Abstract
Innledning
Den byrden av HPV-relatert hode og nakke kreft (HNC) har vært økende i USA og andre utviklede land, men denne trenden har ikke blitt rapportert i Afrika. Målet med studien var å evaluere utbredelsen av HPV-infeksjon i HNC krefttilfeller sett mellom 1990 og 2011 ved tertiær helseinstitusjoner i Nigeria.
Metoder
Vi hentet 149 hode og nakke kreft formalin fast, parafin innebygd vevsprøver diagnostisert mellom 1990 og 2011 fra fire undervisning sykehus i Nigeria. Ett hundre og tjuetre blokker (83%) inneholdt passende HNC for analyse mens DNA-ekstraksjon var vellykket i 60% (90/149). PCR forsterkning var vellykket i 33% (49/149) og Linear Array genotyping for HPV var vellykket i 11% (17/149) av disse tilfellene. Disse var i tumorer fra strupehodet (6), cervikale lymfeknuter (3), nesehulen (2), parotid (1), gane (1), maksillær sinus (1) og kjeven (1). To tilfeller var uspesifikk og ingen var fra orofarynx. Histologisk 41% (7/17) av de med hell genotypede blokkene var plateepitelkarsinom (strupehode 6, sinus maxillaris 1).
Konklusjon
Resultater og
Vi klarte ikke å påvise HPV i noen av HNC prøvene i vår studie. Vårt resultat kan tyde på at det er en lav forekomst av HPV-relatert HNC blant den voksne befolkningen i Nigeria. Våre resultater gir en målestokk å sammenligne tidig forekomst av HPV-relatert HNC i dette samfunnet i fremtiden. Vi hadde betydelige analytiske utfordringer fra mulig dårlig vev behandling og oppfordrer at fremtidige studier bør prospektivt samle inn prøver og sikre høy kvalitet utvalgets behandling
Citation. Oga EA, Schumaker LM, Alabi BS, Obaseki D, Umana A, Bassey IA, et al. (2016) sparsomt med HPV-relaterte hode og nakke kreft (HNC) i Nigeria. PLoS ONE 11 (4): e0152828. doi: 10,1371 /journal.pone.0152828
Redaktør: Scott M. Langevin, University of Cincinnati College of Medicine, USA
mottatt: 29 desember 2015; Godkjent: 03.03.2016; Publisert: 06.04.2016
Copyright: © 2016 Oga et al. Dette er en åpen tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Data Tilgjengelighet:. All relevant data er i papir og dets tilleggsinformasjon filer. Ta kontakt med den aktuelle forfatteren ([email protected]) for ytterligere informasjon
Finansiering: Prosjektet er beskrevet ble støttet av Grant Number D43CA153792-01 (PI – Adebamowo) fra NCI /NIH.. Innholdet er utelukkende ansvaret til forfatterne og representerer ikke nødvendigvis de offisielle visningene av National Cancer Institute eller National Institutes of Health
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
hode og nakke kreft (HNC) er et betydelig folkehelseproblem globalt med hele verden Age Standardisert insidensfrekvens (ASR) på 9,1 per 100.000 innbyggere i henhold til GLOBOCAN 2012 data, 10,7 per 100 000 i USA og 9,0 per 100 000 innbyggere på det afrikanske kontinentet [1]. Mens betegnelsen HNC kunne brukes for å referere til en hvilken som helst kreft som oppstår hvor som helst fra bunnen av hodeskallen til clavicles, konvensjonelt det refererer vanligvis til kreft i munnhulen, oropharynx, nasofarynks, hypofarynx, og strupehodet. Kreft på disse stedene står for 3% av alle krefttilfeller i USA og fire prosent av alle krefttilfeller globalt [1-4].
Risikofaktorer for HNC inkluderer forbruk av alkohol og røyking og deres felles effekten kan være synergistisk [5-7]. Andre risikofaktorer er infeksjon med onkogene virus inkludert Epstein-Barr-virus (EBV), Human Papilloma Virus (HPV), HIV og Herpes simplex virus (HSV); tygging av betel nut, yrkesmessig eksponering for giftstoffer, stråling; kosthold, munnhygiene og genetiske faktorer [8].
