Abstract
Prostatakreft er den vanligste kreftformen hos menn, og de fleste pasienter har lokalisert sykdom ved diagnosetidspunktet. Imidlertid 4% allerede er tilstede med metastatisk sykdom. Epitelial-mesenchymale overgang er en grunnleggende prosess i karsinogenese som har vist seg å være involvert i sykdomsprogresjon. Den viktigste begivenheten i epitel-mesenchymale overgang er undertrykkelse av E-cadherin av transkripsjonsfaktorer, men prosessen er også regulert av microRNAs. Målet med denne studien var å analysere genet og mikroRNA uttrykk involvert i epitel-mesenchymale overgang i prostatakreft og metastatisk prostatakreft cellelinjer og korrelerer med clinicopathological funn. Vi studerte 51 friske frosne vevsprøver fra pasienter med lokalisert prostatakreft (PCA) behandlet av radikal prostatektomi og tre metastatisk prostatakreft cellelinjer (LNCaP, DU145, PC3). Ekspresjonen av gener 10 og 18 mirnas ble vurdert ved sanntids-PCR. Pasientene ble delt inn i grupper etter Gleason score, patologisk stadium, preoperativ PSA, biokjemisk tilbakefall, og risikogruppe for korrelasjon med clinicopathological funn. Flertallet av lokaliserte PCA tilfeller viste en epitelial fenotype, med overekspresjon av E-cadherin og underexpression av mesenchymale markører. MiRNA-200 familiemedlemmer og mirnas 203, 205, 183, 373, og 21 ble overuttrykt, mens mirnas 9, 495, 29b, og en ble underexpressed. Low-uttrykk nivåer av miRNAs 200b, 30a, og en var signifikant assosiert med patologisk stadium. Lavere uttrykk for MIR-200b ble også assosiert med en Gleason score ≥8 og kortere biokjemisk tilbakefall overlevelse. Videre ble det observert lite uttrykk nivåer av MIR-30a og høy uttrykk nivåer av vimentin og Twist1 i høyrisikogruppen. Sammenlignet med den primære svulsten, de metastatisk cellelinjer viste signifikant høyere uttrykk nivåer av MIR-183 og Twist1. I sammendraget, mirnas 200b, 30a, 1 og 183 og genene Twist1 og vimentin kan spille viktige roller i utviklingen av prostatakreft, og kan til slutt bli viktige prognostiske markører
Citation. Katz B, Reis ST, Viana NI, Morais DR, Moura CM, Dip N et al. (2014) omfattende studie av Gene og mikroRNA Expression Relatert til epithelial-Mesenchymale Overgang i prostatakreft. PLoS ONE 9 (11): e113700. doi: 10,1371 /journal.pone.0113700
Redaktør: Aamir Ahmad, Wayne State University School of Medicine, USA
mottatt: 21 juli 2014; Godkjent: 28 oktober 2014; Publisert: 19.11.2014
Copyright: © 2014 Katz et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Data Tilgjengelighet:. Den forfatterne bekrefter at alle data som underbygger funnene er fullt tilgjengelig uten restriksjoner. Alle relevante data er i avisen og dens saksdokumenter filer
Finansiering:. Dette arbeidet ble støttet av FAPESP (Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Sao Paulo) under protokollnummer 2012 /50094-9. Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
Prostatakreft (PCA) er en av de vanligste svulstene hos menn, og det står for 29% av alle nydiagnostiserte kreft [1]. Etter innføringen av PSA screening, de fleste pasienter tilstede med lokaliserte PCA men 4% allerede har metastatisk sykdom ved diagnosetidspunktet [1]. I dag clinicopathological funksjoner som iscenesettelse, Gleason score (GS), og PSA nivåer er gode prognostiske markører [2] og er vant til å gjøre behandling beslutninger; men de er ikke tilstrekkelig nøyaktig til å diskriminere mellom svulster som vil forbli lat og de som senere vil utvikle seg til å bli metastatisk. Faktisk kan de unike biologiske funksjoner og heterogene genetiske bakgrunn av PCa [3] begrense effekten av konvensjonelle clinicopathological parametre som prediktive markører. Av disse grunner, har molekylære biomarkører blitt stadig mer etterforsket for å forstå og forutsi kreft oppførsel.
