Abstract
Bakgrunn
mTOR signalveien spiller en avgjørende rolle i kreftutvikling av nyrecellekreft (RCC). Vi ønsket å undersøke påvirkning av genetiske variasjoner i mTOR pathway relaterte gener på risikoen for RCC.
Metoder
Vi genotypede 8 potensielt funksjonelle polymorfismer i
akt1
,
akt2
,
PTEN Hotell og
mTOR
gener ved bruk av TaqMan metoden i en case-control studie av 710 RCC pasienter og 760 kreftfrie fag. Ubetinget logistisk regresjon, justert for potensielle konfunderende faktorer, ble brukt for å vurdere risiko foreninger. Vi deretter undersøkt funksjonaliteten av de viktige polymorfismer.
Resultater
Av de 8 polymorfismer, etter justering for multiple sammenligninger, fant vi en signifikant sammenheng mellom en variant (rs2295080) i arrangøren av
mTOR Hotell og redusert RCC risiko (
P
= 0,005, OR = 0,74, 95% CI = 0,59 til 0,91, TG /GG
vs.
TT). En annen variant (rs701848) i 3’UTR regionen
PTEN
var assosiert med økt RCC risiko (
P
= 0,014, OR = 1,45, 95% CI = 1,08 til 1,96, CC vs . TT); Men foreningen var ikke signifikant etter justering for multiple sammenligninger. Videre har vi observert lavere
mTOR
mRNA-nivåer i nærvær av det rs2295080G allel i normale nyre vev. Luciferase reporter-analysen viste at den rs2295080G allelet betydelig redusert luciferase-aktivitet. Ingen annen signifikant sammenheng mellom de valgte polymorfismer og RCC risiko ble observert.
Konklusjoner
Våre resultater tyder på at den funksjonelle
mTOR
promoter rs2295080 variant påvirker RCC mottakelighet ved å modulere den endogene
mTOR
uttrykk nivå. Risiko effekter og den funksjonelle virkningen av
mTOR
rs2295080 variant trenger ytterligere validering
Citation. Cao Q, Ju X, Li P, Meng X, Shao P, Cai H et al . (2012) En funksjonell Variant i
mTOR
Arrangøren modulerer sitt uttrykk og er assosiert med nyrecellekreft risiko. PLoS ONE 7 (11): e50302. doi: 10,1371 /journal.pone.0050302
Redaktør: Balraj Mittal, Sanjay Gandhi Medical Institute, India
mottatt: 26. juli 2012; Godkjent: 18 oktober 2012; Publisert: 28.11.2012
Copyright: © 2012 Cao et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Dette arbeidet ble støttet av Program for utvikling av innovative Research team i First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University, Provincial Initiative Program for Excellency Disciplines i Jiangsu-provinsen, etter Natural Science Foundation National Kina [stipend nummer 81171963 og 81102089] og naturvitenskap Foundation of Jiangsu-provinsen [stipend nummer BK2008473 og BK2011773]. Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
nyrecellekreft (RCC) er den vanligste typen av nyrekreft, sto for mer enn 80% av alle ondartede nyresvulster [1], [2]. Selv om den eksakte årsaken til RCC fortsatt i stor grad ukjent, avvikende angiogenese betraktet et kjennetegn på denne sykdommen [3], [4]. I de fleste sporadisk og arvelige RCC tilfeller blir von Hippel-Lindau (VHL) tumorsuppressorgen funksjonelt forstyrret og resulterer i konstitutiv aktivering av hypoksi-induserbar faktor (HIF) og påfølgende induksjon av målgener, slik som VEGF [4] . Genetiske variasjoner i angiogenese-relaterte gener er blitt foreslått for å påvirke personer mottakelighet for RCC [5], [6], [7]. Nylig har et stort genom-wide forening studie utført i USA identifisert en interessant variant i
EPAS1 plakater (koding HIF-2 alfa) som en mottakelighet locus for RCC i en europeisk befolkning [7]. Men i den kinesiske befolkningen som vi evaluert, vi klarte å gjenskape de betydelige funnene mellom polymorfismer i
HIF1A product: [8] samt
EPAS1 product: [9], og risikoen for RCC, som indikerer at det er forskjeller i den genetiske arkitektur av etniske grupper, og undersøke de genetiske variasjonene i andre kandidatgener er fortsatt nødvendig. Heri i denne studien, ekspanderte vi leting til en viktig signalveien omfatter fosfoinositid-3-kinase (PI3K), fosfatase og tensin homolog (PTEN), v-akt murin thymoma viral onkogen homolog (AKT), og pattedyr Målet rapamycin (mTOR).
