Abstract
Mål
Styrking immunologiske reaksjoner, inkludert human leukocytt antigen (HLA) klasse I ekspresjon på tumorceller og anerkjennelse og eliminering av tumorceller ved tumor-spesifikke cytotoksiske T-lymfocytt (CTL), er ansett som et nytt konsept for radioterapi. Denne studien undersøkte pasienter som gjennomgikk preoperativ hyperthermo-kjemoradioterapi (HCRT) for lokalavansert endetarmskreft for å vurdere sammenhengen mellom HLA klasse I uttrykk og klinisk utfall.
Materialer og metoder
Sytti-åtte pasienter med lokalavansert endetarms adenokarsinom som fikk preoperativ HCRT ble registrert. Median alder for pasientene var 64 år (fra 33-85 år) og 4, 18, og 56 pasienter hadde klinisk stadium I, II og III sykdom, henholdsvis. Formalinfiksert og parafininnstøpte vev ble skåret ut før og etter HCRT ble utsatt for immunhistokjemisk analyse med et anti-HLA-klasse I-A, B, C antistoff. HLA klasse I uttrykket ble gradert etter tumorcelle positivitet.
Resultater
I pre-HCRT, antall eksemplarer kategorisert som klasse 0 og 1 var 19 (24%) og 58 (74 %), henholdsvis. Bare en pasient (1%) viste klasse 2 uttrykk. Imidlertid ble 6 (8%), 27 (35%), 7 (9%), og 12 (15%) etter HCRT prøvene gradert som grad 0, 1, 2, og 3, respektivt. Det var en betydelig økning i HLA klasse I uttrykk i post-HCRT prøver (p 0,01). Men hverken pre- eller post-HCRT HLA klasse I uttrykket påvirket total overlevelse og fjernmetastaser overlevelse i klinisk stadium III pasienter. Univariat analyse viste at Post-HCRT HLA klasse I uttrykket viste en signifikant negativ sammenheng med LC (p 0,05). Likevel multivariat analyse viste at det ikke var noen sammenheng mellom HLA klasse I uttrykk og klinisk utfall.
Konklusjon
HCRT økt HLA klasse I uttrykk i endetarmskreftpasienter. Men multivariat analyse klarte ikke å vise noen sammenheng mellom nivået av HLA klasse I uttrykk og prognose
Citation. Sato H, Suzuki Y, Ide M, Katoh T, Noda S-e, Ando K, et al. (2014) HLA klasse I uttrykk og sin Endring av Preoperativ Hyperthermo-kjemoradioterapi hos pasienter med endetarmskreft. PLoS ONE ni (9): e108122. doi: 10,1371 /journal.pone.0108122
Redaktør: Torbjörn Ramqvist, Karolinska Institutet, Sverige
mottatt: 27 mars 2014; Godkjent: 20 august 2014; Publisert: 26.09.2014
Copyright: © 2014 Sato et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Data Tilgjengelighet:. Den forfatterne bekrefter at alle data som underbygger funnene er fullt tilgjengelig uten restriksjoner. Dataene er tilgjengelige fra Gunma Universitetet Graduate School of Medicine Institutional Data Access /etiske komité for forskere som oppfyller kriteriene for å få tilgang til konfidensielle data
Finansiering:.. Forfatterne har ingen støtte eller finansiering for å rapportere
konkurrerende interesser. forfatterne har erklært at noen konkurrerende interesser eksistere
Innledning
Samle bevis støtter betydningen av cellemediert immunitet for å kontrollere tumorvekst og eliminere fjernmetastaser [1] . Human leukocytt antigen (HLA) klasse I-molekyler og tumor antigen-spesifikke cytotoksiske T-lymfocytter (CTL) spiller viktige roller i disse svarene. HLA klasse I-molekyler som uttrykkes av tumorceller til stede tumor-avledede antigener til CTL, som deretter dreper målcellene [2]. Mange studier rapporterer en signifikant korrelasjon mellom klinisk prognose og uttrykk for HLA klasse I av esophageal, ikke-småcellet lungekreft, hode og nakke plateepitelkreft, og blærekreft [3] – [8]. Videre er de fleste av disse rapportene konkluderer med at pasienter med lav HLA klasse I-uttrykkende kreftformer har en dårligere prognose enn de med høy-uttrykkende kreftformer.