epithelial-til-mesenchymale overgang (EMT) er en omvendt biologisk prosess som spiller en rolle i invasjonen og metastasering under kreftutvikling. Epitelial celle-celle-adhesjon er redusert, og cellene skaffe et spindelformet, sterkt motile fibroblast fenotype og en større kapasitet for migrering og invasjon [4]. Den viktigste funksjonen i EMT er transcriptional stanse av E-cadherin [5], [6], som styres av transkripsjons regulatorer
ZEB1
,
ZEB2
,
SNAI1
(Snail),
SNAI2 plakater (Slug), og
TWIST1 product: [5], [7], [8]. I tillegg er det også oppregulering av mesenchymale markører, slik som vimentin og N-cadherin, en prosess som er kjent som cadherin bytte [9].
Rollene til gener relatert til EMT i PCa er ikke helt forstått, og tidligere studier beskriver tapet av E-cadherin [10], etterfulgt av øket ekspresjon av N-cadherin, cadherin-11 og vimentin [9] i immunhistokjemi analyse. Uttrykket nivåer av
ZEB1
, en viktig regulator av EMT i PCa, er relatert til den GS [11], og Behnsawy et al foreslått bruk av EMT genekspresjonsprofiler som markører for biokjemisk tilbakefall etter radikal prostatektomi [ ,,,0],12].
microRNAs (mirnas), en ny klasse av ikke-kodende, regulatoriske RNA, er blitt vist å delta i mange prosesser knyttet til utvikling og progresjon av kreft, inkludert EMT [13]. En av de viktigste mirnas som er involvert i EMT er MIR-200-familien, som er en potent induser av epitelial differensiering. Denne gruppen består av MIR-200A, MIR-200b, MIR-429, MIR-200c, og MIR-141, som er generert fra to transkripsjoner. De tre første er avledet fra kromosom 1, mens de to sistnevnte er utledet fra kromosom 12. Medlemmene i denne gruppen er sterkt knyttet i rekkefølge, noe som indikerer at de sannsynligvis målrette en lignende komplement av messenger RNA [14].
Blant målene i MIR-200-familien er ZEB1 og ZEB2 [15] – [17]. MIR-200 medlemmer hemme uttrykket av ZEB på post-transkripsjonsnivået ved å binde seg til høyt konservert målområder i sine 3’UTRs [18], [19]. Interessant, MIR-200 medlemmer er transkripsjons mål for
ZEB1 Hotell og
ZEB2
. Den nære funksjonell kobling mellom ZEB faktorer og MIR-200 familie i en dobbel-negativ feedback loop er kjent som ZEB /MIR-200 feedback loop [18], hvor aktivering av en gruppe påvirker negativt uttrykk for den andre gruppe. Avhengig av de ekstracellulære signaler, kan denne sløyfe veksle fra den ene siden til den andre siden og stabilisere enten den epiteliale eller mesenkymale fenotype. Andre mirnas har også vist seg å delta i EMT, målretting
SNAI1 plakater (MIR-29b, MIR-30a, MIR-34a) [20], [21], og
SNAI2 plakater (MIR -34a, MIR-1, MIR-200b) [22], [23]. Imidlertid har få studier vurderes mirnas involvert i EMT ved PCA.
Vårt mål er å dechiffrere rolle gener og miRNAs knyttet til EMT ved PCA å identifisere en profil som definerer PCa oppførsel.
