsamlet og tumorvolum (mm3) ble beregnet som V = 0,52 (lengde x bredde x dybde). Dette dyreforsøk ble godkjent av dyreetikk komité i Second Military Medical University.
Statistical Analysis
statistiske analysene ble utført ved hjelp av SPSS 13.0 programvare (SPSS, Chicago, IL, USA). Sammenhengene mellom uttrykket av PRR11 og clinicopathological karakteristikker ble evaluert med chi-squared distribusjoner. GC pasienter ble stratifisert etter uttrykket status for PRR11, LXN, og CTHRC1, og overlevelsesanalyse ble utført ved hjelp av Kaplan-Meier-kurver. Univariate og multivariate analysene var basert på en Cox proporsjonal hazard regresjonsmodell. Variablene som viser signifikans (p 0,05) ved univariat analyse ble vedtatt da ble utført multivariate Cox analyse. Kvantitative variabler ble analysert ved anvendelse av Students t-test. Eksperimentelle data ble presentert som gjennomsnittet av hver betingelse ± S.D. og p 0,05 ble ansett som statistisk signifikant.
Resultater
PRR11 uttrykk status korrelerer med viktige clinicopathological karakteristikker av magekreft
uttrykk for PRR11 ble evaluert ved immunhistokjemi i en kohort av 216 pasienter med gastrisk karsinom. Lav intensitet av cytoplasmatisk PRR11 immunfarging var synlig i de normale epitelceller (figur 1A). Høy intensitet PRR11 farging ble observert spesielt i magekreftceller, og den fargeintensitet var variabel mellom pasienter (fig 1B og 1C). Av disse tumorprøver, 107 ut av 216 (49,5%) hadde positiv PRR11 uttrykk og 109 tilfeller viste PRR11 negative uttrykk (Fig 1 C). Western blotting og RT-PCR-analyse bekreftet videre at PRR11 protein og mRNA ble økt i tumorprøver sammenlignet med i noncancerous vev (fig 1D og 1E). Komplimenter disse resultatene, ble et relativt høyt nivå av PRR11 protein uttrykk nivå også påvist i fem GC cellelinjer, inkludert MKN45, MKN28, SGC7901, HGC27, og MGC803 (S1 figur).
(A, A1) Normal mageslimhinnen viste svak farging av PRR11; (B, B1) Positiv farging av PRR11 i magekreft; (C, C1) Negativ farging av PRR11 i magekreft. A1, B1, C1 blir utvidelse av vev fra A, henholdsvis B, C,. Opprinnelig forstørrelse av A, B, C: 40 x; Original forstørrelse av A1, B1, C1: 200 ×. (D) Western blotting avslørte øket ekspresjon av PRR11 i tumorprøver (T) sammenlignet med det i noncancerous vev (N); (E) mRNA-nivåer av PRR11 i magekreft vev (T) og normale vev (N).
PRR11 uttrykk korrelerte signifikant med antall clinicopathological parametere som T stadium, grad av tumor differensiering, og TNM trinn (tabell 1). PRR11 ekspresjon ble ikke funnet å være assosiert med alder, kjønn, tumorstørrelsen og N stadium. Disse resultatene tyder på at høy PRR11 protein uttrykk er assosiert med en aggressiv fenotype av magekreft.
PRR11 svulst uttrykket er assosiert med redusert overlevelse hos pasienter med ventrikkelkreft
Blant de 216 pasientene i studien, 122 døde i løpet av oppfølgingsperioden med en median total overlevelse på 51,5 måneder. Det betyr overlevelse for pasienter med negativ PRR11 protein uttrykk var 74,5 måneder, mens bety overlevelse for pasienter med positiv PRR11 protein uttrykk ble 46,4 måneder (figur 2A).
