Abstract
Det er økende bevis som tyder på at feilregulering av enkelte microRNAs (mirnas) kan bidra til tumorprogresjon og metastasering og er foreslått å være viktige regulatorer av ulike biologiske prosesser som transkripsjonsregulering, cellevekst og tumorigenesis. Tidligere studier har vist at MIR-137 er dysregulerte i noen kreftformer, men dens rolle i blærekreft er fortsatt ukjent. I vår studie finner vi at MIR-137 er oppregulert i menneskelige blærekreft vev og cellelinjer. Videre ble høyere MIR-137 forbundet med pM eller pTNM stadium i kliniske pasienter med blærekreft. Tvangs uttrykk for MIR-137 i blæren kreftceller betydelig forbedret deres spredning, migrasjon og invasjon. Bioinformatikk analysen identifisert tumorsuppressorgenet PAQR3 som en potensiell Mir-137 mål genet. Videre undersøkelser indikerte at MIR-137 undertrykket ekspresjon av PAQR3 ved binding til dens 3′-utranslaterte område. Stanse av PAQR3 av små interfererende RNA phenocopied effektene av MIR-137 overekspresjon, mens restaurering av PAQR3 i blæren kreftceller blære kreft celler som overuttrykker MIR-137, delvis reversert de undertrykkende effektene av MIR-137. Disse funnene tyder på at Mir-137 kan være en potensiell onkogen i blærekreft
Citation:. Xiu Y, Liu Z, Xia S, Jin C, Yin H, Zhao W, et al. (2014) mikroRNA-137 Oppregulering Øker blærekreft celleproliferasjon og invasjon av målretting PAQR3. PLoS ONE 9 (10): e109734. doi: 10,1371 /journal.pone.0109734
Redaktør: Alfons Navarro, Universitetet i Barcelona, Spania
mottatt: 15 april 2014; Godkjent: 08.09.2014; Publisert: 16 oktober 2014
Copyright: © 2014 Xiu et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Data Tilgjengelighet:. Den forfatterne bekrefter at alle data som underbygger funnene er fullt tilgjengelig uten restriksjoner. Alle relevante data er i avisen og dens saksdokumenter filer
Finansiering:. Finansiering fra National Natural Science Foundation of China (81170534) (https://www.nsfc.gov.cn/). Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
Blærekreft er den femte vanligste kreft i befolkningen generelt og den nest vanligste dødsårsaken hos pasienter med urogenitalsystem malignitet [1], [2]. Mer enn 90% av urinblæren svulster består av overgangsordning celle carcinoma (TCC) som oppstår fra overgangs epitel [3]. Blæren svulster kan deles inn i to forskjellige kategorier: ikke-muskel og muskel invasiv blærekreft [4], [5]. De fleste blære svulster (75-80%) er diagnostisert som ikke-muskel-invasiv tumorer som tilbakefall er høy (50-70%) [6]. Resten er høy grad av muskel invasive svulster (15%) som raskt kan utvikle seg til metastasering og føre til død [7]. Selv om betydelige fremskritt i behandlingen er gjort, blant annet forbedret kirurgisk operasjon, strålebehandling og kjemoterapi, blærekreft fortsetter å være en vanlig sykdom med høy dødelighet [8], [9].
Nylig, økende bevis tyder at en ny klasse av RNA, kjent som microRNAs (mirnas), kunne regulere forskjellige målgener, inkludert onkogener og tumor suppressor [10]. mirnas er endogene 19~22 nucleotide (nt) ikke-kodende RNA som kan negativt regulere protein uttrykk ved å indusere nedbrytning av målet mRNA, svekke deres oversettelse eller begge av spesifikt binding til 3’untranslated regioner (3’UTR) av målet mRNA [ ,,,0],11], [12]. Et økende antall studier har vist at mirnas bidrar til de fleste, om ikke alle, grunnleggende biologiske prosesser, slik som utvikling, differensiering, apoptose og celleformering [13] – [16]. Mutasjoner av gener eller dysregulering miRNA ekspresjon av mirnas er godt beskrevet i mange typer av tumorer, inkludert magekreft, lymfekreft, bryst, lunge, kolon og leverkreft [17] – [22]. Men rollen som miRNAs i blærekreft fortsatt i stor grad ukjent.
