Abstract
Innledning
Tykktarmskreft (CRC) er en av verdens tre mest vanlige krefttyper og dens forekomst er økende. For å identifisere pasienter som har nytte av adjuvant behandling krever nye biomarkører. Den regenererende islet-avledede gen (REG) 4 hører til en gruppe av små sekretoriske proteiner involvert i celle-proliferasjon og regenerering. Det er opp-regulert ekspresjon forekommer i inflammatoriske tarmsykdommer også i gastrointestinale cancere. Rapporter om foreningen av REG4 uttrykk med CRC prognose har vært blandet. Vårt mål var å undersøke tumor REG4 uttrykk i CRC pasienter og dens koekspresjon med andre tarm markører.
Metoder
Tumor uttrykk for REG4 ble evaluert ved immunhistokjemi i 840 sammenhengende kirurgisk behandlet CRC pasienter ved Helsingfors universitet Central Hospital. Uttrykk av MUC1, MUC2, MUC5AC, synapthophysin, og kromogranin ble evaluert i en undergruppe av 220 fortløpende opererte CRC pasienter. REG4 uttrykk med clinicopathological parametere, andre tarm markører, og virkningen av REG4 uttrykk på overlevelse ble vurdert.
Resultater
REG4 uttrykk forbundet med gunstige clinicopathological parametere og med høyere total overlevelse fra ikke-mucinous CRC (p = 0,019). For slike pasienter under 65, uttrykket var en uavhengig markør for lavere risiko for død innen 5 år som kreft; univariable hazard ratio (HR) = 0,57; 95% konfidensintervall (KI) (0,34 til 0,94); multivariabel HR = 0,55; 95% CI (0,33 til 0,92). I ikke-mucinous CRC, REG4 assosiert med positiv MUC2, MUC4, og MUC5AC uttrykk.
Konklusjon
Vi viser til vår kunnskap for første gang, at REG4 IHC uttrykk for å være en uavhengig markør for gunstig prognose i ikke-mucinous CRC. Våre resultater motsier de fra studier basert på kvantifisering av REG4 mRNA nivåer, et avvik warranting videre studier
Citation. Kaprio T, Hagström J, Mustonen H, Koskensalo S, Andersson LC, Haglund C (2014) REG4 Uavhengig spår bedre prognose i Non-mucinous tykktarmskreft. PLoS ONE 9 (10): e109600. doi: 10,1371 /journal.pone.0109600
Redaktør: Anthony WI. Lo, Queen Mary Hospital, Hong Kong
mottatt: 21 juli 2014; Godkjent: 11 september 2014; Publisert: 08.10.2014
Copyright: © 2014 Kaprio et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Data Tilgjengelighet:. Den forfatterne bekrefter at alle data som underbygger funnene er fullt tilgjengelig uten restriksjoner. Alle relevante data er i avisen og dens saksdokumenter filer
Finansiering:. Denne studien ble støttet med tilskudd fra Finska Läkaresällskapet, Kurt och Doris Palander Foundation, Sigrid Juselius Foundation, og Medicinska understödsföreningen Liv och Hälsa, K. Albin Johansson Foundation, og en spesiell statlig tilskudd for forskning og opplæring. Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
Verdens tredje vanligste kreftformen, med en årlig forekomst av over en million nye tilfeller, er tykktarmskreft (CRC) [1]. Dens kur er basert på tidlig diagnose, radikal kirurgi, og mulig adjuvant behandling. En slik behandling er rutine for stadium III pasienter. I trinn II, den fordel adjuvant terapi er imidlertid uklar, siden omtrent 80% av kirurgisk behandlet stadium II pasienter overlever uten kjemoterapi. Selv om vi vet at mange høyrisikofaktorer; T4-scenen, lav differensiering, vaskulær invasjon, tumor obstruksjon, tarmperforasjon, og utilstrekkelig lymfeknute reseksjon, kan vi ikke alltid identifisere pasienter som vil ha nytte av adjuvant behandling. Det ville være fordelaktig å finne nye biomarkører til hjelp i behandling beslutninger.
