Abstract
Den kliniske betydningen av humant papillomavirus (HPV) i halsen metastaser fra kreft med ukjent primær (CUP) er ikke godt etablert. Vi forsøkte å ta opp forholdet mellom HPV status mellom metastaser og den primære svulsten, og også relevansen av HPV status angående radiografisk påvist cystisk metastaser i hode og nakke plateepitelkarsinom (HNSCC) og CUP. HPV DNA ble undersøkt i 68 matchet par av metastaser og primærtumor, og i metastaser fra 27 kopper. I kirurgisk behandlet kopper, ble p16 undersøkt immunohistochemically. Når mandlene viste okkult tonsill- kreft i CUP, ble HPV DNA og p16 også undersøkt i det okkulte primære. Cystisk metastaser på kontrastforsterket computertomografi skanninger var korrelert med den primære nettstedet og HPV status i en annen serie av 255 HNSCCs og kopper med kjent HPV status. Metastaser var HPV-positive i 19/37 (51%) orofaryngeal SCCS (OPSCCs) og 10/27 (37%) kopper, men ikke i ikke-OPSCCs. Fluid ble samlet inn fra cystisk metastaser ved hjelp av tynn nål aspirasjon i to OPSCCs og en kopp, og alle væskeansamlinger var HPV-positive. HPV-status, inkludert tilstedeværelse av HPV DNA, genotype, og fysisk status, så vel som ekspresjon mønster av p16 var konsistente mellom metastaser og primære eller okkult primær tumor. Occult tonsill- kreft ble funnet oftere i p16-positive CUP enn i p16-negative CUP (odds ratio (OR), 39,0; 95% konfidensintervall (KI), 1,4 til 377,8; P = 0,02). Radiografisk, cystisk metastaser var spesifikke for OPSCC og CUP, og ble assosiert med HPV positivitet i forhold til nekrotiske eller fast metastaser (OR, 6.2, 95% CI, 1,2 til 45,7; P = 0,03). I konklusjonen, forblir HPV status uendret etter metastasering. Den okkulte primære av HPV-positive CUP er mest sannsynlig lokalisert i orofarynx. HPV status bestemmes fra tynn nål aspirates forenkler diagnostisering av cystisk metastaser
Citation. Yasui T, Morii E, Yamamoto Y, Yoshii T, Takenaka Y, Nakahara S, et al. (2014) humant papillomavirus og Cystisk metastaser i orofaryngeal kreft og Kreft Ukjent Primary Origin. PLoS ONE 9 (4): e95364. doi: 10,1371 /journal.pone.0095364
Redaktør: Craig Meyers, Penn State University School of Medicine, USA
mottatt: 11. desember 2013, Godkjent: 25 mars 2014; Publisert: 21 april 2014
Copyright: © 2014 Yasui et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Forfatterne har ingen støtte eller finansiering for å rapportere
konkurrerende interesser:.. forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
livmorhals~~POS=TRUNC fra kreft med ukjent primær ( CUP) er en sjelden klinisk enhet og står i dag for mer enn 3% av hode og nakke plateepitelkarsinom (HNSCC) [1]. I mange tilfeller etter at den første presentasjonen som CUP, er det primære stedet avduket hovedsakelig i orofarynx, særlig i palatine mandel og undersiden av tungen [2]. Orofaryngeal plateepitelkarsinom (OPSCC) er etiologisk klassifisert i to forskjellige undertyper; en er tobakk relatert, mens den andre er forårsaket av humant papillomavirus (HPV) infeksjon [3], [4]. Overekspresjon av p16 tjener som en surrogatmarkør for HPV-infeksjon, selv om en undergruppe av P16-positive tumorer er HPV-negative [4]. HPV-positive og /eller p16-positive OPSCC fortrinnsvis oppstår i palatine mandel og undersiden av tungen [4], noe som tyder på relevansen av HPV til CUP.
