Abstract
Bakgrunn
Prostatakreft er en svært heterogen sykdom, og en av de viktigste årsakene til dødelighet i utviklede land. Spesifikke prognostiske og prediktive markører for pasienter med prostatakreft er fortsatt mangelfull. En årsakssammenheng mellom androgener og utvikling av prostatakreft er generelt ansett biologisk plausibel, men androgener er ikke den eneste effektor i kompleksiteten i prostata kreftutvikling. Målet med denne studien var å evaluere den prognostiske betydningen av progesteron reseptor i svulstvev fra T1-3N0 prostatakreftpasienter som gjennomgår prostatektomi.
Metoder
Tissue microarrays fra 535 pasienter med prostatakreft ble konstruert . Duplicate kjerner av tumorceller og stromale tumorvevet fra hver resected prøven ble hentet. Immunhistokjemi ble brukt til å evaluere in-situ uttrykk for progesteron reseptor.
Resultater
I univariatanalyser stor tumorcelletetthet (p = 0,006) og høy tumor stromal celletetthet nivå (p = 0,045) av progesteron reseptor ble begge signifikant assosiert med tumorprogresjon og klinisk svikt. I multivariat analyse, progesteron reseptor uttrykk i tumorceller var en uavhengig negativ prognostisk faktor for klinisk svikt (HR: 2,5, 95% KI: 01.02 til 05.02, p = 0,012).
Konklusjon
høy progesteron reseptor tetthet i tumorceller i prostata kreft svulst er en uavhengig negativ prognostisk faktor for klinisk svikt
Citation. Grindstad T, Andersen S, Al-Saad S, Dønnem T, Kiselev Y, Nordahl Melbø- Jørgensen C, et al. (2015) High progesteronreseptoruttrykk i prostatakreft er assosiert med klinisk svikt. PLoS ONE 10 (2): e0116691. doi: 10,1371 /journal.pone.0116691
Academic Redaktør: Zoran Culig, Innsbruck Medical University, ØSTERRIKE
mottatt: 26 juni 2014; Godkjent: 08.12.2014; Publisert: 27 februar 2015
Copyright: © 2015 Grindstad et al. Dette er en åpen tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Data Tilgjengelighet: All relevant data er i avisen og dens saksdokumenter filer
Finansiering:. Dette arbeidet ble støttet av det norske Helsedepartementet (https://www.regjeringen.no/en/dep/hod.html?id=421 ), den norske Kreftforening (https://kreftforeningen.no/en/main-priorities/), UIT – The Arctic University of Norge (https://en.uit.no/startsida), Nord-Norge RHF ( Helse Nord RHF) (https://www.helse-nord.no/?lang=en_US), finansiering nummer 30125/30012. Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
Prostatakreft (PCA) er en av de viktigste årsakene til dødsfall blant menn i den vestlige verden [1]. Flertallet av PCa oppstår som en lat form som er usannsynlig å invadere utover den lokale vev miljø. En undergruppe av PCas, men viser aggressivitet og metastatiske egenskaper. Slike krefttyper resultere i en hurtig sykdomsprogresjon og redusert sykdomsspesifikk overlevelse [2]. Derfor er det kliniske forløpet av PCa svært individuell og vanskelig å forutsi fra starten.
I mangel på spesifikke molekylære markører som diagnostiske og prognostiske verktøy, påvisning av PCa og dens behandlingsstrategi er fortsatt i hovedsak basert på prostataspesifikt antigen (PSA) verdi, Gleason score på tumor biopsier og primærtumor (pT) -staging [3]. Ptil kan ikke skille mellom de ulike PCA progresjon mønstre. Følgelig, mange av de oppdagede PCA tilfeller representerer klinisk lat svulster som ubehandlet vil forbli stabil i år [2]. Derfor utgjør PSA screening en risiko for overdiagnostikk og overbehandling som er forbundet med en negativ innvirkning på livskvaliteten og omfattende finanskostnader [4,5]. Identifisering av nye, bedre prognostiske og diagnostiske biomarkører for PCa er derfor stort behov.