Regenerering holme-avledet genet (REG) proteiner representerer en gruppe av små sekretoriske proteiner involvert i celle spredning og regenerering, som også deltar i dannelsen av immunsystem [2], [3]. De tilhører den kalsiumavhengig lektin (C-lektin) superfamilien, og er delt inn i fire familier, REG I til IV, basert på deres primære struktur. I strid med de andre REG proteinene binder REG4 polysakkarider uavhengig av kalsium [4]. Genene som koder for REG I til III-gener er lokalisert på kromosom 2p12, mens det av REG4 er på 1p12-13. REG4 ble først klonet og identifisert ved Hartupee et al [5] og ved Kämäräinen et al [6]. Inneholdende 158 aminosyrer og med en molekylvekt på over 18 KDa, er det fysiologisk uttrykt i tykktarmen og tynntarmen, med høy ekspresjon i enteroendocrine celler. [6], [7]. I den gastrointestinale epitel, det REG4 aktivert under bestemte faser av differensiering og modning, er dens uttrykk romlig bestemt, og det har blitt foreslått for å understøtte mucinous og nevroendokrine differensiering eller [8], [9]. Oppregulert REG4 ekspresjon forekommer i inflammatoriske tarmsykdommer (IBD) [6], og også forekommer i mange ondartede sykdommer: kolorektal, gastrisk, og bukspyttkjertel kreft [10] – [12]. REG4 er foreslått for å delta i karsinogenese og regenerering av vev, for å virke som en antiapoptotic faktor, og for å fremme proliferasjon og invasjon [13]. Den ultimate fysiologiske og patologiske roller REG4 fortsatt unnvikende, men. Ekspresjon av REG4 i GI-tarmkanalen kreft har i flere studier syntes å være av prediktiv og prognostisk verdi [10], [11], [14], [15]. Funnene i CRC har skjønt, vært kontroversielt: økt uttrykk er et tegn på dårlig prognose etter Numata et al [16], men ingen sammenheng med prognose har dukket opp i andre studier [17], [18]
Denne studien hadde som mål å evaluere i CRC rollen REG4 som en prognostisk markør og sin tilknytning til clinicopathological parametere i en kohort av 840 pasienter. Videre i en undergruppe av 220 pasienter, fokuserte vi på foreningen av REG4 uttrykk med andre markører: markører for mucinous differensiering MUC1, MUC2, MUC4, og MUC5AC, og også markører for nevroendokrin fenotype. Synaptophysin og kromogranin
metoder
pasienter
studie~~POS=TRUNC besto 840 sammenhengende kolorektal kreft pasienter som gjennomgår kirurgi i 1983-2001 ved Kirurgisk avdeling, Helsinki University Central Hospital. En undergruppe av 240 inneholdt følgelig fortløpende opererte pasienter mellom 1998-2001. REG4 ble studert i hele pasientserie, og de andre markører studert i undergruppen. Det finske folkeregisteret Centre gitt oppfølgings vital-statusdata for å beregne overlevelse statistikk, og statistikk Finland gitt dødsårsak for alle de avdøde. Median alder ved diagnose var 66, med en median oppfølgingstid på 5,1 år (spredning 0 til 25,8). 5-års sykdomsspesifikk overlevelse var 58,9% (95% Cl 55,0 til 62,8%). For undergruppen, median alder ved diagnose var 67 med en median oppfølgingstid på 6,0 år (fra 0 til 13,2). 5-års sykdomsspesifikk overlevelse var 64,8% (95% Cl 58,1 til 71,5%). Clinicopathological kjennetegn ved begge grupper er i S1.
Denne studien er i samsvar med Helsinkideklarasjonen og ble godkjent av Kirurgisk Ethics Committee of Helsinki University Central Hospital (Dnro HUS 226 /E6 /06, utvidelse TMK02 §66 17.4 0,2013) og National Tilsynet Welfare and Health ga tillatelse til å bruke vevsprøver uten individuell informert samtykke i denne retrospektive studien (Valvira Dnro 10041 /06.01.03.01 /2012).
Tissue microarray
Formalin-fiksert og parafininnstøpte tumorprøver kom fra arkivene til Avdeling for patologi, Helsinki University Central Hospital. Representative områder av tumorprøver på hematoxylin- og eosin-farget lysbilder ble preget av en erfaren patolog. Tre 1,0 mm diameter slag tatt fra hver prøve ble montert på hver mottaker parafin blokk med en halvautomatisk vev microarray instrument (TMA) (Beecher Instruments, Silver Spring, MD) som beskrevet [19].