MiR-137 har fått mye oppmerksomhet fordi det er ofte nedregulert og fungerer som en tumor suppressor i mange kreftformer som kreft i eggstokkene, magekreft, glioblastom, lungekreft, tykktarmskreft og neuroblastom [23] – [28]. En tidligere studie av Shimuzu et al. viste også at MIR-137 var ofte metylert i primær blæren svulster og ektopisk uttrykk for MIR-137 trykt blærekreft celleproliferasjon [29]. Men vi heri rapportere motstrid ekspresjon og funksjon av MIR-137 i blærekreft, noe som står i motsetning til det som er rapportert i litteraturen. I denne studien, vi har oppdaget hyppig oppregulering av MIR-137 i humane blærecancer vev og cellelinjer. Overekspresjon av MIR-137 forfremmet celleproliferasjon, migrasjon og invasjon av blærekreft celler. Videre fant vi at PAQR3, en roman tumor suppressor genet, var det direkte målet for MIR-137 i blærekreft. Dermed tyder våre resultater viktige roller for MIR-137 i blærekreft patogenesen og indikerer dens potensielle bruk i kreftbehandling.
Materialer og metoder
Etikk uttalelse
Alle disse pasienter ble enige om å delta i studien og ga skriftlig informert samtykke. Både denne studien og samtykke ble godkjent av den etiske styret for Institutt for The First Affiliated Hospital of Harbin Medical University og holdt Helsinkideklarasjonen.
Det menneskelig vev
Biopsi fra blærekreft og tilstøtende normal urothelium ble innhentet fra pasienter som gjennomgår radikal cystektomi for blærekreft ved første Affiliated Hospital of Harbin Medical University, Kina. De operasjoner skjedde fra april 2010 til april 2013, og alle pasienter forutsatt signert informert samtykke. Biopsiene ble lagret i flytende nitrogen umiddelbart etter reseksjon til RNA-ekstraksjon. De demografiske og kliniske patologiske data er oppført i tabell S1.
Cellelinjer, cellekultur og miRNA transfeksjon
Fire menneske blærekreft cellelinjer T24, J82, 5637 og UMUC3 og en normal blære celle linje, SV-HUC-en, ble kjøpt fra Shanghai Institute of Biochemistry og cellebiologi ved Chinese Academy of Sciences [30]. Cellelinjene ble dyrket i RPMI 1640 medium supplert med 10% varme-inaktivert føtalt bovint serum under en fuktig atmosfære med 5% CO2 ved 37 ° C. Dagen før transfeksjon ble cellene sådd ut i vekstmedium uten antibiotika ved en tetthet på 30-40%. Transfeksjon av HSA-MIR-137 ligner, inhibitor, og krafse, kjemisk syntetisert ved GenePharma (Shanghai, Kina) ble utført ved anvendelse av Lipofectamine 2000 (Invitrogen, Carlsbad, CA) i henhold til produsentens protokoll og ble transfektert inn i cellene med en endelig oligonukleotid konsentrasjon på 20 nmol /L.
RNA isolering og QRT-PCR
Total RNA fra vevsprøver og dyrkede celler ble isolert ved hjelp TRIzol reagens (Takara, Dalian, Kina). Før du utfører Kvantitativ RT-PCR-analyser (qPCR), RNA ble revers-transkribert til miRNA cDNA og total cDNA ved hjelp av One Step PrimeScript miRNA cDNA Synthesis Kit (Takara, Dalian, Kina) og PrimeScript RT reagent Kit (Takara, Dalian, Kina), henholdsvis. Real-time PCR primersekvenser og betingelser som var oppført i Tabell S2 og S3 tabell, henholdsvis, i henhold til MIQE retningslinje. De mRNA og miRNA uttrykk nivåer ble oppdaget av qPCR med Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System real-time PCR System (Applied Biosystems, Carlsbad, USA) med SYBR Premiks Ex Taq (Takara, Dalian, Kina) i henhold til produsentens instruksjoner og ble normalisert i forhold til GAPDH mRNA og små nukleær RNA U6, respektivt. Den Ct verdien av MIR-137 og PAQR3 ble kvantifisert med 2
-ΔΔCt metode.