Sex steroidhormoner, slik som androgener, østrogener og progesteron, er potente effektorer involvert i spredning, differensiering samt cellulær utvikling, og kjente bidragsytere til utvikling av ulike kreftformer [6]. De metabolske funksjoner av prostata er under regulatorisk kontroll av slike sex steroidhormoner [7]. En årsakssammenheng mellom androgener og utvikling av PCa er generelt ansett som biologisk plausibel [8]. Dette indikerer en viktig rolle for androgenreseptoren i prostata karsinogenese og endokrin behandlingssvikt. Men det er bevis på at androgen reseptor er ikke den eneste effektive endokrine reseptor i dette kompleks prosess. Forskning tyder på involvering av både glucocorticoid-, østrogen- og progesteronreseptorer i denne prosessen har blitt publisert [9-13].
Progesteron er et 21-karbon hormon syntetisert fra steroidforløpere i forskjellige deler av kroppen , inkludert testiklene, binyre, placenta og gliaceller i hjernen, i tillegg til eggstokkene [14]. Progesteronreseptoren (PGR) som finnes i to isoformer, PGR-A og PGR-B, og begge blir transkribert fra det samme genet. Det hører til den samme reseptor-familien som androgen- og østrogenreseptorer, som uttrykkes i både stromale og tumorceller i vevet PCa [11,13,15-18]. Foreløpig er det en generell enighet om PGR tilstedeværelse i stromale celler PCa [10,17,19-23]. Resultater om PGR tilstedeværelse i tumorceller, men er motstridende [9,10,17,19-25]. Således viktigheten av PGR i den humane prostata og i prostata karsinogenese er aldri blitt tilfredsstillende forklart. Som en konsekvens vi søkt å vurdere ekspresjonen av PGR i begge tumorceller avledet fra epitel (TE) og stromale tumorceller (TS) i maligne prostatektomi prøver og funnet PGR tetthetsnivået i både TE og TS for å være assosiert med PCa progresjon.
Materialer og metoder
pasienter, clinical- og histopatologiske data
671 pasienter som gjennomgikk radikale prostatectomies som initial behandling for adenokarsinom 1995-2005 ble retrospektivt identifisert fra Institutt for patologi ved Universitetssykehuset Nord-Norge (n = 267), Nordlandssykehuset (n = 63) og Olavs Hospital St. (n = 341). Av disse ble totalt 136 pasienter ekskludert på grunn av (i) strålebehandling mot bekkenregionen før inngrepet (n = 1), (ii) andre kreftformer innen 5 år før PCA diagnose (n = 4), ( iii) utilstrekkelig parafininnstøpte vevsblokker (n = 130), og (iiii) manglende kliniske oppfølgingsdata (n = 1). Ingen av pasientene hadde fått hormonbehandling før eller ved tidspunktet for prostatektomi. Dermed 535 pasienter med komplette oppfølgingsdata ble inkludert i denne studien. Median oppfølgingstid var 89 (range 6-188) måneder på den siste pasienten oppdatering i november 2012. Komplett demografiske og kliniske data ble hentet fra pasientjournaler. Alle vev analysert og lagt til studien ble behandlet på tilsvarende måte, ble svulstene gradert i henhold til den modifiserte Gleason gradering systemet [26,27], og iscenesatt ifølge Verdens helseorganisasjon retningslinjer [28]. Alle primære kreft ble histologisk vurdering av to patologer (ER og LTB), og alle demografiske, kliniske og histopatologiske data (tabell 1) ble spilt inn i en SPSS datafil, hvor pasientene ble avidentifisert. Regional komité for medisinsk og helsefaglig forskningsetikk (2009/1393), Personvernombudet for forskning (NSD), og det nasjonale data Inspection Board godkjent denne studien. Alle pasientene ble anonymisert med hvert forsøk nummer. Disse tallene ble opprinnelig knyttet til identitet for bare ett formål før; å samle klinisk informasjon. Norsk samfunnsvitenskapelig datatjeneste og Universitetssykehuset kontor for datavern akseptert denne løsningen (2009/1393). Skriftlig samtykke fra pasientene ble vurdert, men siden dette var en retrospektiv studie der det meste av materialet var mer enn 10 år gammel, og de fleste av pasientene døde, ble det ansett som ikke trengs. Alle data ble analysert anonymt.
Mikromatrise bygging
Tissue microarray (TMA) konstruksjonen ble valgt for høy gjennomstrømming molekylær patologi analyser. For hver vevsblokk, en patolog (ER) identifisert og merket to representative områder av epitelial tumor vev og to for svulst stromal vev på de tilsvarende haematoxylin og eosin lysbilder. Et område med normale epitelceller, og en med normal stromal vev ble også nøye merket. Fra hvert av disse områdene, ble kjerner samplet fra hver donor blokk for å konstruere TMA blokker. Prostata kjerner fra 20 pasienter uten tidligere malignitet ble brukt som kontroller.