Immunohistochemistry
TMA- og vev-blokker ble nylig kuttet i 4-mikrometer seksjoner. Etter deparaffinization i xylen og rehydratisering gjennom en gradvis avtagende konsentrasjon av etanol og destillert vann, ble platene behandlet i en forbehandling modul (Lab Vision Corp, Fremont, CA) i forbehandling buffer i 20 minutter ved 98 ° C for antigen gjenfinning . Fargingsprosedyre av Dako REAL EnVision Detection system, Peroxidase /DAB +, Kanin /Mouse (Dako, Glostrup, Danmark) brukte en Autostainer 480 (Lab Vision). Vevene ble inkubert med primære antistoffer i én time ved romtemperatur. Den REG4 antistoff som beskrevet i [20], andre var fra kommersielle kilder. Antistoffer og deres fortynninger er i tabell 1.
Scoring av prøver
REG4 cytoplasma uttrykk ble scoret i tumorceller som enten negativ til positiv. MUC1 og MUC2 uttrykk var cytoplasma i tumorceller og ble scoret som negativ-lav-moderat-høy henhold til intensitet. For ytterligere statistisk analyse ble de gruppert i: lav (negativ til lav) og høy (moderat til høy). MUC4 og MUC5AC cytoplasmatiske uttrykk ble scoret enten negativ eller positiv. Neuroendocrinic differensiering (negative vs positive) ble evaluert av cytoplasma synapthophysin og kromogranin positivitet. Stainings ble scoret uavhengig av T.K. og J.H., som var blindet for kliniske data og resultat. Forskjeller i scoring ble diskutert før konsensus. Representative bilder av uttrykk er i Figur 1. REG4 uttrykk ble sammenlignet med spredning indeksen med Ki-67 flekker, som vi publiserte tidligere [21]
representative bilder av antistoff stainings i tykk- og endetarmskreft.; REG4-negative og -positivt (A og B), MUC1- negativ og -positivt (C MUC2-negative og -positivt (E J), synapthophysin-negative og -positivt (K L ), kromogranin-negative og -positivt (M N) Original forstørrelse var x 20.
Statistiske analyser
Evaluering av assosiasjonen mellom REG4 uttrykk og clinicopathological parametere eller MUC uttrykk ble gjort av den eksakte Pearson chi-kvadrat test eller nøyaktig lineær-by-lineær assosiasjon test for bestilte parametere. Sykdomsspesifikke total overlevelse ble regnet fra dato for operasjonen til dødsdato fra kolorektal kreft, eller til slutten av oppfølging. Survival analyse av Kaplan-Meier-metoden ble sammenlignet med log rank test. Den Cox regresjon proporsjonal risikomodell servert for uni- og multivariable overlevelsesanalyse, justert for kjønn, alder, Dukes klassifisering og differensiering. Testing av Cox modell forutsetningen om konstant fareforhold over tid involvert inkluderingen av en tidsavhengig kovariat separat for hver testbar variabel. Hazard ratio for differensiering ble analysert i to perioder (0 til 1,25 og 1,25 til 5 år) for å oppfylle forutsetningene i Cox-modellen, med den tidsavhengige Cox modell. Interaksjons vilkårene ble vurdert og en interaksjon mellom REG4 uttrykk og alder dukket opp. Vi beregnet derfor prognostisk rolle REG4 separat for pasienter under og over 65 år Alle testene var tosidig. En p-verdi på 0,05 ble betraktet som signifikant. Alle statistiske analyser ble utført med SPSS versjon 20.0 (IBM SPSS Statistics, versjon 20.0 for Mac, SPSS, Inc., Chicago, IL)
Resultater
Immunohistochemistry
REG4. uttrykk i tumorceller var cytoplasma og litt kornete. Når den er tilstede, ekspresjon var tydelig i de aller fleste tumorceller, men uten atom uttrykk. I hele vevssnitt, ingen klar forskjell i uttrykk dukket opp mellom invasive fronten og resten av svulsten. Videre, i hele seksjoner, REG4 uttrykk dukket opp i enkelte tilfeller i normal epitel, men ble nedregulert i tumorceller. Uttrykk av slimstoffer, synapthopysin og kromogranin var cytoplasma, uten kjernefysiske uttrykk
Av 840 svulster representert i TMA, kan REG4 flekker bli evaluert i 793.; 580 (73,1%) ble scoret som negativ og 213 (28,9%) scoret som positive. I en undergruppe av 220 svulster, ble MUC en uttrykk evaluert i 206 (lav 83,5% og høy 17,5%), MUC2 uttrykk i 210 (lav 17,1% og høy 82,9%), MUC4 uttrykk i 208 (negativt 51,0% og positiv 49,0% ), og MUC5AC ekspresjon i 205 (negativ 93,2% og 6,8% positiv). Neuroendocrinic positivitet (enten /både synaptohysin- og kromogranin-positive) kunne bli evaluert i 212 (negativt 92,9% og positiv 7,1%).
