Abstract
Bakgrunn
Altered uttrykk for miRNA uttrykk bidrar til menneskelig kreftutvikling. Denne studien ble designet for å oppdage avvik miRNA uttrykk som en potensiell biomarkør for tidlig oppdagelse og prognose prediksjon av ikke-småcellet lungekreft (NSCLC).
Metoder
miRNA utvalg ble brukt til å profilere forskjellig uttrykt mirnas og Taqman-baserte kvantitative RT-PCR-analyser ble brukt til å analysere nivået av MIR-29c, MIR-93, og Mir-429 uttrykk hos NSCLC vevsprøver, tilsvarende normale vevsprøver, og serumprøver fra 70 NSCLC pasienter samt i serumprøver fra 48 friske kontroller.
Resultater
nivåer av MIR-29C og MIR-93 uttrykk ble oppregulert i NSCLC vev, mens serumnivåer av MIR-29c ble også oppregulert, men nivåer av serum MIR-429 ble redusert i NSCLC. Videre ble nivåene av Mir-429 uttrykk i NSCLC vev forbundet med de i serumprøver. Mottaker opererer karakteristikk (ROC) kurve analyse viste at ved optimal cut-off point, områdene under ROC-kurven for serumnivåer av MIR-29C og MIR-429 var 0,723 og 0,727, henholdsvis nivåer som er høyere enn for carcinoma embryonale antigen (0,534) i diagnostisering av stadium i NSCLC. I tillegg ble serumnivåer av MIR-429 assosiert med dårlig total overlevelse av NSCLC pasienter. Begge univariate og multivariate analyser viste at serum MIR-429-nivå var en uavhengig prognostisk prediktor for NSCLC.
Konklusjoner
Resultatene fra denne studien tyder på at påvisning av serum MIR-29c og speil 429 uttrykk bør vurderes nærmere som en roman, non-invasiv biomarkør for tidlig NSCLC
Citation. Zhu W, Han J, Chen D, Zhang B, Xu L, Ma H, et al. (2014) Uttrykk for MIR-29C, MIR-93, og MIR-429 som potensielle biomarkører for deteksjon av tidlig stadium Non-Small lungekreft. PLoS ONE 9 (2): e87780. doi: 10,1371 /journal.pone.0087780
Redaktør: Song Guo Zheng, Penn State University, USA
mottatt: 12 november 2013; Godkjent: 01.01.2014; Publisert: 11 februar 2014
Copyright: © 2014 Zhu et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Denne studien ble støttet delvis med tilskudd fra Science Foundation Natural i Zhejiang-provinsen (Y2110960), Science and Technology Bureau of Zhoushan (10137 og 2011C12039), og fra Medisinsk Bureau of Zhejiang-provinsen (2011KYB165). Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
microRNAs (mirnas) er en klasse av små ikke-kodende RNA som kan fungere som endogent RNA interferens å regulere uttrykket av målrettede gener [1] – [3]. Hittil har totalt 1048 mennesker mirnas blitt identifisert og rapportert i RNA-databasen, og dette tallet fortsetter å øke. Noen av disse mirnas har blitt rapportert å være nyttige som potensielle biomarkører for diagnose, prognose, og personlig terapi av humane cancere [1] – [6], på grunn endret ekspresjon av disse mirnas bidrar til human kreftutvikling. For eksempel har avvikende miRNA uttrykket blitt rapportert i lungekreft. En rekke forskere, inkludert oss, har rapportert den potensielle klinisk anvendelse av sirkulerende mirnas (som MIR-1254, MIR-142-3p, MIR-24, MIR-183, MIR-21, MIR-221, MIR-29c, MIR-486, MIR-30d, MIR-1, MIR-499, og MIR-210) [7], [8]. Dermed kan videre undersøkelser av avvikende miRNA uttrykk føre til oppdagelsen av nye miRNA biomarkører for lungekreft.