TMA ble satt sammen ved hjelp av en vev-arraying instrument (Beecher Instruments, Silver Springs, MD, USA). Vi brukte en nål diameter 0,6 mm for å høste kjerner fra de merkede vev områder fra hver parafininnstøpte vevsblokker. Kjerneprøvene ble innført i et tomt mottaker parafin blokk i et nøyaktig mønster matrise. For å inkludere alle kjerneprøver, ble tolv vev array-blokker konstruert. Flere 4 mikrometer seksjoner ble kuttet med en Micron mikrotom (HM355S), festet til glassplater, og forseglet med parafin. Den detaljerte metodikken har vært rapportert tidligere [29].
immunhistokjemi (IHC)
For immunhistokjemisk farging, Ventana Benchmark XT automatisert farging system (Ventana Medical Systems, Tucson, Arizona) og Ventana reagenser ble brukt. TMA lysbilder ble deparaffinised med xylen og rehydrert i avtagende konsentrasjoner av etanol. Endogen peroksidase ble blokkert ved hjelp av Ventana endogen peroxidase blokkere settet etter en skylling med destillert vann. For antigen henting, lysbilder var oppvarmet med celle condition løsning (CC1, Ventana), standard, i henhold til produsentens instruksjoner. Følgende antistoff fra Ventana Medical (Tucson, Arizona, USA) ble brukt i denne studien: BEKREFTE anti-progesteron reseptor (klone 1E2, katalog # 790-4296) kanin monoklonalt primært antistoff, rettet mot både A- og B-isoformer av den menneskelige progesteron reseptoren. Antistoffet på forhånd var fortynnet av produsenten. Den påførte Antistoffet er fremstilt for rutinemessig diagnostikk IHC og har fått FDA-godkjenning (510k) for IVD (
in vitro
diagnostisk) bruk. Den PGR antistoffet er i dag brukt i rutinemessig praksis i vurderingen av PGR status på brystkreft. For å bekrefte spesifisiteten til det primære antistoff mot PGR, ble lysater av HEK 293-celler med enten transient overuttrykt PGR eller en tom vektor som brukes. Nærmere opplysninger om antistoff validering kan bli funnet i støtteinformasjonsfiler (S1 tekst, S2 Tekst, S1 fig.). Ultra Universal DAB ble brukt som deteksjon kit. Til slutt ble TMA lysbilder kontra med haematoxylin å visualisere kjerner.
Skårer for IHC
ARIOL bildesystem (Applied Imaging Corp., San Jose, CA, USA) ble brukt til å skanne og digitalisere IHC farget TMA lysbilder. Glassene ble lagt i SL 50 automatisert lysbilde loader og skannet med en lav oppløsning (1.25x) og høy oppløsning (20x) med et Olympus BX61 mikroskop med en automatisert plattform (Før Scientific, Cambridge, UK). Bilder av kjernene ble lastet inn i ARIOL Software. Alle prøver ble avidentifisert og scoret manuelt av to patologer (ER og SAS) uavhengig av hverandre, og begge ble blindet til noen patologisk eller klinisk informasjon. Ved uenighet, lysbildene ble re-undersøkt og observatørene nådd en enighet. Representative levedyktige vevssnitt ble bedømt semikvantitativt og graden av kjerne PRG ekspresjon av IHC ble gradert i henhold til både dominerende fargeintensitet og tetthet i både TE og TS. Både intensitet og tetthet ble gitt en score mellom 0-3. Intensitet ble scoret som følger: 0 = negativ, 1 = svak, 2 = moderat, 3 = sterk. Tetthet ble scoret i henhold til prosentandelen av positive celler i undersøkes rommet med følgende system: 0 = 0%, 1 = ≤ 5%, 2 = 5-50%, 3 = 50%. For hvert tilfelle, ble gjennomsnittsverdier beregnet. De gjennomsnittlige poengverdier ble deretter koblet til pasientens kliniske og histopatologiske informasjon. Scoring verdiene ble deretter dikotomiserte som høy og lav intensitet eller tetthet av fargede celler (Fig. 1) under anvendelse av optimale cut off verdier. I både TE og TS, avskåret ble definert som tetthetsnivå × 4
th kvartil. En høy score ble definert som tetthetsnivå ≥ 0,75 i TE, og ≥ 1,75 i TS.
immunhistokjemi mikroskopiske bilder av vev micro array som representerer forskjellige uttrykk for PGR flekker i PCA seksjoner A-B. (A) Høy tetthet av PGR i tumorceller (TE), inkludert forstørrelse. (B) med lav densitet av PGR i TE, inkludert forstørrelse. Original forstørrelse x100 og x400.
