Abstract
Bakgrunn
Selv om HPV-infeksjon er den viktigste årsaken til livmorhalskreft, genetisk mottakelighet for HPV-infeksjon er ikke godt forstått. Tumornekrosefaktor alfa (TNF-alfa), som er involvert i forsvaret mot HPV-infeksjon, spiller en viktig rolle i livmorhalskreft progresjon og regresjon. Målet med denne studien var å undersøke sammenhengen mellom TNF-alfa rs1800629 polymorfisme og risiko for HPV-infeksjon eller livmorhalskreft.
Metoder
Tre grupper var involvert i denne studien av kinesiske kvinner. Gruppe 1 besto av 285 høy risiko HPV positive livmorhalskreftpasienter, Gruppe 2, 225 høy risiko HPV-positive pasienter uten livmorhalskreft, og Gruppe 3, 318 HPV negative kvinner uten livmorhalskreft. Blodprøver ble erholdt fra alle pasienter og genotypet ved PCR-RLFP. Femti tilfeldig valgte prøver ble ytterligere sekvensert
Resultater
allelet og genotype distribusjoner av TNF-alfa rs1800629 polymorfisme var ikke signifikant forskjellig mellom hver av gruppene (P 0,05).. Det er ingen signifikant sammenheng mellom rs1800629 polymorfisme og høy risiko HPV-infeksjon (OR = 0,649, 95% KI: 0,253 til 1,670, p = 0,371), livmorhalskreft (OR = 0,993, 95% KI: 0,376 til 2,618, P = 0,988) eller livmorhalskreft med HPV-infeksjon (OR = 0,663, 95% KI: 0,250 til 1,758, P = 0,409).
Konklusjoner
Vi viste at det ikke er noen sammenheng mellom TNF rs1800629 polymorfisme og HPV-infeksjon, eller livmorhalskreft med HPV-infeksjon
Citation. Wang N, Yin D, Zhang S, Wei H, Wang S, Zhang Y, et al. (2012) TNF-alfa rs1800629 Polymorphism er ikke forbundet med HPV infeksjon eller livmorhalskreft i den kinesiske befolkningen. PLoS ONE 7 (9): e45246. doi: 10,1371 /journal.pone.0045246
Redaktør: Cordula M. Stover, University of Leicester, Storbritannia
mottatt: 20 juni 2012; Godkjent: 17 august 2012; Publisert: 13.09.2012
Copyright: © Wang et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Denne studien ble støttet av Nature Science Foundation National of China (No. 30973191), Science and Technology Program i Liaoning-provinsen (No.2008225004), Peak Medical Bygging spesielt prosjekt i Liaoning-provinsen (No.2010696), Science and Technology Program for Shenyang (No.F11-262-9-15) og gratis forskerprosjekt av Shengjing Hospital (No.200806). Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
livmorhals~~POS=TRUNC kreft~~POS=HEADCOMP er fortsatt den nest vanligste kreftformen blant kvinner på verdensbasis [1]. Infeksjon med en onkogene humant papillomavirus (HPV) er en risikofaktor for å utvikle livmorhalskreft [2]. Immunresponser mot HPV-infeksjon i livmorhalsen epitelet spille en viktig rolle i patogenesen av livmorhalskreft.
Flere cytokiner som modulerer den immunologiske responsen har vært innblandet i utviklingen av kreft [3]. Tumor nekrose faktor-alfa (TNF-α), utskilles hovedsakelig av aktiverte makrofager, er en usedvanlig pleiotropisk cytokin med en sentral rolle i immun homeostase, betennelse, og vertens forsvar [4], [5]. TNF-α er involvert i forsvaret mot HPV-infeksjon, modulerende virusreplikasjon [6].