Migrasjon og invasjon analyser
Cell invasjon og migrasjon ble analysert ved hjelp av en transwell kammer (Millipore, USA) med og uten Matrigel (BD, Franklin Lakes, USA). For invasjonen analysen ble en transwell kammer plassert i en 24-brønns plate og ble belagt med 30 ul Matrigel og ble inkubert i førti minutter ved 37 ° C. I begge transwell assay-celler, 48 timer etter transfektert, ble trypsinert og sådd ut i kamre med en tetthet på 8 x 10
4 celler per brønn og dyrket i medium med RPMI 1640 medium med 2% serum, mens 600 pl av 10 % FBS-1640 ble tilsatt til det nedre kammer. Twentyfour time senere ble migrerte cellene fiksert med 100% metanol i 30 min. Non-migrerte Celler ble fjernet av bomullspinner. Deretter celler på bunnflaten av membranen ble farget med 0,1% krystallfiolett (Sigma) i 20 min. Celle bildene ble tatt under et fasekontrastmikroskop (Olympus, Tokyo, Japan).
Celleproliferering
celleproliferasjon analysene ble utført ved hjelp av en Cell Counting Kit-8 (Dojindo, Kumamoto, Japan ). Blærekreft-celler ble sådd ut i 24-brønners plater ved 2 x 10
5 celler per brønn. Celler ble inkubert i 10% CCK-8 (Dojindo, Kumamoto, Japan) som ble fortynnet i normalt dyrkningsmedium ved 37 ° C inntil den visuelle farge konverteringen. Sprednings priser ble bestemt på 0, 24, 48 og 72 timer etter transfeksjon.
Western blot
Tilsvarende mengder (30-50 mikrogram) av protein ble atskilt med 10% SDS polyakrylamidgeler og overført til polyvinylidenfluorid (PVDF) membraner. Membranene ble blokkert med 5% ikke-fett tørrmelk og inkubert over natten med det passende primære antistoff i fortynninger som er angitt av produsenten. Deretter ble membranene vasket tre ganger i TBST og inkubert med det tilsvarende pepperrot peroksidase (HRP) -konjugert sekundære antistoff ved 1:5,0000 fortynning i 1 time. Bundet sekundært antistoff ble påvist ved hjelp av Enhanced Chemiluminescence (ECL) system (Pierce Biotechnology Inc, USA). Primære antistoffer immunoblottingforsøk var:. Anti-GAPDH, anti-PAQR3 (Santa Cruz Biotechnology, USA)
Luciferase-analyse
T24-celler ble sådd ut i 24-brønners plater (1 x 10
5-celler /brønn) og inkubert i 24 timer før transfeksjon. For reportergenet analysen ble cellene kotransfektert med 0,5 ug pGL3-PAQR3-3’UTR eller pGL3- PAQR3-3’UTR Mut plasmid, 0,05 ng av phRL-SV40-kontroll-vektor (Promega, USA), og 100 nM MIR-137 eller kontroll RNA bruker Lipofectamine 2000 (Invitrogen, USA). Firefly og Renilla luciferase-aktivitet ble målt etter hverandre gjennom en dobbel luciferase-assay (Promega, USA) 24 timer etter transfeksjon.
Statistisk analyse
Hvert eksperiment ble gjentatt minst tre ganger. Statistiske analyser ble utført ved hjelp av SPSS 15.0. Data er presentert som gjennomsnitt ± standardavvik. Statistiske analyser ble utført med enten en variansanalyse (ANOVA) eller t-test, og statistisk signifikans nivå ble satt til α = 0,05 (to-side).
Resultater
Expression av MIR-137 er oppregulert i blærekreftcellelinjer
uttrykk for MIR-137 ble først vurdert av kvantitativ revers transkripsjon-PCR (QRT-PCR) i blærekreftcellelinjer og en normal blære cellelinje SV-HH-en. Som vist på fig. 1, MIR-137 var signifikant oppregulert i alle blærekreftcellelinjer i forhold til SV-HH-en. Vi ytterligere kvantifisert ekspresjonsnivået av MIR-137 i 6 par humane blærecancer vev og tilstøtende normale slimhinnevevet ved QRT-PCR (fig. 1). Resultatene viste at ekspresjonsnivået av MIR-137 var generelt høyere i tumorvev sammenlignet med matchede ikke-tumorvev. Således spekulert vi at MIR-137 kan være en antatt onkogen i blærekreft.
(A). Oppregulering av MIR-137 ekspresjon i blærecancercellelinjer og vev, sammenlignet med de tilsvarende kontroller. Relativ uttrykk for MIR-137 i fire blærekreftcellelinjer og en normal blære cellelinje SV-HUC-1 ble bestemt ved QRT-PCR. U6 snRNA ble brukt som intern kontroll. (B) Relativ uttrykk for MIR-137 i 6 kirurgiske prøver av blærekreft vev og matchet ikke-tumorvev ble bestemt av qRTPCR. U6 snRNA ble brukt som intern kontroll.
