Abstract
Formål
En av de viktigste funksjonen til stromal avledet faktor -1 (SDF-1) og dets reseptorer, er å regulere prosessen for metastasedannelse. Målet med vår studie var å undersøke sammenhengen mellom SDF-1, CXCR4 og CXCR7 proteinnivåer målt ved immunhistokjemi med clinicopathological funksjoner og overlevelse av endometrial kreftpasienter.
Materialer og metoder
92 pasienter i alderen 37-84 (gjennomsnitt 65,1 ± 9,5) ble tatt med til vår studie mellom januar 2000 og desember 2007. Etter at diagnosen livmorkreft, alle kvinner gjennomgikk total abdominal hysterektomi med bilateral salpingoophorectomy og bekken lymfeknute disseksjon. Hos alle pasienter klinisk stadium (i henhold til FIGO klassifisering), histologisk grad, myometriets invasjon, lymfeknute og fjernmetastaser ble determined.Furthermore, overlevelsestiden ble vurdert. Immunhistokjemiske analyser av SDF-1, ble CXCR4 og CXCR7 utført på arkivformalinfiksert parafin vevssnitt
Resultater
Statistisk signifikante sammenhenger (p 0,01). Ble rapportert mellom SDF-1 og klinisk stadium av sykdommen, lymfeknutemetastaser, fjernmetastaser, dyp myometriets invasjon (≥50%), cervical engasjement, involvering av øyets omgivelser. Statistisk signifikant korrelasjon (p 0,01) ble funnet mellom SDF-1-ekspresjonen og risikoen for tilbakefall. Høyere SDF-1 uttrykk var assosiert med ahigher risiko for tilbakefall (p = 0,0001). Resultatene av CXCR4and CXCR7 uttrykk viste ingen signifikante forskjeller (p 0,05) mellom proteiner uttrykk i de primære kreftceller og clinicopathological funksjoner. Videre analyser Kaplan-Meier viste en trinnvis svekkelse av kreft total overlevelse (OS) med økende SDF-1 uttrykk.
Konklusjon
Den viktige rollen SDF-1 som en prediktor for negativ clinicopathological kjennetegn atumor antyder at uttrykket av dette stromal faktor bør inkluderes i panelet av tilbehør patomorfologiske tester og kan være nyttig i å etablere en mer nøyaktig prognose i livmorkreftpasienter
Citation. Walentowicz-Sadlecka M, Sadlecki P, Bodnar M, Marszalek A, Walentowicz P, Sokup A, et al. (2014) stromal avledet Factor-1 (SDF-1) og dets reseptorer CXCR4 og CXCR7 i livmorkreft pasienter. PLoS ONE 9 (1): e84629. doi: 10,1371 /journal.pone.0084629
Redaktør: Kaustubh Datta, University of Nebraska Medical Center, USA
mottatt: 28 september 2013; Godkjent: 25 november 2013; Publisert: 09.01.2014
Copyright: © 2014 Walentowicz-Sadlecka et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Forfatterne har ingen støtte eller finansiering for å rapportere
konkurrerende interesser:.. forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
Forhold som kreftceller er i stand til å sette i gang lokale eller fjern spreadare svært viktig, men fortsatt ukjent klinisk problem. Tumor vekst og evne til å gi metastaser er forbundet med den kontinuerlige interaksjonen mellom kreftceller og vertens mikromiljøet. Svulsten mikromiljøet spiller en viktig rolle i hvert trinn i kreftutvikling. Det er kontinuerlig samspill mellom kreftceller og ekstracellulære matriks (ECM), med fibroblaster, endotelceller og inflammatoriske celler [1]. Flere studier har indikert at svulsten mikromiljøet reagerer på faktorer avledet fra kreftceller, samt vice versa, og i konsekvens har en innvirkning på neoplastisk transformasjon [2]. Mikromiljøet kan være involvert i å fremme mutagenese av tumorceller, så vel som i modifikasjon av tumoren stroma rommet. Neoplastictransformationleads til phenotypicmodifications i stromalcells [3], [4].