mTOR signalveien spiller en avgjørende rolle i cellevekst, overlevelse, spredning og angiogenese [10]. PI3Ks aktiveres ved hjelp av reseptor-tyrosinkinaser så som epidermal vekstfaktor-reseptor (EGFR), vaskulær endotelial vekstfaktor reseptor (VEGFR) og insulin-lignende vekstfaktor-reseptor (IGFR); aktivering resulterer da i en kinase kaskade gjennom AKT og mTOR [11]. Denne veien er negativt regulert av tumorsuppressorgen
PTEN
ved defosforylering av fosfatidylinositol trisphosphate (PIP3) [12]. Genetiske endringer av mTOR pathway relaterte gener, inkludert mutasjoner av
PI3K
,
AKT
, og
PTEN
, lette tumorigenesis og er vanlig i kreft hos mennesker [13], [ ,,,0],14], [15]. Relevansen av mTOR signalering i RCC er markert med suksess i å bruke hemmere av mTOR (temsirolimus og everolimus) for å behandle pasienter med avansert sykdom [16], [17].
enkeltnukleotidpolymorfi (SNPs) i kandidat gener har vist seg å påvirke individers mottakelighet for RCC [7]. I lys av den kritiske rolle mTOR-reaksjonsveien i RCC, er det mulig at SNP’er i denne reaksjonsvei kan spille en viktig rolle i utvikling RCC. Imidlertid har ingen publisert studie ennå løst problemet. Følgelig, i denne studien, vurderte vi 5 kjernegener (
PI3KCA
,
akt1
,
akt2
,
PTEN
, og
mTOR
) i denne veien og analysert 8 potensielt funksjonelle SNPs i disse genene og deres innvirkning på forekomsten av RCC i en kinesisk befolkning.
Pasienter og metoder
Etikk uttalelse
studien ble godkjent av Institutional Review Board of Nanjing Medical University, Nanjing, Kina. Ved rekruttering, ble skriftlig informert samtykke innhentes fra alle deltakerne i denne studien.
Study befolkningen
Totalt 710 episode pasienter med RCC og en gruppe av 760 kreftfrie kontroller rekruttert på First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University, Nanjing, Kina mellom mai 2004 og september 2011 ble registrert i case-control studie. Inklusjonskriteriene saker og kontrollene er beskrevet andre steder [8]. Kort fortalt alle nydiagnostiserte pasienter med histopathologically bekreftet hendelsen RCC og uten tidligere historie med andre kreftformer eller tidligere kjemoterapi eller strålebehandling ble fortløpende rekruttert uten begrensning i alder og kjønn. Sykdommen ble klassifisert i henhold til Verdens helseorganisasjon kriterier og iscenesatt i henhold til 2002 amerikanske Joint Committee on Cancer (AJCC) TNM klassifisering. Kontrollene ble rekruttert fra fag som søkte fysisk undersøkelse i poliklinikker på sykehuset og ble frekvens tilpasset de tilfeller etter alder (± 5 år) og kjønn. De kreftfrie kontroller var genetisk relatert til sakene og hadde ingen individuelle historie av kreft. Før rekruttering, ble en standard spørreskjema administrert gjennom ansikt-til-ansikt intervjuer av erfarne intervjuere til å samle inn demografiske data og relaterte faktorer. Hver pasient donert 5 ml venøs blod etter å gi et skriftlig informert samtykke. Svarprosenten for case og kontrollpersoner var over 85%
SNP utvalg
Vi anmeldt 5 kjerne gener involvert i mTOR signalveien.