Statistiske metoder
Alle statistiske analyser ble utført ved hjelp av statistikkpakke IBM SPSS, versjon 21 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). IHC skåringsverdiene fra hver enkelt patolog ble sammenlignet for inter-observatør pålitelighet ved bruk av en to-veis tilfeldig effekt modell med absolutt avtale definisjon. En Wilcoxon signert rank test ble anvendt for å vurdere om det ikke var statistisk signifikante forskjeller i PGR intensitet og tetthet mellom de ulike kamrene i PCA prøver. Vi benyttet den Spearman korrelasjonskoeffisient for å undersøke sammenhengen mellom PGR uttrykk og clinopathological variabler. Kaplan-Meier-metoden ble brukt for univariate overlevelsesanalyse, og log-rank test for å vurdere statistisk signifikant sammenheng mellom overlevelseskurver i modellen. Univariate Kaplan Meier-kurver ble konstruert av følgende sluttpunkter: 1) Biokjemisk svikt (BF), 2) Klinisk svikt (CF) og 3) PCa død (PCD). BF ble bestemt som en PSA tilbakefall ≥ 0,4 ng /ml i minst to forskjellige blodprøver postoperativt [30]. CF ble definert som bekreftet lokal symptomatisk progresjon utover kur og /eller funn av metastaser til beinet, viscerale organer eller lymfeknuter ved CT, MR, bein scan eller ultralyd. PCD ble definert som død forårsaket av progressive og spres kastrering-resistente PCa ukontrollerbar av terapi. Alle vesentlige variabler fra univariate analysen ble lagt inn i multivariat analyse ved hjelp av en baklengs trinnvis Cox regresjonsmodellen med en sannsynlighet for trinnvis oppføring fjerning på 0,05 og 0,1, henholdsvis. Vi vurderte en p-verdi 0,05 som statistisk signifikant for alle analyser.
Resultater
Pasient egenskaper
radikal prostatektomi var retropubic i 435 tilfeller og perineal i 100 tilfeller. Pasientenes alder ved operasjon varierte fra 47 til 76 år med en median alder på 62 år. Ytterligere opplysninger om kullet er tidligere publisert [31]. En oversikt over de demografiske, kliniske og histopatologiske egenskaper er presentert i tabell 1. Kombinert Gleason score varierte fra 6 til 10 og tumorstadium fra T2a til T3b. I siste oppfølgings 170 (32%) opplevde BF, 36 (7%) opplevde CF og 15 (3%) hadde dødd på grunn av PCa.
Progesteron uttrykk og korrelasjon med clinicopathological variabler
Det var en god scoring avtale mellom de to etterforsker patologer. Den intra-klasse korrelasjonskoeffisient (pålitelighet koeffisient, r) for PGR markør var 0,78 (p 0,001). PGR ble uttrykt i kjernen av både normale celler og i TE og TS (Fig. 1). Høy PGR tetthet i TE (≥ 0,75) ble funnet i 109 (20%) av de 535 pasientene, mens en høy tetthet PGR (x 1,75) i TS ble funnet i 120 (23%) av pasientene. Det var ingen signifikant forskjell i PGR tetthetsnivå i kontroll epithelia sammenlignet med TE (p = 0,429), selv om den gjennomsnittlige tetthet minutter ble 0.37 i kontroll-epitel og 0,52 i TE. I tillegg gjorde 61,9% av kontrollene ikke uttrykke PGR, mens bare 28,3% av TE var uten PGR uttrykk. Men det var en signifikant høyere PGR tetthetsnivå i TS sammenlignet med kontroll stroma (p 0,001). Videre ble en signifikant høyere uttrykk intensitet og tetthet nivå av PGR funnet i TS sammenlignet med TE (begge p 0,001).
høy tetthet nivåer av PGR i TE ble korrelert med en positiv apikal margin (p = 0,025) og perinevral infiltrasjon (PNI) (p 0,01). Ingen korrelasjon til andre clinopathological variabler ble identifisert.
