Abstract
tiden brukte gnager tumormodeller, inkludert transgene tumormodeller, eller subkutant voksende svulster hos mus, ikke i tilstrekkelig grad representerer klinisk kreft. Vi rapporterer her utvikling av metoder for å oppnå et høyt klinisk nøyaktig endetarmskreft modell. Denne modellen ble etablert ved intrarektal transplantasjon av mus rektale kreftceller, stabilt uttrykker grønt fluorescerende protein (GFP), etterfulgt av forstyrre epitelcellelaget av rektal mukosa ved å dryppe en eddiksyreløsning. Tidlig stadium tumor ble detektert i rektal mukosa ved 6 dager etter transplantasjon. Svulsten ble da invasiv inn i submucosal vev. Svulsten Forekomsten var 100% og mener volum (± SD) var 1232.4 ± 994,7 mm
3 på 4 uker etter transplantasjonen oppdages av fluorescens bildebehandling. Spontan lymfeknutemetastase og lungemetastase ble også funnet ca. 4 uker etter transplantasjon i over 90% av musene. Dette rektal tumormodell nettopp etterligner den naturlige historien til endetarmskreft og kan brukes til å studere tidlig svulst utvikling, metastase, og oppdagelse og evaluering av nye behandlingsformer for denne behandlingsresistent sykdom
Citation. Kishimoto H, Momiyama M, Aki R, Kimura H, Suetsugu A, Bouvet M, et al. (2013) Utvikling av en klinisk-Presis Mouse Model av endetarmskreft. PLoS ONE 8 (11): e79453. doi: 10,1371 /journal.pone.0079453
Redaktør: Matthew, Stanford University, USA
mottatt: 27 august 2013; Godkjent: 01.10.2013; Publisert: 12.11.2013
Copyright: © 2013 Kishimoto et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Dette arbeidet ble støttet delvis med tilskudd fra Unge Forskere (B), Kunnskapsdepartementet, kultur, idrett, vitenskap og teknologi, Japan (HK). Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:. Forfatterne har følgende interesser: Hiroyuki Kishimoto, Masashi Momiyama, Ryoichi Aki, Hiroaki Kimura, Atsushi Suetsugu var tidligere agenter av kreftbekjempende Inc. Robert M. Hoffman er en ikke-lønnet agent av kreftbekjempende Inc. anticancer Inc. markedsfører dyremodeller av kreft. Det er ingen andre konkurrerende interesser. Det finnes ingen patenter, produkter under utvikling eller markedsført produkter å erklære. Dette endrer ikke forfatternes tilslutning til alle PLoS ONE politikk på deling av data og materialer, som beskrevet på nettet i veiledningen for forfatterne.
Innledning
heterotop implantasjon modeller som subkutane kreft implantater i mus har tradisjonelt blitt brukt for å evaluere antitumorbehandling på grunn av deres reproduserbarhet og overvåking av tumordannelse. Men ikke heterotop modellene ikke har tilsvarende svulst microenvironments (TME) [1].
genetisk modifiserte musemodeller av kreft krever vanligvis lang tid å utvikle svulster og er uforutsigbar med hensyn til frekvens, tid og sted av primære tumorer og enda mer uforutsigbar når og hvor metastasering forekommer. Ettersom tumorutviklingen i disse dyrene er sjelden synkron, må en stor kohort av dyr bli plassert for å forberede seg på et tilstrekkelig antall dyr ved passende stadier av kreft. Et stort antall dyr må undersøkes i løpet av lange tidsperioder for å evaluere kreftbehandling, og bare overlevelse blir ofte brukt som et sluttpunkt på grunn av vanskeligheten med å overvåke når tumorer vises i indre organer [2].
Flere typer modeller under anvendelse av ortotopisk implantering av tumorer har blitt utviklet og anvendt for å undersøke antitumor hovedsakelig legemidlets effekt [3]. I disse modellene er enten cancercellesuspensjoner injiseres i ortotopiske organ eller tumorvev fragmentene suturerte det tilsvarende organet [4], [5] med implantasjon av vev fragmenter som har vist seg å være mer nøyaktig [5], [6] . Med hensyn til kolorektal kreft modeller, er det etablert svulster i submukøse vev eller på colonic serøse hinnen, men ikke på slimhinnen som svulster faktisk oppstår hos pasienter.
Hensikten med denne studien var å etablere en » true «klinisk presis orthotopic rektal modell der svulster starter forming i slimhinnene vev i endetarmen.
