Abstract
Bakgrunn
En femtedel av pasienter med tilsynelatende «kureres» bukspyttkjertel ductal adenokarsinom (PDA) opplever en tidlig tilbakefall og død, mottar ingen definerbar dra nytte av en større operasjon. Noen pasienter med avansert stadium svulster blir ansett som «unresectable» av konvensjonelle staging kriterier (f.eks levermetastaser), men likevel fremgang sakte. Effektive biomarkører som lagdelt PDA basert på biologisk atferd er nødvendig. For å hjelpe forskerne å sortere gjennom labyrinten av biomarkør data, et kompendium av ~2500 publiserte kandidat biomarkører i PDA ble kompilert (PLoS Med 2009. 6 (4) s. E1000046).
Metoder og funn
Building på dette kompendiet, bygget vi en
overlevelse vev microarray
(kalt e-TMA) består av kortsiktig (kreftspesifikk død 12 måneder, n = 58) og langtidsoverlevende (mer enn 30 måneder, n = 79) som gjennomgikk reseksjon for PDA (total, n = 137). S-TMA fungerer som et biologisk filter for å identifisere bona fide prognostiske markører assosiert med overlevelse gruppe ytterlig (minst 18 måneder separate overlevelsesgrupper). Basert på en streng utvelgelsesprosess, ble 13 antatte PDA biomarkører identifisert fra det offentlige biomarkør depotet. Kandidater ble testet mot den s-TMA ved immunhistokjemi for å identifisere de beste markører for tumorbiologi. I en multivariat modell, MUC1 (odds ratio, OR = 28.95, 3+ vs negative uttrykk, p = 0,004) og MSLN (OR = 12,47, 3+ vs negative uttrykk, p = 0,01) var svært forutsigbare for tidlig kreft spesifikk død. Til sammenligning patologiske faktorer (størrelse, lymfeknutemetastaser, reseksjon margin status og klasse) hadde ORS under tre, og ingen nådde statistisk signifikans. ROC-kurver ble brukt til å sammenligne de fire patologiske prognostiske funksjoner (ROC areal = 0,70) til tre univariate molekylære prediktorer (MUC1, MSLN, MUC2) for å overleve gruppe (ROC areal = 0,80, p = 0,07).
Konklusjoner
MUC1 og MSLN var overlegen til patologiske funksjoner og andre mulige biomarkører som forutsi overlevelse gruppe. Molekylære analyser sammenligne kreftformer fra korte og lange overlevende er en effektiv strategi for å skjerme biomarkører og prioritere kandidat kreftgener for diagnostiske og terapeutiske studier
Citation:. Winter JM, Tang LH, Klimstra DS, Brennan MF, Brody JR, Rocha FG, et al. (2012) A Novel Survival-Based Tissue microarray av kreft i bukspyttkjertelen validerer MUC1 og Mesothelin som biomarkører. PLoS ONE syv (7): e40157. doi: 10,1371 /journal.pone.0040157
Redaktør: Frederic Andre, Aix-Marseille Universitet, Frankrike
mottatt: 14 mars 2012; Godkjent: 01.06.2012; Publisert: 06.07.2012
Copyright: © 2012 Winter et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Fond studien ble hentet fra U01 CA152653, PI Allen. I tillegg ble midler gitt av Marshall og Therese Sonenshine Foundation. Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
pankreatisk duktus adenokarsinom (PDA) er typisk aggressive forhold til de fleste andre kreftformer, sykdommen består av et spekter av biologiske fenotyper. Omtrent 20% av pasientene som gjennomgår reseksjon vil leve i minst 5 år, og en tilsvarende prosentdel av pasientene vil gjenta seg tidlig etter reseksjon og dø av sykdommen i løpet av et år [1] – [4]. På det genomiske nivå, får hver PDA en unik konstellasjon av somatiske mutasjoner [5]. Molecular mangfold på RNA og protein nivå er enda mer komplisert. Til tross for den genotypiske og fenotypiske mangfoldet i PDA, er det ingen pålitelige eller klinisk relevante prognostiske biomarkører som stratifisere sykdommen basert på spådd utfallet.
