Abstract
Innledning
Årsakene til eggstokkreft er i stor grad ukjent. En hypotese er at den ineffektive fjerning av blodpropper og fibrin produkter som avsettes i nærheten av eggstokk ved retrograd menstruasjon kan være assosiert med en økt risiko for kreft i eggstokkene. Flere enkeltnukleotidpolymorfi løpet av gener som omfatter det fibrinolytiske system har vist seg å ha funksjonelle effekt på hastigheten av blodpropp degradering. Disse ble ansett for å være kandidat gener i denne studien.
Sikt
Vi studerte genotypen distribusjoner av 12 funksjonelle SNPs av fire gener (TPA, uPA PAI1 og Tafi) blant 775 eggstokkreft tilfeller og 889 kontroller.
Resultater
Ingen signifikante assosiasjoner ble sett mellom noen av de ti SNPs og risiko for eggstokkreft som en helhet, eller i noen histologisk undergruppe.
diskusjon
kimcellelinje kjent funksjonelle varianter av gener i fibrinolytisk system er ikke forbundet med risiko for eggstokkreft
Citation. Bentov Y, Brown TJ, Akbari MR, Royer R, Risch H, Rosen B, et al. (2009) Polymorphic Variasjon av gener i fibrinolytiske system og risiko for eggstokkreft. PLoS ONE 4 (6): e5918. doi: 10,1371 /journal.pone.0005918
Redaktør: Sudhansu Kumar Dey, Cincinnati Children forskningsfond, USA
mottatt: 17 mars 2009; Godkjent: 19 mai 2009; Publisert: 15 juni 2009
Copyright: © 2009 Bentov et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Bentov Y Brown TJ, Shaw PA, Murphy KJ, Casper RF; Association of en PAI-1 genmutasjon og eggstokkreft. Mount Sinai Hospital /University Health Network, Institutt for obstetrikk og gynekologi forskningsfond. Mars 2007. https://www.mountsinai.on.ca/care/womens-and-infants-health-program/womens-and-infants-program-at-mount-sinai-hospital. Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
Selv om årsaken til eggstokkreft er ukjent, ulike risikofaktorer synes å være relatert til reproduksjon, prevensjon og betennelse. Paritet, amming, p-piller og tubal ligation er alle beskyttende. I motsetning til dette, endometriose og talkum er blant de få kjente risikofaktorer. I det hele tatt, disse observasjonene tyder på at faktorer som minsker antallet eggløsningssyklusene er beskyttende og faktorer som øker lokal betennelse kan være kreftfremkallende.
Endometriose er assosiert med en signifikant økt risiko for ovariekreft [1], [ ,,,0],2]. Forekomsten av endometriose hos pasienter med ovarialcancer er 36% for klarcellet karsinom og 19% for endometrioid ovarialcancer. I en studie ble eggstokkreft funnet i 5-10% av ovarian endometriotiske skader [3]. Det antas at retrograd menstruasjon er nødvendig for utvikling av endometriose [4]. Tubal ligation og p-piller forhindre (eller redusere) retrograd menstruasjon og begge er assosiert med en reduksjon i risikoen for eggstokkreft cancser [5] – [8]
Til tross for høy forekomst av retrograd menstruasjon i opp til 90. % av kvinnene [9], [10], er forekomsten av endometriose er estimert til å være i størrelsesorden 7-10% av kvinner i reproduktiv alder. En spekulativ forklaring på dette avviket er at en intakt fibrinolytisk prosess klarner blodpropp og endometrial celler fra bekken strukturer. Vi hypoteser at kvinner med en defekt fibrinolyse system ikke kan fjerne blodpropper effektivt og, som et resultat av dette øker den tid som endometriale celler i menstruasjons blodpropp forbli i kontakt med bekken strukturer. Disse cellene kan muligens implanteres i det peritoneale eller ovarial overflate [11]. Hvis denne hypotesen er riktig, kan det være en sammenheng mellom defekte fibrinolyse og risikoen for ovarial cancer.
fibrinolytiske system omfatter en familie av proteiner som omfatter to plasminogenaktivatorer (urokinase-type plasminogen aktivator (uPA) og tissue-type plasminogen-aktivator (tPA)), den zymogen plasminogen, den aktive formen plasmin, og inhibitor proteiner som plasminogenaktivatorinhibitor type 1 (PAI1) og trombin-aktivert fibrinolyse inhibitor (TAFI).
tPA er den primære formidler av lokale intra fibrinolyse. Genetiske faktorer spiller en rolle i den variant av endotelial t-PA meldingen [12]. Den C.-7351C T-variant (rs2020918) i enhancer område av t-PA-genet er sterkt korrelert med endotel-t-PA-frigjøringshastigheter. Dette SNP er forbundet med en økt risiko for hjerteinfarkt [13].