(A) Survival var signifikant lengre hos pasienter med svulst mangler uttrykk for PRR11 (OS, 76,6 måned) kontra de med positiv PRR11 uttrykk status (OS, 46,6 måneden; P 0,001). (B) En undergruppe analyse av trinn I
P
0,001). (C) En undergruppe analyse av stadium III
P
= 0,036)
Univariat COX regresjon analyser viste at svulststørrelsen, tumorstadium, lymfeknuter positivitet, TNM stadium, tumor differensiering og PRR11 ekspresjon ble signifikant korrelert med en redusert total overlevelse (tabell 2). Multivariat analyse bekreftet at tumorstørrelse, tumor differensiering og PRR11 uttrykk var uavhengig prognostisk prediktor for total overlevelse av magekreftpasienter (HR = 0,663; 95% CI: 0,406 til 0,961 for tumorstørrelse, HR = 0,545; 95% CI: 0,372 til 0,798 for PRR11, HR = 0,548; 95% CI: 0,376 til 0,801 for svulst differensiering)
Pasientene ble delt inn i to grupper, de med TNM stadium i /II og de stadium III /IV, og. effekten av PRR11 status på overlevelse varighet ble vurdert. Dette undergruppeanalyse viste at resultatene av pasienter med PRR11 overekspresjon var verre enn de uten PRR11 overekspresjon enten i stadium I /II (figur 2B) eller i stadium III /IV (Fig 2C).
PRR11 uttrykk er knyttet med økt celledeling og cellekolonidannelse in vitro og tumorvekst in vivo i SGC7901 mage carcinoma celler
PRR11 ble stabilt brakt til taushet i en SGC-7901 cellelinje ved hjelp lentiviral vektor-lastet PRR11 shRNA. Knockdown av PRR11 (PRR11-KO) ble bekreftet via Western blot-analyse, og effekten av PRR11-KO på cellulær proliferasjon og kolonidannelse ble evaluert. Betydelig uttømming av PRR11 i de transfekterte celler, ble observert (figur 3A), og nedregulering av PRR11 var forbundet med en dramatisk reduksjon i både celleformering (figur 3B) og cellekolonidannelse (figur 3C) i denne cellelinje. Ikke overraskende, PRR11 nedregulering fører til veksthemming av magekreft cellelinjer in vivo (Fig 3D)
(A) Western blot analyse av PRR11 uttrykk ved 48 timer etter transfeksjon av PRR11-shRNA i SGC7901 celler; (B, C) stanse av PRR11 hemmer celleproliferasjon (B) og kolonidannende evne in vitro (C). (D) stanse av PRR11 hemmet svulst vokse in vivo. * P 0,05, ** P 0,01, ** P 0,01 ansett statistisk signifikant sammenlignet med kontrollen
knockdown av PRR11 fører til nedregulering av CTHRC1 og oppregulering av LXN
Vi utførte Western blot analyse for å undersøke om det uttrykk for CTHRC1 og LXN ble endret i PRR11-KO SGC-7901 magekreftceller. Resultatene viste at CTHRC1 ble nedregulert og LXN ble oppregulert i PRR11-KO-celler sammenlignet med kontroller (figur 4A). Videre co-uttrykk analyse ble utført i GC viste prøver tatt ved hjelp av immunhistokjemi (fig 4B). IHC data bekreftet at CTHRC1 uttrykk var positivt assosiert med PRR11 uttrykk (r = 0,299, p 0,001). Og LXN uttrykk var negativt assosiert med PRR11 uttrykk (r = -0,188, p = 0,005) i GC vev (fig 4C)
(A) Western blot analyse som viser at CTHRC1 er nedregulert og LXN er oppregulert i PRR11-KO SGC07901 celler. (B) Uttrykk for PRR11, CTHRC1 og LXN i pasientenes-avledet magekreft vevsprøver. (C) Korrelasjon analyse av PRR11, CTHRC1 og LXN uttrykk. Disse resultater ble tolket som viser at CTHRC1 uttrykket er positivt forbundet med PRR11 uttrykk (r = 0,299, p 0,001)., Og at LXN uttrykket er negativt forbundet med PRR11 uttrykk (r = -0,188, p = 0,005) i GC vev
Diskusjoner
PRR11 er et relativt nytt protein molekyl som kan spille en rolle i kreft patogenesen, og det er foreløpig bare noen få artikler som beskriver rollen PRR11 i lungekreft [13]. Mens PRR11 ble angivelig oppregulert i lungekreft, mulige mekanismer for økt uttrykk har ikke blitt rapportert, og dessuten er mye arbeid er nødvendig for å vurdere den kliniske betydningen av PRR11. I et forsøk på å undersøke dette spørsmålet, ble studien gjennomført for å karakterisere PRR11 uttrykk i magekreft sammen med noen tilknytning clinicopathologic egenskaper.