Så mye som 25% av alle tilfeller av HNC globalt er knyttet til høy risiko HPV (hrHPV). Vedvarende infeksjon med hrHPV er nå akseptert å være en viktig risikofaktor for utvikling av HNC, nesten utelukkende i orofarynx. Ifølge International Agency for Research on Cancer (IARC), HPV type 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58 og 59 er kreftfremkallende, og er ansvarlig for alle kreft i livmorhalsen og en varierende andel av HNCs [9]. Av alle hrHPV typer innblandet i HNC, HPV 16 alene står for nesten 90% av alle HPV-relaterte orofaryngeal karsinomer, med HPV 18 en fjern andre [1, 9-14]. HPV-relaterte HNC er nå ansett som en egen sykdom enhet med ulike molekylære egenskaper, risikofaktorer, klinisk manifestasjon, behandling og prognose [15-19].
Forekomsten av HNC er økende over hele verden, og det meste av dette opphav skyldes økende utbredelsen av hrHPV infeksjon [15, 20]. hrHPV er svært smittsom og de fleste orale infeksjoner er ryddet innen et år [21], selv om klarering for orale infeksjoner avhenger av flere faktorer som hrHPV type, kjønn, antall oral sex-partnere, alder og røykestatus [22]. Økningen i forekomsten av muntlige hrHPV infeksjoner har vært først og fremst knyttet til endrede seksuell atferd spesielt den stadig mer vanlig praksis for oral sex. Det har vært en teori om at dette er ansvarlig for en økning i forekomst av oral hrHPV infeksjon og hrHPV -relaterte HNC. I tillegg har høye antall oral sex-partnere, flere vaginal sex-partnere, yngre alder ved seksuell debut, anogenitale vorter og forbruk av marihuana vært innblandet i økende forekomsten av HNC [23].
Studier i USA statene har vist at byrden av hrHPV relaterte hode og nakke kreft (HNC) er lavere i afrikanske amerikanere enn hvite amerikanere [24-28], og det meste av den siste økningen i forekomsten har blitt sett i stor grad hvite amerikanere [29, 30]. Få studier har blitt gjort for å kvantifisere byrden av hrHPV relaterte HNC i afrikanere. I denne studien, vurderte vi utbredelsen av hrHPV infeksjon i HNC tilfeller diagnostisert 4 tertiære helsesentre i Nigeria mellom 1990 og 2011.
Metoder
I denne multisentertverrsnittsstudie i Nigeria, HNC vevsprøver fast bruker 10% nøytral bufret formalin (NBF) og innebygd i parafinblokker ble brukt. Vi hentet kliniske data og formalinfiksert, parafin Embedded (FFPE) blokker av ondartede hode og hals svulster diagnostisert mellom 1990 og 2011, fra patologi Avdelinger av 4 tertiær helseinstitusjoner i Nigeria: University of Benin Teaching Hospital (UBTH) og Universitetet i Calabar Teaching Hospital (UCTH) i Sør-Nigeria; blant annet Universitetet i Abuja Teaching Hospital (UATH) og Universitetet i Ilorin Teaching Hospital (UITH) -både i Nord-sentrale Nigeria. Tumor blokkene ble sendt til USA hvor patologer ved University of Maryland Greenebaum Cancer Center anmeldt dem for å bekrefte diagnosen. Etter bekreftelse av histologisk diagnose, tok vi seksjoner fra tumor blokker og ekstrahert DNA fra disse delene ved hjelp QIAamp DNA FFPE Tissue Kit
®. Vi testet for HPV-typer som bruker Roche Linear Array
® HPV Genotyping Test i henhold til produsentens instruksjoner. Etisk godkjenning for studien ble hentet fra National Health forskningsetiske komité for Nigeria (NHREC). Studien brukte anonymiserte data som pasient identifikatorer hadde blitt fjernet før analysen.