Patologi rapportene inneholder grunnleggende informasjon om scenen og karakteren av svulsten, og i dag gir den beste tilgjengelige prognostisk informasjon. Konvensjonelle patologiske funksjoner forblir den prognostiske gullstandarden (f.eks lymfeknute status og histologisk grad). Men på tvers av flere store studier, justerte hazard ratio for patologiske funksjoner er under to [6] – [8]. Tilsvarende, i en validert bukspyttkjertelkreft nomogram, uønskede patologiske funksjoner bidrar mindre enn 10% for 3-års overlevelses forutsigelser [9]. Serum CA19-9 er likt begrenset som en prognostisk markør [10] – [12]. Prognostisk informasjon med en slik minimal prediktiv verdi kan ikke pålitelig informere behandling beslutninger. Videre er et komplett sett av patologiske data er kun tilgjengelig for pasienter med resected kreft, som utgjør et mindretall av pasienter med PDA.
Forbedret prognostisk informasjon er en prioritet for kreftforskning. Først informerer nøyaktig prognose diskusjoner mellom onkologer og pasienter om naturhistorie for kreft i bukspyttkjertelen. For det andre kan de opplysninger veilede behandling beslutninger med konsekvenser for både livskvalitet og kreft-relaterte utfall. De mest biologisk aggressive PDA (slik som de som går igjen snart etter reseksjon) er best behandles først med systemisk behandling, i motsetning til en større operasjon. Bukspyttkjertelen kirurgi forsinkelser systemisk behandling med minimum 2 måneder og utsetter pasienten for betydelig operativ risiko med liten forventet nytte. På den annen side, kan pasienter med lat kreft med oligometastatic sykdom nytte av en aggressiv kirurgisk tilnærming, som har blitt standard vare i utvalgte pasienter med metastatisk kolorektalcancer [13]. Tredje, prognostiske biomarkører gi mekanistiske innsikt i kreftutvikling. Fjerde, de fungerer som molekylære mål for nye behandlingsstrategier for eksempel vaksine [14], antistoff [15], og promoter-drevet genterapi [16].
Høye konsekvensutredninger basert på hundrevis av pasientprøver har bedret prognostiske evner i flere krefttyper (for eksempel lunge, prostata, tykktarm og bryst) [17] – [20]. Studier av lignende størrelse og omfang har vist seg vanskelig i bukspyttkjertelkreft på grunn av mindre tilgjengelig vev for undersøkelse og mindre biologisk heterogenitet mellom svulster. Kanskje den mest informative prognostisk studien til i PDA identifisert et panel av 6 prognostiske markører basert på genekspresjon forskjeller mellom lokaliserte PDA og obduksjons prøver (n = 30) [21]. Begrunnelsen bak studie var at de to studiegruppene representert ulike endene av PDA ytterpunktene. Faktisk ble gruppene faktisk utmerker seg ved sykdom trinn (dvs. tidlig vs sent), i motsetning til biologisk oppførsel (dvs. aggressiv vs lat). Den lokaliserte gruppen faktisk hadde en median overlevelse på bare 9 måneder, som regnes som en kort overlevelse perioden etter reseksjon [6].
I denne studien brukte vi immunhistokjemi å avhøre en dikotom sett resected PDAer ( n = 137) består utelukkende av aggressive (kreft-spesifikke overlevelse 12 måneder) og relativt mindre aggressive (kreftspesifikk overlevelse 30 måneder) kreft, for sann prediktor for overlevelse. Et panel av 13 lovende PDA biomarkører ble valgt fra tusenvis av publiserte PDA kandidat biomarkører ved hjelp av en streng utvelgelse strategi (beskrevet i detalj nedenfor), fra en offentlig samling av PDA biomarkører (Figur 1) [22]. Ved hjelp av denne tilnærmingen, nedsatte vi 11 antatte PDA biomarkører som prognostiske markører. Men to proteiner, mesothelin (MSLN) og slimstoff 1, celleoverflate forbundet (MUC1), var robust prediktor for overlevelse gruppe og overgikk vanlige patologiske funksjoner som prognostiske faktorer. I denne studien viste vi nytten av en storstilt, høy gjennomstrømning immunhistokjemi (IHC) basert-analysen av PDA på overlevelse ytterligheter for å identifisere bona fide biomarkører for aggressiv kreft biologi.
