Abstract
Bakgrunn
phosphoinositide 3-kinase (PI3K) /protein kinase B (PKB, AKT) /mammalian target of rapamycin (mTOR) signalveien spiller en avgjørende rolle i angiogenese og cellevekst, proliferasjon, metabolisme, migrering, differensiering og apoptose. Genetisk mangfold i viktige faktorer av denne veien kan påvirke protein funksjon og signaloverføring, noe som bidrar til sykdomsstart og progresjon. Studier tyder på at
mTOR
rs1064261 og
AKT
rs1130233 polymorfismer er forbundet med risiko og /eller prognose av flere krefttyper. Men dette forholdet med magekreft (GC) er fortsatt uklart. Målet med denne studien var å undersøke hvilken rolle
mTOR Hotell og
AKT
polymorfismer i risiko og prognose for GC.
Metoder
Sequenom MassARRAY plattformen ble brukt til å genotype 1842 personer for
mTOR
rs1064261 T → C og
AKT
rs1130233 G → A polymorfisme. ELISA ble anvendt for å påvise
Helicobacter pylori
antistoffer i serum. Immunhistokjemisk analyse ble brukt for å oppdage totalt og fosforylerte mTOR og AKT proteiner.
Resultater
mTOR
rs1064261 (TC + CC) genotype og
AKT
rs1130233 (GA + AA) genotype var assosiert med økt risiko for GC hos menn (
P
= 0,049,
P
= 0,030). I
H
.
pylori
-negative personer,
AKT
rs1130233 GA og (GA + AA) genotyper var knyttet til økt risiko for atrofisk gastritt (AG;
P
= 0,012,
P
= 0,024). Spesielt,
AKT
rs1130233 (GA + AA) genotype påvist signifikante interaksjoner med
H
.
pylori
i sykdomsprogresjon fra friske kontroller (CON) til AG (
P
= 0,013) og fra AG til GC (
P
= 0,049). I tillegg, for pasienter med
AKT
rs1130233 variant, de i H. pylori-positive gruppen hadde høyere nivåer av AKT fosforylert (p-AKT) ekspresjon.
AKT
rs1130233 genotype ble funnet å være assosiert med clinicopathological parametere inkludert lymfeknutemetastase og alkohol drikker (
P
0,05).
Konklusjon
mTOR
rs1064261and
AKT
rs1130233 polymorfismer var assosiert med økt GC risiko hos menn og økt AG risiko i
H
.
pylori
-negative individer. En signifikant interaksjon eksisterte mellom
AKT
rs1130233 genotype og
H
.
pylori
infeksjon i CON → AG → GC sykdomsprogresjon.
AKT
rs1130233 genotype påvirket p-AKT protein uttrykk i
H
.
pylori
-infected personer
Citation. Øse Y, Li Y, Xu Q, Liu J-w, Xing C-z, Xie X-d, et al. (2015) Association of
mTOR Hotell og
AKT
Gene Polymorfisme med følsomhet og Survival of Gastric Cancer. PLoS ONE 10 (8): e0136447. doi: 10,1371 /journal.pone.0136447
Redaktør: Masaru Katoh, National Cancer Center, JAPAN
mottatt: 02.03.2015; Godkjent: 03.08.2015; Publisert: 28 august 2015
Copyright: © 2015 øse et al. Dette er en åpen tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Data Tilgjengelighet: All relevant data er i avisen og dens saksdokumenter filer
Finansiering:. Dette arbeidet ble støttet med tilskudd fra National Key Basic Research Program of China (. 973 Program Ref 2010CB529304), Stiftelsen National Natural Science of China ( Ref No.31200968)
konkurrerende interesser:. forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
Magekreft kreft~~POS=HEADCOMP (GC) er en av de vanligste kreftformene. over hele verden og en ledende årsak til kreft-relaterte dødsfall [1]. Initiering og utvikling av GC er en flertrinnsprosess påvirket av genetiske og miljømessige faktorer. Studier har indikert at eksogene miljøfaktorer inkludert
Helicobacter pylori plakater (HP) infeksjon, kostholdsvaner, røyking, alkohol drikking, og økonomiske faktorer bidrar til magekreftutvikling [2]. Under lignende miljøforhold, personer med ulik genetisk bakgrunn lider ulik risiko for kreft med ulike kliniske resultater. Til nå har samspillet mellom genetiske og miljømessige faktorer med magekreft vært stort sett ukjent.