materialer og metoder
Pasient utvalg
Femti-en pasienter som klinisk hadde lokalisert prostatakreft og gjennomgikk radikal prostatektomi mellom 2000 og 2002 ble valgt. Alle pasientene ble behandlet med den samme kirurgen (MS), og alle patologiske prøver ble analysert ved hjelp av den samme uropathologist (KRML). Pasientene ble fulgt opp i gjennomsnittlig periode på 63.06 måneder
Kontrollgruppen bestod av ti prøver fra pasienter som gjennomgikk kirurgi for benign prostatahyperplasi, og hadde prostatavolum. 50 cm
3 på ultralyd, PSA nivåer. 2,5 ng /ml, og ingen malignitet i de patologiske prøven
prostata vevsprøver
Alle friske frosne PCA prøver ble innhentet fra vår prostata biobank, og skriftlig informert samtykke ble innhentet fra alle pasienter. Denne studien ble godkjent av institusjonelle styret i etikk (CAPPesq – Comissão de Etica para Analise de Projetos de Pesquisa) under nummer 5907. De friske frosne svulster stammer fra radikal prostatektomi prøver, og en 1 cm
3 fragment ble isolert fra mistenkelige området og umiddelbart snap-frosset ved -80 ° C. Det gjenværende vev ble fiksert i 10% formalin, rutinemessig behandlet og farvet med hematoxylin og eosin for histologisk undersøkelse. Prøvene ble deretter gjennomgått og gradert bruker modifiserte Gleason gradering systemet [24], og scenen ble bestemt etter TNM 2010.
Cellelinjer
prostatakreft cellelinjer LNCaP, DU145, og PC3 ble oppnådd fra American Type Culture Collection (ATCC). LNCaP, DU145 og PC3 ble opprettholdt i RPMI, DMEM, og MEM media (Invitrogen, Carlsbad, CA, EUA), henholdsvis. Alle media ble supplert med 10% føtalt bovint serum og 1% antibiotisk /antimykotisk oppløsning (Sigma, St. Louis, MO, USA), og kulturene ble inkubert ved 37 ° C i en atmosfære av 5% CO
2 .
RNA og miRNA isolering og forsterkning
Både RNA og miRNA ble isolert fra prostata vev og cellelinjer ved hjelp av Ambion Mirvana kit (Austin, Texas, USA) i henhold til produsentens protokoll. cDNA ble generert fra RNA og miRNA bruker en TaqMan RNA Reverse Transcription Kit og TaqMan mikroRNA Reverse Transcription Kit, henholdsvis. For genet og miRNA forsterkning, ble en TaqMan Reagent Kit brukes med 7500 Fast Real-Time PCR System (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA). Reaksjonene ble utført i duplikat, og
B2M plakater (β-2-mikroglobulin) og RNU-48 ble anvendt som endogene kontroller for gener og mirnas, henholdsvis.
Gene og miRNA ekspresjonsnivåer var oppnås ved relativ kvantifisering ved hjelp av to
-ΔΔct metode. Den anvendte formelen er ΔΔCT = DCT
1- DCT
2, hvor DCT
1 = CT av målet (tumorprøve) – CT av gjennomsnittet av det endogene kontroll (tumorprøve), og DCT
2 = CT av gjennomsnittet av de normale kontroller (godartet prostatavevet) – CT av gjennomsnittet av det endogene kontroll (godartet prostatavevet). For evaluering av metastatisk cellelinjer ble «kontroll» (DCT
2) anses å være de pt2 svulster. Det endelige resultat ble oppnådd ved bruk av 2
-ΔΔct metode. Funnene i større eller mindre enn 1, ble ansett å indikere overekspresjon eller underexpression, respektivt. Alle verdier ble standardisert i forhold til de normale kontrollverdier, som ble representert som en verdi på 1.
Gene og miRNA utvalg
Valget av miRNAs og gener undersøkt i denne studien var basert på deres rolle i EMT prosessen i forskjellige typer kreft. Vi utførte litteratursøk via PubMed og Web of Science bruker begrepene «epitel-mesenchymale overgang», «kreft», og «miRNA». Basert på data publisert i litteraturen, valgte vi 18 mirnas at målrettede de viktigste gener involvert i EMT. Dataene er presentert i tabell 1.
Statistical Analysis
For å sammenligne clinicopathological funksjoner hos pasienter med lokaliserte PCA pasientene ble delt inn i grupper basert på deres GS (GS ≤6 vs GS ≥8), patologisk stadium (pT2 vs pT3), preoperativ PSA ( 10 vs ≥10 ng /ml), og fravær eller tilstedeværelse av biokjemisk tilbakefall definert som PSA ≥0,02 ng /ml. Pasientene ble også klassifisert i lav risiko og høy risiko sykdomsgrupper i henhold til tilstedeværelsen av noe ugunstig funksjonen. I dette scenariet, ble uttrykket verdiene i svulstvev i forhold til de i godartet prostatavevet.