Univariat analyse
Sammenhenger mellom tettheten nivå av PGR og CFFS (klinisk svikt overlevelse) er presentert i Tabell 2 og Fig. 2. Følgende clinopathological variabler var alle vesentlige prognostiske faktorer for CF: PT-scenen (p 0,001), pN-scenen (p 0,001), Gleason grad (p 0,001), tumorstørrelse (p = 0,019) , perinevral infiltrasjon (p = 0,001), positiv kirurgisk margin (p = 0,038), ikke-apikal kirurgisk margin (p 0,001) og lymphovascular infiltrasjon (p 0,001) (tabell 1)
Kaplan-Meier-kurver som viser andelen av prostata caner pasienter (n = 535) med CFFS i henhold til nivået av progesteron reseptor (PGR) i forskjellige celletyper AD høy og lav tetthet. (A) Tumor stromaceller (TS), (B) tumorceller (TE), (C) TE og TS kombin og (D) TE i pasienter med en høy Gleason score (≥ 7). Et høyt PGR tetthetsnivå er signifikant assosiert med en reduksjon i CFFS. I både TE og TS, avskåret ble definert som tetthetsnivå × 4
th kvartil. En høy score ble definert som tetthetsnivå ≥ 0,75 i TE, og ≥ 1,75 i TS. Log-rank tester ble brukt for å vurdere den statistiske signifikans mellom overlevelseskurver i modellen. Median oppfølgingstid var 89 (variasjons 6-188) måneder. En p-verdi 0,05 ble ansett som statistisk signifikant.
Økende tetthet nivåer PGR i både TE (p = 0,006) og TS (p = 0,045) var signifikant assosiert med CF (fig. 2, panel A og B). Når du slår sammen tetthetsnivåene i TE og TS PGR, hadde pasienter med høye (høye /høye) nivåer PGR tetthet betydelig redusert CFFS (p = 0,019) sammenlignet med de med nivåer lav tetthet (lav /høy, høy /lav og lav /lav) (fig. 2, panel C). Ti år CFFS var 76,8% vs. 91,6% for henholdsvis pasienter med høy (høy /høy) tetthet kontra lav (lav /høy, høy /lav og lav /lav) (tabell 2).
Høy PgR nivåer i TE viste en lignende tendens for økt BF, men dette var ikke statistisk signifikant (p = 0,144). For TS eller TS og TE kombinert, det var ingen assosiasjoner til BF eller PCD.
En høy tetthet nivå av PGR i TE ble signifikant assosiert med CF i undergruppen av pasienter med Gleason score ≥ 7 (p = 0,002 fig. 2, panel D) i forhold til undergruppen av pasienter med Gleason score 6 (p = 0,914). Ti år CFFS for pasienter med nivåer høyt PGR tetthet var 72,2% vs. 97,2% for henholdsvis pasienter med Gleason score ≥ 7 vs. Gleason scorer 6.
Multivariatanalyse
I multivariat analyse ( Tabell 3), høy uttrykk for PGR i TE var en uavhengig prediktor for CF (HR: 2,5, 95% KI: 01.02 til 05.02, p = 0,012) i tillegg til Gleason grad (p = 0,001) og ikke-apikal kirurgisk margin ( p = 0,006). PGR uttrykk i TS tendens til, men nådde ikke statistisk signifikans (HR: 2,1, KI: 1,0 til 4,3, p = 0,060). Ingen uavhengige prognostiske faktorer ble funnet for BF og PCD.
Diskusjoner
Så vidt vi vet, er dette den første store studien undersøker prognostisk rolle PGR i TE og TS i PCa. I univariat analyse ble et høyt tetthetsnivå av PGR i både TE og TS forbundet med CF. Høy tetthet nivå av PGR i TE var en uavhengig prognostisk faktor for CF.