Endometrialcancer (EF) er den sjette mest commonlydiagnosedcanceramongwomenglobally, med ca 288 000 newcases og 50327 deathsoccurringworldwideeachyear.However, blant alle kreft i kvinnelige reproduktive system, livmor kreft ble den mest vanlig med kvinner i Europa og USA [5]. 5125 nye ECcases ble diagnostisert i 2010 i Polen, hva gjør livmorkreft den tredje vanligste kreftformen, etter brystkreft og lungekreft i den polske befolkningen [Polish National CancerRegister].
Den naturlige løpet av livmorkreft er treg og sykdommen er karakterisert ved en ganske god prognose. En tidlig inntreden av kliniske symptomer gjør det mulig å stille diagnosen på et tidlig stadium av sykdommen. Den 5-årige total overlevelse (OS) frekvensen av kvinner med livmorkreft er mer enn 80% for alle trinn og mer enn 90% for stadium I [6]. Livmorkreft er vellykket behandlet med kirurgi og /eller strålebehandling [7]. Men for pasienter med avansert eller residiverende sykdom, eller for de som ønsker å bevare sin fertilitet, behandlingstilbud arelimited. Men det er en gruppe pasienter med dårlig prognose, som vil dra nytte av mer aggressiv behandling. Denne gruppen trenger adjuvant kjemoterapi eller strålebehandling. Forskningen av prediktive faktorer for tilbakefall eller død er av stor betydning.
Anerkjent dårlige prognostiske faktorer for livmorkreft er avanserte FIGO stadium, et ikke-endometrioid histologisk subtype, høy klasse (G3), dyp invasjon av myometrium ( 50%), tilstedeværelse av lymfeknutemetastaser, cervical engasjement og lymphovascular plass invasjon (Wire) [6]. Alle risikofaktorene nevnt ovenfor er identifisert etter omfattende kirurgisk inngrep.
Selv om vår kunnskap om kreftcellene har bedret seg mye gjennom de siste årene, de nøyaktige mekanismene som styrer prosessen med metastaser formasjon fortsatt ukjent. Kjemokiner tilhører en super av liten (7-16 kDa), proinflammatoriske cytokiner, som opprinnelig ble preget av sine egenskaper til å indusere migrering av leukocytter [8]. De ble påvist å spille en viktig rolle i mange biologiske prosesser som er forbundet med inflammasjon, såsom embryogenese, angiogenese, aterosklerose og kreft. Det er kjent at det molekylære nivå av kreft forårsaket av svekket inflammatorisk response.Tumor vekst og dens evne til å gi metastaser er forbundet med den kontinuerlige interaksjonen mellom kreftceller og vertens stroma [4].
stromal avledet faktor -1 (SDF-1), også kjent som CXCL 12 spiller en avgjørende rolle i inflammasjon og hematopoesis ved å fungere som en kjemoattraktant av celler som er involvert i inflammasjon og stamceller migrasjon [9] .SDF-1-kodende gen befinner seg på kromosom 10. .q.11.1 [10] .SDF-1 har to store isoformer, α og β. Begge er avledet fra et enkelt gen, på grunn av alternativ spleising. SDF-1 α er den dominerende isoform, utskilt av stromale benmargsceller og endotelceller og finnes i nesten alle organer [10]. Kjemokinet SDF-1 er et viktig α-kjemokin som binder seg først og fremst til kognatreseptoren CXCR4 og således regulere handel med normale og maligne celler [11]. Det ble antatt at CXCR4 var det bare en reseptor for SDF-1, men senere studier har demonstrert at SDF-1 binder seg også til en annen reseptor kalt CXCR7 [12], [13]. CXCR4 og CXCR7 mediere tumormetastase i flere typer kreft (for eksempel bryst, lunge cancer, lymfom) [14].
En av de viktigste functionsof SDF-1 og dets reseptorer, er å regulere dannelsen av metastaser. Kjemokinreseptorer kan potensielt lette tumorspredning ved hver av de viktigste trinnene i metastase, herunder vedheftningen av tumorceller til endothelium, ekstravasasjon fra blodkar, metastatisk kolonisering, angiogenese, spredning, og den flykte fra vertens respons gjennom aktivering av bestemte reaksjonsveier , slik som ERK /MAPK, PI-3K /AKT /mTOR, eller JAK /STAT og andre. Den voksende bevis foreligger som chemokiner, inkludert SDF-1, lette kommunikasjonen mellom kreftceller og ikke-neoplastiske celler i svulsten mikromiljøet, fremme infiltrasjon, og aktivering av tumor-tilknyttede makrofager og nøytrofile i stroma [15].