Uttrykk av MIR-137 i kliniske pasienter med blærekreft og deres korrelasjonsanalyse med clinicopathological egenskaper
For å studere forholdet mellom MIR-137 med blære kreftforekomst, uttrykket av MIR-137 ble påvist i 50 kliniske pasienter som bruker real-time PCR. Ut av 50 blære kreft prøver, MIR-137 var oppregulert i 45 tilfeller (45/50, 90%) sammenlignet med tilstøtende vev (Fig. 2B). I mellomtiden, MIR-137 ble nedregulert i 5 tilfeller (5/50, 10%). Generelt er ekspresjonen av MIR-137 i blærecancer vev var signifikant høyere enn i tilstøtende vev (Figur 2A, s . 0,001). Jo høyere nivå uttrykk for MIR-137 ble assosiert med pTNM scenen (figur 2C.), Og høyere nivå av MIR-137 ble assosiert med pM scenen (p = 0,05, metastase vs. ingen metastssis) i pasienter med blærekreft (Fig . 2D). Disse data antydet at endringer av MIR-137 kan være involvert i blærekreft progresjon.
(A) i forhold Mir-137 uttrykk nivåer i blære kreft vev og tilstøtende normalt vev ble bestemt ved QRT-PCR. U6 snRNA ble brukt som intern kontroll. (B) MIR-137 ble påvist i 50 par av blærekreft vev og tilstøtende normale kontroller av kvantitativ RT-PCR. Data er presentert som log2 av gangers endring av blærekreft vev i forhold til tilstøtende normale regioner; (C) og (D) Statistisk analyse av sammenhengen mellom miRNA nivå og pTNM trinn (I, II, III og IV) og PM scenen (Ingen metastaser og metastasering); * P 0,05, og ** p 0,01, *** p. 0,001
Overuttrykte MIR-137 forfremmet blærekreft celleproliferasjon, migrasjon og invasjon
Vi har utforsket den potensielle virkningen av MIR-137 i blærekreft celleproliferasjon, migrasjon og invasjon. Celler ble transfektert med kryptert kontroll oligo eller MIR-137 etterligner og inhibitor, som viste høy transfeksjonseffektivitet (fig. 3A). CCK-8 proliferasjonsanalyse viste at celleproliferasjon ble markedsført i MIR-137 etterligner-transfekterte blærekreftceller sammenlignet med egge oligo-transfekterte celler eller ubehandlede celler (fig. 3B). Omvendt, MIR-137 hemmer betydelig hemmet spredning av T24 celler (fig. 3C). Intriguingly, migrering og invasjon assay viste at overekspresjon av MIR-137 vesentlig fremmet migrering og invasjon av T24-celler sammenlignet med kontrollen, mens MIR-137 inhibitor inhiberte både cellemigrering og invasjon (fig. 3D og E).
(A) Expression nivåer av MIR-137 ble undersøkt ved real-time PCR etter transfeksjon av Mir-137 etterligner eller sramble eller ingen transfeksjon. (B) Vekst av T24 celler ble vist etter transfeksjon med Mir-137 etterligner eller sramble eller ingen transfeksjon. Veksten indeksen som vurderes på 0, 24, 48 og 72 timer. (C) Expression nivåer av MIR-137 ble undersøkt ved real-time PCR etter transfeksjon av MIR-137-hemmer eller kontroll eller ingen transfeksjon. (D) Vekst av T24 celler ble vist etter transfeksjon med MIR-137-hemmer eller kontroll eller ingen transfeksjon. Veksten indeksen som vurderes på 0, 24, 48 og 72 timer. (E) Transwell analyse av T24 celler etter behandling med Mir-137 etterligner, hemmere eller krafse eller kontroll; det relative forholdet mellom migrerte celler pr felt er vist nedenfor. (D) Transwell analyse av T24 celler etter behandling med Mir-137 etterligner, hemmere eller krafse eller kontroll; den relative forholdet mellom invasive celler per felt er vist nedenfor, * p 0,05, ** p 0,01, og *** p. 0,001
MiR-137 mål PAQR3 i blæren kreftceller
Som spådd av PicTar, var det komplementaritet mellom har-MIR-137 og PAQR3 3’UTR (fig. 4A). Overekspresjon av MIR-137 reduserte protein og mRNA-nivåer av PAQR3 i blærecancerceller (fig. 4C og D). Effekten av MIR-137 på translasjonen av mRNA til protein PAQR3 ble deretter vurdert ved hjelp av et luciferase reporter-analyse (Fig. 4B). Tvangs uttrykk for MIR-137 bemerkelsesverdig redusert luciferase aktivitet av reportergenet med vill-type konstruksjon, men ikke med mutant PAQR3 3’UTR konstruere, noe som indikerer at MIR-137 direkte målrettet PAQR3 3’UTR.