Polymorfisme er en klasse av genetiske faktorer som deltar i magekreftutvikling og bestemmer interindividuelle variasjoner i GC risiko. Genetisk polymorfisme kan svekke iboende beskyttende mekanismer og øke skader forårsaket av miljøkreftfremkallende. Bærere av mottakelige genotyper er en større risiko for å utvikle kreft enn de med resistente genotyper under lignende forhold. Derfor genetiske faktorer spiller en avgjørende rolle i GC risiko og klinisk utfall.
phosphoinositide 3-kinase (PI3K) /protein kinase B (PKB, AKT) /mammalian target of rapamycin (mTOR) pathway regulerer ulike celle funksjoner inkludert vekst, spredning, migrasjon, og apoptose. Tapia et al. rapportert at PI3K /AKT /mTOR pathway er aktivert i GC og at de fleste proteiner (fosforylerte og ufosforylerte former) studert så langt i denne veien er overexpressed i tumorvev [3]. MTOR er et sentralt medlem av PI3K /AKT /mTOR sti og en kjerne metabolsk signalmolekyl [4, 5]. Enkeltnukleotidpolymorfi (SNPs) kan påvirke mTOR uttrykk og transkripsjonen aktivitet, og dermed endre protein funksjon. Så langt, totalt 14 polymorfismer i dette genet har blitt studert, hvorav tre SNPs (rs2295080, rs1883965, og rs2536) er mest rapportert. Den rs2295080 polymorfisme i promoter-regionen er rapportert å redusere risikoen for nyrecellekreft [6], GC [7], og prostatakreft [8] av downregulating endogent protein ekspresjon. Den rs1883965 polymorfisme har vært forbundet med en økt risiko for GC [9] og esophageal plateepitel kreft [10]. Videre er rs2536 polymorfisme knyttet til en betydelig økt risiko for prostatakreft [8]. I tillegg har
mTOR
rs11121704 polymorfisme er assosiert med dårligere kliniske parametre (død, metastaser, og kjemoterapi motstand) [11]. Det er 45 eksoner i
mTOR
genet, og rs1064261 polymorfisme ligger i ekson 18. T → C variasjon ligger på grensen av ekson 18 og intron 19, men dens forhold med sykdommen er fortsatt uklart .
AKT
genet er avgjørende for celleoverlevelse og koder en viktig nedstrøms effektor av PI3K /
AKT Twitter /
mTOR
sti som regulerer nøkkelen cellulære funksjoner inkludert glukose metabolisme og proteinsyntese.
AKT
, alternativt kjent som
akt1
, har fem allment studert polymorfismer (rs3803300, rs1130214, rs2494732, rs2498804, og rs1130233); de fire første har vært knyttet til risiko eller prognose for nasofaryngeal karsinom, muntlig plateepitelkarsinom, og ikke-småcellet lungekreft. Den rs1130233 polymorfisme ligger i ekson 8 og G → En variant er plassert på grensen av ekson 8 og intron 7.
AKT
en AA haplotype for både rs1130233 og rs2494732 er rapportert å gi økt risiko for nasofaryngeal karsinom [12]; den haplotype inneholder variant alleler av rs1130214 og rs3803300 polymorfismer signifikant øker mottakelighet for muntlig plateepitelkarsinom [13]. Bærere av (GT + GG) genotype av
AKT
en rs2498804 eller CT /TT genotypen av
AKT
en rs2494732 ble funnet å ha en økt risiko for hjernemetastaser fra ikke-småcellet lungekreft [14].
AKT
en rs3803300, rs1130214, og rs2494732 ha betydelige effekter på overlevelse i ikke-småcellet lungekreft pasienter: pasienter med rs3803300 G-allel og rs1130214 G allel hadde kortere total overlevelse (OS) og sykdomsfri overlevelse (DFS) ganger [15].