Fordi SDF-1 /CXCR4 /CXCR7 akse spiller en avgjørende rolle i kreftutvikling, fremdrift, metastaser og tilbakefall, hypoteser vi at SDF-1 og dets reseptorer CXCR4 og CXCR7 kan også ha sammenheng med utfallet av behandlingen av endometrial cancerpatients. Enhver faktor som gir oss mer kunnskap om svulsten aggressivitet ville være avgjørende for omfanget av treatment.It ville være av spesiell interesse å vite de konkrete molekylære mekanismene som er ansvarlig for utviklingen av lymfeknute og fjernmetastaser, og lokal spredning av svulst. Når vi har blitt mer kjent med de molekylære mekanismene bak denne prosessen, kan vi være i stand til å understreke nødvendigheten av målet regimer, som kan endre eller hemme disse prosessene. Hensikten med vår studie var å undersøke sammenhengen mellom SDF-1, CXCR4 og CXCR7 proteinnivåer målt ved immunhistokjemi med theclinicopathological funksjoner og overlevelse av livmorkreftpasienter.
Materialer og metoder
Undersøkelsen ble godkjent av forfatternes institusjons gjennomgang board.The Etisk Komité på LudwikRydygier Collegium Medicum, Nicolaus Copernicus University of Torun godkjent denne studien protokollen (beslutning Ingen KB 332/2007). Alle deltakerne har gitt theinformed, skriftlig samtykke. Pasientenes individuelle karakteristika ble anonymt tatt for å dokumentere prosessen. Etikkomiteer godkjenne dette samtykke prosedyren.
Pasienter
Ninety to pasienter med livmorkreft, i alderen 37-84 (gjennomsnitt 65,1 ± 9,5) ble tatt med til vår studie mellom januar 2000 og desember 2007. Etter diagnostisering av livmorkreft basert på prøver hentet fra utskrapning, alle pasienter gjennomgikk total abdominal hysterektomi med bilateral salpingoophorectomy og bekken lymfeknute disseksjon utført av erfarne gynekologiske onkologer ved Institutt for Oncologic gynekologi av LudwikRydygier Collegium Medicum i Bydgoszcz, Nicolaus Copernicus University.
den kliniske fasen ble vurdert basert på evalueringen av kirurgiske prøver utført av to uavhengige erfarne patologer i henhold til International Federation of gynekologi og fødselshjelp (FIGO) 2009 system.
studie~~POS=TRUNC gruppen~~POS=HEADCOMP inngår 27 pasienter med stadium IA, 18 med stadium IB, 14 med II, 10 kvinner med stadium IIIA, 17 med IIIC og 6 med IV. Histologisk grad ble vurdert i henhold til WHO klassifisering. Histologisk klasse 1 (G1) ble notert i 7 pasienter, G2 i 66 og G3 på 19 kvinner. Deep myometriets invasjon ( 50%) ble observert hos 36 pasienter, lymfeknutemetastaser hos 23 kvinner, fjernmetastaser i 6, cervical engasjement i 38 og adnexal engasjement hos 11 pasienter. Baseline karakteristikker av studiegruppen er vedlagt i tabell 1.
Alle pasientene ble delt inn i tre risikofaktorer grupper: lav risiko – FIGO IA, G1 eller G2, Bokhman type I (endometrioid); middels risiko – IA G3, IB G1 eller G2, Bokhman type I (endometrioid); høy risiko – alle pasienter i type II (non-endometrioid), IB G3, FIGO II og høyere. Pasienter fra den lave risikogruppen mottok ingen ytterligere behandling etter operasjonen, kvinner fra mellomrisikogruppen fikk brachyterapi (VBT) 5 uker etter operasjonen, og pasienter fra høyrisikogruppen gjennomgikk teleradiotherapy og VBT. Adjuvant kjemoterapi ble gitt til ti pasienter med ikke-endometrioid histopatologiske subtype (kjemoterapi besto av carboplatin og paclitaxel).