Materialer og metoder
Cell kultur
musen tykktarmskreft cellelinje CT26 og human colorectal cancer cellelinje HCT-116 ble dyrket i RPMI 1640 medium supplert med 10% FBS. CT26 er en N-nitroso-N-methylurethane- (NNMU) -indusert mus udifferensiert colon carcinoma cellelinje [7]. HCT-116 ble avledet fra en primære humane tarmkreft prøven [8].
GFP og RFP vektor produksjon
Plein retroviral vektor (Clontech), uttrykker økede grønt fluorescerende protein (GFP) og neomycin-resistensgenet på den samme bicistronisk meldingen, ble brukt som en GFP-ekspresjonsvektor. PT67, en NIH3T3-avledet pakkende cellelinje som uttrykker 10 Al virale kappe, ble innkjøpt fra Clontech Laboratories, Inc. PT67-celler ble dyrket i DMEM supplert med 10% FBS. For GFP vektor produksjon, PT67 pakkingscellene, ved 70% konfluens, ble inkubert med en blanding av utfelt DOTAP ™ reagens (Boehringer Mannheim, Indianapolis, Indiana), og mette mengder Plein plasmid i 18 timer. Fersk medium ble fylt opp på dette tidspunktet. Cellene ble undersøkt ved fluorescens-mikroskopering 48 timer etter transduksjon. For seleksjon, ble cellene dyrket i nærvær av 500-2,000 ug /ml G418 (Life Technologies, Grand Island, New York) for 7 d. Den isolerte emballasje celle klon ble betegnet PT67-GFP [9] -. [12]
For RFP retrovirus produksjon,
Hind
III /
Ikke
jeg fragment fra pDsRed2 (Clontech) som inneholdt den full-lengde cDNA RFP, ble innsatt i
Hind III
/
Ikke
i-setet til pLNCX2 (Clontech) som inneholdt neomycin-resistensgenet. PT67-celler ble dyrket i DMEM supplert med 10% FBS. For vektor produksjon, PT67 emballasje-celler ved 70% konfluens, ble inkubert med en blanding av utfelt LipofectAMINE reagens (Life Technologies) og mette mengder pLNCX2-DsRed2 plasmid i 18 timer. Fersk medium ble fylt opp på dette tidspunktet. Cellene ble undersøkt ved fluorescens-mikroskopering 48 timer etter transduksjon. For valg av en klon som produserer høye mengder av RFP retroviral vektor (PT67-DsRed2), cellene ble dyrket i nærvær av 200 til 1000 ug /ml G418 (Life Technologies) for 7 d. Den isolerte emballasje celle klon ble betegnet PT67-DsRed2 [9] -. [12]
GFP og RFP genet transduksjon av kreftcellelinjer
For GFP og RFP genet transduksjon, kreftcellene var inkubert med en 1: 1-utfelt blanding av retrovirale supernatanter fra PT67-GFP eller PT67-DsRed2 celler og RPMI 1640 inneholdende 10% FBS i 72 timer. Fersk medium ble fylt opp på dette tidspunktet. Cellene ble høstet ved trypsin /EDTA 72 timer etter transduksjon og subdyrket i et forhold på 01:15 i selektivt medium, som inneholdt 200 ug /ml G418. Nivået av G418 ble økt opp til 800 ug /ml på en trinnvis måte. Kloner som uttrykker høye nivåer av GFP eller RFP ble isolert med kloningssylindere (Bel-Art Products) ved hjelp av trypsin /EDTA og forsterket ved hjelp av konvensjonelle dyrkingsmetoder i fravær av seleksjonsmidlet [9] – [12].
Mus
Nude
nu /nu
mus (Anticancer cancer~~POS=HEADCOMP, Inc., San Diego, CA) ble holdt i en barriere anlegget på Anticancer cancer~~POS=HEADCOMP, Inc. under HEPA filtrering og matet med Autoclaved laboratorium gnagerdiett (Tecklad LM-485, Western Research Products, Orange, CA). Alle dyrestudier ble gjennomført med en anticancer Institutional Animal Care og bruk Committee (IACUC) -protocol spesielt godkjent for denne studien og i samsvar med de prinsipper og prosedyrer som er skissert i National Institute of Health Guide for omsorg og bruk av dyr i henhold Assurance Antall A3873-1. Alle dyr prosedyrer ble utført under bedøvelse ved hjelp av subkutan administrasjon av en ketamin blanding (10 pl ketamin HCL, 7,6 mL xylazine, 2,4 pl acepromazine maleate, og 10 mL PBS).