Rollen av TNF-α i kreft er ikke godt forstått. Deregulert TNF uttrykk innen svulsten mikromiljøet synes å favorisere ondartet celle vev invasjon, migrasjon, og til slutt metastasedannelse [7]. Det er også bevis kan imidlertid at TNF-α fremme utvikling og spredning av kreft [8], [9]. Rollen til TNF-α i tumorvekst er støttet av TNF-α-manglende mus modellen, der TNF-α
– /- mus er resistente mot utvikling av benigne og maligne tumorer i huden. TNF-modulasjon kan bidra til regulering av celle betennelse, og påfølgende utvikling av malign sykdom [10]. Siden ondartet utvikling av livmorhalskreft er forårsaket av vedvarende virusinfeksjon, fokuserer vi på TNF-genet, som kan være involvert i mottakelighet for HPV-infeksjon og utvikling av livmorhalskreft.
TNF-α er regulert på transkripsjonsnivået [11], og de rs1800629 polymorfismer i den TNF-α promoter region har blitt assosiert med nivået av TNF-α [12]. Foreningen av rs1800629 polymorfisme og livmorhalskreft har vært mye studert, men resultatene er motstridende [13], [14], [15], [16]. Den aktuelle studien ble gjennomført for å undersøke fordelingen av rs1800629 polymorfisme og dens forhold til HPV-infeksjon og livmorhalskreft.
Materialer og metoder
Study fagene
fra 2008 til 2010, alle pasienter behandlet ved Institutt for obstetrikk og gynekologi, Shengjing Hospital i Kina Medical University ble vurdert for oppføring i denne studien. Pasientene ble delt inn i 3 grupper. Gruppe 1 bestod av 285 pasienter diagnostisert med kreft i livmorhalsen og høy risiko for HPV-infeksjon (inkludert HPV 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 og 68). Gruppe 2 besto av 225 pasienter diagnostisert med høy risiko HPV-infeksjon, men uten noen unormal cervical cytologisk eller patologisk endring. Gruppe 3 besto av 318 friske kinesiske kvinner presentere for rutinemessig sunn screening på vår Health Check Center. Gruppe 3 pasienter hadde ingen historie av HPV-infeksjon, cervical neoplastisk sykdom, eller bevis på livmorhals patologien. Pasienter i gruppe 3 hadde en normal cervical cytologi på i det minste to påfølgende årlige undersøkelser. Kvinner med noen historie av ondartet sykdom ble ekskludert fra gruppe 3. Alle pasientene var kinesisk. Informert skriftlig samtykke og 5 ml perifert blod ble oppnådd fra hver deltaker. Studien protokollen ble godkjent av etikkomiteen av Shengjing sykehuset. HPV status ble detektert som tidligere beskrevet [17].
genotyping av rs1800629 polymorfisme
Genomisk DNA ble ekstrahert fra perifere blodleukocytter (Tiangen Blood genome Kit). Genotyping ble bestemt ved polymerasekjedereaksjon-rflp (PCR-RFLP) -analyse, som var basert på fremgangsmåten til Cabrera et al. [18]. PCR-produkter fra 50 tilfeldige pasientprøver ble ytterligere sekvensert for å bekrefte PCR-RFLP genotyping resultater.
Statistisk analyse
Sammenhengen mellom
TNF
-α rs1800629 polymorfisme og HPV infeksjon og livmorhalskreft ble beregnet ved hjelp av odds ratio analyse (ORS) og deres 95% CI’er beregnes ved multivariate logistisk regresjon. Alle ORS ble justert for alder og røykestatus. Hardy-Weinberg likevekt analyse ble utført med Chi-kvadrat test. The Chi-kvadrat test ble brukt for å sammenligne variabler. En p-verdi på 0,05 ble brukt som kriterium for statistisk signifikans. Alle analysene ble utført ved hjelp av SPSS (versjon 13.0, SPSS, Inc., Chicago, IL).