HPV prevalens i metastaser fra HNSCC har vært godt studert; Det har vist seg at HPV-positive metastaser er bestemt til OPSCC [5], [6], mens forholdet av HPV status mellom den primære tumor og dens tilsvarende metastaser ikke er godt etablert. Selv om en rekke undersøkelser har vist god overensstemmelse mellom HPV status mellom den primære tumor og metastaser, en prøvestørrelse på hver studie var liten, og HPV fysisk status ble ikke adressert [7] – [9]. HPV utbredelse i metastaser fra CUP er blitt rapportert å variere mellom 28 og 92%, avhengig av definisjonen av CUP [8] – [11], mens forholdet av HPV status mellom noden metastase og dens tilsvarende okkult primær tumor har ikke er etablert.
foreningen for OPSCC med histologisk identifisert cystisk metastaser er godt kjent [12], mens flertallet av okkulte primærvalg i CUP med histologisk identifisert cystisk metastaser er lokalisert i Palatine mandel eller bunnen av tungen [13]; dette tyder på involvering av HPV-infeksjon i dannelsen av cystisk metastaser. Goldenberg et al. analysert HPV status på dissekert vev fra nakken av OPSCC og CUP pasienter, og fant at 87% (13/15) av cystisk metastatiske noder var HPV-positive [14]. I en annen studie er det blitt rapportert at en lateral halscyste ofte viser seg å være cystisk metastaser etter kirurgiske inngrep, fulgt av histopatologisk undersøkelse [15]. Grunnen til dette er at både cystisk metastaser og en lateral halscyste liggende radiografisk som side cervical cyster, og at følsomheten når det gjelder påvisning av SCC-celler ved cystisk væske ved hjelp av cytopathological undersøkelse er dårlig. Følgelig er en nonsurgical differensialdiagnose mellom disse to enhetene når det gjelder HPV status av klinisk interesse. Differensialdiagnose krever ikke bare å etablere en sammenheng mellom HPV status og radiografisk identifisert cystisk metastaser, men også utvikling av HPV analyse av cystisk væske som samles inn av tynn nål aspirasjon (FNA).
Vi designet denne studien til bedre forstå den kliniske betydningen av HPV status angående metastaser fra CUP. For dette formål vi undersøkt HPV status, inkludert tilstedeværelse av HPV DNA, genotype, og fysisk status, i tilpassede par av primær tumor og metastaser i en stor serie av HNSCC, og vurdert forholdet mellom den primære tumor og dens metastaser vedrørende HPV-status. Vi undersøkt videre ikke bare HPV prevalens i metastaser fra CUP, men også forholdet mellom metastaser og den tilsvarende okkulte tonsill- kreft (viste seg etter tonsillektomi) med hensyn til HPV status og p16 uttrykk mønster. I tillegg studerte vi forholdet mellom radiografisk påvist cystisk metastaser og det primære stedet og HPV status, med vekt på HPV deteksjon ved cystisk væske.
Materialer og metoder
Etikk erklæringen
protokollen med denne studien ble godkjent av Institutional Review Board of Osaka University i desember 2004. Alle pasienter gitt skriftlig informert samtykke.
pasienter
HPV status for den primære tumor og dens tilsvarende metastaser, såvel som HPV-status av metastaser fra CUP, ble tatt opp i begge retrospektive og mulige innstillinger. I den retrospektive innstilling, formalinfiksert parafin-embedded (FFPE) prøver fra 28 matchet par av primære og metastaser og fra 17 kopper ble registrert. Alle tumorer ble kirurgisk kuttet ut mellom januar 2005 og mars 2010 uten forutgående behandling, og ble histopathologically diagnostisert som plateepitelkarsinom. I den potensielle innstilling, ble totalt 53 mistenkelige node-positiv HNSCCs og kopper registrert. Biopsiprøver av mistenkelige primære svulster og FNA eksemplarer av mistenkelig metastaser ble oppnådd fra polikliniske pasienter mellom april 2010 og september 2012. Snitt og FNA prøver ble lagret i RNAlater RNA stabilisering reagenser (Qiagen Inc., Valencia, CA, USA) og buffer ATL (QIAamp Mini Kit: Qiagen Inc.), henholdsvis. Når væskeansamling ble foretatt ved bruk av FNA, var dens sentrifugatet lagret som beskrevet ovenfor. Bare en enkelt syklus av FNA ble utført for HPV-analyse, mens FNA ble gjentatt etter behov for cytopathological analyse. Når mandlene avdekket en okkult primære svulst i CUP pasienter, ble de FFPE- eksemplar av det okkulte primære analysert for HPV DNA og p16. Uttrykk av p16 ble også undersøkt i kirurgisk skåret metastaser fra CUP, uavhengig av innstillingene. For radiografisk analyse, totalt 255 HNSCC og CUP pasienter som hadde gjennomgått en forbehandling kontrastforsterket CT scan og hadde blitt påvist patologisk å være node positive, ble inkludert. Disse inkluderte den retrospektive serie 45 HNSCCs /kopper, den potensielle serien på 50 HNSCCs /kopper, og den ekstra serie på 160 HNSCCs. HPV status av den ytterligere serie hadde vært evaluert ved hjelp av FFPE-biopsiprøver fra den primære svulsten [16]. Diagnostisering av CUP ble gjort etter grundig opparbeidelse ikke klarte å oppdage en primærtumor tross patologisk påvist metastaser. Opparbeidelse inkludert følgende: medisinsk historie; fysisk undersøkelse; hals CT og /eller MR; faryngolaryngeal endoskopi; øvre gastrointestinal endoskopi; mucosal biopsi av orofarynx og nasopharynx; og
18F-fluorodeoxyglucose positronemisjonstomografi (FDG-PET) eller FDG-PET /CT. Mandlene ble ikke inkludert i kriteriene fordi i prinsippet mandlene ble utført samtidig med hals disseksjon når svulsten var resectable.
