Abstract
epidermal vekstfaktor reseptor (EGFR) mutasjoner er de sterkeste respons predictors til EGFR tyrosinkinasehemmere (TKI) terapi, men kunnskap om EGFR mutasjonsfrekvens på lunge adenokarsinom er fortsatt begrenset til retrospektive studier. PIONEER studie (NCT01185314) er en prospektiv molekylær epidemiologi studie i asiatiske pasienter med nylig diagnostisert avansert lunge adenokarsinom, med formål å prospektivt analysere EGFR mutasjonsstatus i IIIB /IV behandlingsnaive lunge adenokarsinomer i Asia. Vi rapporterer fastlands Kina undergruppe resultater. Kvalifiserte pasienter (≥20 år gamle, IIIB /IV adenokarsinom og tidligere ubehandlet) ble registrert i 17 sykehus i fastlands-Kina. EGFR ble testet for mutasjoner av forsterkning ildfast mutasjon system som bruker biopsiprøver. Demografiske og kliniske karakteristika ble samlet for subgruppeanalyser. Totalt 747 pasienter ble registrert. Vellykket EGFR mutasjonsanalyse ble utført i 741, med en samlet mutasjonsraten på 50,2%. EGFR aktive mutasjonsraten er 48,0% (med 1,3% av samlede aktive og resistensmutasjoner). Tobakksbruk ( 30 pack-års vs. 0-10 pack-året, OR 0,27, 95% KI: 0,17 til 0,42) og regionale lymfeknuter engasjement (N3 vs. N0, OR 0,47, 95% KI: 0,29 til 0,76 ) var uavhengige prediktorer av EGFR mutasjon i multivariat analyse. Men selv i vanlige røykere, EGFR mutasjonsfrekvens var 35,3%. EGFR mutasjonsfrekvensen var lik mellom ulike biopsi områder og teknikker. Den samlede EGFR mutasjonsfrekvensen til fastlandet undergruppe var 50,2%, uavhengig assosiert med intensiteten av tobakksbruk og regionale lymfeknuter engasjement. Den relativt høy frekvens av EGFR mutasjoner i fastlands-Kina undergruppe tyder på at noen innsats for å få vevsprøve for EGFR mutasjonstesting bør oppmuntres
Citation. Shi Y, Li J, Zhang S, Wang M, Yang S Li N, et al. (2015) Molekylær epidemiologi av EGFR mutasjoner i asiatiske pasienter med avansert ikke-småcellet lungekreft av Adenocarcinoma Histologi – Fastlands-Kina Delsett Analyse av PIONEER studien. PLoS ONE 10 (11): e0143515. doi: 10,1371 /journal.pone.0143515
Redaktør: Karl X. Chai, University of Central Florida, USA
mottatt: 16 april 2015; Godkjent: 05.11.2015; Publisert: 23.11.2015
Copyright: © 2015 Shi et al. Dette er en åpen tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Data Tilgjengelighet: All relevant data er i avisen og dens saksdokumenter filer
Finansiering:. Denne studien ble finansiert av Astrazeneca og delvis støttet av kinesiske National Major Project for New Drug Innovation (2008ZX09312, 2012ZX09303012-001) og forsknings Special Fund for offentlig velferd Industry of Health (200902002-1)
konkurrerende interesser:. forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
Lungekreft er den ledende årsak til kreft. relaterte dødsfall i verden [1]. Platinumbasert kjemoterapi forbli den viktigste behandlingen valg for avansert ikke-småcellet lungekreft (NSCLC) [2]. Men, epidermal vekstfaktor reseptor (EGFR) tyrosinkinasehemmere (TKI) terapi nylig oppnådd lovende suksesser i NSCLC pasienter som hadde EGFR aktive mutasjoner [3-5], signifikant øke pasientenes overlevelse [6,7].
derfor er det av stor betydning for å bestemme forekomsten av EGFR mutasjoner frekvens. Studier i ulike populasjoner identifisert noen undergrupper (adenokarsinom histologi, kvinner, aldri-røykere og østasiatisk etnisk opprinnelse) med høyere EGFR aktiv mutasjonsraten [8,9]. Imidlertid har flere retrospektive studier i resectable og avansert lunge adenokarsinom antydet at kjønn ikke var en faktor for EGFR mutasjon [10,11]. Derfor er det viktig å identifisere demografiske og kliniske egenskaper knyttet til EGFR mutasjoner, slik at identifisering av subpopulasjoner av pasienter med høy risiko for å huse EGFR mutasjon, og dermed gir onkologer å bestemme hvilke førstelinjebehandling kan tilby de mest fordeler.