Selv om variasjoner i
mTOR Hotell og
AKT
spiller viktige roller i magekreftutvikling, har ingen studier undersøkt forholdet mellom
AKT
polymorfisme med GC risiko og prognose. I tillegg mekanistiske koblingen mellom
mTOR
rs1064261 og både kreft mottakelighet og overlevelse er ukjent. For å belyse hvorvidt
mTOR Kjøpe og
AKT
polymorfismer kan tjene som risiko og /eller prognostiske markører for GC, vi undersøkte
mTOR
rs1064261 og
AKT
rs1130233 polymorfismer i forhold til GC risiko og deres interaksjon med
H
.
pylori
i en case-control studie av 1842 personer. I 205 personer med tilstrekkelige data, ble clinicopathological parametere analysert for å utforske foreningen av disse to polymorfismer med GC prognose og dermed identifisere nye biomarkører for GC risiko og prognose.
Materialer og metoder
Studiedesign og studiepopulasjonen
utformingen av denne studien ble godkjent av human Etisk komité i First Affiliated Hospital of China Medical University (Shenyang, Kina). Hver deltaker gitt skriftlig informert samtykke under en epidemiologisk undersøkelse. Studien utforming følger to deler (polymorfisme og protein nivå analyser) og assosiasjoner mellom polymorfismer og sykdomsrisiko og prognose ble undersøkt. I GC risikoanalyse, GC pasientene var fra First Affiliated Hospital of China Medical University som fikk kirurgi operasjon reseksjon eller gastroscopic diagnose /behandling mellom 2004 og 2013. De AG pasienter og kontroller ble rekruttert fra en helsesjekk program i Zhuanghe, Liaoning provinsen, mellom 2002 og 2013. Alle diagnoser var basert på gastroscopic og histopatologiske undersøkelser
I tillegg ble GC tilfeller klassifisert i intestinal type og diffuse typen basert på Lauren klassifikasjon [16, 17].; AG klassifisering og iscenesettelse var basert på den nye Sydney system [18, 19]. Kontroll deltakerne hadde normale mage funn eller gastritt bare. Informasjonen om røyking vane, alkoholforbruk og slektshistorie ble kjøpt opp av «ansikt til ansikt» spørreundersøkelse. Røykere og alkoholholdige drikker ble definert som følger: hvis man røykte mer enn én gang per dag, og hvis dette varte mer enn ett år, da denne personen ble definert som røykere, og denne situasjonen inkludert nåværende røykere og tidligere røykere som hadde sluttet å røyke for mer enn ett år. Personer som ikke tilfredsstiller denne situasjonen ble definert som aldri har røykt. Hvis en konsumert en flaske øl eller en femtedel pund av brennevin om dagen, og hvis denne situasjonen varte mer enn ett år, så er dette personen ble ansett drinkers. Individer som ikke passer denne standarden ble definert som nondrinkers. Fastende venøs blod ble innhentet fra hver deltaker og lagret ved -20 ° C som serum og clotted celler.
For å ytterligere evaluere forholdet mellom polymorfismer med clinicopathological parametere og overlevelse av GC, utførte vi en prognostisk analyse av GC pasienter for hvem tilstrekkelig kliniske data var tilgjengelig. Histologiske data ble vurdert i henhold til helseorganisasjons kriterier og tumor-node-metastaser (TNM) iscenesettelse av postoperative patologiske prøver ble gjort i henhold til syvende utgaven av av International Union Against Cancer (UICC) /amerikanske Joint Committee on Cancer (AJCC) ( 2010) kriterier. Pasienter med fjernmetastaser før operasjonen, var de som fikk strålebehandling eller kjemoterapi før operasjonen, og de med mangelfull informasjon for prognostisk analyse utelukket. En sensitivitetsanalyse ble utført for å teste om de ekskluderte pasientene hadde virkning på overlevelse analyse. Oppfølging for alle pasienter ble gjennomført i mai 2014.