Resultater
Av de 149 tumorvev hentes (se tabell 1), de fleste, 123 (83%), var kvalifisert for analyse-av uegnet 26 blokker, 18 blokker hadde ingen identifiserbare svulster, diagnose var usikker for 5 blokker, 2 kvartaler inneholdt livmor vev og en blokk inneholdt en pleomorphic adenom av neseskilleveggen. DNA-ekstraksjon og rensing var vellykket i 60% (90/149) og PCR-amplifisering ble vellykket i 33% (49/149) og lineær oppstilling genotyping var vellykket i 11% (17/149) av disse tilfeller (se tabell 2). Gjennomsnittsalder (SD) av pasientene i prøvene testet for HPV DNA ble 43,3 år (20.27), 10 var menn, seks var kvinner; og gjennomsnittsalder (SD) av vev var 4,0 år (1,54), (Se tabell 3). Ved histologisk vurdering av disse 17 svulster, seks var fra strupehodet, tre fra livmorhalsen lymfeknuter, to fra nesehulen, en spytt, en Palatine, en sinus maxillaris en fra kjeven mens to var uspesifikke hode og nakke kreft (Se tabell 4). Ingen av tumorene var fra oropharynx. Morfologisk, 41% (7/17) av de med hell genotypede blokkene var plateepitelkarsinom (strupehode 6, sinus maxillaris 1). Ingen av kreft ble funnet å være positivt for HPV av enhver type.
Diskusjoner
I denne retrospektive studien av HNC tumor blokker fra 4 henvisning sykehus i Nigeria, fant vi at av de 149 FFPE- blokker tilgjengelige for studier, gjorde vi ikke identifisere noen orofaryngeal kreft; HPV genotyping var vellykket i 17 (11%) tilfeller og ingen av disse var positive for HPV DNA. Vi fant heller ikke finne noen svulst som spesifikt stammer fra orofarynx i dette utvalget. Til tross for studier fra andre deler av verden som tyder på at orofaryngeal kreft står for en stor andel av all HPV-relatert HNC [2, 4], vår Resultatet tyder på at hrHPV relatert HNC ennå ikke har dukket opp som en betydelig helsebelastning i nigerianske befolkningen. En annen studie fra nord-sentrale Nigeria viser at det meste av HNC behandlet på en tertiær helsesenter det var nasofaryngeale karsinom mens orofaryngeal kreft ikke var så vanlig som forventet, og står for bare ca 7% [31]. Andre rapporter viser en tilsvarende mangelen på orofaryngeal karsinom i Nigeria [32-34].
Den lave forekomsten av hrHPV relatert HNC blant nigerianere kan skyldes flere faktorer. hrHPV-relaterte HNC har vært forbundet med utøvelse av oral sex og utbredelsen av denne seksuell atferd har vært økende blant ungdom og unge voksne med en fersk undersøkelse som viser at oral sex praksis, men mye til felles, er mer utbredt i yngre aldersgrupper [35 -37]. I USA studier tyder på at hvite er mye mer sannsynlig å rapportere å ha hatt mer enn 5 oral sex-partnere enn svarte og latinamerikanere av begge kjønn; hvite er også minst 3 ganger mindre sannsynlig enn svarte og latinamerikanere rapportere aldri har hatt oral sex. Følgelig er oral hrHPV infeksjon borgerlig blant hvite i forhold til afrikanske amerikanere og dette kan forklare den høyere prevalens hrHPV relatert HNC i hvite amerikanere [37-39].
Videre praktisering av oral sex synes å være mindre utbredt blant afrikanere enn i amerikanere i alle løp. Studier av ungdom for eksempel, viser at utbredelsen av å ha hatt oralsex for afrikanske ungdom varierer fra 5,4% til 13,3% sammenlignet med 75% i amerikanske ungdom, befolkningsomfattende studier av oral sex atferd i afrikanere viser en forekomst av mindre enn 12% sammenlignet med minst 70% i amerikanere av alle etniske grupper [37, 38, 40-43]. Den relativt lavere forekomst av oral sex praksis blant afrikanere kan være en grunn til at hrHPV -relaterte HNC skjer sjeldnere i denne populasjonen.