Deteksjon og typing av høyrisiko HPV DNA og vurdering av HPV16 fysisk status
DNA ble ekstrahert fra FFPE-prøver i overensstemmelse med det vev settet DNeasy (Qiagen Inc.), og fra friske prøver i overensstemmelse med den QIAamp Mini Kit (Qiagen Inc.). Tilstedeværelsen av HPV DNA ble screenet for ved hjelp av en nestet polymerase kjedereaksjon (PCR) ved anvendelse av PGMY09 /11 primersett (for primær PCR) og GP5 + /6 + primersett (for sekundær PCR) som tidligere rapportert [17] . De sekundære PCR produktene ble renset og sekvensert direkte med en 3100 Genetic Analyzer (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA). Typing ble oppnådd ved å sammenligne sekvensen med de til kjente HPV-typer ved hjelp av NCBI BLAST-programmet (https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi). Den fysiske statusen HPV16 ble adressert i henhold til forholdet mellom
E2
til
E6
kopiere tallene, som ble bestemt ved hjelp av real-time PCR forsterkning av
E2
og
E6
åpne leserammer som tidligere rapportert [18]. Den livmorhalskreft cellelinjen Caski ble anvendt som en positiv kontroll [19].
Immunhistokjemi av p16
Immunhistokjemisk analyse av p16 ble utført ved anvendelse av 4-um FFPE vevssnitt med en passende positiv kontroll . Etter antigen hentes ved hjelp av en Pascal trykkoppvarmingskammer (DAKO, Glostrup, Danmark), ble seksjonene inkubert med anti-p16-antistoff i en fortynning på 1:500 (klon LC8: Santa Cruz Biotechnology, Inc., Dallas, TA, USA) . Etter inkubering, ble anti-p16-antistoff detektert ved bruk av ChemMate EnVision kit (DAKO) og visualisert ved hjelp av diaminobenzidin som et kromogen. Negativ kontroll farging ble utført i fravær av primært antistoff. Saker ble klassifisert som positive for p16 når 50% eller mer av celler viste kjernekraft og cytoplasma farging.
Definisjon av cystisk node på kontrastforsterket CT scan
Definisjonen av cystisk noder på med kontrast forbedrede CT var i samsvar med de kriterier som er rapportert av Goldenberg et al. [14]. Noder med en rund eller ovale form, en tynn (mindre enn 2 mm) styrke kapsel, homogen vann dempning og ingen indre kompleks som var heterogene, eller har hatt fast område ble klassifisert som cystisk (figur 1a.). Noder med tykkere solide vegger og /eller heterogen, sammensatt sentral lav dempning ble klassifisert som nekrotisk (fig 1b.); mens noder med en homogen solid innhold ble klassifisert som fast (fig. 1c).
Merk et kontrastforbedrende tynn vegg og homogen lav tetthet innhold i cystisk metastaser.