Lungekreft er den ledende årsak til kreft dødsfall på verdensbasis [9]. Til tross for fremskritt i tidlig oppdagelse og forbedringer i behandling, pasienter med avansert sykdom fortsatt ofte utvikle tilbakevendende sykdom etter lengre radikale resections, og 5-års overlevelse rate er fortsatt bare 5%. Dermed nærmer romanen å effektivt håndtere denne sykdommen på molekylært nivå kunne identifisere pasienter som har en høyere eller lavere risiko for tilbakefall etter operasjonen og gi biomarkører for prediksjon av pasientens overlevelse. I denne forbindelse, har bruken av serum mirnas som potensielle biomarkører for diagnostisering og forutsi prognose av lungekreft blitt rapportert [7], [10]. Faktisk har flere studier identifisert miRNA signaturer som skiller mellom normale og kreft vev for klassifisering av krefttyper og for svulst diagnose og prognose. Det kan også være mulig å benytte miRNA uttrykk som en biomarkør for å overvåke behandling effekt eller forutsi kreft progresjon [11] – [12]. Men til dags dato har de fleste studier fokusert på svulstvev, og endringer i sirkulerende serum mirnas nivåer og forholdet mellom disse endringene og vev ved sykdomsutbruddet fortsatt kontroversielle [7]. Videre har nytten av mange sirkulerende mirnas blitt demonstrert i diagnostisering av NSCLC, men noen sirkulerende mirnas viste diagnostisk verdi for tidlig stadium NSCLC [13], [14]. Imidlertid er ytterligere bekreftelse i ulike populasjoner nødvendig. Derfor, i denne studien, vi analyserte nivåer av tre mirnas (MIR-29C, MIR-93, og MIR-429) i ikke-småcellet lungekreft (NSCLC) vev og sammenlignet dem med de i serumprøver av NSCLC pasienter og sunn kontroller, spesielt, deres uttrykk nivåer i scenen NSCLC pasienter tidlig. I mellomtiden, analyserte vi dataene ved sammenligning med karsinom embryonale antigen (CEA), som er en mye brukt markør for diagnose av NSCLC [15]. Vi undersøkte sammenhengen mellom deres uttrykk og clinicopathological og overlevelsesdata fra NSCLC pasienter.
Materialer og metoder
Etikk erklæringen
Denne studien ble godkjent av etisk Review Committee of Zhoushan Municipal Government of China, og alle biologiske prøver ble oppnådd med pasientenes skriftlig informert samtykke.
Pasientprøver prøver~~POS=HEADCOMP
i denne studien rekrutterte vi 70 pasienter med kirurgisk resected NSCLC og matchet fjerne noncancerous vev fra Zhoushan Hospital, Zhejiang, Kina mellom januar 2008 og mai 2009. Det var 56 mannlige og 14 kvinnelige pasienter med NSCLC, inkludert 34 pasienter yngre enn 60 år og 36 eldre enn 60 år. I mellomtiden, sera fra alle NSCLC pasienter og 48 friske frivillige matchet i henhold til kjønn og alder ble også samlet inn. Ingen av pasientene som deltok i denne studien hadde fått noen cellegift eller strålebehandling før operasjonen. For vevsprøve samling, ved fjerning av de kirurgiske prøver, vev ble umiddelbart transportert til Pathology Laboratory, og prøvene ble anbragt i en kryoampulle, hurtigfrosset i flytende nitrogen i 30 minutter, og lagret ved -80 ° C inntil anvendelse . Alle vevsprøver ble gjennomgått av to patologer, og diagnosen ble gjort i henhold til National Comprehensive Cancer Network (NCCN) kriterier. Det var 34 lunge adenokarsinomer og 36 lunge plateepitelkarsinom, og 46 svulster ble moderat til høyt differensierte, mens 24 var dårlig differensiert. Videre 18 NSCLC hadde en svulst mindre enn 3 cm i størrelse, mens 52 pasienter med tumor som er større enn 3 cm. Lymfeknutemetastaser ble funnet i 32 pasienter, og 36 pasienter hadde stadium I NSCLC og 34 pasienter hadde fase II, III eller IV NSCLC (tabell 1). I tillegg ble serumnivåer av CEA målt ved hjelp chemiluminescence som en del av rutinemessige kliniske tester, og referanseverdi ble kjøpt fra den kliniske database ved Zhoushan Hospital.