Forhøyede nivåer av uPA fremmer tumorcellespredning og metastase og er forbundet med forholdsvis dårlig prognose [14]. En funksjonell polymorfisme av
uPA
genet har blitt beskrevet. Dette er en substitusjon av C til t i nukleotidsekvensen av exon 6 som koder kringle domenet som resulterer i å Pro Leu erstatning ved kodon 141 (rs2227564).
PAI1 er en serin protease inhibitor som binder seg til begge plasminogenaktivatorer , t-PA og u-PA, som danner et stabilt kompleks som er fjernet fra sirkulasjonen ved leverceller [15]. Høye nivåer av PAI1 er et vanlig funn i eggstokkreft [16]. PAI1 over-ekspresjon er også assosiert med dårlig overlevelse hos kreftpasienter ovarian [17] – [19]. Videre har det blitt foreslått at PAI1 nivåer er viktig i prognosen for brystkreft og livmorhalskreft [20] – [22]. I kreft transplantasjons modeller, er tumorvekst, invasjon, og angiogenese redusert i PAI1- mangelfull mus [23], [24]. Flere enkelt nukleotid (SNP) i det PAI1-genet har blitt assosiert med en signifikant økning i PAI1 proteinekspresjon [25].
trombin-aktivert fibrinolyse inhibitor (TAFI) er en potent hemmer av fibrinolyse som fjerner karboksyterminale -lysin rester fra delvis degradert fibrin og reduserer plasminogen bindende [26].
In vivo
dyrestudier viser at hemming av TAFI aktivitet ved karboksypeptidase øker trombolyse [27]. Sirkulerende nivåer av TAFI er sterkt styrt av seks polymorfe variasjoner i promoteren og 3’UTR-regionen til TAFI-genet [28].
Vi foreslår at funksjonelle varianter i disse genene kan være relatert til risikoen for kreft i eggstokkene. Målet med denne studien var å finne ut om noen kjente funksjonelle polymorfismer av disse fire genene av fibrinolytisk system er forbundet med økt risiko for invasiv kreft i eggstokkene.
Materialer og metoder
Study befolknings~~POS=TRUNC
Cases ble konstatert gjennom Ontario Kreftregisteret. Alle kvinner nylig diagnostisert med invasiv epitelial eggstokkreft i Ontario, Canada, fra januar 1995 til desember 1999 var kvalifisert. 1694 potensielt kvalifiserte tilfeller 1016 kvinner samtykket og gitt blodprøver for DNA-testing. Det var 775 kvinner for hvem både en DNA-prøve og tilstrekkelig klinisk informasjon var tilgjengelig, og disse er undersåtter av den aktuelle studien. Pasientene ble inndelt i fire etniske grupper av kaukasisk; Fransk-kanadisk, østasiatisk og indisk (tabell 1).
Ett tusen sekstitre kontroller ble valgt fra friske kvinner som deltok en screening klinikk for brønn kvinner på kvinne College Hospital, Toronto, mellom 1996 og 2001. av de kvinnene som ble spurt om å delta i denne studien, ble enige om ca 80%, og gitt en blodprøve og fullført en risikofaktor spørreskjema. Alle forsøkspersonene gitt informert samtykke til genetisk testing. Styrer ikke hadde blitt diagnostisert med kreft. Forsøkspersonene ble bedt om å gi informasjon om deres etniske opprinnelse, herunder opplysninger om fødested av sine fire besteforeldre. 889 av disse friske kvinner som var fra de fire etniske grupper av tilfellene ble inkludert i studien.
Vi analyserte DNA-prøver fra 1664 fag, 775 tilfeller med eggstokkreft og 889 kontroller. Pasienter som er kjent for å bære en BRCA1 eller BRCA2-mutasjon ble ekskludert. Tabell 1 gir demografisk informasjon om sakene og kontroller.
genotypede Varianter
Hver DNA-prøve ble sjekket for totalt 12 SNPs i de fire kandidatgener. Alle disse 12 varianter ble vist å påvirke ekspresjon eller funksjon av deres beslektede gener eller proteiner [13], [25], [28]. Disse variantene inkluderer rs2020918 (C.-7351C T) fra t-Pa-genet; rs2227564 (Pro141Leu) fra uPA genet; rs1799889, rs2227631, rs2227674 og rs6465787 fra PAI1 genet; og rs1926447 (Thr347Ile), rs3581491, rs2146881, rs3742264 (Ala169Thr), rs1087 og rs34813434 fra TAFI genet.
iPLEX kjemi på en MALDI-TOF MassARRAY system (Sequenom Inc., San Diego, CA, USA) var brukes for genotyping de 12 SNPs i åtte reaksjoner. Prosedyrene ble utført i henhold til produsentens standardprotokoll [29].