Radioterapi er en viktig form for anti-kreft-terapi, og blir brukt for å behandle mange typer av kreft, uavhengig av klinisk stadium. Det er generelt akseptert at bestrålingen induserer celledød via apoptose og /eller nekrose av skade (enten direkte eller indirekte) DNA. Men nyere studier tyder på at stråleindusert immunogen celledød er et konsept forskjellig fra den mer «tradisjonelle» stråling-indusert celledød [9] – [11]. Konseptet underliggende strålingsinduserte immunogen celledød er basert på induksjon av anti-tumor immun CTL-responser av radioterapi med modifikasjon av immunogene epitoper på tumor HLA klasse I-molekyler. Radioterapi øker ekspresjon av HLA klasse I-molekyler ved humane melanomceller og av nyre og subkutane celler i HLA-A2-transgene mus [12]. I motsetning Speetjens et al. rapportert at bestråling ikke effekt HLA klasse I uttrykk ved endetarmskreftceller [13]. Imidlertid har noen rapporter undersøkt sammenhengen mellom strålebehandling og HLA uttrykk på kreftcellene i en klinisk setting [12], [14], [15]. Videre til vår beste kunnskap, har ingen studier undersøkt endringer i HLA klasse I uttrykk av kreftceller i samme pasient før og etter strålebehandling.
Vi har tidligere behandlet endetarmskreftpasienter med preoperativ hyperthermo-kjemoradioterapi (HCRT ) i flere år, og rapporterte kliniske utfall [16], [17]. Her fikk vi prøver fra de samme pasientene for å undersøke (i) HLA klasse I uttrykket i endetarmskreftceller, (ii) endringer i HLA klasse I uttrykket indusert av HCRT, og (iii) forholdet mellom HLA klasse I uttrykk og prognose.
Materialer og metoder
Etikk uttalelse
Alle pasienter gitt sitt skriftlige samtykke til å delta i denne studien. Denne studien ble godkjent av Institutional Review Board of Gunma Universitetet Graduate School of Medicine, Gunma, Japan (IRB godkjenningsnummer er 1051). Anonymitet av pasientene ble bevart.
Pasienter og prøver
Sytti-åtte pasienter med lokalavansert endetarms adenokarsinom, som ble fortløpende behandlet med HCRT fulgt av kirurgi ved Gunma universitetssykehus mellom 2003 og 2011, ble inkludert i studien. Pre- og post HCRT prøver var tilgjengelig for alle pasienter.
Egenskapene til pasientens og svulstene er oppsummert i tabell 1. Median alder for pasientene ved starten av HCRT var 64 år (range, 33-85 år). Gjennomsnittlig og median oppfølging perioder var 45 og 40 måneder (range, 3-103 måneder), henholdsvis. For diagnostisk workup, gjennomgikk alle pasientene computertomografi (CT) av abdomen og thorax å lette iscenesettelse av regionale og fjernmetastaser. T stadium ble bestemt av CT og magnetic resonance imaging (MRI), spesielt T2 vektede bilder, i henhold til TNM klassifisering av ondartede svulster (UICC, 7. utgave). Generelle, 4, 18 og 56 pasienter ble klassifisert med trinn I, II og III sykdom, henholdsvis. Prøver fra de 56 pasienter med stadium III sykdom ble ytterligere undersøkt for å fastslå sammenhengen mellom HLA klasse I uttrykk og prognose.
Vevsprøver ble skåret endoskopisk fra endetarmssvulster før HCRT og deretter kirurgisk etter HCRT (median , 10 uker, med en gjennomsnittlig, 12 uker, rekkevidde, 1-54 uker). Skåret vev ble deretter fiksert i 10% formalin i 24 timer og innstøpt i parafin. HLA klasse I uttrykk ble undersøkt av immunhistokjemi.
Behandlinger
Alle de 78 pasientene gjennomgikk preoperativ HCRT, som tidligere rapportert [16]. Kort, ekstern stråle strålebehandling (X-stråler, 10 MV) ble levert med en anteroposterior eller tre- eller firefelt boksen teknikk. Den kliniske mål-volum (CTV) utgjøres den primære svulsten og hele mesorectal vev. Den totale stråledosen var 40-54 Gy (median, 50 Gy), med daglige fraksjoner av 2 Gy. Sytti-fire pasienter fikk også 5-fluorouracil (5-FU) og Levofolinate, tre fikk UFT og leukovorin, og en fikk Capecitabine.