metoder
Pasienter
Denne studien ble godkjent av Memorial Sloan-Kettering Cancer Center (MSKCC) institusjon vurdering bord. Pasientene ble inkludert dersom de gjennomgikk en bukspyttkjertel reseksjon for invasiv rørformet type (vanlig) duktalt adenokarsinom (PDA) etter år 2000, og enten døde av sykdommen i løpet av ett år etter reseksjon (kort overlevelse) eller overlevd minst 30 måneder (lang overlevelse) . De spesifikke overlevelses grenser ble valgt av to grunner: For det første, under dannelse av grupper som var tilstrekkelig drevet for analyse, men hadde sammenlignbare prøvestørrelsene til hverandre; andre, slik at det tidsintervallet mellom de to overlevelsesgrupper (minst 1,5 år i denne studien) understreket tumorbiologi løpet behandlingsrelaterte faktorer som bestemmer overlevelse. For eksempel gir adjuvant behandling en overlevelsesgevinst på om lag tre måneder for PDA [23], og bør derfor ikke diktere overlevelsesgrupper som definert her, bortsett fra i sjeldne tilfeller. Tilsvarende utvinning fra kirurgi er variabel, men pasienter som overlever pankreas reseksjon generelt vende tilbake til sitt preoperativ baseline, eller lider av sykdomsrelaterte symptomer [24]. Registreringer av hver pasient på kort sikt overleve gruppe ble omhyggelig gjennomgått, og bare pasienter som døde av kreft i bukspyttkjertelen (og ikke komplikasjoner fra kirurgi) ble inkludert i studien. Pasienter med invasiv kreft som følge av en intraductal papillær mucinous svulst, kolloid karsinom, acinar cellekreft, og andre mindre vanlige varianter av adenokarsinom ble ekskludert.
Clinicopathologic Informasjon
Clinicopathologic informasjonen ble hentet fra institusjonelle bukspyttkjertelen svulst database og fra elektroniske pasientjournaler. Relevante kliniske variabler inkludert postoperativ kjemoterapi, strålebehandling, og pasientens overlevelse. Patologiske data inkludert lymfeknute status (positiv vs negativ), tumor differensiering (dårlig vs. moderat /godt), størrelse (≥3 cm vs. 3 cm), og reseksjon margin status (positiv vs negativ). Mikroskopisk sykdom i bukspyttkjertelen halsen, gallegang, tolvfingertarmen, og uncinate marginene ble kategorisert som positive.
Tissue Forberedelse
TMA ble konstruert fra vev kjerner hentet fra formalin -Fast, parafin innebygd vevsblokker i 151 pasientprøver. I alle tilfeller ble vevsprøver avledet fra resekterte primære ductal adenokarsinomer i bukspyttkjertelen. Teknikeren plassert prøvene på TMA blindt at IHC tolkning av studiesøkerne var objektivt. Den TMA ble konstruert som følger: en representativ blokk av tumoren ble oppnådd, og en tilsvarende H 10% merkede celler), 1+ (11-25%) , 2 + (26% -75%), 3+ (mer enn 75%). En gjennomsnittlig poengsum ble registrert for hver tre eksemplarer sett. I alt 14 prøver hadde utilstrekkelig neoplastisk cellularity for IHC analyse og ble ekskludert, noe som ga 137 prøver med tilstrekkelig vev for alle testede antistoffer.