RNA isolering og kvantitativ RT-PCR
Total cellulær RNA ble isolert fra 100 mg lungevev eller 600 mL serumprøver ved hjelp av en mirnas isolasjon kit eller Mirvana PARIS RNA isolering kit (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) i henhold til produsentens protokoll. RNA-konsentrasjonen ble bestemt ved anvendelse av et Nanodrop ND-1000 spektrofotometer (Nanodrop Technologies, Wilmington, DE, USA), og RNA-kvalitet ble målt ved anvendelse av en denaturerende 15% polyakrylamidgel. Revers transkripsjonsreaksjon ble utført ved anvendelse av TaqMan mikroRNA Reverse Transcription Kit (Applied Biosystems) i henhold til produsentens instruksjoner i et totalt reaksjonsvolum på 7,5 pl. qPCR ble utført in triplo ved bruk av TaqMan 2 x Universal PCR masterblanding uten AmpErase UNG (Applied Biosystems) i en ABI 7500 Real-Time PCR-system (Applied Biosystems) med følgende betingelser: 95 ° C i 10 minutter, etterfulgt av 40 sykluser av 95 ° C i 15 s og 60 ° C i 1 min. Syklusen terskel (CT) verdiene ble beregnet ved hjelp av SDS 2.0.1 programvare (Applied Biosystems). Mal-frie kontroller for både RT og PCR ble inkludert i hvert eksperiment for å sikre målet spesifikke forsterkning.
De gjennomsnittlige nivåer av miRNA uttrykk i vev og sera ble normalisert i forhold til den gjennomsnittlige mengder U6 snRNA og U48 snRNA ved hjelp av to
-ΔΔCt metoden [16] – [17]. De gjennomsnittlige Ct-verdier for disse fem mirnas ble beregnet eksklusive uteliggere (dvs. replikerer med Ct verdier avviker med mer enn en syklus fra medianen). I tillegg, hvis CtU6, ave og CtU48, ave hver ikke forekomme i løpet av 32 sykluser, ble analysen gjentatt. Prøver med lav U6 eller U48 snRNA nivåer ble ikke ekskludert fra dataanalyser.
Statistisk analyse
Alle statistiske analyser ble utført ved hjelp av GraphPad Prism 5.0-programvaren (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA). Dataene ble analysert ved bruk av homogeniteten av varians. Enveis ANOVA eller Wilcoxon to-utvalg tester ble brukt for å teste for assosiasjoner mellom miRNA uttrykk nivåer og clinicopathological funksjoner av pasientene. En paret utvalgs t-test ble brukt for å sammenligne forskjeller i miRNA uttrykket mellom lungevev og serumprøver. Receiver Operating karakteristiske (ROC) kurver ble generert for å vurdere den diagnostiske nøyaktigheten av hver parameter. Pasient overlevelse ble anslått av Kaplan-Meier-metoden, og den log-rank test ble brukt for å sammenligne overlevelse mellom gruppene. Den Cox hazard regresjonsmodell ble brukt til å analysere risikofaktorer for NSCLC. Alle statistiske tester var tosidig, og en
P
verdi på 0,05 ble ansett som statistisk signifikant.
Resultater
Differensial uttrykk for tre miRNAs i NSCLC vev og pasientsera
Basert på vår miRNA array (Agilent) og validering av data, valgte vi tre mirnas (MIR-29C, MIR-93, og MIR-429) for videre studier i NSCLC prøvene. Vi utførte QRT-PCR-analyse for disse tre mirnas i 70 par av NSCLC og tilsvarende noncancerous lunge vev. Våre data viste at nivåene av MIR-29C og MIR-93 uttrykk ble oppregulert i NSCLC vev sammenlignet med tilsvarende noncancerous lunge vev (
P
= 0,0408 og
P
= 0,0444, henholdsvis), mens MIR-429 nivåer var ikke signifikant forskjellig mellom NSCLC og noncancerous lunge vev (
P
= 0,3903, figur 1A).
A, QRT-PCR påvisning av tre miRNAs i 70 NSCLC tumorer og de tilsvarende normale lungevev.
P
-verdier for MIR-29C, MIR-93, og MIR-429 var 0,0408, 0,0444 og 0,3903, henholdsvis ved hjelp av en paret prøve
t
-test. B, QRT-PCR analyse av serum miRNA nivåer i serumprøver av 70 NSCLC pasienter kontra 48 friske kontroller.