Hypertermi behandling ble utført på en ukentlig basis (2-6 økter (median, 5 økter) hver varer 30 min) ved hjelp av kapasitiv oppvarming utstyr og en radiofrekvens på 8 MHz (Thermo-RF 8, Yamamoto Vinita Co. Ltd., Japan).
kirurgi (hovedsakelig total mesorectal eksisjon) ble utført ved 1-54 uker (median, 10 uker) etter ferdigstillelse av HCRT. Sytti-fem pasienter (96%) ble operert innen 17 uker. Flere pasienter som viste en klinisk komplett respons på HCRT nektet kirurgi; derfor kirurgi ble utført i kun tre pasienter (4%) av pasienter etter mer enn 34 uker.
farging for HLA klasse I
Formalin-fiksert og parafininnstøpte prøvene ble brukt til immunhistokjemisk analyse. Vevssnitt ble deparaffinized og utsatt for antigen gjenfinning med epitop henting løsning (Target Retrieval Solution, sitrat pH 6; Dako, Glostrup, Danmark) ved 121 ° C i 20 min. Endogen peroksidase aktivitet ble blokkert av Dako REAL (Dako). En primær antistoff mot HLA klasse IA, B, C tung kjede, EMR8-5 (Hokudo, Sapporo, Japan), som ikke gjenkjenner HLA klasse I tung kjede-β2-mikroglobulin-peptid kompleks, ble fortynnet (1:70 ) Antistoff i fortynningsløsning med bakgrunns Reduksjon av forbindelsene (Dako) og inkubert med vevet seksjoner ved 4 ° C over natten [18]. Snittene ble deretter inkubert med et Histofine enkel Stain MAX-PO kit (Nichirei, Tokyo, Japan) i 30 min. Til slutt, ble seksjonene behandlet med 3, 30-diaminobenzidin (DAB, Dako) i 1 minutt, og motfarget med hematoxylin. Prøver av normal lymph node tjente som positive kontroller. Den isotypematchende irrelevant immunoglobulin (negativ kontroll mus lgG1; Dako) ble anvendt som den negative kontroll
To forfattere (HS og MI, både blindet til de kliniske og patologiske data) vurderes HLA klasse I positivitet i en semi. -quantitative måte. Farging ble klassifisert som følger: Grade 0, 10% fargede celler; Grad 2, 10-50% fargede celler; Grad 3, 50-90% fargede celler; Grad 4, 90% fargede celler. Forholdet mellom HLA klasse I ekspresjon og klinisk prognose ble bestemt ved å dividere de etter HCRT prøvestykker inn i to grupper, slik som tidligere beskrevet [6], [13], [19]: Karakterer 0-1 og Karakterer 2-3. Forholdet mellom HLA klasse I uttrykk og klinisk prognose ble ikke undersøkt i pre-HCRT prøver fordi bare én pasient viste klasse 2-3 uttrykket før HCRT.
Statistisk analyse
Overlevelse ble målt i dager, fra dag 1 av HCRT til dødstidspunktet eller endelig oppfølging. Univariat analyse av aktuariell total overlevelsesrate (OS), den lokale kontrollrate (LC), og fjernmetastaser overlevelse rate (DMFs) for hver clinicopathological faktor ble analysert ved hjelp av Kaplan-Meier-metoden, og forskjellene mellom overlevelseskurver var analysert ved hjelp av log-rank test. Multivariate analyser ved hjelp av Cox proporsjonal farer modell ble utført for å undersøke sammenhengen mellom prognose og flere clinicopathological variabler. Forskjeller i HLA klasse I uttrykket mellom pre- og post-HCRT prøvene ble undersøkt ved hjelp av Wilcoxon signert rank test. Forskjeller ble betraktet som signifikant ved P 0,05. Alle statistiske analyser ble utført ved hjelp av SPSS programvare, versjon 21 (SPSS Japan Inc., Tokyo, Japan).