PI3KCA
,
akt1
,
akt2
,
PTEN Hotell og
mTOR
. SNPs i disse genene ble valgt ut basert på HapMap data (https://hapmap.ncbi.nlm.nih.gov/) og dbSNP data (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/projects/SNP/). De potensielt funksjonelle polymorfismer ble identifisert i henhold til de følgende kriterier: (1) lokalisert i den 5 «flankerende regioner, 5» utranslatert region (UTR), 3 «UTR, eller kodende områder med aminosyreendringer; (2) mindre allel frekvens (MAF) 5% i den kinesiske befolkningen; eller (3) forbundet med kreftrisiko i tidligere studier. Ifølge kriteriene, ble 8 SNPs identifisert, inkludert rs2494750 og rs2498786 i
akt1
, rs33933140 og rs7254617 i
akt2
, rs11202607 og rs701848 i
PTEN
samt rs2295080 og rs2536 i
mTOR
.
DNA-ekstraksjon og genotyping
Genomisk DNA ble ekstrahert fra perifert blod ved proteinase K fordøyelsen og fenol-kloroform ekstraksjon. Den genotyping av disse 8 SNPs ble utført ved hjelp av forhåndsutformet TaqMan SNP genotyping Analyser (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) i laboratorium ved Institutt for molekylær og genetisk toksikologi, Nanjing Medical University, Nanjing, Kina. Sekvensene til primerne og probene er oppført i Tabell S1. Reaksjonsblandingen på 10 pl inneholdt 20 ng genomisk DNA, 3,5 pl av 2 x TaqMan genotyping Master Mix, 0,25 mL av primere og prober blanding og 6,25 ul dobbeltdestillert vann. Amplifikasjonen ble utført under følgende betingelser: 50 ° C i 2 minutter, 95 ° C i 10 minutter etterfulgt av 45 sykluser på 95 ° C i 15 sek, og 60 ° C i 1 min. Presiseringer og analyser ble utført i 384-brønns ABI 7900HT Real Time PCR System (Applied Biosystems) etter produsentens anvisninger. SDS 2.4 programvare (Applied Biosystems) ble benyttet for alleliske diskriminering. De genotyping priser av disse SNPs var alle over 98%. For kvalitetskontroll, ble 4 negative kontroller inkludert i hver plate, og 5% av prøvene ble tilfeldig valgt ut for gjentatt genotyping for bekreftelse; og resultatene var 100% konkordant.
Analyse av
mTOR
mRNA uttrykk
Atten kirurgisk fjernet nyrekreftvevet med tilkoblede paratumor nyrevevet, og en ytterligere 24 paratumor nyrevevet, var brukes til å analysere
mTOR
mRNA nivåer
in vivo
. Vevene ble tatt fra kirurgisk fjernet prøver fra pasienter og ble umiddelbart lagret i flytende nitrogen. RNA ble isolert fra omtrent 100 mg vev ved hjelp av TRIzol reagens (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) og revers transkribert til enkeltkjedet cDNA ved å bruke en oligo (dT) primer og Superscript II (Invitrogen).
mTOR
RNA nivå ble målt ved hjelp av kvantitativ real-time revers transkripsjon (RT) -PCR på ABI Prism 7900 sekvens deteksjonssystem (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA).
ACTB
ble brukt som en intern referanse genet. Primere som brukes for
mTOR
var 5 «-TTGCTTGAGGTGCTACTG -3′ (fornuft) og 5»-CTGACTTGACTTGGATTCTG-3 «(anti), og primere for
ACTB
var 5′-TGGCACCCAGCACAATGAA -3 «(sense) og 5′-CTAAGTCATAGTCCGCCTAGAAGCA-3» (antisens). Reaksjonsblandingen inneholdt 0,1 M av hver primer, 2 x SYBR grønn PCR Master Mix (Takara, Berkeley, CA, USA), og 1 pl cDNA (1:10 fortynning). Amplifikasjonen ble utført under følgende betingelser: 95 ° C i 30 s, og 40 sykluser med 95 ° C i 15 s og 60 ° C i 30 sek. Hver reaksjon ble gjort i tre eksemplarer.