Et første skritt for å forstå PGR handling ved PCA er å definere reseptor uttrykk i prostata vev. Tidligere publikasjoner om PGR uttrykk i PCA særlig de som bruker IHC, har presentert motstrid resultater og bare noen få rapporter har adressert PGR rolle i prostata kreftutvikling. Vår store størrelse studien viser en bred distribusjon av PGR i stromal og epitelceller både godartet og ondartet prostatavevet. I dag synes det å være en generell avtale om PGR tilstedeværelse i stromale celler PCa [10,17,19-23]. I tråd med våre funn, har flere også rapportert en høy PGR uttrykk i TE av PCa [9,10,23,25]. I kontrast, andre har vist en total mangel på PGR uttrykk i TE [17,19,20,22]. Selv eksperimentelle studier med cellelinjer har rapportert motstridende resultater [17,24,25,32]. Slike avvik kan forklares av flere faktorer. Dette inkluderer bruk av ulike antistoffer, foredling vev, antigen gjenfinning metoder, antall vevsprøver og ulike poengsystemer, og kan reflektere mangel på metodisk standardisering. Den monoklonalt antistoff 1E2 brukes i vår studie er optimalisert for klinisk bruk, og brukes i rutinemessig praksis i vurderingen av PGR status på brystkreft. Dette er også tilfelle for NCL-PGR1A6 antistoff brukt i artiklene ved Bonkhoff et al. [10] og Hiramatsu et al. [23], noe som bekrefter tilstedeværelsen av PGR i TE. Flere av IHC studier motsier denne studien er funn ble utført før utviklingen av nye metoder økende metodologisk [17,19,20]. Slike fremgangsmåter omfatter bruk av nye, svært spesifikke monoklonale antistoffer mot PGR, mikrobølgebestråling fremgangsmåten og tidseffektiv vev Fremgangsmåte ved behandling av TMA [33], som er blitt rapportert som et verdifullt verktøy for evaluering av pasientmaterialet og en god erstatning for hele § analyse [34].
Yu et al. nylig undersøkt stedet og rolle både PGR isoformer ved PCA og rapportere funn motstrid til våre. Dette kan forklares ved deres undersøkelse av PGR som de funnet å bli uttrykt kun i et subsett av stromale celler fra de 27 radikal prostatektomi prøver [22]. Dette er i motsetning til arbeidet var ekspresjon av PGR i både TE og TS ble tydelig påvist. I vår kohort 129 (28,3%) av pasientene hadde ingen PGR ekspresjon i TE, i motsetning til bare 8 pasienter (1,7%) med negativ PGR farging i TS. Imidlertid, de med et høyt tetthetsnivå av PGR i TE ble signifikant assosiert med CF. Forskjellen i gruppestørrelse potensielt kan forklare noe av avviket mellom funnene. I tillegg har begge de valgte antistoff og vev bearbeidingsmetoder forskjellig.
I en annen studie med celleproliferasjonsanalyse, Yu et al. funnet PGR å bli negativt regulere stromal celleproliferasjon
in vitro product: [32]. I vårt arbeid univariat analyse viste en høy PGR uttrykk i TS for å være assosiert med klinisk svikt i PCA-pasienter. Så langt har vi ennå ikke har vist mekanismen bak denne foreningen.
Steroid hormoner regulerer cellens progresjon gjennom cellesyklus ved å binde seg til sine respektive reseptorer. Disse reseptorene er signaltransduksjon molekyler og kan regulere spredning på to forskjellige måter, genomisk eller ikke-genomiske handlinger i komplekse signalnettverk [6]. Flere ikke-genomiske proliferative virkninger av progesteron er blitt foreslått i tumorceller i andre organer, inkludert bryst [35-37], astrocytom [38] og [39] osteosarcom-cellelinjer. Men slike resultater motsagt av forslag til anti-proliferative handlinger av progesteron i livmorkreft [40]. Dette kan tyde på at handlingene til progesteron er vev bestemt. Vi har funnet at høy PGR tetthetsnivå i TE ble assosiert med CF pasienter med Gleason score ≥ 7, noe som tyder på en opp-regulering av PGR i framdrift PCa. Dette er i konsistens med tidligere publikasjoner. Bonkhoff et al. har antydet progressiv veksten av PGR under PCa progresjon og metastasering [10]. Støtte disse funnene, Latil og medarbeidere fant en redusert PGR uttrykk i klinisk lokaliserte svulster og økt PGR uttrykk i hormon ildfast svulster, sammenlignet med normal prostata vev [9].