I alle tilfeller, total overlevelse ble bestemt (i måneder). Blant alle tilfeller bare pasienten påvist død relatert til kreft ble analysert. Oppfølgingstiden var 60-80 måneder.
Metoder
Studiene ble utført på arkivformalinfiksert parafin vevssnitt avledet fra Institutt for klinisk Pathomorphology Collegium Medicum Nicolaus Copernicus University.
for å etablere immunhistokjemiske prosedyrer, ble en rekke positive kontroll reaksjoner utført. De positive kontroller ble utført på en modell vev, for hvilken den nærværet av de analyserte antigener ble angitt i referansekilder (Human Protein Atlas), så vel som i produserte antistoffer dataarket (tabell 2). De negative kontrollreaksjoner ble utført på flere undersøkelser så vel som på kontroll vevssnitt under riktig immunhistokjemisk farging, med anvendelse av det primære antistoff med en oppløsning av fortynnet 1% BSA (bovint serumalbumin) i PBS (fosfatbufret saltvann).
De immunhistokjemiske studier ble utført i henhold til standard-protokollen med kanin polyclonalantibodies mot: SDF-1 (ab9797, Abcam, Cambridge, UK), CXCR4 (ab7199, Abcam), CXCR7 (ab38089, Abcam). Farging av SDF-1α og CXCR7 ble utført automatisk i Dako AurostainerLink48, og CXCR4 farging ble utført manually.Epitopes ble avslørt ved hjelp av epitop Retrieval Solution pH-9 i PT-Link (Dako, Glostrup, Danmark). Den endogen peroksidase-aktivitet ble blokkert ved hjelp av peroksidase Block (Dako) i 10 minutter, og den ikke-spesifikke antistoff-binding ble blokkert med 5% BSA (bovint albumin) i PBS (fosfatbufret saltvann). Vevssnitt ble inkubert med primært antistoff mot SDF-1 og CXCR7 i 30 minutter. i RT (romtemperatur) og natten ved 4 ° C med anti-CXCR4. Et antigen-antistoff-komplekset ble oppdaget ved hjelp EnVisionFLEX-HRP (Dako), og localizedaccording tothe nærvær Ofa brownreaction productusing DAB (3-3’diaminobenzidine) som achromogen.
Evaluering av protein uttrykk.
studiene ble gjort på 20x opprinnelige målet forstørrelse for hver av de studerte antibodiesusing tent microscopeECLIPSEE800 (Nikon Instruments Europa, Amsterdam, Nederland).
protein~~POS=TRUNC immunhistokjemisk uttrykk ble beregnet ved hjelp av morfometriske prinsipper basert på theRemmele-Stegner skala [16 ] [IRS: 0-12], i henhold til forholdet mellom intensiteten av proteinet uttrykket (skala (0-3), 0 – negativ, 1 – lav farging, 2 – moderat farging, 3 – sterk farging) og den positivt tall uttrykt av celler eller vev område (skala (0-4), 0, negativ, 1, 10% positive område, 2, 10-50% positive område, 3, 50-80% positive område, 4, ≥80% positive området).
de patologer som ble evaluerer immunhistokjemisk uttrykk undersøkt antigener jobbet uavhengig av hverandre, og de har blitt blindet for pasientens kliniske så vel som andre data.
Statistisk analyse.
Alle statistiske analyser ble utført ved hjelp av thePQStat versjon 1.4.4.126.The statistisk signifikans av SDF-1, CXCR4 og CXCR7 korrelasjon i forhold til ble vurdert ved hjelp theKruskal-Wallis og U Mann-Whitney test clinicopathologicalfeatures. P-verdi 0,05 ble ansett som statistisk signifikant
Den generelle overlevelse ble undersøkt for signifikans ved hjelp av log-rank test og Kaplan-Meier-kurver.. Videre ble univariate og multivariate Cox regresjoner utført.