For evaluering av metastatiske svulster, tre metastatisk PCA cellelinjer ble analysert sammen og betegnet som metastatisk gruppen. Uttrykket nivåer av genene og mirnas mellom cellegruppen og PT3 tumorer ble sammenlignet i forhold til PT2 tumorer, som ble betraktet som «kontroll» -gruppen. Begrunnelsen var at patologisk stadium kan representere et praktisk bevis på EMT, og ved hjelp av denne metoden, kan vi vurdere hvilke EMT markører er involvert i utviklingen av en lokalisert svulst til metastasering.
Mann-Whitney U og T-tester ble brukt for å sammenligne GS, patologisk stadium, pre-operative PSA nivåer, biokjemisk tilbakefall, og risikogrupper. Fordelingen av genet og miRNA uttrykk nivåer ble skjevt, og dataene ble log-transformeres for analyse. Kaplan-Meier-kurver ble konstruert for å analysere biokjemiske gjentakelse overlevelse. Statistisk signifikans for alle tester, som vurdert ved å beregne to-sidige
P
-verdier, ble satt på. 0,05
Resultater
Pasientdata
gjennomsnitts~~POS=TRUNC alderen~~POS=HEADCOMP for pasientene var 65 år. Gjennomsnittlig og median GS var 7,3 og 7, henholdsvis. Tjueto pasienter (43%) var scenen pT2, og 29 (57%) av pasientene var scenen pT3. Sytten (33%) av pasientene hadde biokjemisk tilbakefall i en gjennomsnittlig oppfølgingsperiode på 63.06 måneder. Dataene er vist i tabell 2.
miRNA og genuttrykk profilering i lokaliserte PCa
mirnas 200a, 200b, 200c, 429, 141, 205, 203, 21, 183, og 373 ble overuttrykt i 35 (69%), 47 (92%), 38 (74%), 39 (77%), 42 (82%), 44 (86%), 38 (74%), 51 (100 %), 38 (74%), og 33 (64%) prøver, henholdsvis. mirnas 1, 29b, 9, og 495 ble underexpressed i 41 (80%), 41 (80%), 36 (71%), og 42 (82%) prøver, henholdsvis. mirnas 34a, 155, 30a og 10b viser et varierende mønster av uttrykket: MIR-34a og MIR-155 ble underexpressed i 55% og 57% av prøvene, henholdsvis, og MIR-30a og Mir-10b ble overexpressed i 51% av prøvene (tabell S1 i File S1).
E-cadherin ble overexpressed i 50 tilfeller (98%). Den gener N-cadherin,
TGFB1
, og
ZEB1
ble underexpressed i 36 (71%) av pasientene, mens
SNAI2 Hotell og vimentin ble underexpressed i 42 (82%) og 41 (80%) pasienter, henholdsvis.
ZEB2
,
SNAI1
, og
PDGFD
viste varierende mønstre av uttrykk. På den annen side,
TWIST1
var den eneste EMT-indusert gen som viste overekspresjon i de fleste tilfeller (73%) (tabell S1 i File S1).
mirnas og gener assosiert med clinicopathological funksjoner
tabellene 3 og 4 illustrerer data om miRNA og genekspresjon i forhold til clinicopathological funksjoner, respektivt. Lave nivåer av MIR-200b, MIR-30a, og Mir-1 var assosiert med pT3 sykdom. Av de 18 mirnas studert, tre ble betydelig underexpressed i pT3 sykdom (MIR-200b – 7,73 vs 23,86,
P
= 0,02; MIR-30a – 1,73 vs 3,79,
P
= 0,048; og MIR-1 til 0,72 vs 1,97,
P
= 0,04). Men om genene, vi kunne ikke finne noen sammenheng mellom deres uttrykk og patologisk stadium.
