Standard CPE celler kan være preget av innleide og sfæriske former, løsrivelse fra hverandre, hvis ikke løsrivelse fra vevet kultur plate. Mammosphere kulturer fra din 4T1 cellelinje ble anerkjent og rammet av onkolytiske hsv1 GFP. Sterk grønn fluorescens på grunn av konstitutiv GFP-ekspresjon ble funnet i flere celler av kulene i forhold til den mock infisert kontroll. Til sammen indikerer disse data at både 4T1 monolag og mammospheres kan bli angrepet av onkolytiske HSV-1 GFP.
ALDHbr og ALDHlo celler kan bli jevnt smittet av 4T1 celler farget med aldefluor underlaget utstilt strålende grønn fluorescens, som kanskje ikke skilles fra GFP uttrykk i celler infisert med HSV1 GFP. Men den naturlige fluorescens raskt forsvunnet fra legg fast ALDHbr celler fordi de ikke var i aldefluor buffer, som blokkerte ABC-transportører og beholdt den fluorescerende substrat i cellene, men var som et alternativ fremgangsmåte og skjermfluid når belagt på oppskrifter.
Av den grunn de separerte ALDHbr cellene var fluorescerende gratis og HSV1 drived GFP uttrykk kan brukes til å vurdere smittsomhet til ALDHbr celler. Faste ALDHbr og ALDHlo celler ble infisert med HSV1 GFP på ulike måneder for ulike tider. Som vist i figur 4C, etter 10 timer hadde GFP uttrykket dukket opp i begge delpopulasjoner forurenset med HSV1 GFP på Mois av 0. forurensning for 34 timer, når differensiering og cellevekst hadde framkom, GFP uttrykk var mer tydelig i begge delpopulasjoner. Videre, HSV-1 GFP sykdom effektivitet i begge ALDHlo og ALDHbr cellene var beslektet.
For å analysere konsekvensen av onkolytiske Syk kinase inhibitor på 4T1 ALDHbr celler, ble 4T1 celler behandlet med doksorubicin eller HSV1 HGM CSF i 24 timer, og derfor undersøkt for endringer i forholdet mellom ALDHbr celler ved flowcytometri. På grunn av den fluorescens mellom den aktiverte aldefluor substratet og GFP-ekspresjon ved flowcytometri, ble onkolytisk HSV1 hGMCSF brukes i stedet. Det var en 3. 5-gangers økning i mengden av ALDHbr celler etter behandling med doksorubicin i forhold til tilsvarende kontroll. Likevel er tilstedeværelsen av HSV1 HGM CSF i kanalen ikke noe endre prosentandelen av ALDHbr celler i 4T1-celler sammenlignet med kontrollen.
ALDHbr tumorcelle-frekvens ble evaluert in vivo etter forskjellige behandlinger, for å avgjøre hvorvidt disse tumorceller ALDHbr vises også motstand mot doksorubicin kjemoterapi eller følsomhet overfor HSV-1 HGM CSF in vivo. Uforenlig med in vitro informasjon, det var ikke mer opptrapping i ALDHbr tumefaction celle frekvens in vivo etter kjemoterapi behandling, som var lik, eller enda litt mindre enn de av svulstene behandlet med kjøretøy.
På den annen side, onkolytisk HSV-1 HGM CSF enkelt middel behandlingen resulterte i en vesentlig reduksjon i ALDHbr tumorcelleinformasjon, og volumet av ALDHbr tumorceller ble også betydelig redusert i tumorer behandlet med doxorubicin fulgt nøye av hsv1 HGM CSF versus kjøretøy eller doxorubicin alene.