(A) Skjematisk fremstilling av PAQR3 3 «UTR viser antatte miRNA målområde. (B) Analyse av de relative luciferase aktiviteter PAQR3-WT, PAQR3-MUT i T24 celler. Feilstolpene er utledet fra tredoble expriments. (C) QRT-PCR analyse av PAQR3 mRNA uttrykk i T24 celler etter behandling med Mir-137 etterligner eller rykke ut eller ikke transfeksjon. Uttrykket av PAQR3 ble normalisert til GAPDH. (D) Western blot analyse av PAQR3 uttrykk i T24 celler transfektert med Mir-137 etterligner eller rykke ut eller ikke transfeksjon. GAPDH ble også gjenkjent som en lasting kontroll.
Restaurert uttrykk for PAQR3 delvis reddet MIR-137-økt celleproliferasjon og invasjon
Vi først analysert funksjon PAQR3 i blæren kreftceller . Som vist på fig. 5A, transfeksjon av små interfererende RNA mot PAQR3 inn T24 celler førte til dramatisk redusert PAQR3 protein uttrykk. Stanse av PAQR3 betydelig forbedret spredning av blærekreft celler (fig. 5B), som phenocopied effekten av MIR-137 på spredning av blæren kreftceller. Co-transfeksjon av en konstruksjon som uttrykker PAQR3 og MIR-137 i T24 celler førte til restaurering av PAQR3 uttrykk, noe som bekreftes av Western blot (Fig. 5C). Denne restaureringen av PAQR3 vesentlig hemmet spredning og invasive egenskapene til blæren kreftceller. Enda viktigere, fant vi at restaureringen av PAQR3 kunne gi en betydelig reversere spredning og invasjon fremmet av MIR-137 (fig. 5D og 5E). Oppsummert indikerer disse data at inhibering av PAQR3 ekspresjon av MIR-137 er ansvarlig, i det minste delvis, for å fremme effekten av MIR-137 på celleproliferasjon og invasjon i human blærekreft.
(A) Western blot analyse viste at transfeksjon av små interfererende RNA mot PAQR3 inn i T24-celler førte til dramatisk redusert PAQR3 proteinekspresjon. GAPDH ble også gjenkjent som en lasting kontroll. (B) stanse av PAQR3 betydelig forbedret spredning av blæren kreftceller. Veksten indeksen som vurderes på 0, 24, 48 og 72 timer. (C) Western blot analyse av PAQR3 i T24 celler co-transfektert med enten Mir-137 etterligne eller krafse og 2,0 mikrogram pCDNA- PAQR3 eller pcDNA tom vektor. GAPDH ble også gjenkjent som en lasting kontroll. (d) Cellevekstkurver i T24-celler transfektert med forskjellige kombinasjoner på 0, 24, 48 og 72 timer. (E) Transwell analyse av T24 celler behandlet med forskjellige kombinasjoner. Den relative forholdet mellom invasive celler per felt er vist til høyre. * P 0,05, ** p 0,01, *** p. 0,001
Diskusjoner
I løpet av de siste tiårene, mirnas har dukket opp som viktige regulatorer involvert i ulike biologiske prosesser slik som transkripsjonsregulering, celledifferensiering og tumorigenesis [31]. Globalt avvik miRNA uttrykket profiler av svulster har gitt verdifull innsikt i de molekylære veier av onkogenese [32]. Som en av de mest fremtredende mirnas innblandet i tumorgenese, er MIR-137 presentert med en kontroversiell rolle i løpet av tumorprogresjon [33]. MiR-137 ble funnet å bli redusert i mange humane kreftformer, inkludert magekreft, glioblastom og brystkreft [24], [25], [34]. Den eksakte rolle MIR-137 i blærekreft var fortsatt uklart selv om tumor-undertrykke funksjon har vært innblandet [29]. Dermed vår nåværende studie skal avklare uttrykk og biologisk funksjon av MIR-137 i blærekreft. I motsetning til resultatene av Shimuzu et al. [29], vår studie viste at MIR-137 var ofte oppregulert i blærekreftcellelinjer og vev sammenlignet med normal blære cellelinje og vev. Basert på disse funnene, hypotese vi at MIR-137 kan være et potensielt onkogen i blærekreft. Som forventet, håndhevet uttrykk for MIR-137 forbedret spredning, migrasjon og invasjon av T24 celler. Årsakene til avvik mellom funnene i denne studien og som av Shimuzu et al. fortsatt uklare, men den etniske bakgrunn av kliniske prøver kan spille en rolle. Videre kan det onkogene funksjon av MIR-137 være spesifikke for blærevevet, siden dens tumor undertrykkende funksjon har blitt mye rapportert i andre typer vev. Våre nåværende funn tyder på at Mir-137 spiller en avgjørende rolle i invasiv og metastatisk potensial av blærekreft, og kan være potensielle diagnostiske og prediktive biomarkører.