Resultater
Vi har evaluert uttrykk for SDF-1, CXCR4 og CXCR7 i primærtumor cells.the uttrykk for SDF-1 ble funnet i 90% tilfeller, uttrykket ofCXCR4 og CXCR7was funnet i 100% av alle tilfeller av livmorkreft (figur 1) .Analysis av uttrykk evalueres i tilstøtende normalt vev viste meget lav ekspresjon (IRS = 1) av CXCR4 i normal endometrium. Videre var det ingen uttrykk for SDF-1 og CXCR7 i utvalgte områder av normal endometrium (IRS = 0) (Figur 1).
(A) Hovedmål forstørrelse 10 ×. (B) Hovedmål forstørrelse 20 × .
resultatene for hver faktor i henhold til pasientenes histopatologiske funksjoner resultatene er vist i tabell 3-5.
Statistisk signifikant korrelasjon ( p 0,01) wasreported mellom SDF-1expresion og klinisk stadium av sykdommen. Høyere uttrykk ble observert gjennom økende Figo etapper. Men det var ingen statistisk signifikante sammenhenger mellom histologisk grad (G) og Bokhman subtype av livmorkreft (tabell 3).
Ifølge spredning til lymfeknuter høyere SDF-1 uttrykk ble oppnådd i primærtumor av pasienter med lymfeknutemetastaser sammenlignet med pasienter som ikke lymfeknutemetastase (p = 0,0005). SDF-1 uttrykk var signifikant høyere hos pasienter med lymfeknutemetastaser (N1), fjernmetastaser (M1), dyp myometriets invasjon (≥50%), cervical engasjement og involvering av øyets omgivelser (tabell 3).
statistisk signifikant korrelasjon (p 0,01) ble funnet mellom SDF-1-ekspresjonen og risikoen for tilbakefall. Høyere SDF-1 uttrykk var assosiert med høyere risiko for tilbakefall (p = 0,0001) (Table3)
Resultatene fra CXCR4and CXCR7 expressionsdidn’t avsløre noen signifikant sammenheng (p 0,05). Mellom proteinsexpression i primærtumorceller og theFIGOclinical scenen, gradering, samt Bokhmansubtype og lymfeknuter og fjernmetastaser (tabell 4, 5) .Selv så, statistiske analyser viste ingen significantcorrelationbetween CXCR4 og CXCR7expressions og dyp myometriets invasjon (≥50% ), cervical og /eller adnexalinfiltration, andthe risiko for tilbakefall (tabell 4, 5).
Videre analyser på Kaplan-Meier viste en trinnvis svekkelse av kreft total overlevelse (OS) med økende SDF-1 uttrykk. The Log-rank test viste statistisk signifikant korrelasjon mellom SDF-1 uttrykk og overlevelse, i gruppen av pasienter med høyt uttrykk for SDF-1shorter overlevelse ble rapportert (p = 0,00099) (figur 2)
associationbetweenSDF-en expressionand survivalrate ble alsoperformed ifølge theunivariable og multivariat Cox regresjonsanalyse (inkludert variabler som: avansert FIGO stadium, høy klasse (G2 + G3), ikke-endometrioid subtype (Bokhman II), lymfeknutemetastaser og dyp myometriets infiltrasjon (≥50%) (Tabell 6).
SDF-1 uttrykk, avansert FIGO stadium, lymfeknute infiltrasjon og dyp myometriets invasjonen ble påvist statistisk viktige prognostiske faktorer i univariat analyse for total overlevelse. grade og ikke-endometrioid subtype var ikke viktig i den univariate analysen (tabell 6). i multivariat analyse bare SDF-1 uttrykk og dyp myometriets invasjonen ble påvist betinget viktig (tabell 7).
Diskusjoner
Svulst består av celler der endringer er reflektert av svekket vekst kontrollmekanismer. Kreftcellene finnes i et bestemt mikromiljøet, som utøver en betydelig effekt på de ulike stadier av svulst utvikling. Det er mange vekselvirkninger, ikke bare mellom kreftcellene, men også mellom den ekstracellulære matriks (ECM) og fibroblaster, endotelceller, og betennelsesceller.