nestin drevet grønt fluorescerende protein (ND-GFP) naken mus
Interaksjon av CT26-RFP svulst og vert ND-GFP-uttrykke celler i rektal mukosa ble undersøkt. CT26-RFP-celler ble transplantert til orthotopically ND-GFP nakne mus [13] ved fremgangsmåtene beskrevet nedenfor. Ti dager etter tumor transplantasjon, ble musene avlivet og den anorectum ble dissekert. Tumor og ND-GFP celle interaksjon ble observert med OV100 imaging system
Forstyrrelse av endetarms mucosal barriere
endetarms mucosal barrieren ble kjemisk forstyrret av følgende prosedyre. Etter mus ble bedøvet, et polyetylen-kateter ble satt inn i rektale hulrom gjennom anus. Endetarms lumen ble vasket med 6 ml PBS for å rense ut tarminnholdet. Den rektale hulrom ble utvidet ved å sette inn en tilbaketrekkings inn i det anorektale området, og deretter ble rektal mukosa ble godt fuktet med 4% eddiksyreløsning i to minutter, etterfulgt av skylling med 6 ml PBS (fig. 1).
(a) Normal utseendet på muse anus. Scale bar, 1 mm. (B) snelle laget av et dryppinfusjonsrøret. (C) De anorektal lumen ble utvidet ved å sette den inn i tilbaketrekkings anorectum og innpodet med en eddiksyreoppløsning. (C1) Før eddiksyre preparat. (C2) Fargen til rektal mukosa endret fra rødaktig rosa til hvitaktig etter behandling med eddiksyreoppløsning. m = rektal slimhinne. Scale bar, 1 mm. (D) Histologisk undersøkelse like etter eddiksyrebehandling viste at epitelcellelaget av rektal mukosa ble traumatisert. (D1) H E-delen av normal anorectum. A = overflaten epitel; B = slimhinner; C = muskularis slimhinner; D = submucosa; E = muskularis externa. (D2) Etter eddiksyre behandling. Legg merke til at bare den øvre del av slimhinnen blir forstyrret. Top, × 40 forstørrelse; bunn, × 100 forstørrelse.
intrarektal drypping av kolorektal kreft celler og eksamen for tumordannelse
Umiddelbart etter avbrudd av endetarms mucosal barriere, CT26-GFP celler (2,0 × 10
6) i 50 ul Matrigel (BD Biosciences, San Jose, CA), ble introdusert og innpodet på endetarmsslimhinnen med en 28-gage nål inn 4 mm fra anal ringen. Anus ble forseglet, holder retractor i endetarmen, med plasttape umiddelbart etter drypping av kreftceller for å hindre celle lekkasje. Plasten tape forsegling og retractor i endetarmen ble fjernet fra musene etter at de utvinnes fra anestesi. Etter kreftcelle implantasjon, noninvasive observasjon med det OV100 Small Animal Imaging System [14] eller MVX-10 fluorescens mikroskop [15] (begge fra Olympus, Tokyo, Japan) ble brukt til å detektere og karakterisere implanterte kreftceller. Deretter ble musene avlivet for å utforske mulige metastaser og for histologiske studier. Tumorvolumet ble beregnet i henhold til følgende ligning: Tumor volum (mm
3) = lengde (mm) x bredde (mm) x dybde (mm) × 0.5 [16]
fluorescens optisk avbildning. og behandling
OV100 Imaging System og MVX-10 fluorescens mikroskop ble brukt for fluorescens deteksjon av den voksende svulsten. Høyoppløselige bilder ble direkte fanget på en PC og analyseres med CellR programvare (Olympus-Biosystems, Melville, New York) [14].
histologisk undersøkelse
Etter mus ble avlivet, endetarmen var åpnet i lengderetningen og inspisert for tilstedeværelse av svulster. Den utskårede rektal svulst ble deretter integrert i frysemedium, frosset og delt på 7 pm med en cryostat. Slides ble observert for svulst celle fluorescens og deretter undersøkt mikroskopisk av hematoxylin-eosin farging.