SNP genotyping
Genomisk DNA ble ekstrahert fra blodprøver ved hjelp av fenol-kloroform metoden [20] og fortynnet til å jobbe konsentrasjon på 50 ng /ul i
mTOR
rs1064261 T → C og
AKT
rs1130233 G → En genotyping. Prøvene ble plassert tilfeldig i 384-brønns plater og analysert på en blindet måte til sykdomsstatus. Genotyping ble utført ved hjelp av Sequenom MassARRAY plattform (Sequenom, San Diego, California, USA) i henhold til produsentens instruksjoner. For kvalitetskontroll, gjennomgikk 5% av prøvene gjentatt genotyping; Resultatene var 100% konsekvent.
H. pylori serologi undersøkelse
serologi analyse for å påvise
H
.
pylori
infeksjon ble utført ved hjelp av ELISA (
H
.
pylori
-IgG ELISA kit, Biohit, Helsinki, Finland), som beskrevet tidligere [21]. En lesning av 34 enzymimmun enheter ble ansett å indikere
H
.
pylori
positivitet.
Påvisning av mTOR og AKT proteiner i vev
Immunhistokjemisk analyse ble brukt for å bestemme uttrykket av total og fosforylert mTOR og AKT (p-mTOR og p -AKT) proteiner i 65 formalinfikserte, parafininnstøpte GC vevsprøver. Vevsprøver ble kuttet i 4-mikrometer tykke seksjoner og montert på poly-L-lysin-belagte glassplater. Etter sitronsyre antigen gjenfinning, ble primært antistoff inkubert med vevssnitt ved 4 ° C over natten (fortynning konsentrasjon: mTOR og p-mTOR 1: 100, AKT 1: 300, og p-AKT 01:50, ble alle innkjøpt fra Cell Signaling Teknologi). Etter tre 5 minutters vaskinger i fosfatbuffer saltvann, ble vevssnitt inkubert med biotinylert sekundært antistoff (Maixin, Fujian, Kina) og streptavidin-biotin-peroksidase i 10 minutter hver ved 37 ° C. For negative kontroller, ble primært antistoff erstattet med PBS buffer.
Statistisk analyse
Statistisk analyse ble utført ved hjelp av SPSS (versjon 18.0) statistisk programvare (SPSS, Chicago, IL, USA). Hardy-Weinberg likevekt (HWE) ble først undersøkt hos friske kontroller. Justert odds ratio og 95% konfidensintervall (CIS) for forholdet mellom de to polymorfismer og sykdomsrisiko ble beregnet ved multivariabel logistisk regresjon, med justering for kjønn, alder og
H
.
pylori
infeksjonsstatus. . I et stratifisert analyse, når stratifisert etter alder, kjønn og
H
pylori
infeksjonsstatus ble justert; . Når stratifisert etter kjønn, alder og
H
pylori
infeksjonsstatus ble justert; og når stratifisert etter
H
.
pylori
smittestatus, kjønn og alder ble justert. Sannsynligheten ratio testen ble utført for å vurdere samspilleffekter av genotype og
H
.
pylori
på sykdomsrisiko ved å sammenligne modellen involverer bare de viktigste effektene av kjønn, alder,
H
.
pylori
status, og genotype med full modell (som også inneholder samspillet begrepet av genotype med
H
.
pylori
status). Pearsons χ
2-test ble anvendt for å vurdere relasjonen av forskjellige genotyper med clinicopathological parametere av GC. Fishers eksakte metoden ble brukt da den forventede frekvensen var mindre enn fem. Kaplan-Meier metoden ble brukt til å visualisere OS ved genotype gruppe. Den log-rank test ble benyttet for å undersøke forskjeller i overlevelse distribusjoner. Univariable og multivariable Cox-modeller ble utført for å beregne rå eller justert farer forholdstall og 95% konfigurasjons for hver genotype å anslå effekten på overlevelse med og uten justering for konfunderende faktorer. Logistisk regresjonsanalyse ble brukt til å utforske effekten av polymorfismer på protein uttrykk justert etter kjønn, alder og
H
.