Vi vurderte foreningen av GS med mirnas unntatt GS 7 på grunn av deres usikker atferd. Femten pasienter (29%) hadde en GS ≤6 og 23 (45%) hadde en GS ≥8. Vi fant ut at Mir-200B uttrykk var signifikant lavere hos pasienter med en GS ≥8 sammenlignet med pasienter med en GS ≤6 (6,94 vs 18,67,
P
= 0,035). Ingen sammenheng ble funnet mellom GS og de andre mirnas og gener.
Når pasientene ble gruppert etter lav risiko og høy risiko sykdom, høy-risiko sykdom hadde signifikant lavere nivåer av MIR-30a (1,70 vs 6.37,
P
= 0,039). Også høye nivåer av vimentin og
TWIST1
var signifikant forbundet med høy risiko sykdom (0,27 vs 0,90,
P
= 0,017; 1,81 vs 8,89,
P
= 0,018) .
på grunn av signifikant sammenheng mellom mirnas 200b, 30a, og en med patologisk stadium og deres potensial som prognostiske markører, ble en overlevelsesanalyse utført. Kaplan-Meier analyse viste at pasienter med lavere nivåer av MIR-200b hadde signifikant kortere biokjemisk tilbakefall overlevelse (
P
= 0,049) (figur 1).
Pasienter med MIR-200b uttrykk nivåer ≤14.690 viste signifikant kortere biokjemisk tilbakefall overlevelse.
Videre MIR-183 og
TWIST1
uttrykk nivåer var signifikant høyere hos pasienter med metastatisk PCA cellelinjer sammenlignet med nivåene hos pasienter med pT3 sykdom og høy grad av tumorer (Tabell S2 i File S1). I cellelinjer, nivåene MIR-183 og Twist1 var 2,64 og 3,54, henholdsvis, mens i PT3 svulster, deres nivå var 40.41 og 14.45, henholdsvis (
P
= 0,009 og
P
= 0,049, henholdsvis).
Diskusjoner
betydningen av EMT i kreftutvikling har blitt grundig studert i de siste årene, og det er nå regnet som en av de viktigste mekanismene som er ansvarlig for tumorprogresjon og metastatisk spredning. Vår studie forsøkte å vurdere betydningen av uttrykket mønstre av flere mirnas og gener involvert i EMT i kliniske prøver av lokalisert prostatakreft og metastatisk cellelinjer. Våre funn er oppsummert i figur 2, som viser de viktigste mirnas og gener involvert i EMT i utviklingen av PCa og deres mulige virkningsmekanisme.
uttrykk nivåer av miRNAs 200b, 30a og en nedgang når svulsten kjøper høy klasse funksjoner, mens uttrykk nivåer av TWIST1 og vimentin økning. Når svulsten blir metastatisk, er en økning i ekspresjonsnivåene av MIR-183 og TWIST1 observert. De stiplede linjene indikerer gener hvor disse mirnas eller gener kan opptre, på grunnlag av tidligere publiserte data.
BR
= Biokjemisk Gjentakelse.
Vi har vist at MIR-200B, MIR-30a, og Mir-1 ble betydelig underexpressed i ikke-orgel-begrenset svulster og kan utgjøre interessant prognostiske faktorer. En fersk studie støtter våre funn ved å vise at MIR-200B og Mir-1 induserer mesenchymale-epitel overgang (MET) i mus og menneskelig PCA celler og er viktige regulatorer i prostata tumorigenesis og tumorprogresjon [23].
MIR-200b ble overexpressed i PCA prøver, og dette funnet er i samsvar med tidligere studier på PCa [25], [26]. Medlemmene av MIR-200-familien er de viktigste mirnas involvert i EMT [27], og studier i PCA celler har vist at Mir-200B hemmer EMT, vekst og metastasering [23], [28]. Vi hypotese at Mir-200B har størst potensial til å bli en prognostisk markør fordi lavere uttrykk for MIR-200b ble signifikant assosiert med en høy GS, pT3 sykdom og kortere biokjemisk tilbakefall overlevelse. Rollen til MIR-200b har blitt beskrevet i andre tumorer, og dens nedregulering er relatert til avansert stadium av sykdommen [29] og kortere total overlevelse [30] – [32]. I likhet med våre funn, fant Barron et al at Mir-200a ble redusert hos pasienter som enten fikk tilbakefall ved å studere MIR-200a uttrykk i formalinfiksert parafin-embedded vev fra pasienter med pT3 sykdom [33], som støtter potensialet i MIR-200 familien som en markør for biokjemisk tilbakefall.