Forskjellen i forekomst av hrHPV -relaterte HNC kan også være relatert til genetiske forskjeller mellom afrikanere og hvite amerikanere. Ndiaye
et al product: [44] viste at byrden av HPV-relatert HNC er lavere i afrikansk-amerikanere enn i hvite amerikanere, selv etter kontroll for seksuell atferd og alder selv om dette kan skyldes rest confounding [38 ]. Derfor noen har antydet at det er medfødte forskjeller i host-virus interaksjoner mellom hvite og svarte som kan forklare Konsekvensene av hrHPV infeksjon på etiologi HNC [45]. Det er også antydet at den mikrobiomer kan være en faktor i vedvarende HPV-infeksjon i livmorhalsen, er det mulig at en lignende mekanisme er ved trekk med hensyn til det orale mikrobiomer og oral HPV-infeksjon [46].
Det var en høy forekomst av utilstrekkelige tumorprøver for molekylærbiologi analyse og HPV genotyping i denne studien, som kan reflektere dårlig infrastruktur for svulst patologi i Nigeria. En studie av HNC FFPE- tumor blokker i sørafrikanske svarte med orofaryngeal kreft oppdages HPV DNA i 94,1% av tilfellene [47]. Dette resultatet skiller seg fra tidligere afrikanere studier, inkludert 3 tidligere studier i Sør-Afrika som viser utbredelsen av HPV til 1,4%, 1,5% og 11,5% [48-50]. Videre en studie HNC FFPE svulster fra Senegal, som finnes HPV DNA i bare 3,4% av tilfellene [44]. Det er ingen grunn til å mistenke at hrHPV -relaterte svulster ville være vanskeligere å analysere enn HNC som ikke er forbundet med hrHPV. Dypfryst biopsier ville vike bedre HPV deteksjon priser enn FFPE men logistikken for å skaffe disse typer svulster i Afrika er ganske utfordrende [9]. Andre potensielle utfordringer HPV DNA testing fra FFPE inkluderer barriereeffekt av parafin, DNA tverrbindinger på grunn av formaldehyd og vev fragmentering [51].
Det har vært betydelig variasjon i forekomsten av hrHPV relatert HNC mellom studier som benyttes ulike HPV påvisningsteknikker. Høyere prevalens av HPV har blitt rapportert i HNC når PCR-metoder ble brukt i stedet for
in situ
hybridisering, noe som gjør det enda mer komplisert å basseng resultater fra flere studier [19]. Forskjellige metoder er tilgjengelige og alle har forskjellige nivåer av følsomhet når de anvendes for HPV identifikasjon. Resultatene kan også variere avhengig av anatomiske opprinnelsen til tumor [52, 53].
Vår studie lider av flere begrensninger. Kvaliteten på fiksering var suboptimal i en signifikant andel av tumor blokker og DNA-deteksjon (svulst tilgjengelighet ved DNA-utvinning, rensing, forsterkning og genotyping) var ikke vellykket for mange prøver. Forsøk på å reparere formaldehyd-indusert DNA-skader ikke gir meningsfylt suksess. Fremtidige studier av HNC og hrHPV -relaterte HNC i Nigeria bør gjøres i forkant og behandlet i god kvalitet laboratorier med standard QA /QC prosedyrer for å sikre at de resulterende tumorvev er mottagelig for molekylærbiologiske studier. Vår utvalgsstørrelsen var liten, og dette kan være en refleksjon av den lave forekomsten av HNC i vår befolkning. Mange pasienter kan også presentere sent eller ikke tilstede i det hele tatt til sykehuset og dø før en definitiv diagnose av HNC er laget [54].
I konklusjonen, vi fant ikke noen tilfelle hrHPV relatert HNC i vår prøve. Selv om dette er trolig et resultat av lav forekomst av HPV-relatert HNC, bør våre resultater tolkes med forsiktighet på grunn av lite effektiv utvalgsstørrelse og lav DNA utbytte.
Hjelpemiddel Informasjon
S1 Table. . Datasett
doi: 10,1371 /journal.pone.0152828.s001 plakater (XLSX)
Takk
Vi vil spesielt takke Ms. Yinka Owoade og Mr. Jesse James av instituttet of human Virology Nigeria (IHVN) for deres støtte i å utføre dette arbeidet.