REG4 i lymfe-node metastase
Basert på TMA resultater valgte vi 10 pasienter med Dukes C-sykdom, 5 med REG4-positive svulster og 5 med negative svulster. Ingen av pasientenes REG4 negative svulster viste positivitet i sin lymph-node metastaser, mens av de 5 pasientene med REG4-positiv tumor, 2 viste positivitet også i deres lymfeknutemetastase (figur 2).
REG4- negativ ekspresjon i tumor og -positivt i tilstøtende epitel (A). Positiv REG4 ekspresjon i primærtumor (B) og negativ i det tilsvarende lymfeknutemetastase (C) .Positive REG4 ekspresjon i primærtumor (D) og positiv i dens tilsvarende lymfeknutemetastase (E). Original forstørrelse x 4 i figur A og x 20 i B-E.
REG4 og clinicopathological parametere
Cytoplasmatiske REG4 uttrykk forbundet med mindre avansert stadium (p = 0,014), plassering i riktig hemicolon (p = 0,035), og mucinous histologi (p 0,0001). Vi så ingen sammenheng med alder, kjønn, differensiering, eller plassering (colon vs. endetarm) (tabell 2). Som REG4 forbundet sterkt med tumorhistologi, analyserte vi mucinous og ikke-mucinous CRC separat. I ikke-mucinous CRC, REG4 uttrykk assosiert med mindre avansert stadium (p = 0,005) og høyere differentiaton (p = 0,023). Ingen tilknytning dukket opp med alder, kjønn, tumor beliggenhet, og heller svulst side. (Tabell 3) I mucinous CRC, gjorde REG4 uttrykk ikke forbinder med noe clinocopathological parameter (data ikke vist). Ingen sammenheng mellom REG4 og Ki-67 ble sett i CRC heller ikke i noen av undergruppene analysert (data ikke vist).
REG4 og andre tarm markører
I undergruppe av 220 svulster, fant vi at REG4 uttrykk signifikant assosiert med høyere uttrykk av MUC2, MUC4, og MUC5AC, men ikke med MUC1 uttrykk. Heller ikke REG4 uttrykk forbinder med markører for nevroendokrin differensiering. Det samme forble tro når ikke-mucinous CRC ble analysert alene (tabell 4). I mucinous CRC, REG4 uttrykk forbundet med noen andre markører undersøkt (data ikke vist).
Survival analyse
I ikke-mucinous, CRC REG4 positivitet var et tegn på gunstig prognose ( p = 0,019, log-rank test); 5 års DSS for pasienter med positiv cytoplasmisk REG4 tumor ekspresjon var 67,9% (95% CI 60,5 til 75,3) sammenlignet med 57,8% (95% CI 53,5 til 62,1) for de uten cytoplasmatisk ekspresjon (figur 3). I mucinous CRC, dukket ingen forskjell (data ikke vist). Når vi stratifisert ikke-mucinous CRC for pasienter under eller over 65, REG4 uttrykk var et tegn på gunstig prognose hos pasienter under 65 (p = 0,049, log-rank test.), Med ingen forskjell for de eldre (p = 0,195, log -rank-test). (S2 S3)..
sykdomsspesifikk overlevelse analyse i henhold til Kaplan-Meier metoden for REG4 uttrykk i ikke-mucinous tykktarmskreft ved log-rank test
Cox regresjon univariable analyser bekreftet disse resultatene, med REG4 uttrykk være et tegn på en redusert risiko for død innen 5 år for ikke-mucinous CRC. En vesentlig forskjell dukket også for pasienter under 65 (HR 0,57, 95% KI 0,34 til 0,94, p = 0,029), men ikke for de eldre (HR 0,83, 95% KI 0,57 til 1,22, p = 0,34). Cox regresjon multivariabel analyse for ikke-mucinkjertler CRC pasienter under 65, justert for kjønn, scene, og differensiering, viste at REG4 var en faktor av betydning gunstig prognose (HR 0,55, 95% KI 0,33 til 0,92, p = 0,022) (tabell 5 ).