Resultater
Forstyrrelse av mucosal barriere av endetarmen
mucosal barriere av endetarmen av nakne mus ble avbrutt ved behandling av mukosa med 4% eddiksyreløsning (fig. 1a-c). Det var ingen dødsfall eller åpenbar toksisitet relatert til denne prosedyren. Histologisk undersøkelse viste at epitelcellelaget av rektal mukosa ble avbrutt og skrelles etter eddiksyrebehandling (Fig. 1d). Slimhinnene vev var nå klar til å ta imot kreftcellene.
ortotopiske implantasjon av CT26-GFP celler
Umiddelbart etter kjemisk forstyrrelse av endetarms mucosal barriere, CT26-GFP mus tykktarmskreftceller, blandet i Matrigel, ble innført i rektum lumen. Anus ble forseglet med plast tape etter å fylle endetarms lumen med kreftcellesuspensjonen, som sørget for at kreftcellene forble på rektal slimhinnen under anestesi. Den totale fremgangsmåte tid var omtrent 15 minutter per mus, og det var ingen komplikasjoner eller dødsfall i forbindelse med både eddiksyre behandling og kreft-celle implantasjon.
Etter kreftcelle implantasjon, er rektale hulrom ble ikke-invasivt undersøkt med MVX-10 fluorescens mikroskop eller OV100 Small Animal Imaging System (fig. 2a). De CT26-GFP celler på rektal slimhinnen kan lett avbildes av GFP fluorescens begynner 6 dager etter implantasjon senest. Forekomsten av rektale tumorer i rektal mukosa var 100%. Verken instillasjon av kreftceller alene eller eddiksyre-behandling alene førte til vekst av en rektal svulst.
(a) i endetarmen ble fotografert invasivt 10 dager etter implantasjon. Venstre, lysfelt observasjon; midten CT26-GFP svulster vokser på rektal slimhinne var tydelig synlig under fluorescens observasjon; rett, samtidig observasjon i sterkt lys og fluorescens bildebehandling. Scale bar, 500 mikrometer. (B) Etter laparotomi, ble rektum åpnet i lengderetningen fra den fremre veggen. Venstre, brutto utseende i bukhulen. Skala: 10 mm; midten detalj av eske regionen; rett, samtidig observasjon i sterkt lys og fluorescens. Plasseringen av tumordannelse var begrenset på den bakre vegg av terminalen tarmen. Rød linje, retningen av rektal tverrsnitt på (c). Hvit linje, retningen av tumor tverrsnitt av (d). Scale bar, 2 mm. (C) Histologisk analyse bekreftet at GFP-positive lesjoner ble medullær-type adenokarsinomer uten kjertel strukturer. Venstre, fluorescens deteksjon av svulster i en frossen delen; midten, GFP-positive tumorer viste høy cellularitet og ble bekreftet som tumorer som vokser i slimhinnen i endetarmen; rett, fusjonerte bilde av H E histologisk seksjon og fluorescens deteksjon. Legg merke til at cancercellene lokalisere bare i slimhinnen i endetarmen. (d1-3) CT26 medullær-type adenokarsinomer invaderer submucosal lag utover grensene for muskularis slimhinner (rød pil hoder). T = tumor. Svarte piler, muskularis slimhinner. (E) Histologisk utseende av human benmarg-type adenocarcinoma. Grønne piler indikerer svulst kanten [23].
Som vist i fig. 2b, er plasseringen av tumordannelse var begrenset til den bakre vegg av terminalen tarmen. Denne begrensningen av tumordannelse kan skyldes at kreftcellesuspensjonen for å ta kontakt bare avbrutt dorsal slimhinnen i endetarmen.
Ved 10 dager etter implantering, fluorescens mikroskopi av frosne seksjoner og histologiske analyser viste at svulster var vokser i slimhinnen på en lignende måte til human medullært tarmkarcinom (fig. 2c-e). Rundt denne tiden, CT26-GFP-celler invaderer submucosal lag, utover grensene for muscularis slimhinner, ble også registrert (fig. 2d).
Alle musene til slutt bare hadde en enkelt svulst dannes på rektal mukosa , og tumorstørrelsen økte gradvis over tid (fig. 3a). Siden rektale tumorer prolapsed gjennom anus når de nådde omtrent 3 mm i størrelse, og deretter ble utenfor anus, forekom ingen rektal hindring under hele observasjonstiden i noen av musene (fig. 3b).