Bygging av promoter-reporter plasmider
For å konstruere målet
mTOR
promoter-reporter plasmider, syntetisert vi DNA fragment som inneholder enten rs2295080G allel eller T-allelet ved å forsterke 998-bp (-617 til 381 basis forhold til transkripsjon start stedet)
mTOR
promoter region bruke primere med restriksjonsseter. Primerne var 5′-ACTTAGAGCTCAAACAGGGATGGGGCTGGGGGAGAGGGA-3 «(fremover) og 5′-ACTTAAGATCTCGAAACGTCTTTTGATGCAGTAATTCCT-3» (bakover), og de inkluderte SacI og NheI restriksjonsseter. De resulterende PCR-produkter ble deretter spaltet med SacI og Nhel og klonet inn i pGL3-Basic vektor (Promega, Madison, WI, USA) inneholdende ildflue luciferase-genet som en reporter. Konstruksjonene ble alle bekreftet ved DNA-sekvensering.
Cellelinjer
Den nyrecelle adenokarsinom cellelinje (786-o), humane embryonale nyre 293 celler (HEK-293) og HeLa cellelinjer var vennlig levert av Dr. Z. Zhang (Institutt for molekylær og genetisk toksikologi, School of Public Health, Nanjing Medical University, Nanjing, Kina) og ble brukt som rapportert tidligere [18], [19].
Transfeksjon og luciferase reporter analyser
786-o, HEK-293 og Jakten celler ble sådd i 24-brønners kulturplater. Etter 24 timer ble hver brønn transfektert med 1 pg av hver
mTOR
-reporter plasmid ved hjelp av Lipofectamine 2000 (Invitrogen). Som en indre standard, ble alle plasmider kotransfektert med 8 ng PRL-SV40, som inneholdt Renilla luciferasegenet. Den pGL3-Basic vektor uten innskudd ble anvendt som en negativ kontroll. Førti-åtte timer etter transfeksjonene ble cellene lysert med den passive lyseringsbuffer (Promega) og analysert for luciferase-aktivitet ved bruk av dual-luciferase reporter Assay System (Promega). Uavhengige forsøk ble gjort i tre eksemplarer for hvert plasmid konstruksjon.
Statistiske analyser
Forskjeller i fordelingen av demografiske karakteristika, utvalgte variabler, og frekvenser av genotyper mellom saker og kontroller ble testet av Student t -test (for kontinuerlige variabler) eller χ
2-test (for kategoriske variabler). SNP allelfrekvenser i kontroll deltakerne ble testet mot avvik fra Hardy-Weinberg likevekt av en godhet-of-fit χ
2-test før videre analyse. Assosiasjoner mellom polymorfismer og risiko for RCC ble estimert ved å beregne odds ratio (ORS) og 95% konfidensintervall (CIS) fra ubetinget logistisk regresjonsanalyse med justering for mulige confoundere. Vi brukte den falske funnraten (FDR) basert på Benjamini-Hochberg metode for å justere
P
verdi for multiple sammenligninger. Foreningene ble vurdert som statistisk signifikant når FDR justert
P
verdiene var mindre enn 0,05. Forskjeller i luciferase reporter-gen ekspresjon mellom forskjellige promotorkonstruksjoner, i tillegg til mRNA og proteinnivåene fra nyretumor eller normale vev som bærer forskjellige genotyper ble evaluert ved Student «s t-test eller en-veis analyse av varians (ANOVA), og
P
0,05 ble ansett for å være statistisk signifikant. Alle analyser ble utført med programvaren SAS 9.1.3 (SAS Institute, Cary, NC, USA) med to-sidige
P
verdier.