Resultater
De grunnleggende kliniske kjennetegn ved de tre gruppene er oppsummert i Tabell 1. Fordelingen av alder og røyking var ikke signifikant forskjellig mellom de 3 gruppene (P = 0,224 og 0,108, henholdsvis). Pasienter i livmorhalskreft gruppe (gruppe 1) var alle HPV positive. Livmorhalskreft ble iscenesatt i henhold til International Federation of gynekologi og fødselshjelp klassifisering og 49,8, 37,9, 9,8 og 2,1% av pasientene hadde stadium 0, I, II og III sykdommer, henholdsvis. Bare en pasient hadde stadium IV livmorhalskreft. Som definert, pasienter i gruppe 2 var alle HPV positive og hadde ingen celleforandringer i livmor funn.
De PCR-RFLP analyseresultater av 50 stikkprøver ble alle bekreftet ved sekvensering (fig. S1). Genotypefrekvensene i alle grupper ikke samsvare med Hardy-Weinberg likevekt (P = 0,0013). De alleliske frekvensene til A-allel i gruppene 1, 2 og 3 var 8,1, 10,2 og 8,3%, respektivt. ble ingen signifikante forskjeller i allele frekvenser mellom gruppene (P
G1-G2 = 0,271, p
G2-G3 = 0,287 og p
G1-G3 = 0,916, Tabell 2). Det ble ikke observert noen signifikant forskjell fra genotype fordeling mellom gruppene (p
G1-G2 = 0,551, p
G2-G3 = 0,627 og p
G1-G3 = 0,980, tabell 2). Det var ingen forskjell i fordelingen av genotyper blant pasienter med forskjellige kliniske stadier av livmorhalskreft (Gruppe 1) (p = 0,575).
I ytterligere multivariat regresjonsanalyse ble det ingen signifikant sammenheng observert i sammenligningen av genotyper etter justering for alder, røyking, og HPV-infeksjon status. Sammenligning av grupper 2 og 3, fant vi ingen signifikant sammenheng mellom TNF rs1800629 polymorfisme og HPV-infeksjon (AA vs GG: OR = 0,649, 95% KI:. 0,253 til 1,670, P = 0,371 Tabell 3). Sammenligning av grupper 1 og 3, fant vi det var ingen signifikant sammenheng mellom TNF rs1800629 polymorfisme og livmorhalskreft (AA vs GG: OR = 0,993, 95% KI:. 0,376 til 2,618, P = 0,988 Tabell 4). Sammenligning av grupper 1 og 2, fant vi ingen signifikant sammenheng mellom TNF rs1800629 polymorfisme og livmorhalskreft med HPV-infeksjon (AA vs GG: OR = 0,663, 95% KI:. 0,250 til 1,758, P = 0,409 Tabell 5). Ingen foreninger ble funnet i kombinerte genotyper (AA vs. GG + GA eller GG vs. GA + AA) med livmorhalskreft (Tabell 3-5).
Diskusjoner
I denne studien, Vi evaluerte pasienter med høy risiko HPV og livmorhalskreft (gruppe 1), med høy risiko HPV og ingen livmorhalskreft (gruppe 2), og med verken høy risiko HPV eller livmorhalskreft (Gruppe 3) Vi vurdert forholdet mellom rs1800629 polymorfismer og HPV infeksjon og livmorhalskreft. Vi observerte ikke en signifikant sammenheng mellom rs1800629 polymorfismer og livmorhalskreft eller HPV-infeksjon.
Selv om flere studier har indikert at polymorfismer i promoter regionen rs1800629 kan være en medvirkende årsak til utvikling av livmorhalskreft [14] , [15], [19], [20], [21], har resultatene vært motstridende. Det er ikke klart hvorfor studier ved identiske malignitet produsert avvikende resultater. Forskjeller mellom studiedesign, undersøkte populasjoner, og analytisk metode som brukes kan ha bidratt til disse uoverensstemmelser. Store prospektive studier med matchet case-control studier er nødvendig for å bedre belyse den nøyaktige rollen til TNF rs1800629 polymorfisme i livmorhalskreft.