(a) Alle musene slutt hadde bare en enkelt svulst dannet på rektal mukosa. Tumorstørrelse økt over tid. (B) Prolapsed CT26 rektal svulst vokser utenfor anus på 4 uker etter implantasjon (rød pil hoder). Hvit rør inn i endetarmen (hvit pil) viser at anorektal passasje er godt bevart, og det er ingen hindring. Scale bar, 10 mm
På 4 uker etter drypping av kreftceller, gjennomsnittlig tumorvolum (gjennomsnittlig volum ± SD) nådde 1232.4 ± 994,7 mm
3 (Fig. 3a), og spontan lymfeknutemetastaser ble detektert med høy forekomst (fig. 4). Den metastatisk sats til hale mesenteriske lymfeknute (inferior mesenterisk lymfeknute hos mennesker) [17], [18], som er en regional lymfeknute i endetarmskreft, var 90,9%. Metastaser til para-aortic lymfeknuter var 54,5% (tabell 1). Spontane lungemetastase ble også påvist i 91,8% av musene (fig. 5). Imidlertid er bare 9% av musene (1/11) hadde levermetastaser (tabell 2).
(a) Skjematisk tegning av anatomien i (b). Kaudal mesenteriske lymfeknute på opprinnelsen til arterie mesenterica caudale. Dette lymfeknute er ekvivalent med dårligere mesenterisk lymfeknute hos mennesker. Scale bar, 2 mm. (B1) Caudal mesenteriske lymfeknute i sterkt lys observasjon. (B2) GFP fluorescens av hale mesenteriske lymfeknute i (b1), noe som indikerer at lymfeknuteinneholdt en metastase. Scale bar, 2 mm. (C) To para-aorta lymfeknuter (røde og gule piler) identifisert i en annen mus. Hvite pilen indikerer spredning hale mesenteriske lymfeknute. Scale bar, 2 mm. (D) Høyere forstørrelse observasjon av et para-aorta lymfeknute antydet med rød pil i (c). GFP fluorescens av en mikrometastaser ble oppdaget (hvite piler). Scale bar, 1 mm.
(a) Makroskopisk utseende lunge. Lungemetastaser ble oppdaget med GFP fluorescens. Scale bar, 2 mm. (B) Makroskopisk utseende av leveren. Fluorescens bildebehandling oppdaget GFP uttrykk for CT26-GFP levermetastaser (røde piler). Scale bar, 10 mm.
På omtrent fire uker, mus viste cachectic symptomer og måtte ofres på grunn av tumorstørrelse.
Angiogenese av mus rektal svulst orthotopically implantert i ND-GFP nakne mus
RFP-uttrykk CT26 celler ble orthotopically implantert inn i rektum for nestin-drevet GFP (ND-GFP) nakne mus ved fremgangsmåtene som er beskrevet ovenfor. Ti dager etter implantering, ble ND-GFP-uttrykkende begynnende blodkar visualisert vokser inn i RFP-uttrykkende CT26 rektal tumor i ND-GFP naken mus (Fig. 6).
(a) CT26-RFP tumor vokser i rektal slimhinnene i ND-GFP hårløse mus (hvite piler). Rød linje, retningen av det rektal tumor tverrsnittet av (b). Scale bar, 2 mm. (B) Tverrsnitt av endetarms svulst. Lys- lys observasjon. Scale bar, 2 mm. (C) Fluorescens observasjon av (b). Scale bar, 2 mm. (D) Detalj av innrammet område i (c). Host-avledet ND-GFP-uttrykker blodkar ble visualisert i RFP-uttrykke CT26 endetarms svulst i ND-GFP naken mus (hvite piler). Scale bar, 200 mikrometer.
Tumor formasjon ved rektal instillasjon av menneskelig av kreftceller i nakne mus
Anvendeligheten til denne implantasjon metoden ble evaluert med humane kreftceller. Med samme teknikk, human tykktarm kreft HCT-116-RFP celler også dannet endetarmssvulster hos nakne mus.
Diskusjoner
Klinisk-nøyaktige dyremodeller der svulstene oppstår fra tidlig stadium og senere bli invasiv og metastatisk vil være av stor verdi for å forutsi klinisk utfall for kreftbehandling mer presist. Få transgene modeller av invasiv tykktarmskreft eksisterer [4].
Apc
Min +/- musemodell vanligvis utvikle adenomer, men ikke invasiv adenokarsinomer [19]. I tillegg er tumorutvikling i genetisk modifiserte mus sjelden synkron, noe som gjør det vanskelig å fremstille et tilstrekkelig antall dyr ved hensiktsmessige stadier for kreftbehandling evaluering [2].