Statistiske metoder
Avvik på genotypefrekvensene i kontrollene fra de forventet under Hardy Weinberg likevekt (HWE) ble vurdert av χ
2 tester (en grad av frihet). Alle kasus-kontroll sammenligninger ble justert for alder og etnisitet, ved hjelp av multivariate logistisk regresjon og de justerte P-verdier og odds ratio (OR) ble rapportert. Gitt antall sammenligninger i denne studien, en p-verdi på 0,01 ble brukt som kriterium for statistisk signifikans. Sammenhenger mellom eggstokkreft og SNP genotyper ble målt i studien gruppen som helhet og deretter i undergrupper definert ved histologisk type, alder av diagnose og familiens historie. Familiehistorie ble definert som en eller flere første- eller andregradsslektninger med brystkreft under 50 år eller eggstokkreft.
Resultater
Twelve SNPs, som representerer fire gener ble undersøkt i 775 eggstokkreft tilfeller og 889 kontroller. To SNPS i TAF1 (rs1087 og rs34813434) ble ekskludert på grunn av samtalepriser under 90%. Ringeprisene for de andre 10 SNPs var i overkant av 95%, og alle var i Hardy-Weinberg likevekt mellom kontrollene. Genotypene for disse ti SNPs er vist i tabell 2.
For ingen av de 10 studerte SNPs var fordelingen av genotyper vesentlig forskjellig mellom de tilfeller og kontroller (tabell 2). Sub-divisjon av saker basert på alder ved diagnose eller histologisk typen ikke ga noen signifikant sammenheng (data ikke vist).
Diskusjoner
Vi antok at en arvelig defekt i fibrinolytisk veien kunne føre til økt varighet av eksponering av eggstokkene til blodpropper som inneholder epitelceller som stammer fra Mullerian kanalen avsatt av retrograd menstruasjon, og dermed øke risikoen for eggstokkreft. Denne hypotesen var basert på den kjente beskyttende effekten av tubeligatur og p-piller mot eggstokkreft, som hindrer eller reduserer retrograd menstruasjon. I tillegg har tidligere forskning demonstrert en økt aktivitet av inhibitorer av det fibrinolytiske system i eggstokkkreftpasienter. Til tross for det store antallet av prøver og SNPs undersøkte resultatene av denne undersøkelsen var negativ. De eggstokkreft som er sterkest assosiert med endometriose er de klare celle og endometriod subtyper. Spesielt, ikke i noen av disse subgoups var en forening funnet
Økt ekspresjon av flere fibrinolytiske modulatorer har blitt assosiert med øket risiko for utvikling av kreft og dårlig prognose [14] – [24].. Nærmere bestemt PAI1 ble vist å fremme tumorvekst i en doseavhengig og scene-avhengig måte [30]. Dessuten ble de SNP rs1799889 i arrangøren av PAI1 genet vist ved 37 separate studier til utgjør en betydelig allel doseavhengig sammenheng mellom 4G-allel og økt PAI1 protein nivå in vivo. De 4G /4G homozygote har de høyeste nivåene av sirkulerende PAI1 [26].
Sternlicht et al [25] oppdaget en sammenheng mellom PAI1 nivåer og total overlevelse av brystkreft i en studie av 2.539 saker og 1,832 kontroller. Imidlertid ble det PAI1 4G /5G SNP ikke forbundet med brystkreft forekomst, klinisk utfall eller PAI1 uttrykk. Disse forfatterne konkluderte med at kreftassosiert signaler er viktigere enn kimlinje genetisk variasjon i å bestemme ekspresjon av PAI1 i brystkreftpasienter. I vår studie, 4G /4G, 4G /5G og 5G /5G genotypiske distribusjoner var lik i de tilfeller og kontroller.
Vi inkluderte alle SNPs av gener av fibrinolytisk system som ble funnet å være assosiert med en endring i noen av konsentrasjonen av proteinet eller dets funksjon.
Vi har ikke kunnet påvise noen signifikant sammenheng mellom fibrinolysis gen polymorfismer og forekomsten av eggstokkreft i en hvilken som helst histologisk subtype. Dersom det fibrinolytiske reaksjonsveien er involvert i kreft i eggstokkene, gjør risikoen for ikke å bli påvirket av funksjonelle polymorfismer i de sentrale gener. Men gitt den tidligere studier, som rapporterer en mulig rolle for disse enzymene i initiering eller progresjon av kreft, kan det være at variasjon i uttrykket av proteiner i fibrinolytisk systemet forblir relevant for eggstokkreft kreftutvikling.