Våre funn er lik de som er rapportert av Stanczuk et al. [15] og Govan et al. [16], som viste ingen signifikant sammenheng mellom rs1800629 polymorfisme og livmorhalskreft. Våre funn av genotype distribusjon og HPV-infeksjon risiko støttes av Deshpande et al. [14], som etterforsket sammenslutning av rs1800629 polymorfisme med HPV 16-infeksjon. Men studiene var basert på en liten utvalgsstørrelse og kanskje ikke har hatt tilstrekkelig statistisk styrke til å påvise en forskjell. Selv om vi har en stor utvalgsstørrelse, var vi ikke i stand til å bekrefte mulig genetisk mottakelighet for dette SNP nettstedet.
Kirkpatrick et al. [22] viste at livmorhals neoplasi var påvirket av rs1800629 genotype. Siden cervical neoplasi tendens til regress eller fremgang spontant [23], kan det påvirke vurderingen av risikoen for å utvikle livmorhalskreft. Lengre oppfølging ville ha forbedret dette oppklaringsprosenten.
Den etnisk bakgrunn i en populasjonsbasert genetisk mottakelighet studien er også en viktig faktor som påvirker resultatene. Genotypen fordeling av rs1800629 i våre kinesiske pasienter var lik den som er rapportert i indisk [21], Koreansk [24] og Costa Rica kaukasisk [25] bestander, mens vår genotypefordeling var litt annerledes fra Sør-Afrika [15] og zimbabwisk [15 ] afrikansk, og USA [13], [23] og Mexico [14]. Kaukasiske populasjoner. I en meta-analyse, Liu et al. [26] observerte at sammenhengen mellom den rs1800629 AA homozygot genotype og livmorhalskreft var mer betydelig i asiater. Men studier gruppene sitert av Liu et al. [26] var relativt små og under-drevet.
Miljø eksponeringer kan også spille en viktig rolle i disse inkonsekvente resultater. Geografiske variasjoner i HPV-type [27] kan bidra til de forskjellige livmorhalskreftrisiko og endre effekten av rs1800629 polymorfisme. Imidlertid gjorde våre resultater ikke støtter sammenhengen mellom HPV-infeksjon og rs1800629 polymorfisme i den kinesiske befolkningen.
En begrensning med denne studien var at det var en sykehusbasert, kasus-kontrollstudie. Pasientene ble valgt ut fra en enkelt institusjon, og dermed ikke kan ha vært representant for livmorhalskreftpasienter i den generelle befolkningen. Kontrollpersoner ble valgt ut fra samme sykehus, også muligens innføre et utvalg bias. Men fordelingen av rs1800629 genotypefrekvensene i våre pasienter var lik andre rapporter [28] av den kinesiske befolkningen, som foreslo det var ingen utvalgsskjevhet.
TNF-alfa rs1800629 allel A har en tendens til å øke uttrykket av TNF-α [12], men utviklingen trykk synes å redusere hyppigheten av høy TNF-α produsent, allel A, for å redusere dødelighet indusert ved høyt nivå av TNF-α. Tatt i betraktning resultatene, postulerer at vi i immun kompromittert komplekse mikrobielle vaginalt miljø, ikke TNF-α ikke spiller en viktig rolle i både HPV eliminere og HPV-relaterte transformasjon. Og i utviklingen av flere faktorer indusert kreft, dualiteten av TNF-α fastslå at det ikke har avgjørende innflytelse på livmorhalskreft.
Konklusjon
I vår studie fant vi ingen sammenheng mellom TNF rs1800629 polymorfisme og HPV infeksjon eller livmorhalskreft med HPV-infeksjon.
Hjelpemiddel Informasjon
Figur S1.
PCR-RFLP-analyse og sekvensering av TNF-alfa rs1800629 genotype. (A) resultater (elektroforese på 3% Gel) PCR-RFLP-analyse (B) Sekvense resultatene etter ABI 3700.
doi: 10,1371 /journal.pone.0045246.s001 plakater (TIF)
takk til
Vi takker medlemmene av Department of Key Laboratory av medfødt misdannelse Helsedepartementet for deres teknisk assistanse. Vi takker også Spring Snow Jian Lu for henne sjenerøs hjelp på prøvetaking og klinisk arbeid med pasienter med cervical sykdom.