Statistisk analyse
symmetrien HPV status og /eller p16 ekspresjon mellom det primære tumor og dens tilsvarende metastaser ble undersøkt ved hjelp av kappa-testen. Forskjellen i fenotypen til HPV /p16 mellom metastaser fra CUP (med og uten okkult tonsill- kreft) ble undersøkt ved hjelp av nøyaktig Fisher-Freeman-Halton test. Sammenhengene mellom okkulte tonsill- kreft og HPV status og mellom okkulte tonsill- kreft og p16 uttrykk ble undersøkt ved hjelp av univariat analyse ved hjelp av logistisk regresjon modellen og Clopper-Pearson eksakte test, henholdsvis. Forskjeller i forekomsten av cystisk metastaser i henhold til det primære stedet ble vurdert ved hjelp av univariat analyse ved hjelp av logistisk regresjonsmodell eller Clopper-Pearson eksakte test, som passer. Forholdet mellom HPV status og cystisk metastaser ble vurdert ved hjelp av univariat analyse ved hjelp av logistisk regresjonsmodell. Alle statistiske tester var to tailed. P-verdier av 0,05 ble ansett som statistisk signifikant. Alle data ble analysert ved bruk av JMP versjon 10.02 programvare (SAS Institute, Cary, NC, USA).
Resultater
Forholdet mellom HPV status mellom primære og metastaser i OPSCC
i den retrospektive innstillingen, 40% (6/15) av OPSCCs ble HPV-positive og 60% (9/15) var i HPV-negative, både når det gjelder primærtumor og dens tilsvarende metastaser (tabell 1). Tilstedeværelse eller fravær av HPV-infeksjon var konsistent mellom det primære tumor og dens tilsvarende metastaser, og indikerer likheten i HPV status mellom de to (P 0,0001). Av notatet er det faktum at 17% (1/6) av HPV-positive OPSCCs hadde flere metastatisk noder, som alle var HPV-positive. Omvendt, 33% (3/9) av HPV-negative OPSCCs hadde flere metastatisk noder, som alle var HPV-negative. Ingen av de 13 ikke-OPSCCs (5 hypopharyngeal, 4 strupehodet, og 4 orale kreftformer) var HPV-positive.
Når det gjelder potensielle innstillingen, PCR-analyse var mislykket i 6% (3/53 ) av tilfellene på grunn av dårlig DNA forberedelse fra FNAs. Men gjentatte FNAs dokumentert kreftform i alle disse tre tilfellene. Følgelig ble den potensielle analysen begrenset til 50 saker, som til slutt ble diagnostisert med grundig klinisk workup å være følgende kreftformer: 22 orofaryngeal; 2 nasopharyngeal; 7 hypopharyngeal; 7 strupehodet; 2 muntlig; og 10 kopper. I både den primære tumor og dens metastaser, 59% (13/22) av OPSCCs ble HPV-positive, mens 41% (9/22) av OPSCCs og 100% (18/18) av de ikke-OPSCCs var HPV negative i både den primære tumor og dens metastaser; igjen, dette antydet likheten i HPV status mellom det primære tumor og dens metastaser (P 0,0001; tabell 1). Kollektivt, 51% (19/37) av OPSCCs ble HPV-positive, som alle har sin opprinnelse i enten Palatine mandel eller undersiden av tungen. Som vist i tabellene 2 og 3, både HPV-genotype og fysiske tilstand var i overensstemmelse mellom det primære tumor og dens metastaser (P 0,0001). HPV16 utgjorde 95% (18/19) av HPV-positive tilfeller og HPV33 ble påvist i de resterende ett tilfelle. Komplett viral integrering ble funnet i 56% (10/18) av HPV16-positive tilfeller, mens de resterende 44% (8/18) av HPV16-positive tilfeller oppviste en blanding av episomal og integrerte virale former.
HPV prevalens i CUP og forholdet mellom HPV status mellom det okkulte primære og metastaser
i retrospektive og prospektive innstillinger, 35% (6/17) og 40% (4/10 ) av kopper var HPV-positive, henholdsvis, noe som indikerer at totalt 37% (10/27) av kopper ble HPV-positive (tabell 1). Detaljerte egenskapene av kopper med hensyn på HPV er presentert i tabell S1 for den retrospektive innstillingen og i Tabell S2 for den potensielle innstilling. HPV16 og HPV18 utgjorde 80% (8/10) og 20% (2/10) av de 10 HPV-positive tilfeller, respektivt. Komplett viral integrering ble funnet i 63% (5/8) av HPV16-positive tilfeller, mens de resterende 38% (3/8) av HPV16-positive tilfeller viste blandede virus former. Det bør bemerkes at fluid ble samlet ved FNA i tre tilfeller (2 OPSCCs og en CUP) i den potensielle omgivelser. Alle de tre væskeansamlinger ble funnet å være HPV-positive, selv om gjentatt FNA cytologi ikke klarte å oppdage ondartede celler i en av dem.