Neste, vi adressert den molekylære mekanismen av MIR-137 i å fremme spredning , migrering og invasjon i blærecancerceller. I denne studien, real-time PCR, Western blot og luciferase analysene viste at PAQR3 er et mål på MIR-137. Viktigere, spesifikk PAQR3 knockdown med siRNA phenocopied de migration- og invasjonsfremmende effekter av Mir-137 over-uttrykk. Vi viste også at når MIR-137-uttrykke celler gjenopptatt PAQR3 uttrykk, deres invasjon manglene ble delvis reversert. Derfor tror vi at MIR-137 spiller en rolle i markedsføringen av metastaser i blærekreft, i hvert fall delvis, av downregulating protein uttrykk for PAQR3. PAQR3 tilhører progesteron og AdipoQ reseptor (PAQR) familie og er en syv-trans protein spesifikt ligger på Golgi-apparatet i pattedyrceller [35]. Tidligere studier har vist at PAQR3, også kjent som RKTG (Raf kinase overlapping til Golgi), kan fungere som en romlig regulator av Raf-kinase ved sekvestrering av Raf til Golgi-apparatet [36]. PAQR3 fungerer som en tumor suppressor på grunn av sin hemmende aktivitet på Raf /MEK /ERK signal [37]. Når overuttrykt i humane A375-melanomceller, en human ondartet melanoma cellelinje med B-Raf mutasjon, inhiberer PAQR3 /RKTG ERK-aktivering, celleproliferasjon og transformasjon av celler [37]. Videre sletting av PAQR3 i mus førte til økt forekomst av hud tumorigenesis. PAQR3 /RKTG også kan inhibere celleformering, migrering, spirende og angiogenese av endotelceller, og ekspresjonsnivået av PAQR3 er betydelig nedregulert i kliniske klar-nyrecellekarsinom prøver, med en invers korrelasjon med VEGF-ekspresjon nivå [38]. Videre har tidligere studier indikerte også at PAQR3 har en funksjonell interaksjon med p53 i kreftdannelsen og epitelial-til-mesenchymale overgang [39]. Uttrykket nivået av PAQR3 ble betydelig redusert i kolorektal kreft prøvene sammenlignet med tilstøtende normale vev og uttrykket nivået av PAQR3 ble omvendt assosiert med tumor karakter i kolorektal kreft prøvene [40]. Våre studier har også vist at overekspresjon av PAQR3 kan hemme celleproliferasjon og invasjon. Oppregulering av disse mirnas i kreft kan lette ekspresjonen av PAQR3, som fører til forbedret metastase av kreft.
Som konklusjon, har våre resultater viser at MIR-137 var signifikant oppregulert i blærecancerceller og vev. Tvangs uttrykk for MIR-137 forfremmet blærekreft celleproliferasjon, migrasjon og invasjon gjennom direkte rettet mot PAQR3. Denne romanen MIR-137 /PAQR3 akse kan gi ny innsikt i mekanismene bak tumormetastase, og undertrykkelse av Mir-137 uttrykk kan være en potensiell terapeutisk strategi for behandling av blærekreft i fremtiden.
Støtte Informasjon
Tabell S1.
Clinicopathologic charateristics av pasienter med blærekreft
Doi. 10,1371 /journal.pone.0109734.s001 plakater (docx)
Tabell S2. .
Primer sekvenser
doi: 10,1371 /journal.pone.0109734.s002 plakater (DOC)
tabell S3.
Sjekkliste for MIQE retningslinje
doi:. 10,1371 /journal.pone.0109734.s003 plakater (DOC)