Resultater
HLA klasse I uttrykket
Figur 1 viser HLA klasse I uttrykk av rektale kreftceller. Antall pre-HCRT prøver kategorisert som Grad 0, 1, 2 og 3 var 19 (24%), 58 (74%) 1 (1%), og 0 (0%), henholdsvis. Antallet etter HCRT prøver kategorisert som Grad 0, 1, 2 og 3 var 6 (8%), 27 (35%), 7 (9%), og 12 (15%), henholdsvis. Tjueseks pasienter (33%) viste en patologisk komplett respons (PCR) post-HCRT. Tabell 2 viser at HLA klasse I uttrykket sammenheng med pasientens alder (. 60
vs
≤60), men ikke med andre en annen tumor egenskaper eller sykdom stadium
Representative bilder som viser HLA. klasse I uttrykk ved endetarmskreftceller. A, Grade 0 uttrykk. B, Grade 1 uttrykk. C, grad 2 uttrykk. D, grad 3 uttrykk. Forstørrelse, × 200.
Endringer i HLA klasse I uttrykket indusert av HCRT
Totalt 26 pasienter oppnådde pCR etter HCRT. Endringer i HLA klasse I ekspresjon ble undersøkt i tumorprøver fra de gjenværende 52 pasienter. Av disse, 26 (50%) viste økt ekspresjon av HLA klasse I, 3 (6%) viste redusert ekspresjon og 23 (44%) viste ingen endring. Økningen i HLA klasse I ekspresjon etter HCRT var signifikant (p 0,01) (figur 2). Av de 26 pasienter som oppnådde PCR, 5 (19%) viste Grad 0 ekspresjon forhånds HCRT og 21 (81%) viste en klasse 1-ekspresjon. Det var ingen signifikant sammenheng mellom grad av HLA klasse I uttrykket forhånds HCRT og PCR.
klassetrinn av HLA klasse I uttrykk i prøver fra samme pasient. A, pre-HCRT prøven; Grade 0. B, post-HCRT prøven; Grade 3. Forstørrelse, × 200. C, HLA klasse I uttrykk i pre- og post-HCRT prøver. Prediktiv verdi ble testet ved bruk av Wilcoxon signert rank test.
Sammenheng mellom HLA klasse I uttrykk og prognose
5 år OS, LC, og DMFs for alle 78 pasienter med Grade 0 -1 etter HCRT HLA klasse i uttrykket var 76%, 94% og 76%, henholdsvis, mens fem år OS, LC, og DMFs av pasienter med Grade 2-3 etter HCRT HLA klasse i uttrykket var 79%, 74% og 79%, henholdsvis (tabell 3). Det var ingen signifikant sammenheng mellom de tre resultatparametre og karakteren av HLA klasse I uttrykk. PCR indusert av HCRT viste en signifikant sammenheng med god LC (p 0,05).
Deretter undersøkte vi ytterligere prøver fra 56 pasienter med stadium III sykdom å bestemme sammenhengen mellom HLA klasse I uttrykket og prognose. Den 5-årige OS, LC, og DMFs for stadium III pasienter med Grad 0-1 etter HCRT HLA klasse I uttrykket var 70%, 100%, og 70%, henholdsvis, og den 5-årige OS, LC, og DMFS for pasienter med klasse 2-3 post-HCRT HLA klasse i ekspresjon var 92%, 77% og 85%, respektivt (figur 3). Post-HCRT HLA klasse I uttrykket viste en signifikant negativ sammenheng med LC (p 0,05). Men multivariat analyse viste at ingen av variablene korrelerte med klinisk prognose (tabell 4).
De kliniske resultatene av 56 pasienter med stadium III sykdom. (A, total overlevelse, B; lokal kontroll, og C, fjernmetastaser overlevelse). Lav HLA klasse I uttrykket: Karakterer 0 og 1; høy uttrykk: klassetrinn 2 og 3.
neste forsket undersøkt om økningen i HLA klasse I uttrykket indusert av HCRT forbedret klinisk utfall for stadium III pasienter. Den fem-års OS og DMFS for «økt» -gruppen og «konstant eller redusert» gruppe var 77% og 78% (p = 0,97) og 71% og 78% (p = 0,66), respektivt. Det var ingen signifikant sammenheng mellom endringer i HLA klasse I uttrykk og OS og DMFs. På den annen side, 5-års LC for de «økt» -gruppen og «konstant eller redusert» gruppe var 82% og 100%, henholdsvis (p = 0,04). LC av «økt» HLA klasse I uttrykket gruppen var vesentlig dårligere enn for «konstant eller redusert» uttrykk gruppe
Diskusjoner
De viktigste funnene i denne undersøkelsen var som følger.: (i) 19 (24%) og 58 (74%) av tumor vevsprøver fra pasienter med rektal adenokarsinom viste Grad 0 ( 10%) eller Type 1 (10-50%) ekspresjon av HLA klasse i, henholdsvis; (Ii) preoperativ HCRT ført til en betydelig økning i HLA klasse I uttrykk; og (iii) multivariat analyse viste ingen signifikant positiv sammenheng mellom HLA klasse I uttrykk og overlevelse.