Av 27 pasienter med CUP, 19 gikk mandlene sammen med hals disseksjon, som avslørte okkult tonsill- kreft hos 32% (6/19). Forholdet mellom metastaser og dens tilsvarende okkult tonsill- kreft angående HPV status og p16 ekspresjon er oppsummert i tabell 4. fenotypen av HPV status og p16 ekspresjon var konsistent mellom metastaser og dens tilsvarende okkult tonsill- kreft (P = 0,01). Dessuten, som vist i tabellene 2 og 3, HPV-genotype og fysiske tilstand var konsistente mellom metastaser og dens tilsvarende okkult tonsill- kreft. Fig. 2 viser hematoxylin og eosin farging og p16 immunhistokjemi av okkult tonsill- kreft med cystisk metastaser. Den overfladisk slimhinne lag av mandel ble funnet å være intakte, mens kreftceller som uttrykker p16 var fremtredende i en krypt lag med invasjon i det submucosale lag (fig. 2a og 2b). Kreftvev som avgrenset et tynt cystisk vegg diffust uttrykt p16 (Fig. 2c og 2d).
Målestokk tilsvarer 1 mm.
Av notatet, 100% (6/6) av kopper med avduket okkult tonsill- kreft uttrykte p16, mens 50% (3/6) var HPV-positive. I skarp kontrast til bare 23% (3/13) og 15% (2/13) av kopper uten avduket okkult tonsill- kreft var p16-positive og HPV-positive, henholdsvis. Forskjellen i fordelingen av HPV /P16 fenotyper var statistisk signifikant mellom kopper, med og uten avduket okkulte tonsill- kreft (P = 0,004); dette funnet bedt oss om å undersøke forholdet mellom okkulte tonsill- kreft og HPV status eller p16 uttrykk i metastaser fra CUP. Som vist i tabell 5, kan muligheten for at okkult tonsill- kreft bli oppdaget etter mandlene var signifikant høyere når metastaser fra CUP var p16-positiv, enn når det var p16-negative (odds-ratio (OR), 39,0; 95% konfidensintervall (CI), 1,4 til 377,8; P = 0,02). Selv om okkulte tonsill- kreft ble påvist oftere hos HPV-positive CUP enn i HPV-negative CUP, gjorde forskjellen ikke statistisk signifikant (p = 0,17)
Association of radiografisk identifisert cystisk metastaser med primær svulst nettstedet og HPV status
kontrastforsterket CT-skanning fra totalt 255 pasienter med lymfeknutepositiv HNSCC eller CUP ble anmeldt (tabell 6). Ingen av 146 ikke-OPSCCs (18 nasopharyngeal, 91 hypopharyngeal, 25 strupehodet, og 12 muntlige kreftformer) viste radiografisk påvist cystisk metastaser, mens 6% (5/82) av OPSCCs og 11% (3/27) av kopper gjorde. Alle de fem OPSCCs med radiografisk påvist cystisk metastaser opprinnelse i enten palatine mandel eller undersiden av tungen. Forekomsten av cystisk metastaser var betydelig lavere i ikke-OPSCC enn i OPSCC (OR 0,05; 95% CI, 0,004 til 0,8; p = 0,03). I de tilfellene med cystisk metastaser, 38% (3/8) viste flere lymfeknutemetastasering, som alle involverte nekrotisk metastaser. Alle de resterende fem tilfeller viste enslig nodal metastasering, som var cystisk. Fordi både HPV-infeksjon og cystisk metastaser var spesifikke for OPSCC og CUP undersøkte vi foreningen av HPV status med radiografisk funn av metastaser i OPSCC og CUP (tabell 7). Sammenlignet med nekrotisk og /eller faststoff metastaser, cystisk metastaser var mer sannsynlig at HPV-positive (33 versus 75%, OR, 6,2; 95% CI, 1,2 til 45,7; p = 0,03). I sin tur, frekvensen for radiografisk identifiserende cystisk metastaser var høyere i HPV-positive tumor enn i HPV-negativ tumor (15 versus 3%, OR, 6,2; 95% CI, 1,3 til 43,8; p = 0,02).