I flere eksperimentelle studier av inn- et al., mus med PCa ble behandlet med et PGR antagonist, mifepriston, og sammenlignet med kontroller. De fant en høyere dødelighet i de som ikke er behandlet. Dessuten var det mindre PCA komplikasjoner i den behandlede gruppen [41,42]. Lignende funn av anti-progesteron aktivitet av mifepriston i begge androgen sensitive og ikke-sensitive PCA cellelinjer
in vitro Hotell og
in vivo
, har blitt rapportert [43,44]. Våre funn gir ytterligere støtte til disse funnene, noe som indikerer at PGR spiller en rolle i patogenesen av PCa. For å undersøke hvorvidt unormal PGR aktivitet er en mekanisme for kastrering motstandsdyktig prostatakreft utvikling, et fase I kliniske /II studien har nettopp blitt igangsatt for å teste effekten av anti-progestin, onapriston, hos pasienter med denne tilstanden (http: //clinicaltrials gov /vise /NCT02049190).
mekanismen bak PGR oppregulering i PCA har ennå ikke blitt klarlagt. I denne studien var Ki67 og PGR i TE korrelert med CF (S3 Text), noe som indikerer en assosiasjon mellom PGR og proliferativ aktivitet. Arora et. al. [12] har rapportert at oppregulering av glukokortikoid reseptor re-aktiverer uttrykk for en undergruppe av androgen reseptor-regulerte gener og dermed induserer kastrere motstandsdyktig PCa. Den PGR er, i likhet med den glukokortikoid-reseptoren, i likhet med androgen reseptor med 88% sekvenshomologi i den ligand-bindende domene [45]. I tråd med dette funn, kan progesteron indusert ekspresjon av androgen reseptor-regulerte gener være en potensiell mekanisme for å bidra til utvikling av resistente for kastrering PCa. Imidlertid er videre forskning undersøker dette garantert for en slik hypotese bekreftes.
En mulighet for ulike roller ved to PGR isoformer i normal prostata vev og PCA som er foreslått for østrogenreseptorer [13], må også tas i betraktning. Vi vet nå at crosstalk mellom TE og TS er avgjørende for utviklingen av PCa. I en studie av Memarzadeh et al., Cancer-assosiert fibroblast vekstfaktorer forårsaket en oppregulering av epitelial androgen receptor [46]. Dette kan indikere at epitel-stromal krysstale er mekanismen bak induksjon av PGR ekspresjon i TE, og det er dermed fremme PCa progresjon. Imidlertid oppregulering av PGR ikke kan være direkte mekanismen bak økt proliferasjon, men snarere en følge av andre underliggende prosesser. Således, den respektive rolle epitelisk versus stromal PGR i prostata karsinogenese og en potensiell individuell rolle PGR isoformer gjenstår å bli bestemt.
Konklusjon
Heri, har vi funnet at en høy tetthet nivå PGR i TE er en uavhengig prognostisk faktor for progresjon til CF ved PCA. Videre høy tetthet nivåer PGR har betydning for progresjon til CF hos pasienter med Gleason score ≥ 7. Progesteron /PGR kan av disse grunner være nyttig som en prognostisk verktøy, men også som et mål for nye behandlingsstrategier ved PCA. Videre funksjonelle studier som undersøker PGR rolle i både epitel og stromal avdelinger av PCa er fortsatt nødvendig for å konkludere med hvordan du best kan anvende denne kunnskapen ved PCA diagnose og behandling.
Hjelpemiddel Informasjon
S1 datasett. SPSS PCa og PGR datasett
doi:. 10,1371 /journal.pone.0116691.s001 plakater (SAV)
S2 datasett. SPSS PCa og Ki67 datasett
doi:. 10,1371 /journal.pone.0116691.s002 plakater (SAV)
S1 Fig. Lysater av HEK 293-celler med enten tom vektor (A) eller et PGR overekspresjon konstruksjon (B) ble kjørt på en SDS-PAGE-gel og overført til en nitrocellulosemembran.
Membranen ble probet med første Ventana anti-PGR antistoff (øvre panel), og deretter med anti-aktin antistoff for å kontrollere for lasting (nedre panel)
doi:. 10,1371 /journal.pone.0116691.s003 plakater (TIFF)
S1 tekst. Antistoffspesifisiteten validering
doi:. 10,1371 /journal.pone.0116691.s004 plakater (docx)
S2 tekst. Ventana produktkatalog, bekrefter anti-progesteron reseptor (PR) (1E2) Rabbit monoklonale primære antistoffet
doi:. 10,1371 /journal.pone.0116691.s005 product: (PDF)
S3 tekst. . Ki67 farging
doi: 10,1371 /journal.pone.0116691.s006 plakater (docx)
Takk
Vi ønsker å takke Magnus Persson, (Institutt for klinisk patologi, Universitetet Sykehuset Nord-Norge), og Mona Pedersen (UiT Arktis Universitetet i Norge) for sin svært forsiktig laboratoriearbeid.