P
-verdier på serum MIR-29C, MIR-93, og MIR-429 var 0,0012, 0,9291 og 0,0001, henholdsvis ved hjelp av en uparet sample t-test. C, D, E, Association of disse miRNA nivåer mellom NSCLC vev og serumprøver. Pearson korrelasjon test viste at Mir-429 uttrykk i serum ble signifikant assosiert med det i NSCLC vev (r = 0,3578,
P
= 0,0024), mens serumnivåer av MIR-29C og MIR-93 var ikke forbundet med de i NSCLC vev (r = -,07877,
P
= 0.5169 og r = 0.1515,
P
= 0.2105, henholdsvis). *
P
0,05 mellom gruppene
Vi deretter undersøkt om disse forskjellene i miRNA uttrykket var tilstede i serumprøver fra disse pasientene.. Vi fant at serum MIR-93 uttrykk var ikke forskjellig mellom NSCLC pasienter og friske kontroller (
P
= 0.3530). Men MIR-29c uttrykk ble betydelig økt serum fra NSCLC pasienter (
P
= 0,0012), og Mir-429 uttrykk ble betydelig redusert (
P
= 0,0001, figur 1B). Serumnivået av Mir-429 uttrykk var signifikant korrelert med at i NSCLC vev (r = 0,3578,
P
= 0,0024, figur 1E), mens serumnivåer av MIR-29C og MIR-93 uttrykk ble ikke assosiert med de i NSCLC vev (r = -,07877,
P
= 0,5169 og r = 0,1515,
P
= 0,2105, henholdsvis figur 1C og D).
foreninger mellom endret miRNA uttrykk og kliniske kjennetegn ved NSCLC
Vi neste undersøkt sammenhengen mellom endrede miRNA uttrykket nivåer (MIR-29c og MIR-93 i NSCLC og MIR-29c og MIR-429 i serum) med clinicopathological egenskaper av NSCLC. Vi fant at økt MIR-93 uttrykk ble sterkt assosiert med NSCLC histologi (
P
= 0,031, Tabell 2), mens serum MIR-29c uttrykk ble assosiert med unormale CEA nivåer (
P
= 0,030, Tabell 2). I motsetning til dette ble ingen andre forbindelser påvises mellom uttrykket nivåer av disse mirnas. Videre plottet vi uttrykk data for MIR-29C og MIR-429 ved hjelp av ROC kurver for å identifisere en cut-off verdi som kan skille lungekreftpasienter fra friske kontroller. ROC-kurve analyse viste at ved den optimale cut-off, serumnivåer av MIR-29c hadde en sensitivitet på 65,7% og en spesifisitet på 74,1% for å skille NSCLC fra friske kontroller med et område under kurven (AUC) på 0,676 (
P
= 0,0004, 95% konfidensintervall [CI]: 0,584 til 0,759, figur 2A). I tillegg er serumnivået av MIR-429 hadde en sensitivitet på 54,3% og en spesifisitet på 81,2% for å skille NSCLC pasienter fra friske kontroller med en AUC på 0,713 (
P
0,0001, 95% KI: 0,623 -0,793, figur 2B). Fordi blodet CEA testen er et mye brukt markør for NSCLC, sammenlignet vi CEA resultatene med miRNA uttrykket nivåer og funnet ut at CEA hadde en AUC på 0,576 (
P
= 0,1493, 95% KI: 0,482 til 0,666, Figur 2C). Men for kombinasjonen av MIR-29c uttrykk og CEA, dataene viste en AUC på 0,712 (
P
0,0001, 95% KI: 0,622 til 0,792); for kombinasjonen av MIR-429 uttrykk og CEA, AUC var 0.707 (
P
= 0,0007, 95% KI: 0,616 til 0,787); og for kombinasjonen av MIR-29c uttrykk og MIR-429 med CEA, AUC var 0,797 (
P
0,0001, 95% KI: 0,713 til 0,865).
A, MIR -29c; B, MIR-429; C, viste CEA ROC kurver og en AUC med diagnostisk makt til å skille NSCLC pasienter fra friske kontroller. D, MIR-29c; E, MIR-429; F, viste CEA ROC kurver og en AUC med diagnostisk makt til å skille stadium I NSCLC pasienter fra friske kontroller.