Man må huske på at neoplasme representerer en systemisk tilstand, som er forbundet med lidelser som involverer en rekke komponenter i tumor og dens stroma, som interaksjoner utgjør en forutsetning for prosessen med invasjon og dannelse av metastaser [17].
resultatene av mange studier bekreftet den viktige rollen av stromal faktor SDF- 1 i tumorutvikling. Øket ekspresjon av SDF-1 i fibroblaster, og spesielt ekspresjon av CXCR4 reseptor på membraner i kreftceller, spesielt i de hypoxemic områdene av tumoren, innebærer veksten, mobilitet, og invasivitet av malignitet. Kreft assosiert fibroblaster (CAF) ble påvist å stimulere utviklingen av kreft gjennom utgivelsen av SDF-1. I sin tur, bevirker SDF-1 rekruttering av progenitor endotelceller, stimulerer angiogenese. Tumormetastaser inn i områder som er rike på SDF-1 er forbundet med ekspresjon av CXCR4 på overflaten av kreftceller og deres opptak til SDF-1-rike områder langs en konsentrasjonsgradient. Dette gjenspeiles av invasjonen av kreftceller til området av metastasering og resulterende ødeleggelse av omkringliggende vev. I tillegg er ekspresjonen av CXCR4 modulert av stroma, som også er forbundet med progresjon av tumoren [17].
Ekspresjon av SDF-1 signalveier, modulert av dens spesifikke reseptorer, spesielt CXCR4 var godt etablert [18]. Aktivering av CXCR4occurs i flere signalveier, og consequentlye fører til forskjellige biologisk celle responser [19]. Det ble klart påvist at CXCR4 er målet for negativ regulering tilkoblet medG-proteinsignalisering som er i stand til å regulere ekspresjonen CXCR4 på flere måter. To veier ble identifisert. Først G-proteinsignalisering avhengig koblet til transkripsjon og ekspresjon gjennom PI3K-AKT-NF-κβ, MEK1 /2 og ERK1 /2 signaltransduksjon. For det andre G-protein uavhengige signalveien via JAK /STAT investigated.Numerous studier indikerer rollen til reseptoren CXCR7 i SDF-1-aktivering, som G-protein uavhengig reaksjonsvei [20]. Men theresults av nevnte rapportene partlystill fortsatt uklart. Lee et al.evaluatedthe migrasjon av melanocytter mot SDF-1. Forfatterne etterforsket som SDF-1 induserer migrasjon av melanocytter gjennom CXCR7, og ikke CXCR4. Forfatterne har også fastslått at SDF-1 /CXCR7 kompleks fremmer aktivering av β-arrestin 2-avhengige signalveien. Derfor er det svært viktig å søke etter aktuelle SDF-1signalling trasé gjennom CXCR (både CXCR4 og CXCR7) i ulike kreftformer som ville suggestnew terapeutiske strategier.
Mekanismene ved hjelp av hvilke SDF-1 /CXCR4 /CXCR7 pathway forbedrer utviklingen av kreft forblir uforklart. En rekke studier som involverer tumormodeller, særlig eggstokk-kreft, ble utført for å answerthis spørsmål. Det ble bekreftet at SDF-1 stimulerer angiogenese, for det meste gjennom å forbedre syntesen av VEGF. Kanskje, SDF-1 fremmer overlevelse av celler gjennom aktivering av signaleringskaskader PI3 og MAP-kinaser, uten at cellesyklusprogresjon. SDF-1 modulerer apoptose via BCL-2 /BAD, og MEK, S6, og PI3K kinase veier. Videre kan genene whichexpressions er forbundet med øket overlevelse av celler aktiveres ved eksponering for SDF-1. Derfor, SDF-1 kan fremme overlevelsen av celler ved hjelp av to mekanismer: post-translasjonell inaktivering av apoptose, og økt transkripsjon av gener assosiert med celleoverlevelse. Mer aggressiv fenotype av SDF-1-positive tumorer kan være assosiert med økt syntese av metalloproteinaser og økt transkripsjon av gener som er ansvarlige for aktivering av metabolske veier fremme invasivitet og dannelse av metastaser [21], [22], [23].
resultatene fra sparsom publiserte studier som omhandler rollen som SDF-1 /CXCR4 /CXCR7 sti i livmorkreft er motstridende og mangelfulle. Målet med denne studien var å analysere uttrykk for SDF-1, CXCR4, og CXCR7 proteiner i primærlivmorkreft.