Det er blitt demonstrert at ortotropiske implantering til å fremme veksten og metastatisk potensial av de transplanterte tumorer som skal uttrykkes, og reflekterer klinisk kreft [5], [20]. Mange kolorektal kreft modeller syssels ortotrop implantasjon er også rapportert. I disse modellene ble det enten en kreftcellesuspensjon injisert i submucosal lag av colorectum [4], [5], [21], eller tumorvev fragmenter ble suturert bare på tykktarmen serosa. I disse modellene svulster vokser i submukøse vev forlater slimhinnene (som er den sanne opprinnelse av tykktarmskreft) intakt eller fra begynnelsen svulster vokser bare på serøse overflaten, noe som tilsvarer avansert stadium kolorektal kreft i klinikken.
Formålet med denne studien var å etablere et klinisk nøyaktig ortotopisk tykktarmsmodellen hvor tumorer starte forming i slimhinnevevet. Vi antok at nøyaktig ortotopisk implantering kan oppnås med kjemisk ødeleggelse av slimhinneoverflatebarriere i rektum og etterfølgende montering av CT26 kreftceller.
fluoresceinmerkede cancerceller [22] mulig meget følsom, i sanntid, og ikke-invasiv deteksjon av meget tidlig stadium kreft på rektal slimhinne og mikrometastaser i lymfeknutene og lungene, noe som ellers ville være umulig å oppdage i levende vev eller histologisk undersøkelse [20].
plasseringen av primær tumordannelse ble begrenset til den bakre vegg av terminalen rektum, som er den mest praktiske observasjonspunktet i mus colorectum. Reproduserbarheten av tumor Plasseringen tillatt enklere og mer fokusert invasiv undersøkelse over tid. Histologisk utseende av svulsten var veldig lik human tykktarmskreft klassifisert som udifferensierte eller medullær-type adenokarsinom [23].
lymfeknutemetastaser og lungemetastaser ble funnet i mus implantert med CT26-GFP-celler med høy hyppighet, noe som kan anses som «true» spontan metastase, ettersom i denne fremgangsmåten er det svært usannsynlig at kreftceller kan innføres direkte til den venøse eller lymfatiske sirkulasjon kunstig ved tidspunktet for implantasjon [4]. Selv om leveren er en vanligste metastatisk side av tykktarmskreft, ble levermetastaser funnet i bare 9% av mus (1/11) i denne modellen. Dette kan forklares ved det faktum at i denne modellen, svulster form ved den nedre del av endetarmen, blod som renner inn i den systemiske sirkulasjon venøse dominant over portvenesirkulasjon [24]. Endetarmskreft er mer sannsynlig enn tykktarmskreft å resultere i lungemetastaser uten levermetastaser i klinikken [24].
I motsetning til cecal injeksjon modell, denne modellen krever ikke laparotomi, der uønsket peritoneal formidling er forårsaket av kreftceller dissosiert ved tidspunktet for transplantasjonen [4]. Den nåværende metode kan også anvendes i immunkompetente verter med kreft-cellelinjer fra mus opprinnelse og ville være egnet for tumor immunologiske undersøkelser.
ND-GFP nakne mus, er GFP ekspresjon under kontroll av den av nestin promoteren [13], [25] der verts-avledet ND-GFP-uttrykker blodkar ble visualisert i tidlig stadium endetarms svulster dannes fra CT26-RFP celler.
Så vidt vi vet, er dette den første modellen som kan sikkert gi virkelig orthotopic endetarmskreft vokser i slimhinnevevet, og senere føre til spontan lymfeknute og lungemetastaser som er lett påvises ved GFP fluorescens med høy følsomhet. Denne modellen kan brukes til å studere tidlige hendelser i tumorvekst eller vurdere intraluminale faktorer (diett forbindelser, gallesyre, intestinal microflora, etc.), som kan fungere for å forbedre eller hemme veksten av kolorektal cancer i tidlig stadium av kreft.
som konklusjon, implantasjon av kreftceller til det mukosale vev aktivert av teknikkene beskrevet i den foreliggende rapport tillot tumorer til å vokse på en måte som etterligner klinisk sykdom hos mennesker. Denne modellen vil være nyttig for evaluering av den terapeutiske effekten av antitumormedikamentene, og kan være i stand til å bli brukt til å studere tidlige hendelser i TME.
Takk
Denne artikkelen er dedikert til minne av AR Moossa, M.D.