Tidligere studier viser at nedregulering av MIR-200 kan bidra til utviklingen av PCa [15] [34]. Xu et al observert en 80% reduksjon i MIR-200b nivåer i kjemisk kastrerte LNCaP celler via RNA sekvensering [35]. Emerging bevis støtter involvering av EMT prosesser i dereguleringen av androgen signale aksen, men data er fortsatt kontroversielt. Zhu og Kyprianou observert at androgener indusere uavhengig EMT mønster innen prostata kreft celler, noe som resulterer i vesentlige endringer i cellulær invasjon og motilitet [36]. Den aktiverte androgenreseptoren (AR) er nylig blitt vist å fremme EMT aktivering via undertrykkelse av E-cadherin uttrykk innenfor brystcancerceller [37]. På den annen side, Sun et al fant at androgen deprivasjon fører EMT in vivo og oppkjøp av mesenchymale funksjoner [38].
Dette er den andre studien om Mir-1 og prognose ved PCA. Hudson et al tidligere funnet at lavere uttrykk nivåer av Mir-1 var assosiert med tidligere biokjemisk tilbakefall ved PCA [39]. Nå viste vi at Mir-1 ble nedregulert i primærtumor sammenlignet med benign prostata vev, og ble betydelig redusert i ikke-organ begrenset sykdom. Det er antatt at Mir-1 regulerer Slug [23], gjennom histon metylering og acetylering [39] og som også har som mål gener knyttet til spredning, migrasjon og invasjon [40] spiller en viktig rolle i EMT ved PCA.
data~~POS=TRUNC om rollen MIR-30a ved PCA er knappe og motstridende. I vår studie, MIR-30a viste en varierende mønster av uttrykk. MIR-30a ble beskrevet som blir nedregulert i studie utført av Porkkas et al [41], mens Carlsson et al rapporterte at oppregulering av denne miRNA [42]. Nylig, Kao et al viste at ETS-relaterte genet (
ERG
), som er den hyppigst overexpressed onkogen i PCA er et direkte mål på MIR-30 og at overekspresjon av MIR-30 i PCA celler undertrykker EMT fenotyper og hemmer celle migrasjon og invasjon [43]. MIR-30 familien også hemmer cellemigrasjon, invasivitet og metastaser
in vitro
i andre svulster, som for eksempel lunge, bryst, og leverkreft [21], [44] – [46], ved å målrette
SNAI1 product: [21], [44] og vimentin [45], [46]. I denne studien sammenhengen observert mellom redusert uttrykk av MIR-30, avansert patologisk stadium, og høy-risiko sykdom bekrefter MIR-30 som en tumor suppressor miRNA ved PCA. Cheng et al observert at lave nivåer av MIR-30a var prediktorer av avansert stadium og lymfeknutemetastase i invasiv brystkreft [45]. Wang et al viste at lave nivåer av MIR-30a var signifikant assosiert med en høyere forekomst av portalen blodåre svulst blodpropp i leverkreft [46].
Når det gjelder gener, vi observerte overekspresjon av E-cadherin i praktisk talt alle saker, og de fleste av mesenchymale markører, inkludert N-cadherin,
TGFB1
,
ZEB1
, vimentin, og
SNAI2
, ble nedregulert. Dette genekspresjon profil antyder sterkt at lokaliserte PCa opprettholder den epiteliale fenotypen til tross for tumor differensiering og økende stadium. Men
TWIST1
ble overuttrykt i 73% av tilfellene.
TWIST1
er en helix-loop-helix transkripsjonsfaktor som aktiverer EMT gjennom indirekte hemming av E-cadherin [47].