Resultater
Kjennetegn på RCC pasienter og kontroller
de frekvensfordelinger av utvalgte kjennetegn for 710 tilfeller og 760 kontroller er vist i tabell 1. Det var ingen signifikante forskjeller mellom de tilfeller og kontroller med hensyn til alder, kjønn, BMI og drikking status ( alle
P
0,05). Men det var flere røykere, hypertensjon pasienter og diabetikere blant sakene enn blant kontrollene (
P
= 0,035, 0,001 og 0,001, henholdsvis). Av 710 pasienter, 62,8% av pasientene i stadium I, mens 19,6, 7,3 og 10,3% ble funnet å ha fase II, III og IV sykdommer, hhv. Den prosent av kjernefysisk karakter fra I til IV var henholdsvis 19,2, 48,0, 24,5 og 8,3.
genotype og allelfrekvenser av
akt1 Twitter /
akt2 Twitter /
PTEN Twitter /
mTOR
polymorfismer og RCC risiko
de assosiasjoner mellom disse polymorfismer og RCC risiko i beste genetiske modellen er presentert i tabell 2 og detalj genotype fordelinger av polymorfismer er presenteres Tabell 3. genotypefrekvensene av disse 8 SNPs i kontroller alle dannet Hardy-Weinberg likevekt. Den mest betydelige SNP forbundet med RCC risiko var rs2295080, som ligger i promoterregionen av
mTOR
. Sammenlignet med personer som bærer rs2295080TT genotype, enkeltpersoner bærer TG og TG /GG genotyper ble begge assosiert med en redusert risiko for RCC (
P
= 0,021, OR = 0,81, 95% CI = 0,68 til 0,97 og
P
= 0,005, OR = 0,74, 95% CI = 0,59 til 0,91, henholdsvis). Sammenhengen mellom rs2295080 og RCC risiko forble signifikant etter justering for multiple sammenligninger (FDR = 0,040). I tillegg til dette SNP, en variant homozygot (CC) av en annen SNP (rs701848), som er plassert i den 3’UTR-regionen i
PTEN
ble også signifikant assosiert med økt risiko RCC (
P
= 0,014, OR = 1,45, 95% CI = 1,08 til 1,96). Imidlertid forble denne foreningen bare marginalt signifikant etter justering for multiple sammenligninger (FDR = 0,056). Siden PTEN negativt regulerer mTOR signalveien, så undersøkte vi om det var samspillet mellom
mTOR
rs2295080 og
PTEN
rs701848 påvirke RCC risiko, men som vist i tabell 4, ingen signifikant Det ble ikke observert interaksjon (
P
interaksjon = 0,118), men personer med både risiko genotyper (rs2295080 TT og rs701848 CC) hadde en signifikant økt RCC risiko på 1,72. Som
mTOR
rs2295080 produsert den beste foreningen signal mellom valgt polymorfisme, vi så fokusert på det i de påfølgende funksjonelle eksperimenter.
Uttrykk for
mTOR
i RCC og assosiasjoner mellom
mTOR
rs2295080 og
mTOR
uttrykk
Vi utforsket uttrykk for
mTOR
i RCC og assosiasjoner mellom rs2295080 polymorfisme og
mTOR
uttrykk i paratumor nyrevevet ved hjelp av real-time kvantitativ RT-PCR. Som vist i figur 1 A,
mTOR
ekspresjonsnivået i tumorvev var signifikant høyere enn i de tilstøtende normale vev (
P
= 0,018). Dessuten, sammenlignet med personer som bærer TT genotype, enkeltpersoner bærer G allel (TG og GG genotyper) hadde lavere nivåer av
mTOR
uttrykk (
P
= 0,003 og 0,011 for TG
vs.
TT og GG
vs.
TT, henholdsvis) (fig. 1B). Disse resultatene antydet at overekspresjon av
mTOR
kan bidra til nyrekreftutvikling, og at rs2295080, som ligger i
mTOR
promoter, kan være involvert i nedsatt kreftutvikling ved å regulere transkripsjonen aktivitet og uttrykk nivåer av
mTOR
.