Statistical Analysis
Analysen ble utført ved hjelp av intercooler Stata 8.2. Kategoriske variabler ble testet ved Fishers eksakte test, ble kontinuerlige variabler ved Wilcoxon rank sum test, og standard logistisk regresjon utført for multivariabel testing. Kontinuerlige variabler ble testet ved hjelp av rang sum test. En sammenligning av multivariate regresjonsmodeller ble utført for å identifisere den beste prognostiske modellen ved hjelp av mottakeren opererer karakteristisk analyse og den tilhørende Harrel C-indeks (også referert til som arealet under kurven eller ROC-området). I den foreliggende analyse, C-indeksen måler hvor godt en bestemt multivariat modell av prediktorer diskriminerer mellom kortsiktige og langsiktige overlevelse grupper. Verdiene varierte mellom 0 og 1. Verdien 0,5 indikerer ingen prediksjonsevne (tilfeldig prediksjon) og fremstår som en diagonal linje på en ROC graf, mens verdier over 0,5 indikerer god forutsigbarhet, og vises som krumlinjet tomter over diagonalen. Når to ROC kurver ikke krysser hverandre, den ene med en høyere C-indeksen dominerer over den andre. All statistikk ble tosidige med ap verdi. 0,05 indikerer statistisk signifikans
Resultater
Konvensjonell Pathologic Funksjoner
Det var 79 (58%) pasienter i lang begrepet overlevende gruppe og 58 (42%) på kort sikt overlevende gruppe. Konvensjonelle patologiske funksjoner (lymfeknute status, histologisk grad, størrelse, og reseksjon margin status) og pasient variabler (alder, kjønn, postoperativ liggetid, og adjuvant behandling) ble analysert som predikator for overlevelse gruppe (tabell 1). Ingen av de pasientrelaterte faktorer korrelerte med overlevelse. Av de patologiske variablene, ble positive lymfeknuter status (p = 0,02), dårlig differensiering (p = 0,003), og en tumorstørrelse større enn 3 cm (p = 0,02) i forbindelse med tidlig cancer-spesifikk død i den ujusterte univariate analysen.
den prognostiske nøyaktigheten av tre ulike modeller, som anslått av Harrell C-indeksen, ble sammenlignet, fremstilt grafisk og i tabellform (figur 4). Modellen som inkluderte de tre biomarkører (MUC1, MSLN, og MUC2) var overlegen den modellen inkludert fire vanlige patologiske funksjoner (lymfeknute status, histologisk grad, tumorstørrelse og reseksjon margin status), selv om forskjellen bare savnet statistisk signifikans ( p = 0,07). Den kombinerte modellen med biomarkører og patologiske funksjoner utføres best (p = 0,0001).
Biomarkører
Expression mønstre av 13 kandidat prognostiske markører (se Metoder og figur 1 for detaljer om biomarkør utvalg strategi) i de to gruppene overlevelse ble testet og sammenlignet. De univariate Resultatene er gitt i tabell 2. Av 13 kandidatgener, bare MUC1, MSLN, og MUC2 hadde statistisk forskjellige uttrykk mønstre mellom grupper. En utvikling i retning av betydning ble observert med SMAD4 tap (p = 0,09). Representative lysbilder merket med MUC1, MSLN, og MUC2 vises i Figur 2.
MUC1
En sterk sammenheng ble observert mellom økt MUC1 protein uttrykk og kort overlevelse (p 0,0001). I den totale kohorten, 15% av pasientene hadde en IHC score på 0, 23% hadde 1+, 33% hadde 2+, og 30% hadde 3+. Andelen pasienter som var i den korte overlevende gruppen på hver separate IHC stillingen økt lineært (helling av lineær regresjon = 0,21, p = 0,002). Spesielt, 5% var i det korte overlevelse gruppe med en IHC score på 0, 29% med 1 +, 49% med 2+, og 68% med 3+ (figur 3A). Den negative prediktive verdien var høy (95%), som 19 av 20 pasienter med fraværende MUC1 uttrykk i denne kohorten levd mer enn 30 måneder.
MSLN
I forhold til MUC1 uttrykk, mønster av MSLN uttrykk i total kohorten var litt vektet mot lavere IHC score: 63% av pasientene hadde 2+ eller 3+ MUC1 merking mens 48% hadde sammenlign MSLN merking (p = 0,02). Men som MUC1, var det en sterk sammenheng mellom MSLN uttrykk og tidlig kreftspesifikk dødelighet (p 0,0001). Igjen ble det observert en lineær sammenheng mellom IHC stillingen og andelen av pasienter i dårlig overlevelse gruppe (helningen av lineær regresjon = 0,20, p = 0,02). I de ulike IHC resultater kategorier, var prosentandelen av pasienter som ikke var i den korte overlevelse var som følger: 20% av pasientene med et IHC score på 0, 35% med 1 +, 49% med 2+, og 81% med 3+ (Figur 3B).