De fleste studier vurderes EGFR mutasjonsstatus i en klinisk studie setting, eller retrospektivt basert på arkiv vevsprøver som kanskje ikke tilstrekkelig samsvar med virkelige praksis på en epidemiologisk synspunkt. Derfor er prospektive studier av EGFR mutasjonsstatus i kliniske settinger nødvendig.
En prospektiv epidemiologisk studie er gjennomført i Spania for å screene for EGFR mutasjoner i lungekreft [12], men ingen prospektive studier ble utført for asiatiske pasienter. PIONEER studie (NCT01185314) er en stor potensiell molekylær epidemiologi studie i asiatiske pasienter med nylig diagnostisert avansert lunge adenokarsinom, med formål å vurdere sin EGFR mutasjonsstatus [13]. Denne studien registrert totalt 1510 pasienter i 51 investigational områder i 7 asiatiske land /regioner (fastlands-Kina, Hong Kong, India, Filippinene, Taiwan, Thailand og Vietnam) for å undersøke EGFR mutasjonsfrekvens og å relatere disse mutasjonene med pasienters demografiske og kliniske karakteristika, samt med forskjellige vev prøvetakingsteknikker. I denne rapporten presenterer vi resultatene for undergruppe av pasienter fra fastlands-Kina.
Materiale og metode
Studiedesign og Pasienter
PIONEER studie (NCT01185314) er epidemiologisk, multisenter, åpen og ikke-komparativ studie av EGFR mutasjonsstatus hos pasienter med nylig diagnostisert avansert (stadium IIIb /IV) NSCLC
kriteriene var:. 1) ≥20 år gamle; 2) histologisk eller cytologisk bekreftet avansert lunge adenokarsinom (stadium IIIb /IV); og 3) behandlingsnaive. Pasientene ble registrert i 17 sykehus i fastlands-Kina.
Studien ble utført i henhold til Helsinkideklarasjonen og gode kliniske retningslinjer. Studien ble godkjent av etiske komiteer i alle studiesteder. Alle pasienter gitt et skriftlig informert samtykke til deltakelse i studien og bruk av tumorprøver (vev eller cytologi).
Datainnsamling
Demografiske data for pasienter ble samlet inn, blant annet kjønn, alder, og røykestatus. Sykdoms data inkludert datoen for første NSCLC diagnose, histologisk type AJCC scenen, lymfeknutestatus, og fjernmetastaser. Standardiserte tilfelle rapportskjemaer ble brukt til å registrere data i henhold til protokoll instruksjoner. Røyking ble målt ved hjelp av to måter. Først pasienter ble klassifisert i henhold til deres faktiske røykestatus (aldri røkt betyr at faget røkt ingen sigaretter i løpet av hele sin levetid, ex-røyker betyr at faget ikke lenger røyker, sporadisk røyker betyr at faget røyker, men ikke hver dag , og vanlig røyker betyr at faget røyker hver dag). For det andre var røyking pasienter klassifisert i henhold til deres tobakksforbruket, i pakke-år.
EGFR mutasjonsanalyse
tumorprøver ble hentet fra primære eller metastatiske lesjoner, og ble håndtert og lagret følgende laboratorier « kvalitetskontroll krav. Biopsi nettstedet og teknikk ble registrert. Cytologiske prøver ble akseptert bare når histologisk materiale var utilgjengelig. Etter svulst DNA-ekstraksjon, ble EGFR mutasjon analysert ved Laboratory of Medical Oncology, Cancer Hospital, Chinese Academy of Medical Sciences Peking Union Medical College; Beijing Key Laboratory of Clinical Study på Anticancer Molecular Målrettet narkotika ved en forsterkning ildfast mutasjon system (ARMS) -baserte EGFR mutasjonsdeteksjon kit (EGFR RGQ PCR kit, Qiagen, Crawley, UK). Dette settet tillater påvisning av 29 mutasjoner i EGFR-genet.