(A) Distribusjon og sammenligning av
mTOR
uttrykk i karsinomer og tilstøtende normalt vev (
P
= 0,018). (B) Association mellom
mTOR
uttrykk i nyrevevet, og
mTOR
rs2295080 genotyper.
mTOR
rs2295080 TT genotype er forbundet med betydelig høyere mTOR uttrykk enn
mTOR
rs2295080 TG (
P
= 0,003) og GG (
P
= 0,011) genotyper.
Funksjonell karakterisering av
mTOR
rs2295080
for å undersøke om variasjonen er funksjonelt signifikant ved å endre
mTOR
promoter aktivitet, vi deretter generert reporter genkonstruksjoner inneholder enten rs2295080 G eller T-allel og transfektert HEK293, 786-o og HeLa cellelinjer med reporter plasmider. Som vist i figur 2, den konstruksjon inneholdende rs2295080G allel kjørte et betydelig lavere reportergenekspresjon sammenlignet med den som inneholder den rs2295080T allel i disse cellelinjene. Resultatene indikerte at rs2295080G allel i promoter regionen hadde en redusert transkripsjonen aktivitet av
mTOR
.
(A) Skjematisk fremstilling av reporter plasmider som inneholder
mTOR
rs2295080 T eller G-allel, som ble satt inn oppstrøms for luciferase reporter-genet i den pGL3-plasmid Basic. (B) De 2-konstruksjonene ble transient transfektert inn i HEK-293, 786-o og HeLa-celler, respektivt. Alle konstruksjoner ble kotransfektert med PRL-SV40 å standard transfeksjonseffektiviteten. Verdier er gjennomsnitt ± SD fra mer enn 3 separate eksperimenter som var hver utført i tre eksemplarer.
Diskusjoner
I den forhåndsinnstilte studien undersøkte vi assosiasjoner mellom 8 potensielt funksjonelle polymorfismer i mTOR signalveien relaterte gener og RCC mottakelighet i en kinesisk befolkning. Vår studie antydet at rs2295080 variant i promoter-regionen i
mTOR
var assosiert med en redusert risiko for RCC. Foreningen studere resultatene av rs2295080 ble senere bekreftet av videre funksjonsanalyse av varianten. Først observerte vi at
mTOR
mRNA nivået ble redusert hos personer som bar rs2295080 G allelet
in vivo
. Deretter, i
in vitro
analyser, fant vi at rs2295080 G-allelet betydelig redusert transkripsjonen aktivitet av
mTOR
. Disse resultatene tyder på at
mTOR
rs2295080 er en funksjonell SNP. Så langt vi kjenner til, er dette den første studien for å evaluere rollen polymorfismer av mTOR signalveien relaterte gener i forekomsten av RCC.
Disse funnene er biologisk plausibel, særlig i lys av de avgjørende roller av mTOR-reaksjonsveien i celledød og overlevelse. Over aktivering av mTOR har vært ansett som et kjennetegn i RCC, selv om de over aktivering av mTOR oppstår fra økt proteinuttrykk eller over fosforylering av mTOR protein virker vag [20], [21]. Gitt den viktige rollen mTOR, ville man forvente at et høyere uttrykk nivå av mTOR total protein kan lette nyrekreftutvikling, som støttes av flere studier som undersøker uttrykk for
mTOR
hos nyrecellelinjer [21] og i nephrectomy RCC prøvene [22]. I vår studie observerte vi også at mRNA nivået av
mTOR
var signifikant høyere i RCC vev enn i paratumor nyrevevet, noe som ytterligere gitt bevis for en utløsende rolle
mTOR
uttrykk i RCC. Over-uttrykk for
har mTOR
også blitt foreslått å være en dårlig prognostisk faktor i flere humane kreftformer, inkludert RCC [22], lungekreft [23], brystkreft [24], laryngeal plateepitelkarsinom [25 ] og galleveier adenokarsinom [26]. Tatt i betraktning den rolle mTOR i å tilrettelegge kreftutvikling og progresjon, er reduserte nivåer av mTOR på grunn av den rs2295080 varianten i promoteren kan redusere kreft følsomhet, noe som kan forklare våre funn i foreningen studiene.