MUC2
MUC2 uttrykk var assosiert med lang overlevelse i motsetning til MUC1 og MSLN (p = 0,03). MUC2 uttrykk var uvanlig samlet (15%) i PDA. Kortsiktige overlevende uttrykt MUC2 på bare 7% av tilfellene. Langsiktige overlevende uttrykt MUC2 i en større andel, selv om uttrykket var fortsatt mindre vanlig (22% av tilfellene).
multivariat analyse
En multivariat logistisk regresjonsanalyse ble utført som inkluderte betydelige univariate biomarkør prediktorer overlevelse (MUC1, MSLN, og MUC2) samt de fire vanligste rapporterte patologiske funksjoner (Tabell 3). MUC1 og MSLN var svært viktig i den justerte modellen, mens MUC2 ikke var. I forhold til mangler uttrykk, odds ratio forbundet med inkrementell MSLN uttrykk var 1,7 (IHC poengsum = 1+), 2,6 (IHC poengsum = 2+) og 12,5 (IHC poengsum = 3+). For MUC1, de odds ratio var 10,1 (IHC poengsum = 1+), 11,9 (IHC poengsum = 2+) og 29,0 (IHC poengsum = 3+). De sammensatte p-verdier for MSLN og MUC1 var p = 0,01 og p = 0,004, respektivt. Ingen av de vanlige patologiske trekk var statistisk signifikant i den multivariate modell. For å teste om de høye prognostiske verdier av MUC1 og MSLN var bare en gjenstand av en multi-lagdelt sammenligning (IHC score til 0 til 3+), den multivariate modellen ble gjentatt etter kategorisere lymfeknutemetastaser i en tilsvarende lagdelt mote (negativ, en eller ≥2 lymfeknutemetastaser). Justert odds ratio for de relevante biomarkører var uendret; flere lymfeknutemetastaser spådd dårlig overlevelse med en odds ratio på bare 3,9 (p = 0,02).
Diskusjoner
Tidlig kreft tilbakefall og dødelighet etter pankreas reseksjon (innen ett år) er fortsatt nedslående opplevelser for klinikere. I slike tilfeller har pasienter med tilsynelatende «resectable» sykdom har store reseksjoner med «kurativ hensikt», men ikke motta noen definerbare fordeler, noen ganger på bekostning av betydelig sykelighet eller dødelighet. Vår institusjonelle data tyder dette scenariet oppstår i en femtedel av pasienter som gjennomgår pankreas reseksjon for PDA [30]. På den annen side er det enkelte pasienter med metastatisk sykdom har forholdsvis langsomt voksende kreftformer, og kan ha nytte av metastasectomy eller cytologiske reduksjon. Dette scenariet er ekstremt uvanlig med PDA, men det er presedens for en aggressiv kirurgisk tilnærming i utvalgte pasienter med avansert, men lat sykdom [31]. Dessverre er den foreliggende tilnærming til pasienter med PDA unnlater å integrere biologiske faktorer. På det nåværende tidspunkt, vanlige patologiske funksjoner gir den beste prognostisk informasjon, men er ikke tilstrekkelig pålitelige til å påvirke beslutninger behandling, som denne studien viser.
Studier utformet for å identifisere pålitelige prognostiske markører møte to spesielle utfordringer. Første, ytre bestemmende faktorer for overlevelse som er uavhengig av en svulst molekylære profil forvirre biomarkør analyser. Tenk et scenario der forskjell i total overlevelse mellom to pasienter etter pankreas reseksjon er bare 3 måneder. Overlevelsen forskjellen kan være relatert til pasientens funksjonstilstand, sosiale faktorer, medisinske komorbiditet, kjemoterapi respons, behandling toksisitet, kirurgiske komplikasjoner, eller en rekke andre muligheter. Hver av disse faktorene kan minimalt bidra til pasientens overlevelse, og ville kreve en studie med svært stor statistisk styrke til å fullkarakterisere hver enkelt. Videre er disse overlevelses faktorer som ikke er vanligvis forbundet med biomarkør uttrykk mønstre (kjemoterapi respons og toksisitet kan være unntak). Denne studien minimaliserer støy fra alternative og mindre vesentlige overlevelsesfaktorer ved å utelukke pasienter med middels overlevelse (12-30 måneder). Med unntak av sjeldne tilfeller, ville tumorbiologi forventes å være den viktigste føreren av overlevelse grupper som er definert ved et tidsforskjell av denne størrelsesorden (et minimum på 1,5 år skiller korte og lange overlevende grupper).