pylori
status. To-tailed
P
verdier av. 0,05 ble betraktet som statistisk signifikant
Resultater
baseline pasientkarakteristika
De demografiske og kliniske kjennetegn ved 1842 personer involvert i risikoanalysen omfatter 483 GC pasienter, 686 AG pasienter og 673 friske kontroller er vist i tabell 1. Begge SNPs var til stede i HWE; genotypen fordeling er angitt i tabell 2. Resultatet av sensitivitetsanalyse er vist i tabell S1, noe som bekreftet de ekskluderte pasientene hadde ingen effekt på overlevelsesanalyse. De demografiske og kliniske kjennetegn ved 205 GC pasienter involvert i overlevelsesanalyse som alder, kjønn, Borrmann klassifisering, Lauren klassifisering, TNM stadium, vekstmønster, invasjon dybde, lymfeknutemetastase, røyking, drikking, familiehistorie, og
H
.
pylori
infeksjon er vist i tabell 3.
Association of SNPs med GC og AG risiko
multivariabel logistisk regresjon ble brukt for å undersøke foreningen av
mTOR
rs1064261and
AKT
rs1130233 med GC og AG risiko. Det var ingen signifikant forskjell på
mTOR
rs1064261 og
AKT
rs1130233 på risikoen for CON → AG, AG → GC, CON → GC, eller CON + AG → GC progresjon (tabell 2) .
i lagdeling analyse av menn (tabell 2), bærere av TC genotype av
mTOR
rs1064261 hadde en 1,55 ganger økt risiko for GC sammenlignet med AG (
P
= 0,049, 95% KI 1,00 til 2,38); A-allelet av
AKT
rs1130233 konferert 1.32-fold, 1,29-fold, og 1.30-fold økning i AG → GC, CON → GC, og (CON + AG) → GC progresjon, henholdsvis i G allel (
P
= 0,013, 95% KI 1,06 til 1,64;
P
= 0,038, 95% KI 1,01 til 1,64, og
P
= 0,008, 95% KI 1,07 til 1,58, S2 tabell). I
H
.
pylori
-negativ gruppe,
AKT
rs1130233 GA genotype var assosiert med en 1,69 ganger økt risiko for AG sammenlignet med CON (
P
= 0,012, 95% KI 1,12 til 2,54, tabell 2). I tillegg ble det ingen signifikant sammenheng funnet mellom disse to polymorfismer og intestinal-type eller diffuse-type GC i de overordnede og stratifiserte analyser (S3 og S4 tabeller).
Vi utførte en interaksjonsanalyse for
mTOR
rs1064261 og
AKT
rs1130233 med
H
.
pylori
infeksjon. Resultatene indikerte at
AKT
rs1130233 (GA + AA) genotype hadde en signifikant interaksjon med
H
.
pylori
infeksjon i CON → AG og AG → GC progresjon (
P
= 0,013 og
P
= 0,049; tabell 4). Men ingen signifikant interaksjon av
mTOR
rs1064261 med
AKT
rs1130233 ble observert for CON → AG → GC progresjon i de overordnede og stratifiserte analyser (S5 Table). I tillegg var det ingen signifikant interaksjon mellom disse to polymorfismer og
H
.
pylori
infeksjon i CON → AG → GC progresjon (tabell 4).
Sammenslutning av SNPs med clinicopathological parametere av GC pasienter
Analyse av forholdet mellom
mTOR
rs1064261 og
AKT
rs1130233 med clinicopathological parametre i GC pasienter antydet at
AKT
rs1130233 GA og (GA + AA) variant genotypene forekommer oftere i GC pasienter uten lymfe metastaser enn i de med lymfeknutemetastase (GA 89,1% vs. 71,1%,
P
= 0,012; GA + AA 92,2% vs. 81,1%,
P
= 0,030). GA, AA, og (GA + AA) genotyper var hyppigere i drinkers enn i nondrinkers (GA 61,0% vs. 95,8%,
P
= 0,047; AA 63,6% vs. 88,9%,
P
= 0,047; GA + AA 76,8% vs. 96,9%,
P
= 0,038; tabell 5). Imidlertid ble det observert noen signifikant sammenheng mellom
mTOR
rs1064261 varianter og clinicopathological parametre i GC pasienter.
