Vi interessant ikke oppdaget noen doksorubicinol i MCF 7DOX2 12 celler eller deres metode, til tross for sine høyere nivåer av uttrykk for AKR isoformer i cellene. Tilsatt doksorubicinol til celler kunne bli ekstrahert og kvantifisert i mediet og i celler, noe som indikerer at det negative resultatet var ikke skyldes en svikt i teknikken for å påvise doksorubicinol. Herding av enten cellelinje med 5B cholansyre ikke påvirker den intracellulære mengden av doksorubicinol eller nivåene av doksorubicinol i media.
Behandling av Ivacaftor celler med beholderen ABC transporter hemmer og 5B cholansyre ciklosporin En forbedret mobil doxorubicin informasjon ved henholdsvis 800-FDA og 511-gangster,. På den annen side, 5B cholansyre eller cyklosporin A dramatisk økt doxorubicin innhold i MCF 7DOX2 12-celler og 2. 8 fold. Behandling av MCF 7DOX2 12 celler med både 5B cholansyre og ciklosporin En forbedret mobil doxorubicin innhold til nivåer 4. fire ganger høyere enn ubehandlede celler. Vi antar at doksorubicinol ikke lokalisere til kjernen av MCF 7CC12 og MCF 7DOX2 12 celler fordi hydroksylering av doxorubicin senker sin affinitet for DNA.
For å teste dette spekulasjoner, sammenlignet vi DNA-bindende parametere av doksorubicin og doksorubicinol ansette en bindende forskyvning analyse beskrevet i teknikker. Både Bmax og Kapp var vesentlig forskjellig mellom doxorubicin og doksorubicinol, noe som tyder på at, på en molar basis, binder seg til DNA doksorubicinol med en redusert affinitet og kapasitet enn doxorubicin, som vist på figur 7 og Tilleggs dokument 3: Tabell S3. DNA microarray, høy gjennomstrømning kvantitativ PCR, og andre genet profilering strategier har allerede vært veldig til nytte i å bestemme variasjoner i genuttrykk mellom celler eller svulster som gir et svar til de som ikke og kjemoterapi.
Dessverre er den falske funnraten for slike metoder svært høy, hovedsakelig på grunn av påvisning av en mange passasjer gener som ikke er relatert til narkotika respons. Et bredt utvalg av hovedbane analysemetoder eksisterer gjort i stor grad gjennom maskinlæring, og noen i dag, noen kuratert manuelt. Problemet med denne tilnærmingen er selve størrelsen på datasettene, det store antallet dokumenterte veier, og de komplekse statistikk som kreves for å fastslå betydningen av funnene.
I denne studien har vi valgt å bruke en enkel modell for å undersøke biologi doxorubicin motstand, nemlig på jakt etter overrepresentasjon av doxorubicin farmakokinetiske og farmakodynamiske gener i datasett av gener har endret uttrykk i doxorubicin motstand.