Videre fant vi også at serumnivåer av MIR-29c hadde en sensitivitet på 50,0% og en spesifisitet på 95,8% for sært stadium i NSCLC fra friske kontroller med en AUC på 0,727 (
P
= 0,0001, 95% KI 0,619 til 0,818, figur 2D). MIR-429 hadde en sensitivitet på 94,4% og en spesifisitet på 41,7% for sært stadium I NSCLC pasienter fra friske kontroller med en AUC på 0,723 (
P
= 0.0001,95% KI 0,615 til 0,815, figur 2E) . CEA hadde en sensitivitet på 66,7% og en spesifisitet på 52,1% for å skille stadium I NSCLC pasienter fra friske kontroller med en AUC på 0,534 (
P
= 0,6040, 95% KI 0,422 til 0,644, figur 2F). I tillegg er kombinasjonen av MIR-29c uttrykk og CEA hadde en AUC på 0,757 (
P
0,0001, 95% KI: 0,651 til 0,844), kombinasjonen av MIR-429 uttrykk og CEA hadde en AUC av 0,659 (
P
= 0,0128, 95% KI: 0,547 til 0,759), og kombinasjonen av MIR-29C uttrykk, Mir-429 uttrykk, og CEA hadde en AUC på 0,833 (
P
0,0001, 95% KI: 0,736 til 0,906)
Sammenhengen mellom serum MIR-429 nivå og overlevelse av NSCLC pasienter
Fordi uttrykket av de tre testede mirnas ble endret i NSCLC vev og serumprøver, vurderes nærmere vi om påvisning av deres nivåer kan forutsi prognose hos NSCLC pasienter. Vi fant at serumnivået av Mir-429 uttrykk ble assosiert med total overlevelse av NSCLC pasienter (
P
= 0,0030 ved hjelp av en Log-rank test, figur 3). Men uttrykket av MIR-29C, MIR-93, og MIR-429 i NSCLC vev og serumnivåer av MIR-29C og MIR-93 var ikke forbundet med total overlevelse av NSCLC pasienter. Den univariate Cox hazard regresjonsanalyse viste at serumnivåer av MIR-429 var en signifikant prognostisk indikator på NSCLC (justert hasardratio = 6,458, 95% KI: 1,409 til 29,593,
P
= 0,016). Den multivariate Cox proporsjonale hazard regresjonsanalyse viste at serumnivåer av MIR-429 var en uavhengig prognostisk prediktor for NSCLC pasienter (hazard ratio = 12,875, 95% KI: 2,295 til 72,230,
P
= 0,004, Tabell 3) .
P
-verdi for overlevelsen av pasienter med høye og lave nivåer av miRNA uttrykket ble beregnet ved bruk av log-rank test. *
P
. 0,05 mellom gruppene
Diskusjoner
I denne studien analyserte vi uttrykket av tre miRNAs, velges basert på våre tidligere miRNA matrise og validering av data, i NSCLC vev og serumprøver for tilknytning clinicopathological og overlevelsesdata fra pasienter. Vi fant ut at MIR-29C og MIR-93 uttrykk ble oppregulert i NSCLC vev sammenlignet med tilsvarende noncancerous lunge vev. I tillegg ble serumnivåer av MIR-29c betydelig øket og serumnivåer av MIR-429 ble signifikant redusert i fase I NSCLC sammenlignet med nivåene i 48 friske kontroller. Videre fant vi at lavere serum MIR-429 nivåer var assosiert med dårlig total overlevelse av NSCLC pasienter. De univariate og multivariate analyser viste at serumnivået av MIR-429 var en uavhengig prediktor for total overlevelse av NSCLC pasienter. Vår nåværende data tyder på at påvisning av serum MIR-29C og Mir-429 uttrykk bør vurderes nærmere som en roman non-invasiv biomarkør for tidlig stadium av NSCLC.