Ingen sammenheng mellom SNPs og GC pasient overlevelse
Univariable og multivariable Cox-modeller ble utført for å vurdere effekten av
mTOR
rs1064261 og
AKT
rs1130233 polymorfismer på GC overlevelse (tabell 6). Fordi Lauren klassifisering, TNM stadium, vekstmønster, invasjon dybde, og lymfeknutemetastase var signifikant assosiert med overlevelse (
P
0,05, vist i tabell 3), de ble betraktet som justert covariables i Cox proporsjonal farer regresjonsmodell. Resultatene viste ingen signifikant sammenheng mellom de to SNP’er og GC prognose (tabell 6). Tilsvarende hadde en stratifisert analyse ikke påvise noen signifikant sammenheng mellom SNP genotype og GC prognose (S6 tabell).
SNP genotype korrelerer med total og fosforylerte proteiner uttrykk
uttrykk for total og fosforylerte mTOR og AKT proteiner ble analysert i vev fra de ulike grupper av deltakere (fig 1). Totalt sett var det ingen signifikant sammenheng mellom
mTOR
rs1064261 eller
AKT
rs1130233 polymorfisme og total eller fosforylerte mTOR og AKT proteiner. I
H
.
pylori
-positivt undergruppe, andelen av p-AKT-positive celler var signifikant høyere i varianten genotype gruppen enn i villtype gruppe (
P
= 0,045; Tabell 7).
A. uttrykket av mTOR protein i magekreft slimhinnen (100 ×); B. ekspresjon av p-mTOR protein i mageslimhinnen (100 x); C. ekspresjon av AKT-protein i magekreft mucosa (100 x); D. uttrykk for p-AKT protein i mageslimhinnen (100 ×).
Diskusjoner
I denne studien rapporterer vi for første gang en sammenslutning av
mTOR
rs1064261 og
AKT
rs1130233 polymorfismer med GC risiko og prognose. Hos menn
mTOR
rs1064261 (TC + CC) genotype og A-allelet av
AKT
rs1130233 var assosiert med økt GC risiko. I
H
.
pylori
-negative hanner,
AKT
rs1130233 (GA + AA) genotype var assosiert med økt AG risiko. I tillegg har
AKT
rs1130233 (GA + AA) genotype viste en signifikant interaksjon med
H
.
pylori
infeksjon i CON → AG → GC progresjon. Varianten genotype av
AKT
rs1130233 var assosiert med økt p-AKT protein uttrykk.
AKT
rs1130233 polymorfisme var også assosiert med lymfeknutemetastase og alkohol drikking. Disse funnene gir eksperimentelle bevis for å støtte mTOR og AKT som potensielle biomarkører for bestemte typer GC og også gi ledetråder til samspillet mellom
H
.
pylori
infeksjon og mTOR /AKT signalering.
mTOR
genet ligger på menneskelig kromosom 1p36.2 og koder 289 kDa mTOR protein, som består av 2549 aminosyrer . MTOR er medlem av fosfatidylinositol kinase (PIK) familie og har serin /treonin kinase aktiviteter. Vi fant at
mTOR
genet (TC + CC) variant genotype ble assosiert med økt GC risiko hos menn, noe som tyder på at det er involvert i kreftutvikling. MTOR finnes hovedsakelig i cytoplasma under normale forhold, og går inn i kjernen etter aktivering for å regulere nedstrøms mål eukaryote initiering faktor 4E (EIF-4E) bindende protein 1 (4E-BP1) og ribosom 40S liten subenhet S6 protein kinase (p70S6K) [22 -24]. Sistnevnte er en viktig medlem av PI3K /AKT /mTOR reaksjonsvei og en sentral metabolsk signalmolekyl. MTOR integrerer en rekke cellulære signaler fra vekstfaktorer og nærings- og energi status; Det har således viktige biologiske funksjoner i angiogenese og cellevekst, proliferasjon, metabolisme, migrering, differensiering, apoptose og [25]. Dens funksjon er nært knyttet til transformasjon av normal til kreftceller og kreftcelle spredning. Genetiske variasjoner i genene av mTOR signalveien (
PI3K
,
AKT
, og
PTEN
) kan fremme kreftutvikling [26-28].