Vi identifiserte 20 annen studier i litteraturen som analyserte protein biomarkører ved hjelp TMA av PDA (tabell 4). I motsetning til denne studien, disse TMA-baserte studier inkluderte alle pasienter over overlevelse spekteret, noe som kan tolkes som en positiv studie funksjonen. Ingen av disse studiene identifisert noen biomarkører med klinisk relevans i PDA. Vi foreslår at en overlevelse TMA kan være bedre egnet for biomarkører undersøkelser i PDA, fordi det understreker tumorbiologi. Utvalgsstørrelsen i denne studien sammenlignet med andre TMA studier (øverste kvartil). Viktigst, omfatter denne studien trolig det største antallet pasienter ved de ekstreme overlevelses.
Den andre utfordringen for biomarkør undersøkelser av PDA med IHC er å tenke ut en rasjonell strategi for å velge de beste molekylære kandidatene for studien. Det er omtrent 30.000 humane proteiner, og 10% har blitt rapportert som overexpressed i PDA [22]. IHC analyser er begrenset av mengden tilgjengelig vev (ett antistoff per TMA delen, og omtrent 30-50 snitt per TMA blokk), og dermed en rasjonell kandidat biomarkør utvelgelsesprosess er nødvendig for å velge den mest praktiske og lovende biomarkører for studien. Vanligvis etterforskere designe eksperimentelle biomarkør paneler i henhold til enten forskningsinteresser, en spennende papir, eller et samlende tema for eksempel en felles molekylær vei. Som Tabell 4 viser, tidligere TMA studier i PDA teste et lite antall antistoffer (median 2 biomarkører per studieplass, rekkevidde, 1-18). Bare to studier undersøkte mer enn 4 antistoffer.
Biomarker utvalget i denne studien var basert på den nylig publiserte og sentralisert biomarkør oppbevaringssted for PDA [22]. Byggingen av dette datasettet var en massiv innsats som krevde 7000 persontimer (beløper seg til nesten en persons arbeid per år). Forfatterne identifiserte hver studie i den litteratur som er knyttet et gen eller protein for å PDA, og deretter ordnet indeksen-genet (eller protein), de viktigste assays som er involvert i studien, og den aktuelle referanse. Forfatterne primære mål var å «utvikle et kompendium av potensielle biomarkører som kan være systematisk validert av kreft i bukspyttkjertelen samfunnet» [22]. Sette sin utfordring til handling, analyserte vi dette store datasett ved hjelp av en algoritme (detaljert i figur 1) [22] som plasserte økt betydning eller vekt på antall tidligere rapporter knytte en bestemt biomarkør til PDA. I alt 13 biomarkører ble identifisert ved hjelp av dette valget strategi og tilsvarende antistoffer ble testet mot s-TMA.
IHC analyse viste at 10 av the13 kandidater var ikke-informativ som prognostiske markører i denne studien kohort. Disse negative observasjonene tilveiebringe overbevisende bevis (med unntak av SMAD4 som tapte statistisk signifikans, p = 0,09) at denne gruppen av antatte kreft i bukspyttkjertelen biomarkører er klinisk irrelevant for prognose. I univariate analysen ble MUC1 og MSLN uttrykk forbundet med aggressiv kreft biologi (dvs. kort overlevelse gruppe) og MUC2 uttrykk ble assosiert med gunstige biologi (dvs. lang overlevelse gruppe). Bare MUC1 og MSLN var robuste prognostiske faktorer i den multivariate modellen, justert for vanlige patologiske funksjoner (Tabell 3). Diffuse MUC1 og MSLN uttrykk var svært forutsigbare for kort overlevelse (de odds ratio var henholdsvis 12,47 og 28,95,). Interessant, de fire standardpatologi testene hadde odds ratio under 3, og ingen oppnådde statistisk signifikans i den multivariate modellen. En ROC-analyse ble utført for å beregne prediktiv nøyaktighet på tre ulike multivariate modeller ved å skille korte og lange overlevelsesgrupper (biomarkører bare; patologiske funksjoner bare, og en kombinasjon av biomarkører og patologiske funksjoner). En trend mot overlegen prediktiv nøyaktighet ble observert med panel av molekylære markører (MUC1, MSLN, og MUC2) over vanlige patologiske funksjoner (AUC = 0,81 vs 0,70, p = 0,07). Disse dataene antyder at biomarkører faktisk kan gi mer prognostisk innsikt enn standard prognostiske data inkludert i patologi rapporter.