Vår studie fant at både PRR11 mRNA og protein er oppregulert i GC vev sammenlignet med normal slimhinne; et funn som støtter tanken om en pro-onkogen rolle PRR11 i magekreft. Videre positivt uttrykk for PRR11 var signifikant assosiert med en aggressiv Caner fenotype, inkludert svulster med økte mengder av invasjonen, økt svulst dedifferentiation, og avansert stadium av sykdommen. I tillegg er det etablert en gastrisk karsinom cellelinje i hvilken PRR11 blir stabilt slått ned. Denne cellelinje demonstrerer redusert cellulær proliferasjon og vesentlig redusert kolonidannelse i våre analyser. Samlet utgjør disse resultatene tyder på at PRR11 protein uttrykk kan spille en avgjørende rolle i utvikling og progresjon av GC kreft.
TNM stadieinndeling er allment akseptert system for klassifisering i guiding kreftbehandling og forutsi prognose. Ikke overraskende pasienter i vår studie med resections på et tidligere tidspunkt hadde en lengre overlevelse intervall enn de med senere stadium sykdommen. Nylig har biologiske markører toppet interesse av klinikere som en måte å vurdere /forutsi terapeutiske effekten og pasientens utfall. Noen eksempler på slike markører som er i bruk er HER2, mTOR, og ANXA1 [14-16]. Vår studie støtter en potensiell prognostisk rolle for måling PRR11 i magekreft som Kaplan-Meier analyser viste at positive uttrykk nivå PRR11 var assosiert med dårlig prognose i både tidlig TNM stadium (TNM I /II) og i slutten av TNM stadium (TNM III /IV). Ytterligere multivariate analyser viste at PRR11 overekspresjon var en selvstendig overlevelse prediktor for GC pasienter etter reseksjon av primære svulster. Dette er den første rapporten som PRR11 uttrykket er assosiert med dårlig postoperativ utfallet i GC pasienter.
De mulige mekanismene bak PRR11-fremme kreftutvikling er ikke fullt ut undersøkt. Den tidligere studie av PRR11 ble gjennomført og tolket i innstillingen av lungekreft og viste at PRR11-knockdown dysregulerte uttrykket av flere viktige genet i kritiske stier som cellesyklus, tumorigenesis og metastase (f.eks CCNA1, RRM1, MAP4K4 og EPB41L3) [ ,,,0],9].