mTOR
SNPs er rapportert å være assosiert med mottakelighet for GC [7, 9], nyrecellekreft [6], prostatakreft [8], og esophageal plateepitel kreft [10]. Disse SNP’er kan påvirke nivåene av mTOR-ekspresjon og transkripsjonen aktivitet, og dermed endrer proteinets funksjon. G allel av
mTOR
rs2295080 polymorfisme er forbundet med en redusert risiko GC, muligens som følge av redusert promoteraktivitet og mRNA-ekspresjon [7]. En annen
mTOR
polymorfisme lokalisert i den promoter-regionen, rs1883965 G → A, overfører økt risiko for GC [9] og spiserørskreft plateepitel [10]. Våre funn tyder på at den (TC + CC) genotype er forbundet med en økt risiko GC i menn, men ingen virkning på protein-ekspresjon ble observert.
mTOR
kan fremme celleproliferasjon og noe «onkogene» egenskaper. Varianten genotype kan ha enda mer onkogene aktivitet. Som menn er mer sannsynlig å bli utsatt for flere risikoeksponering faktorer (røyking, drikking og usunne levevaner), kan bærere av visse genotype være utsatt for økt risiko for GC.
AKT
, V-
AKT
murine thymom viral onkogen homolog, kart til menneskelig kromosom 14q32.32 og koder for et 56 kDa protein, som består av 480 aminosyrer [15]. AKT er en viktig effektor av PI3K /AKT /mTOR signalveien, og genetisk mutasjon eller unormalt protein ekspresjon kan forandre en rekke cellulære prosessen, inkludert migrering, proliferasjon, vekst og overlevelse. I tillegg er AKT aktivering involvert i celleproliferasjon og apoptose, som er relatert til kreft initiering og progresjon [29].
AKT
SNPs er rapportert å være assosiert med følsomhet overfor og /eller prognose av ulike krefttyper, inkludert nasopharyngeal carcinoma [12], muntlig plateepitelkarsinom [13, 30], ikke-småcellet lungekreft [14 , 15], bukspyttkjertel ductal adenokarsinom [31], og GC [32] via effekt på protein ekspresjon og transkripsjonelle aktivitet. Wang et al. studerte fire SNP’er inkludert rs1130233 i et kinesisk befolkning [13], og fant at tre polymorfismer var assosiert med følsomhet overfor oral squamous cell carcinoma eller DFS, men med ingen signifikant sammenheng for rs1130233. Zhang et al. rapportert at AA haplotyper av
AKT
rs1130233 og rs2494732 tillagt økt nasofaryngeal karsinom risiko [12] og at noen
AKT
haplotyper forårsake økt AKT protein uttrykk [33, 34], som fører til endrede mobil migrasjon og spredning. Derfor
AKT
rs1130233 Et allel kan ha økt proliferativ aktivitet. I denne studien fant vi at
AKT
rs1130233 A-allelet tillagt en økt risiko for GC hos menn. Vanligvis menn har en høyere GC forekomst og en høyere GC dødelighet enn voksne kvinner [35]. Det høye nivået av eksponering av menn til miljørisikofaktorer (røyking, drikking og usunne levevaner) øker deres mottakelighet for GC [36]. Som A-allelet kan ha sterkere proliferativ aktivitet, den kombinerte effekten av
AKT
polymorfisme og kjønn kan delvis forklare den observerte høy GC risiko forbundet med
AKT
rs1130233 polymorfisme hos menn.
i tillegg har vi funnet ut at i
H
.
pylori
-negativ undergruppe,
AKT
rs1130233 (GA + AA) genotype var assosiert med økt AG risiko.
AKT
rs1130233 polymorfisme viste en signifikant interaksjon med
H
.
pylori
infeksjon i CON → AG → GC progresjon. Det er allment akseptert at
H
.
pylori
er en viktig årsak til GC.