Diskusjoner
Her viser vi ved immunhistokjemi at REG4 uttrykk i ikke-mucinkjertler kolorektal kreft forbinder med gunstige clinicopathological parametere og at REG4 er en uavhengig markør for gunstig prognose hos pasienter under 65. REG4 uttrykk forbinder med uttrykket av andre tarm markører. MUC1, MUC2, og MUC5AC
REG4 uttrykk var høyere i lav-trinns svulster og i de med av mucinous histologi. Med mucinkjertler svulster ekskludert, REG4 uttrykk knyttet betydelig med høyere differensiering og lav scenen. REG4 uttrykk også forbundet med MUC1, MUC2, og MUC5AC, som støtter det funn at REG4-positive tumorer er mer sterkt differensiert enn er de som er REG4 negativ. Disse resultatene er i overensstemmelse med resultatene av Li et al [17], som viste ved at det for REG4, immunhistokjemisk (IHC) ekspresjon i CRC knytter seg betydelig med høyere differensiering og med fravær av venøs invasjon. Videre REG4 uttrykk viste en trend som assosiasjon med lav T-fasen, fravær av lymfeknutemetastase, og lokal sykdom (Dukes A-B vs C-D). Lignende resultater vises for galleblæren kreft, hvor positive REG4 IHC uttrykk, forbinder med høyere svulst differention [22]. Kontroversielle resultater for CRC i Numata et al. viser at høyere REG4 mRNA uttrykk forbinder med høyere differensiering, dypere invasjon (T-stadium), lymfatisk invasjon, tilstedeværelse av levermetastaser, og mer avansert stadium [16]. De er imidlertid målt mRNA nivåer av PCR, ikke som vi gjorde selve protein uttrykk.
Foreningen mellom REG4 nivåer og carcinoma har vært under studier i både serum og vev. Forhøyet serumkonsentrasjon av REG4 i karsinom pasienter sammenlignet med de i friske kontroller har vært et funn i bukspyttkjertelkreft [12], magekreft [11] og galleblæren kreft [22], noe som indikerer at serum REG4 kan tjene som en diagnostisk biomarkør. Økt REG4 IHC ekspresjon har blitt foreslått som en markør for dårlig prognose i magekreft [23], og forhøyede nivåer av vev REG4 mRNA kan være en markør for dårlig prognose i CRC [16]. REG4 IHC uttrykket har imidlertid vist, ingen virkning på prognose i CRC [17], [18]. En årsak til dette kan være at mucinkjertler og ikke-mucinkjertler kreft ikke ble analysert separat. Også forskjeller i antistoffer, flekker prosedyrer og analyse av stainings kan ha forskjellig fra vår studie. I galleblæren kreft, har REG4 IHC-ekspresjon er assosiert med bedre prognose [22].
Våre resultater viser at REG4 IHC uttrykk er en markør for gunstig prognose i ikke-mucinous CRC, mens ingen forskjell fremkom i mucinous CRC. REG4 uttrykk er konstitutivt høy i mucinkjertler tumorer (dvs. pseudomyxoma peritonei, og mucinkjertler cystadenomas og mucocellular magekreft) Dette kan forklare hvorfor ingen klar variasjon i REG4 uttrykk ble funnet av IHC i gruppen av mucinkjertler CRC svulster. Forskjeller i REG4 ekspresjon var på den annen side tydelig i ikke-mucinous CRC. I våre pasienter under 65, forhøyet REG4 var en selvstendig faktor for bedre prognose i ikke-mucinous CRC. Det virker derfor sannsynlig at REG4 mRNA nivåer kan være forhøyet i CRC pasienter med dårlig prognose, men dette er ikke oversatt til protein. Videre studier har således garanteres å sammenligne REG4 mRNA-nivåer med REG4 IHC hvert enkelt tilfelle.
Resultatene av fem par REG4-positive primære tumorer og deres tilsvarende lymfeknute-metastaser viste at av de fem lymfeknuter, bare to viste REG4 uttrykk; Dette kan innebære at en REG4-negative undergruppe av tumorceller er mer sannsynlig å metastasere enn REG4-positive celler.
REG4, er uttrykt i inflammatoriske tarmsykdommer og også i margen av magesår, regnes som en markør av inflammasjon [6]. I noen av våre hel-vev seksjoner tumorvev farget negativt for REG4, men den tilstøtende godartet epitelet uttrykt REG4 sterkt, tilsynelatende representerer en betennelsesreaksjon mot tumoren.
Det er bemerkelsesverdig at REG4 ekspresjon overfører en mer gunstig prognose bare i CRC uten mucinous differensiering. Faktisk har høy ekspresjon av REG4 dukket opp i aggressive former for gastrointestinal kreft som viser mucinous fenotype lignende mucocellular (signet ring celle) karsinom i magen [9]. På den annen side er REG4 også rikelig tilstede i slimstoffrike cystadenomas av tillegget og i dens ondartet, disseminert form, pseudomyxoma peritonei, noe som er svært motstandsdyktig terapi.