Statistiske analyser
Statistisk analyse ble utført av statistikk og programmering avdeling av Astra Zeneca Japan bruker SAS 8.2 (SAS Institute, Cary, NY, USA). Per protokollanalyse (PPS) sett ble brukt for alle statistiske analyser. Mutasjoner prevalens og tilsvarende 95% konfidensintervall (95% KI) ble beregnet ved hjelp av Wilson poengsum metoden. Assosiasjoner mellom mutasjoner og demografiske og kliniske karakteristika ble analysert ved χ2 tester eller Fishers eksakte tester, som passer. Egenskaper knyttet til mutasjoner med en P-verdi 0,05 ble inkludert i en multivariat logistisk modell. Alle analysene var tosidig og en P-verdi 0,05 ble betraktet som signifikant. I multivariat analyse, en P-verdi 0,01 ble betraktet som signifikant
Resultater
baseline karakteristikker av studiepopulasjonen
Fra september 2010 til juli 2011, totalt. av 747 pasienter (747/1510, 49,5% av den totale studiepopulasjonen) fra 17 sykehus i fastlands-Kina ble registrert for analyse (PPS). Blant dem, 397 (53,1%) var menn og 350 (46,9%) var kvinner. Gjennomsnittsalderen ved registrering var 57,4 ± 11,4 år, i området fra 20 til 83 år. Alle pasientene var kinesiske befolkningen. Det totale antall aldri-røykerne var 421 (56,4%), eks-røykere var 136 (18,2%), til-røykere var 19 (2,5%) og vanlig røyker var 171 (22,9%). Blant pasienter med positiv røyking historie (n = 324) var gjennomsnittlig pakke-år var 32,9 ± 24,0. For 97,2% (n = 726) av pasientene, tidsintervallet mellom opprinnelig diagnose og registrering i studien var 6 måneder. På opprinnelige diagnosen, ble fjernmetastaser funnet i 615 (82,3%) pasienter, og 132 (17,7%) av pasientene led av en lokalavansert sykdom. Det vanligste stedet for biopsi var lunge (549 pasienter), lokale lymfeknuter (77 pasienter) og fjerne lymfeknuter (47 pasienter). Den vanligste metoden for biopsi var bildestyrt biopsi (222/747, 29,7%), bronkoskopi biopsi (180/747, 24,1%) og operasjonssåret biopsi (95/747, 12,7%). I flertallet av pasientene ble vevsprøve tatt fra den primære svulsten (n = 541, 72,4%) og ble løst i 10% nøytral bufret formalin (n = 639, 85,5%).
Faktorer assosiert med EGFR mutasjon
i PPS befolkningen, EGFR mutasjonsanalyse var vellykket i 741 pasienter (99,2%). Blant de 741 pasientene som ble evaluert, 372 (50,2%, 95% KI: 46,6 til 53,8) var EGFR mutasjon-positive (M +), og 369 (49,8%, 95% KI: 46,2 til 53,4) var EGFR mutasjon-negative (M- ). I univariate analyser, som forventet, det kvinnelige kjønn var signifikant assosiert med høyere EGFR mutasjonsfrekvens (60,6% for kvinner vs. 41,0% for menn, P 0,001), og røykestatus var assosiert med M +, med en høyere forekomst av EGFR M + hos pasienter som aldri hadde røykt (59,6%, P 0,001) (fig 1), eller de som røykte 0-10 stk-år (58,4%, P 0,001) (tabell 1). Som røyking og pack-årene var kovariater ble bare pakken år variabel inkludert i multivariat analyse. Stage klassifisering (53,0% for stadium IV vs 38,6% for stadium IIIb, P = 0,002) og regional spredning til lymfeknuter (62,1% for N0, 52,6% for N1-2 og 43,8% for N3, P = 0,009) var også faktorer assosiert med EGFR mutasjonsfrekvensen i univariate analyser.