TWIST1
har vist seg å være overuttrykt i PCa på immunhistokjemi analyser og for positivt å korrelere med GS [48], [49]. Det er interessant at et gen med slike betydning i EMT og med prognostisk verdi i PCa er overuttrykt i lokaliserte tumorer. Den tidlige overekspresjon av
TWIST1
kan tilskrives regulering av
NKX3-1
genet [50], en tumor suppressor som ble funnet å være underexpressed i de tidlige stadiene av PCa [51 ], [52]. Imidlertid, for å tidlig oppregulering av
TWIST1
ser ikke ut til å være tilstrekkelig til å igang EMT prosessen. Ifølge Casas et al,
TWIST1
induserer
SNAI2
å fremme EMT [53], men uttømming av
SNAI2
helt blokkerer muligheten for
TWIST1
å undertrykke E-cadherin og indusere EMT.
Vi har vist at høye nivåer av
TWIST1
, samt vimentin er signifikant assosiert med pasienter i høyrisikogruppen og
TWIST1
var også betydelig høyere i metastatisk cellelinjer. I en fersk undersøkelse, Behnsawy et al [12] viste at høyt uttrykk nivåer av
TWIST1 Hotell og vimentin evaluert av immunhistokjemi er en uavhengig faktor knyttet til kortere biokjemisk tilbakefall overlevelse, noe som tyder på at disse genene kan være potensielle markører biokjemisk tilbakefall etter radikal prostatektomi.
TWIST1
synes å spille en rolle i ulike trinn i EMT, og dens rolle i utviklingen av PCa [49]. I studien av Kwok et al,
TWIST1
uttrykk var høyere i vev avledet fra metastatiske lesjoner fra bein og lymfeknuter [48]. Rollen til
TWIST1
i dette senere trinn av emt kan forklares ved aktivering av dens mål, MIR-10B. MIR-10b ikke bare undertrykker E-cadherin [54], men også hemmer oversettelsen av HOXD10 protein, tillater uttrykk for den pro-metastatisk genprodukt,
RHOC product: [55].
Vi har også observert at uttrykket nivåer av MIR-183 var betydelig høyere i metastatisk gruppen. Ueno et al observert at høyere uttrykk nivåer av MIR-183 var signifikant assosiert med høyere PSA, høyere stadium og kortere total overlevelse etter radikal prostatektomi, men dens oppførsel ved PCA er helt kontroversiell noen som viser at MIR-183 fremmer migrasjon og invasjon [56] – [58], mens andre viser at det hemmer migrering, invasjon og metastase [59] – [61]. Noen mål av MIR-183 har blitt foreslått,
DKK3
,
SMAD4 product: [56],
EGR1 Hotell og
PTEN product: [57], som slår MIR-183 en kontekstavhengig miRNA. Basert på våre resultater og ifølge tidligere studier i litteraturen, mener vi at MIR-183 fungerer som en oncomiR i PCA og mekanismen kan innebære
PTEN
som er relatert til PCa progresjon og utvikling av metastaser [62 ]. Ding et al viste også at samtidig
PTEN Hotell og
SMAD4
inaktivering i prostata epitel er i stand til å produsere et fullt penetrant invasiv og metastatisk PCa fenotype hos mus [63].
i konklusjonen, er det viktig å forstå at EMT påvirkninger tumorprogresjon i forskjellige trinn gjennom flere markører. Her beskrev vi en omfattende studie av miRNAs og gener knyttet til EMT ved PCA og fant at uttrykket nivåer av MIR-200b, MIR-30a, MIR-1,
TWIST1 Hotell og vimentin kunne brukes i beslutnings prosesser knyttet til primære eller adjuvant behandling i fremtiden.
Hjelpemiddel Informasjon
fil S1.
Kombinert fil støtte tabeller. Tabell S1: Expression nivåer av mirnas og gener fra hvert enkelt tilfelle i forhold til BPH prøver. Tabell S2: Expression nivåer av mirnas og gener i PT3 svulster og i cellelinjer (i forhold til PT2 svulster)
doi: 10,1371 /journal.pone.0113700.s001 plakater (docx)