Ja, til dags dato, et stort antall studier har viste at endret ekspresjon av spesifikke mirnas spiller en viktig rolle i human tumorgenese grunn av funksjonene til disse mirnas som gene undertrykkere eller onkogener [17] – [19]. Således påvisning av avvikende miRNA ekspresjonsnivåer kan brukes for tidlig diagnose av kreft hos mennesker eller forutsigelse av prognose fordi mirnas er mer stabile og resistente overfor RNase A fordøyelse og andre barske forhold enn det tradisjonelle proteinmarkører [7], [10], [ ,,,0],17], [20]. For eksempel, Chen
et al product: [10] har vist at mirnas er stabile i sirkulerende serum og kan tjene som potensielle diagnostiske markører for lungekreft. Hu
et al product: [7] rapportert at fire mirnas er uavhengige prediktorer for total overlevelse i lungekreftpasienter. Le og kolleger [20] viste at serumnivåer mirnas er forskjellige i pre- og postoperative lungekreft prøver og at disse mirnas kan potensielt brukes som biomarkører for tilbakefall av sykdommen etter operasjonen. Imidlertid har bare noen få studier rettet mot diagnostiske rolle mirnas i tidlig stadium NSCLC [13], [14]. I denne studien analyserte vi uttrykket av tre miRNAs i NSCLC vev og serumprøver for deres potensielle verdi i tidlig diagnose og prognose av NSCLC pasienter. Våre data viste at nivåene av MIR-29C og MIR-93 uttrykk ble oppregulert i NSCLC vev sammenlignet med tilsvarende noncancerous lunge vev. Videre ROC-data viste at AUC for MIR-29C og MIR-429 var 0,723 og 0,727, respektivt, og disse verdiene var betydelig høyere enn det for CEA (0,534), i trinn I NSCLC, tyder disse mirnas kunne brukes til tidlig diagnose av NSCLC. CEA er en mye brukt biomarkør i diagnostisering NSCLC og ble valgt som en positiv kontroll [15]. Faktisk Heegaard
et al product: [8] viste at uttrykket av MIR-29c ble betydelig økt i 220 scene NSCLC pasienter tidlig sammenlignet med 220 matchede kontroller. I andre studier ble MIR-93 ekspresjon funnet å fremme tumor angiogenese og metastase ved å undertrykke stor tumor suppressor homologi to uttrykk [21] – [22]. Imidlertid er MIR-429 et medlem av MIR-200 familien som tidligere ble vist å hemme epithelial-til-mesenchymale overgang ved å regulere E-cadherin, ZEB1, og SIP1 uttrykk [23] – [25]. Ingen studier har ennå avslørt sin rolle i diagnose og prognose av NSCLC. I denne studien har vi for første gang viste at uttrykket av MIR-429 i serum ble nedregulert i NSCLC pasienter sammenlignet med friske kontroller, og at lavere Mir-429 uttrykk var assosiert med dårlig total overlevelse av NSCLC pasienter, noe som tyder på MIR-429 uttrykket er en uavhengig prognostisk indikator for NSCLC. I tillegg fant vi at serumnivåer av MIR-429 var signifikant assosiert med Mir-429 uttrykk hos NSCLC vev, noe som førte til hypotesen om at kreftceller kan benytte mirnas å transportere genetisk informasjon til de omkringliggende eller fjerne celler og dermed fremme tumorvekst og progresjon [26]. I vår forrige undersøkelse, rapporterte vi at serum og kreft nivåer av MIR-96 var assosiert [18], som støtter forestillingen om at noen mirnas kan skilles fra svulstvev og fremme kreft progresjon, som også er i samsvar med rapporter fra Mitchell
et al product: [17] og Hu
et al product: [7].
Flere studier har vist at påvisning av serum miRNAs kan være spesielt nyttig for den tidligere diagnostisering av klinisk asymptomatiske kreft [ ,,,0],27] – [29]. For eksempel, i tidligere lungekreft studier nivåer av MIR-1254, MIR-574-5p, MIR-486, MIR-30d, MIR-1 og MIR-499 uttrykk ble betydelig dysregulerte i tidlig stadium lungekreft [7] , [30]. Chen
et al product: [31] demonstrert gjennom profilering at 10 serum mirnas kan tjene som nye ikke-invasive biomarkører for lungekreft diagnose. Keller
et al product: [32] også foreslått at det å utvikle lungekreft kan være påvisbare år før diagnose gjennom en bestemt miRNA signatur og at denne signaturen endringer under svulst utvikling. Delvis i samsvar med resultatene av disse studiene, er resultatene av våre studien demonstrere nytten av de tre testede mirnas, som var mer følsomme enn CEA for å detektere stadium I NSCLC. Men våre nåværende data er proof-of-prinsippet, og videre prospektiv studie med et større utvalg vil kontrollere om påvisning av disse miRNAs er nyttig for tidlig diagnose av stadium I NSCLC og overlevelse prediksjon i NSCLC.
Vi har funnet forskjeller i ekspresjon av tre mirnas mellom NSCLC vev og tilhørende noncancerous lungevev. Viktigere, identifiserte vi MIR-29C og MIR-429 som dysregulerte i sirkulerende serumprøver fra pasienter med tidlig stadium NSCLC, og uttrykket av disse miRNAs var mer følsomme enn serum CEA nivåer i skille NSCLC pasienter fra friske kontroller. Videre har vi også identifisert redusert serum Mir-429 uttrykk som en uavhengig prognostisk biomarkør for NSCLC. Den kliniske verdien av de tre testede mirnas i diagnose og prognose av NSCLC garanterer videre undersøkelse i større kohorter.