Age, tid fra opprinnelige diagnosen, ondartet pleural effusjon, og primærtumor var ikke forbundet med M + status. Tumor karakter syntes å være signifikant assosiert med EGFR mutasjonsfrekvens; imidlertid, ble denne variabelen dokumentert for et lite antall pasienter, hovedsakelig på grunn av den begrensede mengden av vev er tilgjengelig for diagnose, og er derfor ikke tatt med i den multivariate analysen. Fordelingen av EGFR M + etter biopsi nettstedet, type og teknikk var relativt lik (S1 tabell). Pasienter med lymfeknuter biopsi viste ikke lavere EGFR mutasjonsfrekvens sammenlignet med andre biopsi nettsteder (47,2% vs 50,8%,
P
= 0,4591).
Multivariatanalyse identifisert pakke-år og regional spredning til lymfeknuter som uavhengige prediktorer av EGFR M +. Pasienter røyke 10-30 (OR 0,54, 95% KI: 0,37 til 0,78) eller mer enn 30 (OR 0,27, 95% KI: 0,17 til 0,42) pakke-år hadde mindre sjanse til båtplass en EGFR mutasjon enn de røyker mindre enn 10 pakke-år. Svulster med regionale lymfeknuter engasjement (stadium N1-2, OR 0,71, 95% KI: 0,44 til 1,14, og N3, OR 0,47, 95% KI: 0,29 til 0,76) var også mindre sannsynlighet for å huse EGFR mutasjoner enn pasienter uten lymfeknuter engasjement (N0) (tabell 2).
Typer av EGFR mutasjon
De vanligste mutasjonene var ekson 19 sletting og L858R punktmutasjon, observert i 182 (24,6%) og 169 (22,8%) pasienter. Ut av 372 EGFR M + pasienter, 346 pasienter (46,7%) hadde EGFR aktive mutasjoner alene, 16 pasienter (2,2%) hadde resistente mutasjoner alene, og 10 pasienter (1,3%) hadde både aktive og resistente EGFR mutasjoner (tabell 3). Pack-år og regionale lymfeknuter engasjement ble også identifisert som uavhengige faktorer signifikant assosiert med EGFR aktive mutasjoner ved univariat og multivariat analyse (S2 Bord og S3 Table).
I tillegg ni pasienter gitt både histologi og cytologiprøvene, hvorav en pasient hadde mutasjon resultater som ikke samsvarer.
Diskusjoner
EGFR mutasjoner er for tiden den sterkeste respons prediktor til EGFR-TKI behandling [14]. I tillegg, med etablering av førstelinjebehandling ved bruk av EGFR-TKI [6,7], kunnskap om EGFR mutasjonsstatus hos behandlingsnaive pasienter avansert NSCLC, spesielt lunge adenokarsinom, er av stor betydning for klinisk beslutningsstøtte. Tidligere ble generelt utledet fra retrospektive studier og kliniske studier, noe som kanskje ikke reflekterer det virkelige liv. PIONEER er en stor epidemiologisk studie prospektivt undersøke EGFR mutasjonsstatus i asiatiske behandlingsnaive avanserte NSCLC pasienter [13], og vi rapporterer resultatene fra fastlands-Kina undergruppe.
I vår studie (PPS befolkningen), den samlet EGFR mutasjonsfrekvens var 50,2%, i likhet med tidligere studier i Øst-Asia pasienter [6,15], men mye høyere enn i kaukasiske lunge adenokarsinom pasienter [12,16]. I tillegg til en annen etnisitet distribusjon, er EGFR mutasjoner også foreslått å være mer vanlig i adenokarsinom, kvinner og aldri-røykere [8,9]. Rekhtman et al. rapporterte at «ren» plateepitelkreft lungekreft, verifisert av immunhistokjemi som Np63 (+) /TTF-en (-), manglet EGFR mutasjoner [17], og dermed forlater lunge adenokarsinom som den viktigste kandidat for EGFR screening i NSCLC. I den foreliggende prospektive studien, fant vi også at effekten av kjønn var ikke signifikant etter justering for røykestatus, og ikke har noen interaksjon med røyking (data ikke vist).
røykestatus ble identifisert som et selvstendig prediktor for EGFR mutasjon i den foreliggende undersøkelse. Vi har observert at EGFR mutasjon forekomsten avtok med økende bruken av tobakk, som er lik en retrospektiv av Li et al. i resectable NSCLC [18]. Når røyking ble klassifisert i aldri røkt, ex-røyker, sporadisk røyker, og vanlig røyker i henhold til deres røyking frekvens, det var et stort gap mellom aldri røkt og stadig røkt pasienter. Men selv i vanlige røykere, EGFR mutasjon ble likevel funnet i 35,3% av pasientene, noe som indikerer nødvendigheten av EGFR mutasjonstesting i denne pasientgruppen.