I en proprietær microarray analyse (S1 og S2 Tables) [17], fant vi at to nye kandidatgener (CTHRC1 og LXN) ble bemerkelsesverdig endret etter PRR11-banket ned. CTHRC1 ble først rapportert som et nytt sekretorisk protein i skadede og syke arterier, og det er antatt at CTHRC1 kan virke til å inhibere kollagen ekspresjon og fremmer cellemigrering, som begge er essensielle funksjoner for en invasiv kreft [18]. Videre studier viste at CTHRC1 protein er sterkt uttrykt i metastatiske lesjoner sammenlignet med ikke-metastatisk svulster, og hemming av CTHRC1 uttrykk resulterer i redusert celle migrasjon in vitro [19]. Nylig ble det vist thatCTHRC1 proteinekspresjon er nært forbundet med utvikling av leverkreft [20, 21], bukspyttkjertelkreft [22], magekreft [23], og tykktarmskreft [24]. LXN er en forholdsvis ny gen som har blitt rapportert å bli nedregulert i human GC. Kanonisk, er LXN tenkt å stille ut tumorsupressorproteinene-lignende funksjoner [25]. Det har også rapportert at LXN har tumor undertrykkende egenskaper i malignt melanom [26] og leverkreft [27]. Vi viste også at overekspresjon av CTHRC1 var positivt korrelert med tumorinvasjon, regional lymfeknutemetastase, sykdomsutvikling, og pasientenes utfall (S2 figur), mens LXN overekspresjon var negativt assosiert med lymfeknutemetastase, tumor differensiering, og sykdom stadium (S3 Table), noe som indikerer onkogen rolle CTHRC1 og undertrykkende rolle LXN i GC. Interessant, vår studie viste at stanse PRR11 forårsaket redusert uttrykk for CTHRC1 og økt uttrykk av LXN, noe som indikerer en cross-talk mellom PRR11 og CTHRC1 og LXN. Dessuten var det en signifikant sammenheng mellom PRR11 uttrykk og CTHRC1 og LXN uttrykk i GC prøver. Disse resultatene antydet at PRR11 kan fremme kreft progresjon gjennom interaksjon med CTHRC1 og LXN. Imidlertid må den eksakte mekanismen som skal undersøkes nærmere.
I konklusjonen, er PRR11 ofte uttrykt i menneskelig GC, og dens uttrykk er assosiert med dårlig overlevelse av GC pasienter. Ytterligere in vitro og in vivo studier viste at knockdown av PRR11 inhiberer GC celleproliferasjon, kolonidannende evne, og tumorvekst i et gastrisk karsinom cellelinje. Påfølgende korrelasjonsanalyse viste at PRR11 uttrykk er også positivt korrelert med CTHRC1 uttrykk og negativt korrelert med LNX uttrykk, og gir hint av en mulig mekanisme for onkogene funksjon PRR11. Den aktuelle studien gir grunnlag for fremtidige studier av disse nye prognostiske markører som kan vise seg å være nyttige mål i gjenkjenning, sortering og behandling av GC pasienter.
Hjelpemiddel Informasjon
S1 Fig. Expression of PRR11 protein i magekreft cellelinjer avslørt av Western blotting-analyse
doi:. 10,1371 /journal.pone.0128943.s001 plakater (PPTX)
S2 Fig.
Kaplan-Meier-kurver av overlevelse varighet hos pasienter med magekreft i henhold til uttrykk av CTHRC1 og LXN (A) Pasienter med CTHRC1 overekspresjon hadde en kortere overlevelse varighet enn de uten CTHRC1 uttrykk (53 måneder vs. 69 måneder; P = 0,019). (B) Ingen signifikant forskjell i total overlevelse mellom pasienter med LXN uttrykk og de uten LXN uttrykk (68 måneder kontra 55 måneder; P = 0,093)
doi: 10,1371 /journal.pone.0128943.s002 product: (. PPTX)
S1 Table. Nedregulert gener i PRR11-KO celler sammenlignet med WT celler i QBC939 celler
doi:. 10,1371 /journal.pone.0128943.s003 plakater (docx)
S2 Table. Oppregulert gener i PRR11-KO celler sammenlignet med WT celler i QBC939 celler
doi:. 10,1371 /journal.pone.0128943.s004 plakater (docx)
S3 Table. Sammenheng mellom CTHRC1 og LXN uttrykk og clinicopathological parametere av magekreft
doi: 10,1371 /journal.pone.0128943.s005 plakater (DOC)
Takk
Vi takket Dr. Ying Chen, Changhai Hospital, Shanghai, Kina, som ber gi magekreft prøver.