Diskusjoner
i denne studien har vi vist at HPV-positive metastaser er spesifikk for OPSCC, spesielt når OPSCC oppstår i palatine mandel og undersiden av tungen. Vi har også vist at HPV-status, inkludert tilstedeværelse av HPV DNA, genotype, og fysisk status, var konsistent mellom det primære tumor og dens tilsvarende metastaser. Disse resultater antyder at okkult primærtumor av CUP med HPV-positive metastaser er mest sannsynlig lokalisert i oropharynx, særlig i Palatine mandel eller undersiden av tungen. Funn om vår serie med kopper var i samsvar med dette forslaget. Mandlene avslørte okkult tonsill- kreft hos 60% (3/5) av kopper med HPV-positive metastaser og 67% (6/9) av kopper med p16-positiv metastaser, men ikke i noen av 10 kopper med HPV-negative /p16-negative metastaser. Videre har vi vist for første gang at HPV-status, inkludert tilstedeværelse av HPV DNA, genotype, og fysisk status, så vel som ekspresjon mønster av p16 er konsistente mellom metastaser og dens tilsvarende okkult tonsill- kreft. Samlet har vi etablert ikke bare at HPV-status av svulsten forblir uendret etter metastaser, men også at det okkulte primære stedet for CUP med HPV-relaterte metastaser eksisterer i orofarynx.
Gitt disse funnene, det er mest sannsynlig i tilfelle av CUP med HPV-relaterte metastaser som okkult primære svulsten er lokalisert på undersiden av tungen, med mindre okkult tonsillare kreft er bevist etter mandlene. Weiss et al. rapportert at mandlene og blind biopsi av undersiden av tungen avduket det okkulte primære svulst i alle de 12 kopper med HPV-positive metastaser, og i alle de 11 kopper med p16-positiv metastaser [8]. I vår serie, mandlene ikke klarte å avdekke okkult tonsill- kreft hos 40% (2/5) av kopper med HPV-positive metastaser, og i 33% (3/9) av kopper med p16-positiv metastaser, der det okkulte primære tumor var forventet å være lokalisert på undersiden av tungen. Videre fant vi at mandlene var mislykket i å oppdage det okkulte primære svulst i alle de 10 kopper med HPV-negative /p16-negative metastaser. Likeledes, Park et al. rapportert at mandlene og slimhinnebiopsi var vellykket i identifisering av okkult OPSCC i kun 7% (2/27) av kopper med HPV-negative metastaser og hos 14% (4/29) av kopper med p16-negative metastaser [10 ]. Det virker som det er vanskelig å identifisere den okkulte primære svulsten ved hjelp av mandlene når metastaser fra CUP er HPV-negative /p16-negative.
Ifølge en systematisk gjennomgang av HPV-typene i HNSCC, utbredelsen av HPV18 i OPSCC var lav; HPV18 utgjorde bare 9 av 909 (1,0%) HPV-positive OPSCC tilfeller [20]. Videre, de aller fleste ( 95%) av HPV18-positive HNSCCs var ikke OPSCCs. I kontrast, stod HPV18 for to av ti (20%) HPV-positive kopper i vår familie; dessverre, både av pasientene med HPV18-positive kopper ikke gjennom mandlene (tabell S1 og S2). Det er fortsatt uklart om hvorvidt eller ikke det okkulte primære stedet i disse to kopper var mandel. Gitt det ovennevnte funn at ikke-SCC i munnhule og svelg danner det store flertallet av HPV18-positive HNSCC tilfeller, er det sannsynlig at den primære okkult av HPV18-positive CUP foreligger ved andre enn oropharynx områder. Dette er en interessant problemstilling som må tas opp i fremtiden.