I tillegg
PTEN
rs701848 polymorfisme ble marginalt assosiert med økt RCC risiko justert for multiple sammenligninger. Det bør bemerkes at denne polymorfisme er lokalisert i 3′-UTR-regionen i
PTEN
; derfor er det biologisk plausibel at dette SNP kan endre
PTEN
uttrykk ved å påvirke mRNA stabilitet, og påvirke deretter kreft mottakelighet. Imidlertid må hypotese funksjon av denne SNP fortsatt å bli undersøkt i fremtidige studier. Siden aktivering av mTOR signal er negativt regulert av
PTEN
, ville det være interessant å se om det er en interaksjonseffekt mellom
mTOR
rs2295080 og
PTEN
rs701848 polymorfismer. Men vi fant ikke signifikant interaksjon mellom disse 2 SNPs, selv om personer med risiko genotyper av begge de to SNPs (rs2295080 TT og rs701848 CC) hadde en signifikant økt RCC risiko på 1,57.
Til nå flere molekylære mål midler, for eksempel tyrosinkinaseinhibitoren sunitinib, de VEGFRs inhibitor pazopanib, og mTOR-hemmere temsirolimus og everolimus, har blitt godkjent for å behandle pasienter med avansert RCC. Nå nylig, Xu
et al.
Vist at genetiske polymorfismer i angiogenesis- og eksponeringsrelaterte gener kan forutsi behandlingsrespons til pazopanib monoterapi hos pasienter med RCC [27]. Dessuten er det også bevis som tyder på at genetiske polymorfismer i gener involvert i sunitinib farmakokinetikk er assosiert med progresjonsfri overlevelse (PFS) i mRCC pasienter behandlet med sunitinib [28]. Det skal bemerkes at
mTOR
rs2295080 polymorfisme har blitt foreslått å være assosiert med kliniske resultater i spiserørskreft hos pasienter som behandles med kjemoradioterapi [29]. Det er imidlertid fortsatt en mangel på studier som undersøker den arvelig genetisk variasjon som respons på behandling av mTOR-inhibitorer. Tatt i betraktning den funksjonelle rollen til rs2295080 polymorfisme i modulering av ekspresjonen av
mTOR
, kan dette polymorfisme være en lovende genetisk markør for å undersøke med hensyn til forutsigelse av behandlingsresponsen til temsirolimus eller everolimus. Men mangelen på tilgjengelig informasjon om disse narkotika behandlinger i våre RCC pasienter begrenser vår studie for å løse dette problemet; derfor oppfordrer vi sin etterforskning i andre studier som fokuserer på behandling av RCC pasienter.
I konklusjonen, tyder våre resultater at
mTOR
rs2295080 påvirker RCC mottakelighet i vår kinesiske befolkningen. Vår studie viser også at
mTOR
rs2295080 variant kan påvirke RCC mottakelighet ved å modulere den endogene
mTOR
uttrykk nivå. I tillegg er resultatene fra vår studie reiser noen viktige spørsmål om, for eksempel om den distinkte uttrykk nivået av
mTOR
indusert av rs2295080 polymorfisme vil påvirke fosforylering nivået av mTOR og deretter endre sin nedstrøms signal, og om denne polymorfisme har en effekt på RCC prognose og responsen av RCC-pasienter for behandling med temsirolimus og everolimus. Fremtidige studier med mer en helhetlig design og mer tilgjengelig informasjon om disse medikamentelle behandlinger kan bidra til å løse disse spørsmålene.
Hjelpemiddel Informasjon
Tabell S1.
Sekvensene til primerne og probene anvendes i den foreliggende undersøkelse.
doi: 10,1371 /journal.pone.0050302.s001 plakater (DOC)