Speetjens et al. undersøkte uttrykk av HLA-klasse I molekyler i endetarmskreft [13]. De kategorisert HLA klasse I uttrykk som følger: fraværende (ingen uttrykk), negative (0-50% positive celler), og positive (51-100% positive celler). De rapporterte at 9,7%, 32% og 58% av prøvene ble kategorisert som fraværende, negativ eller positiv, henholdsvis når farget for HLA klasse I-antigen ved hjelp av anti-HLA-antistoff, HCA2, men at 2,1%, 21%, og 77% var fraværende, negativ eller positiv, henholdsvis, når farget for HLA klasse i antigen ved hjelp av anti-HLA-antistoff, HC10. Bare én pasient i denne studien viste 50% HLA klasse I positivitet. Dette avviket kan delvis forklares av tre faktorer. Først den primære monoklonale anti-HLA klasse I-antistoffer var annerledes. De brukte HCA2 (som reagerer med HLA-A (ikke HLA-A24), HLA-B73, og HLA-C-molekyler, så vel som HLA-E, HLA-F og HLA-G antigener), og HC10 (som reagerer med HLA -B og HLA-C molekyler og HLA-A10, -A28, -A29, -A30, -A31, -A32 og -A33 tunge kjeder) som de primære antistoffer. Men vi brukt EMR8-5, som reagerer med HLA-A * 2402, A * 0101, A * 1101, A * 0201, A * 0207, B * 0702, B * 0801, B * 1501, B * 3501, B * 4001, B * 4002, B * 4006, B * 4403, Cw * 0102, Cw * 0801, Cw * 1202, og Cw * 1502, som det primære antistoff [18]. For det andre er semi-kvantitativ vurdering ikke den mest nøyaktige måten å evaluere HLA klasse I uttrykk. Endelig kan forskjellene forklares med «kreft immunoediting Begrepet» foreslått av Dunn, som beskriver svulsten endring prosessen besto av tre påfølgende faser (eliminering, likevekt og unnslippe) for å være akseptable for immunsystemet [20]. I dette konseptet, hadde det fremkallende tumorcelle blitt eliminert ved immunsystemet før de blir klinisk synlig (eliminasjon), imidlertid, en sjelden tumor celle ble ikke drept av immunrespons, og derfor har disse tumorceller komme til å forårsake klinisk synlig sykdom (likevekt og rømme). Derfor har avansert kreft tendens til lav antigene tilstand. Også sammenlignet med Speetjens studie, denne studien involverte flere pasienter med lokalavansert endetarms adenokarsinom (72% av pasientene hadde stadium III sykdom). Dermed kan vi ha funnet lavere nivåer av HLA klasse I uttrykk. Ifølge «kreft immunoediting konsept», HLA klasse I uttrykket på kreftcellene avtar med stigende scenen
Noen rapporter har undersøkt stråling induserte endringer i HLA klasse I uttrykk på ulike kliniske faser.; Imidlertid har det blitt demonstrert
i
vitro product: [12], [14], [15], [21]. Speetjens et al., Fant heller ingen signifikante forskjeller i HLA klasse I uttrykk i tumorprøver fra pasienter behandlet med eller uten bestråling [13]. I motsetning til dette, fant vi at HLA klasse I ekspresjon i rektale kreftceller økte etter HCRT og denne forskjellen kan skyldes stråledose, intervallet mellom strålebehandling og kirurgi, eller til de forskjellige analysemetoder anvendes. Speetjens et al., Behandles en gruppe av pasienter med 25 Gy pr fem fraksjoner i løpet av 10 dager etter kirurgi og deretter sammenlignet HLA-ekspresjon i tumorceller fra bestrålte og ikke-bestrålte pasienter. I motsetning til dette, behandlet vi pasienter med 50 Gy pr 25 fraksjoner i løpet av 5 uker etter kirurgi, og median intervallet mellom strålebehandling og kirurgi var 10 uker. Vi deretter sammenlignet HLA klasse I uttrykk på tumorceller fra pre- og post-HCRT prøver fra de samme pasientene. REITs et al. rapporterte at bestråling førte til en doseavhengig økning i nivåene av intracellulær peptider avledet fra eksisterende proteiner og økt proteinsyntese via mTOR aktivering. Dette resulterte i en økning i MHC klasse I ekspresjon. Men den optimale dose /fraksjon og intervallet mellom bestråling og evaluering for det høyeste nivået av HLA klasse I ekspresjon i den kliniske fase er kjent.