H
.
pylori
virulente faktorer kan indusere unormal celledeling og apoptose gjennom å regulere signalveier (inkludert PI3K /AKT); Dette er et nyere forskning hotspot [37-39]. Tabassam et al. antydet at AKT fosforylering indusert av
H
.
pylori
virulensfaktorer CAG PAI og OipA regulerer intracellulære signaler som er ansvarlige for en rekke cellulære funksjoner som er involvert i magekreftutvikling. Den spesifikke fremme AKT serin 473 eller treonin 308 fosforylering av CAG PAI og OipA kan forstyrre nedstrøms spredning og apoptose signaler. En kombinasjon av cag PAI og OipA er tilstrekkelig til å aktivere PI3K /PDK1 sti og AKT /ERK /nedstrøms signalisering [39]. Nakayama et al. rapportert at
H
.
pylori
virulens faktor Vaca induserer β-catenin funksjon ved å aktivere PI3K /AKT sti og inaktivere GSK33β [38], og dermed regulere celledeling, differensiering og apoptose. Disse dataene antyder at interaksjonen mellom
H
.
pylori
med aktivert AKT har en biologisk funksjon. Men ingen av de to SNPs inkludert i denne studien heller
H
.
pylori
infeksjon i forbindelse med disse SNPs viste en signifikant interaksjon med GC. Samlet disse dataene understreker den viktige rollen som
AKT
rs1130233 polymorfisme i PI3K /mTOR /AKT veien. I tillegg, i
H
.
pylori
-positivt undergruppe, de med
AKT
rs1130233 variant genotype hadde økt p-AKT uttrykk. Ettersom dette polymorphism viste en interaksjon med
H
.
pylori
infeksjon, er effekten av denne polymorfisme på protein ekspresjon kan bare oppstå i nærvær av
H
.
pylori
infeksjon. En genetisk mutasjon som fører til unormal ekspresjon AKT er rapportert å fremme cellemigrering og proliferasjon [40, 41], som kan forklare hvorfor denne polymorfismen økte risikoen for AG. Fremtidige store studier er nødvendig for å bekrefte disse resultatene.
Vi sammenlignet også genotype fordelingen av disse to polymorfismer i grupper med ulike clinicopathological parametere og vurdert deres relasjon med GC prognose. Vi fant at
AKT
rs1130233 GA, AA, og (GA + AA) genotyper var hyppigere i drinkers enn i nondrinkers. Vi vil derfor anta at drinkers med
AKT
rs1130233 GA, AA, og (GA + AA) genotyper er mer utsatt for GC. Avan et al. [31] rapporterte at
AKT
rs1130233 A-allelet er assosiert med redusert overlevelse av pancreatic ductal adenokarsinom pasienter, som kan tilskrives redusert
akt1
mRNA og protein uttrykk og redusert apoptose effektivitet [33 , 42].
AKT
rs1130233 Et allel er en risiko genotype for kreft, muligens i forbindelse med alkohol drikking som drikker alkohol var en av de økte risikofaktorer for GC [43-46]. Men ingen signifikant sammenheng mellom disse to SNPs med GC overlevelse ble funnet av Cox regresjonsanalyse. På grunn av den relativt lite utvalg, kan det hende at recall bias eksisterer i case-kontrollstudie, og resultatet status kan ha forårsaket tilfeller å endre sin eksponering profil. Derfor ble ytterligere eksperimenter og store studier for å bekrefte resultatene.
Denne studien har noen begrensninger. For det første prøvestørrelsen var forholdsvis liten, spesielt for overlevelse og protein ekspresjon analyser, som begge trenger en ytterligere bekreftelse på store populasjoner. For det andre ble bare OS analysert i overlevelsesanalyse og andre prognostiske parametre som progresjonsfri overlevelse er også garantert. For det tredje, overlevelsesanalyse ble bare utført i et delsett av hele GC pasientene som kan gjøre sannsynligheten for en selektiv skjevhet, og en stor prøvestørrelse for den prognostiske studien bør utføres i nær fremtid. Fjerde, er funksjonelle eksperimenter nødvendig for å belyse den underliggende sykdommen mekanisme.
Konklusjon
I sammendraget, forholdet mellom
mTOR
rs1064261 og
AKT
rs1130233 polymorfismer med GC mottakelighet og OS har blitt vist for første gang.
mTOR
rs1064261 og
AKT
rs1130233 polymorfismer var signifikant assosiert med GC risiko hos menn.