Et annet interessant funn i denne studien var at EGFR mutasjonsfrekvens uavhengig redusert med involvering av regional lymfeknute, og pasienter med N3 sykdom hadde minst sjanse for å huse en EGFR mutasjon. Dette funn understøttes av en studie av Na et al. i en koreansk befolkning (OR 0,2, 95% KI: 0,0 til 0,7, p = 0,02) [19]. Det er liten sjanse for at denne observasjonen kan skyldes tumorprøvevolum fordi den ARMS tilnærmingen har en velkjent deteksjonssensitivitet, og EGFR M + frekvens i henhold til biopsi områder var sammenlignbare. Den plausibel forklaring fortsatt garanterer ytterligere undersøkelser.
EGFR T790M mutasjon er forbundet med kortere progresjonsfri overlevelse med EGFR-TKI behandling hos pasienter med NSCLC [20,21]. Men utbredelsen av EGFR T790M mutasjon varieres ved befolkningen og teknikk. Su et al. oppdaget T790M i 2,8% av kinesiske pasienter med TKI-naive NSCLCs [20], mens Rosell et al., ved hjelp av en Taqman assay, rapporterte at 35% av EGFR M + (L858R eller 19 del) NSCLC hadde samtidig T790M mutasjon i kaukasiere [21 ]. I denne prospektive kohort av behandlingsnaive avansert lunge adenokarsinom ble T790M mutasjonen funnet i bare 0,4% av våre kinesiske pasienter ved hjelp av ARMS analysen, sto for 0,8% av EGFR M + pasienter, som alle ble observert samtidig med EGFR L858R mutasjon . Denne frekvensen av den T790M-mutasjonen er mye lavere enn frekvensen observert av Su et al. (2,8%) [20]. Dette kan være på grunn av den mindre prøvestørrelse i deres studie, og ved den annen påvisningsmetoden. EGFR exon 20 innskuddsmutasjon ble også foreslått å indusere en dårlig respons til EGFR-TKI [22], og er rapportert i ca. 2% av NSCLC eller lunge adenokarsinom [23-25], som er lik vår rapport (2,0%) .
Denne studien har noen begrensninger. Faktisk, til tross for alle våre anstrengelser, var vi ikke i stand til å rekruttere alle lungekreftpasienter, hovedsakelig fordi noen av dem ikke samtykke, noe som kan introdusere en skjevhet. Videre tobakk var selvrapportert, og kanskje lider av en viss underrapportering.
Konklusjon
I konklusjonen, fra PIONEER prospektive studien, var den samlede EGFR mutasjonsfrekvensen til fastlands-Kina undergruppe var 50,2%. EGFR aktive mutasjonsraten er 48,0% (med 1,3% av samlede aktive og resistensmutasjoner). Den relativt høy frekvens av EGFR mutasjon i denne populasjonen og sammenlign EGFR M + raten blant ulike biopsi områder og teknikker tyder på at noen innsats for å få vevsprøver for EGFR mutasjonstesting bør oppmuntres.
Hjelpemiddel Informasjon
S1 Bord. Samlet analyse av mutasjon test EGFR etter prøvetype (PPS)
doi:. 10,1371 /journal.pone.0143515.s001 plakater (DOC)
S2 Table. Subgruppe analyse for EGFR aktive mutasjoner alene (PPS)
doi:. 10,1371 /journal.pone.0143515.s002 plakater (DOC)
S3 Table. Logistic modell analyse for EGFR aktive mutasjoner alene (PPS)
doi:. 10,1371 /journal.pone.0143515.s003 plakater (DOC)
Takk
Forfatterne takker pasientene og etterforskere for deres deltakelse i denne studien. Forfatterne takker PIONEER studien PI, Pan-Chyr Yang for tillatelse til separat rapportere fastlandet kinesisk resultater.