På den annen side, endringer i HLA klasse I ekspresjon kanskje av induserte av andre enn stråling, f.eks, kjemoterapi og /eller hypertermi faktorer. Gamerio et al. rapporterte at hypertermi førte til en betydelig økning av hovedhistokompatibilitetskompleks (MHC) klasse I proteinekspresjon på overflaten av murine colon adenokarsinom celler som uttrykte human CEA [22]. I tillegg Ohtsukasa et al. rapportert at anti-kreft narkotika (f.eks 5-FU, SN-38, og CDDP) induserte en markert økning i MHC klasse I uttrykket av menneskets tykktarm kreft cellelinjer celler (COLO 201)
i
vitro product: [23]. Videre, de også rapportert at anti-kreft narkotika indusert MHC klasse I uttrykk i murine tykktarmskreftceller
i
vivo
. De mente at denne endringen kan bli indusert av kjemoterapi-indusert produksjon av endogene proteiner og /eller for økt transport av akkumulert materiale til cellemembranen.
Disse resultatene tyder på at den økede HLA klasse I ekspresjon observert i fore~~POS=TRUNC liggende~~POS=HEADCOMP studie ble utvidet med en kombinasjon av radioterapi, kjemoterapi og hypertermi. Videre studier er nødvendig for å forstå mekanismene bak økningen i HLA klasse I uttrykket indusert av ulike behandlinger; men dette er den første rapporten som viser at pre-HCRT øker HLA klasse I uttrykk i en klinisk setting. Dette resultatet tyder på at kombinasjonen strålebehandling med HLA-klasse I-mediert immunterapi kan forsterke svake antitumorimmunresponser forårsaket av tap av HLA klasse I ekspresjon, som er en viktig mekanisme ved hvilken tumorceller å unnslippe immunosurveillance.
Vi forventet at pasienter som har svulster med høy HLA klasse I uttrykket ville ha en gunstig klinisk prognose; men når vi utført univariat analyse, fant vi ingen signifikant positiv sammenheng mellom HLA klasse I uttrykk og OS eller DMFS i fase III-pasienter. Videre LC viste en signifikant negativ sammenheng med post-HCRT HLA klasse I uttrykk i fase III-pasienter. I kontrast til resultatene presentert heri, de fleste tidligere studier rapporterer at pasienter med tumorer som viser høy HLA klasse I ekspresjon hadde en bedre prognose [3] – [8]. I tillegg, når vi undersøkt sammenhengen mellom HCRT-induserte endringer i HLA klasse I uttrykk og OS, LC, og DMFs, fant vi at LC viste en signifikant negativ korrelasjon med økt HLA klasse I uttrykk. Det er flere årsaker til disse avvikene, som følger: (i) kirurgiske faktorer kan ha en sterkere innvirkning på klinisk prognose enn pre-HCRT-indusert HLA klasse I Uttrykket og immunologisk virkning; (Ii) de immunologiske faktorer som påvirker klinisk prognose er ganske komplisert (effekten av HLA klasse I uttrykket var ikke sterk nok til å påvirke klinisk prognose); og (iii) antallet av trinn III pasientene (56) var utilstrekkelig for å muliggjøre en meningsfylt vurdering av klinisk prognose. . Derfor er videre studier er nødvendig for å etablere sammenhengen mellom HLA klasse I uttrykk og prognose i endetarmskreftpasienter
I konklusjonen, antyder studien at HCRT kan øke HLA klasse I uttrykk ved endetarmskreftceller; men det gjorde multivariat analyse ikke vist noen assosiasjon mellom HLA klasse I uttrykk og prognose.