OPSCC og CUP danner ofte histologisk identifiserbare cystisk metastaser [12], [13]. Motsatt er cystisk metastaser ofte feildiagnostisert som en lateral halscyste [15]. I sin tur, er det ikke før kirurgisk inngrep etterfulgt av histopatologisk undersøkelse at lateral halscyste kan bevises å være cystisk metastaser. Dette er fordi både cystisk metastaser og lateral halscyste liggende radiografisk som side cervical cyster, og fordi følsomheten av cytopathological undersøkelse er dårlig i påvisning av maligne celler ved cystisk væske. I cystisk metastaser, er følsomheten av cytopathological diagnose blitt rapportert å være i området fra 33 til 50% [15], [21]. For å finne en løsning om differensialdiagnose av disse to enhetene, må vi først adressert forholdet mellom primære nettstedet og radiografisk identifiserbare cystisk metastaser på kontrastforsterket CT bildebehandling. Vi fant ut at radiografisk identifiserbare cystisk metastaser var spesifikke for OPSCC og CUP, og at det sekundære området av OPSCC med radiografisk identifiserbare cystisk metastaser var enten palatine mandel eller undersiden av tungen. Fordi det primære stedet spesifikk for cystisk metastaser var identisk med det primære stedet spesifikke for HPV-infeksjon, vi neste undersøkt sammenhengen mellom HPV status og cystisk metastaser. Vi fant ut at radiografisk identifiserbare cystisk metastaser er mer sannsynlig å bli HPV-positive sammenlignet med fast eller nekrotisk metastaser i OPSCC og CUP. Disse funnene tyder på at HPV positivitet av cystisk væske som samles inn av FNA vil hjelpe med å gjøre en endelig diagnose, nemlig at cyste av interesse er ondartet. In situ hybridisering, som kan brukes i deteksjonen av HPV DNA i celleblokker fremstilt av cystisk væskeansamling, synes utilstrekkelig for dette formål på grunn av lav cellularitet. PCR, som er overlegen i forhold til in situ hybridisering i følsomhet, er egnet til å tjene en mer effektiv måte for påvisning av HPV DNA i cystisk fluidoppsamling. I denne studien har vi vist for første gang muligheten til å oppdage HPV DNA ved hjelp nestet PCR i væskeansamlinger aspirerte fra cystisk metastaser. Kollektivt, har vi vist at radiografisk identifiserbar cystisk metastaser er mest sannsynlig HPV-positive, og at PCR muliggjør deteksjonen av HPV DNA i fluidoppsamling ved hjelp av FNA. Disse funnene tyder på at en lateral livmorhals cyste som FNA væsken er HPV-positive er cystisk metastaser, men ikke en lateral halscyste.
På kontrastforsterket CT bildebehandling, 6% av lymfeknutepositiv OPSCC og 11% av lymfeknutepositiv CUP viste cystisk metastaser. Denne utbredelsen av radiografisk identifiserbare cystisk metastaser i OPSCC og CUP er relativt lav, sammenlignet med den til histologisk identifisert cystisk metastaser. Så mye som 56 og 73% av node-positiv kreft Palatine mandel og undersiden av tungen, henholdsvis, har blitt rapportert til å danne histologisk identifiserbare cystisk metastaser [12]. Denne forskjellen gjenspeiler sannsynligvis den begrensede evne til kontrastforsterket CT bildebehandling for å visualisere en cystisk lesjon. Det er vanskelig å skille en cystisk lesjon fra en nekrotisk lesjon, særlig når lesjon av interesse er liten. Dessuten, selv når en stor metastaser vises nekrotisk på kontrastforsterket avbildning CT, FNA gir noen ganger en væskeansamling, som indikerer at radiografisk noden synes å være nekrotisk, men histologisk det synes å være cystisk.
Som konklusjon, vi har fastslått at HPV status av tumoren forblir uendret etter metastasering. I HPV-positive CUP, er okkult primærtumor mest sannsynlig lokalisert i oropharynx, særlig enten i Palatine mandel eller i bunnen av tungen. HPV-positive OPSCC og CUP tendens til å danne cystisk metastaser. PCR-analyse av FNA væske gjør nonsurgical påvisning av HPV DNA, som kan legge til rette for differensialdiagnose av cystisk metastaser og brachialis kløft cyste.
Hjelpemiddel Informasjon
Tabell S1. .
Kjennetegn på kreft med ukjent primær i retrospektiv innstilling
doi: 10,1371 /journal.pone.0095364.s001 plakater (xlsx)
Tabell S2.
Kjennetegn på Kreft Ukjent Primary i Prospective Setting
doi:. 10,1371 /journal.pone.0095364.s002 plakater (XLSX)