I denne studien uttrykk for SDF-1 ble dokumentert i 90% av pasientene, mens alle av dem viste tilstedeværelse av CXCR4 og CXCR7 reseptorer. Vi har bevist at uttrykket av SDF-1 økte proporsjonalt med FIGO stadium (p 0,001). I kontrast, gjorde vi ikke observere statistisk signifikant correlationsbetweenSDF-1 uttrykk og graden av histologiske differensiering, eller ulike typer svulst i henhold til Bokhman klassifisering. Pasienter med spredning til lymfeknuter, fjernmetastaser, infiltrering av cervical stroma og myometrium infiltrasjon av over 50% av dens tykkelse viste vesentlig høyere nivåer av SDF-1-ekspresjon. Ekspresjonen av SDF-1 viste seg å være en signifikant prediktor for tilstedeværelsen av disse negative prognostiske faktorer i endometrial kreftpasienter.
I motsetning til dette ble ingen signifikant sammenheng mellom dokumentert ekspresjonen av CXCR4 og CXCR7 proteiner og clinicopathological karakteristika livmorkreft; Tilsvarende disse parameterne var ikke vist seg å spille rollen som negative prognostiske faktorer av denne malignitet.
rekke publiserte rapporter om den prognostiske verdi av komponentene i SDF-1 /CXCR4 /CXCR7 bane i endometriale kreftpasienter er sparsom. Videre resultatene av disse studiene er mangelfulle og noen ganger motstridende.
Mizokami et al. [24] analysert relationshipbetween graden av histologicaldifferentiation, animportantprognosticfactor av endometrialcancer, og uttrykk for SDF-1 protein og CXCR4 i 41 patientsaffected med thismalignancy. Forfatterne viste en invers korrelasjon mellom graden av histologisk differensiering og ekspresjon av både SDF-1 og CXCR4. De stromale uttrykk for SDF-1 og CXCR4 viste seg ikke å være assosiert med tumoren karakter.
Kodama et al. hevdet at det er en sammenheng mellom CXCR4 ekspresjon og den kliniske fase av tumor [25]. Forfatterne analyserte gruppe 55 endometrial kreftpasienter og viste at høyere kliniske stadier av denne malignitet er forbundet med lavere nivåer av CXCR4 uttrykk. De observerte redusert uttrykk for CXCR4 hos pasienter med høyere Figo etapper, dyp myometriets invasjon, lymfeknute og adnexal metastaser, og mer aggressiv fenotype av svulsten. Videre, i likhet med vår studie, forfatterne avdekket at CXCR4 ikke utgjør en selvstendig prediktor for overlevelse.
Resultatene fra disse to studiene var contradictive til funnene dokumentert hos pasienter med andre kreftformer (bryst, prostata og lungekreft ), og ikke bekrefte foreningen av SDF-1 /CXCR4 signalveien med en mer aggressiv fenotype av svulst, som uttrykk for proteiner involvert i denne veien viste lavere i svulster preget av dårligere prognose [15].
en annen undersøkelse av rollen til SDF-1 /CXCR4-signalreaksjonsveien ble utført ved Tsukamoto et al. [26]. Disse forfatterne analysert sammenhengen mellom SDF-1 og CXCR4 uttrykk og svulsten potensial for myometriets invasjon. Dybden av myometrial infiltrering er en viktig faktor i prognostisk endometrial kreftpasienter, som den dype invasjon blir mer ofte assosiert med tilstedeværelse av fjernmetastaser og spredning til lymfeknuter. Forfatterne undersøkte fem linjer av endometrial kreft celler og materiale fra 34 pasienter med denne kreft [24]. Den gjennomsnittlige nivået på CXCR4 uttrykk var høyere hos pasienter der infiltrasjon oversteg 50% av myometriets tykkelse enn kvinner uten dyp myometriets invasjon. Eksperimenter med endometriekreft linjer avslørte at SDF-1 aktiverer PIK3 /Akt signalveien, som er nødvendig for prosesser av livmorkreft celle migrasjon. Denne studien var den første til å foreslå at SDF-1α /CXCR4 akse spiller en rolle i invasjonen av livmorkreft.