Et flertall av entero-endokrine celler i normal tarmslimhinnen vise høy fysiologisk uttrykk for REG4 med co-uttrykk for synaptophysin og kromogranin. Intestinal nevro endokrine svulster i både lav og høy grad viser også REG4 positivitet, ofte med en særegen anatomisk fordeling med den sterkeste ekspresjon i et enkelt lag av celler i periferien av tumoren som er i intim kontakt med det omkringliggende stroma [6] gitt dette, var det litt interessant at synaptophysin- og kromogranin-positive CRC svulster i denne studien fortsatt negativt for REG4.
Flere rapporter tyder på at onkogene rolle REG4 i utviklingen av kreft i mage-tarmkanalen. Den ultimate molekylære mekanismer har imidlertid vært unnvikende. Bishnupari et al [24] rapportert at behandling av dyrkede tykktarm adenokarsinomceller med rekombinant REG4 protein indusert fosforylering av EGF-reseptoren og Akt. De foreslo at REG4 er et transaktivator av EGFR /Akt signalveien. En ytterligere klarlegging av rollen av eksogent REG4 som en regulator av cellevekst potensial er imidlertid ventet identifikasjon av den antatte REG4 reseptoren. Ingen bevis viser at økt uttrykk for REG4 av seg selv induserer kreftsvulst, imidlertid. Våre observasjoner på mus transgen for menneskelig REG4 cDNA under villin arrangøren som fører til global overekspresjon av REG4 i tarmslimhinnen ikke forårsake økt svulstdannelse eller mucosal hyperplasi (upubliserte data).
Regulering av REG4 uttrykk er fortsatt dårlig forstått. Vi opprinnelig rapportert sterkt oppregulert ekspresjon av REG4 også i betent IBD mucosa av IBD-lignende foci av gastritt-indusert intestinal metaplasi i magen [6]. Dette tyder på at inflammatoriske cytokiner kan påvirke REG4 uttrykk. Nevroendokrine differensiering, på den annen side, som sett i enteroendocrine celler, synes å gi konstitutiv ekspresjon av REG4. Vi har nylig rapportert co-uttrykk for REG4 med nevronale transkripsjonsfaktor Hath-en (atonale, Math-1) i nevroendokrine svulster [9]. Det som gjenstår å bli etablert, er om en regulator av REG4 uttrykk er Hath-en.
I forhold til hele vevssnitt, gjør at TMA teknikk analyse av større pasient kohorter, men med en mindre andel av svulstene evaluert. Dette stilles ikke noe problem her, men som REG4 fargemønsteret i hele vår seksjon farging var homogen. Av tekniske årsaker ble inntil 5% av prøvene tapt i TMA-produksjon og -staining prosessen. Styrken i denne studien er et stort, godt karakterisert CRC-pasient kohort med vår lange oppfølgingstiden.
Her viser vi til vår kunnskap for første gang, at REG4 IHC uttrykk er en uavhengig markør av gunstig prognose i ikke-mucinous kolorektal kreft hos pasienter under 65 år Disse resultatene er uenige med dem som oppnås ved å evaluere mRNA nivåer; våre uoverensstemmelser med andres funn tilsier videre studier.
Hjelpemiddel Informasjon
Figur S1.
Clinicopathologic karakteristikker av studiepopulasjonen og undergruppen befolkning
doi:. 10,1371 /journal.pone.0109600.s001 plakater (docx)
Figur S2.
REG4 uttrykk som indikerer bedre prognose i ikke-mucinous tykktarmskreft for yngre pasienter. Sykdomsspesifikk overlevelse analyse i henhold til Kaplan-Meier metoden for REG4 uttrykk i ikke-mucinous kolorektal kreft hos pasienter under 65 ved log-rank test
doi:. 10,1371 /journal.pone.0109600.s002 product: ( TIFF)
Figur S3.
REG4 uttrykk viser ingen forskjell i overlevelse i ikke-mucinous tykktarmskreft for eldre pasienter. Sykdomsspesifikk overlevelse analyse i henhold til Kaplan-Meier metoden for REG4 uttrykk i ikke-mucinous kolorektal kreft hos pasienter 65 år og eldre ved log-rank test
doi:. 10,1371 /journal.pone.0109600.s003
(TIFF)
takk
Vi takker Päivi Peltokangas, Gynel Arifdshan, og Elina Aspiala for deres utmerkede teknisk assistanse.