Denne studien bekrefter MUC1 og MSLN som biomarkører for aggressiv kreft i bukspyttkjertelen biologi. Implikasjonene av disse funnene må tolkes i lys av studiens design, og rollen til disse proteinene som prognostiske markører i den kliniske behandlingen av PDA er fortsatt usikker. Mens hver oncoprotein har vært fokus for over 200 studier i PDA, er det ingen store studier av tumorprøver som er grundig undersøkt dem som prognostiske biomarkører ved hjelp av en sammenlignbar gradert IHC scoring system. Noen tidligere studier har observert overlevelse forskjeller forbundet med høye og lave uttrykker svulster (MUC1 eller MSLN), men er begrenset av små utvalg, fravær av lagdelt IHC scoring systemer, og ujusterte statistikk [32] -. [34] Hotell
Enkelte biomarkører inkludert i studien hadde uttrykk mønstre som avvek fra tidligere rapporter. For eksempel, MSLN uttrykket (1 + eller større) ble observert hos 71% av pasientene med PDA i denne studien (sammenlignet med 85-100% i tidligere studier [32], [35]), og MUC4 uttrykket (1+ eller større) ble observert i 55% (i forhold til 90% i tidligere studier [36], [37]). Forskjeller mellom denne studien og tidligere som kan være relatert til utvalgsstørrelsen variasjon (tidligere studier var mindre) og pasientens valg (denne studien er beriket med pasienter på ytterpunktene overlevelse). Vi er i ferd med å validere resultatene av denne undersøkelsen i et stort datasett som omfatter pasienter i hele spekteret overlevelse. I tillegg forskjeller i immunhistokjemiske score er viktig. For eksempel, tidligere studier av MSLN og MUC4 definert positiv merking som fokal antistoffreaktivitet på mer enn 1% av kreftceller [35], [36], mens den foreliggende studien kreves minst 10% av cellene for en IHC score på 1+ .
implikasjonene av denne forskningen utover forbedret prognostisk vurdering av tumorprøver, og derfor nytten av s-TMA strategi er ikke helt avhengig av valideringsstudier med et stort antall uselekterte pasienter. Først biomarkører basert på overlevelses ytterpunktene er nyttig å prioritere kreftgener for diagnostisk og terapeutisk forskning. Siden de mest biologisk aggressive kreftceller er vanligvis ildfast med konvensjonelle midler, står det til grunn at romanen behandlingsmetoder som spesifikt retter aggressive under kloner er spesielt tiltalende og garanterer videre etterforskning. Til støtte for dette konseptet, har NCI identifisert MUC1 og MSLN blant de mest lovende mål for vaksine kreftutvikling, med den tidligere protein oppført i topp tre [38]. En radiomerket monoklonalt antistoff mot MUC1 ble også nylig evaluert i en fase I /II studien, med en planlagt fase III-studie for å følge [39], [40]. Videre har promoter-drevet kreft genterapi som utnytter aktiv MUC1 og MSLN arrangører i ulike krefttyper blitt grundig studert i pre-kliniske kreft modeller bruker virale vektorer [41] – [43]. Vi er for tiden arbeider med en promoter-drevet genterapi tilnærming mot PDA ved hjelp av en ikke-viral, biologisk nedbrytbar polymer vektor for å levere giftige nanopartikler [16].
I tillegg både MUC1 og MSLN er tilstede på celleoverflaten med utskilt isoformer. Således prognostiske markører som disse er potensielt påvises i sera eller utskilte væske.