En annen studie, utført av Gelmini et al., Analyserte tilstedeværelse av mRNA og uttrykk for SDF -1, CXCR4, og CXCR7 proteiner i 41 pasienter operert på grunn av livmorkreft [27]. CXCR7 oppdaget nylig av Burns et al., Fremmer veksten og adhesjonen av mange kreftlinjer in vitro [13]. Gelmini et al. bestemmes nivåene av mRNA ved hjelp av RT-PCR, og analysert ekspresjon av proteiner ved anvendelse av en tre-element immunhistokjemisk skala. De observerte at tumoren nivået av CXCR4 mRNA var høyere og nivået av SDF-1-ekspresjon lavere enn i normalt vev. Videre CXCR4-positive cancerceller var i stand til å migrere mot høyere nivåer av SDF-1, som var forbundet med større invasivitet av tumoren og dannelsen av fjernmetastaser. Forfatterne viser at uttrykket av CXCR4 i høyt differensierte svulster (G1) ble nedsatt i forhold til dårlig differensierte de (G3). I motsetning til dette ble ingen signifikant correlationsassociated med graden av differensiering histologisk dokumentert i tilfelle av CXCR7 mRNA-nivåer. I likhet med vår studie, forfatterne ikke avsløre noen statistisk signifikant correlationsin uttrykk for CXCR4 og CXCR7 proteiner knyttet til de ulike histologiske graderinger av primærtumor [27].
En nylig publisert studie av den rollen SDF- 1 /CXCR4 akse i livmorkreft involverte 199 pasienter i hvem østrogen reseptor status ble undersøkt bortsett fra SDF-1 og CXCR4 uttrykk [28]. Forfatterne av denne studien ikke fant en signifikant sammenheng mellom østrogen reseptor status og uttrykk for SDF-1.
Dette tyder på at rollen som SDF-1 /CXCR4 /CXCR7 aksen i utviklingen av livmor kreft fortsatt uforklart. Forfatterne av de to første studiene nevnt ovenfor rapporterte en invers sammenheng mellom de uttrykk for proteiner som er involvert i SDF-1 /CXCR4 veien og graden av histologiske differensiering eller klinisk stadium av tumoren. I motsetning til dette, i henhold til forfatterne av de resterende studier, høyere ekspresjon av SDF-1 /CXCR4 akse-komponentene er forbundet med en dårligere prognose. Det bør bemerkes imidlertid at ingen av de nevnte studiene analyserte nøyaktig de samme sett av prognostiske faktorer. De studerte parametere inkludert svulst klasse og FIGO stadium, dybden av myometriets invasjon, eller involvering av livmorhalsen, adnexa, og lymfeknuter [24], [25], [26], [27]. Dernest, forfatterne av disse studiene brukt ulike klassifiseringssystemer protein uttrykk. I vår studie, ble uttrykket av antistoffer vurderes med Remmele-Stegner skala, med tanke på både andelen av antistoff-merkede celler og intensiteten av deres farging.
I vår studie, økt uttrykk av SDF-1 ble dokumentert hos pasienter med negative prognostiske faktorer av endometrial cancer, for eksempel en høy klinisk stadium, en spredning til lymfeknuter, en dyp myometrial invasjon, en infiltrasjon av cervix og adnexa, og tilstedeværelsen av fjernmetastaser. SDF-1 viste seg å være den viktigste prediktor for dårlig prognose i livmorkreftpasienter, og i likhet med andre ondartede sykdommer, økt ekspresjon av dette molekyl var assosiert med en mer aggressiv fenotype av tumoren. Videre provedstatistically vi betydelige forskjeller i 5-års overlevelse. Overlevelse av pasienter som viser høy ekspresjon av SDF-1 ( = 6) var betydelig kortere enn de med lav uttrykket ( = 4).
Zhang et al. viste at uttrykkene for SDF-1 og CXCR4 i prostata kreft var høyere enn i tilfellet med benign hyperplasi. Videre ble øket ekspresjon av SDF-1 forbundet med større invasivitet av tumoren og tilstedeværelsen av fjernmetastaser [29]. Også Kajiyama et al.
