Abstract
Bakgrunn
En felles genetisk variant, rs4939827, som ligger i
SMAD7
, ble identifisert av to nye genom-wide association (GWA) studier for å være sterkt forbundet med risiko for kolorektal kreft (CRC). Men følgende replikering studiene gitt motstridende resultater.
Metode og funn
Vi har utført en case-control studie av 641 tilfeller og 1037 kontroller i en kinesisk befolkning og deretter utført en meta-analyse, integrere våre og publiserte data av 34313 tilfeller og 33251 kontroller, for å avklare forholdet mellom rs4939827 og CRC risiko. I vårt case-control studie, ble den dominerende modellen betydelig assosiert med økt CRC risiko [Odds Ratio (OR) = 1,46; 95% konfidensintervall (95% CI), 1,19 til 1,80]. Følgende meta-analyse ytterligere bekreftet dette signifikant sammenheng for alle genetiske modeller, men med betydelig mellom-studie heterogenitet (alle
P
for heterogenitet 0,1). Ved stratifisert analyse, vi viste at etnisitet, sample størrelse, og svulst nettsteder kan utgjøre kilden til heterogenitet. Den kumulative analysen antydet at tydelig tendens til signifikant sammenheng ble sett med å legge studieprøver over tid; mens, viste sensitive analyser resultatene før og etter fjerning av hver studie var like, indikerer sterkt stabiliteten av dagens resultater.
Konklusjon
Resultatene fra vår case-control studier og meta-analyse kollektivt bekreftet signifikant sammenheng av varianten rs4939827 med økt risiko for tykktarmskreft. Likevel bør fine kartlegging av resistens loci definert av rs4939287 bli pålagt å avdekke årsaks variant
Citation. Song Q, Zhu B, Hu W, Cheng L, Gong H, Xu B, et al. (2012) En vanlig SMAD7 Variant er forbundet med risikoen for tykktarmskreft: Bevis fra en case-control studie og en meta-analyse. PLoS ONE 7 (3): e33318. doi: 10,1371 /journal.pone.0033318
Redaktør: Paolo Peterlongo, IFOM, Fondazione Istituto FIRC di Oncologia Molecolare, Italia
mottatt: 02.01.2012; Godkjent: 09.02.2012; Publisert: 21 mars 2012
Copyright: © 2012 Song et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Dette arbeidet ble støttet av Natural Science Foundation National Kina NSFC-81001275 og 81171878 og Fok Ying Tung Foundation for unge lærere i høyere utdanningsinstitusjoner i Kina (131 038) til XM og de grunnleggende forskningsfondene for de sentrale universiteter (Hust. NO 2011QN200) til J.W. Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
tykktarms~~POS=TRUNC kreft~~POS=HEADCOMP (CRC) er den tredje vanligste kreftformen og den fjerde største årsaken til kreftdødelighet i verden [1]. Blant de risikofaktorer og årsaker til CRC, har genetisk komponent sterkt bidratt til CRC utvikling, som står for ca 35% av totalt antall saker som reflekteres av twin-og familiebaserte studier [2]. Men så langt genetiske faktorer har ufullstendig blitt karakterisert.
Genome-wide forening (GWA) studie har i stor grad bidratt til identifisering av vanlige genetiske varianter assosiert til vanlig sykdom uten forutgående kunnskap om gen-funksjon. Flere misliker GWA studier har rapportert flere roman mottakelighet loci til tykktarmskreft [3] – [11] ._ ENREF_7 Blant disse loci, den enkeltnukleotidpolymorfi (SNP, rs4939827), som ligger i 18q21, har vært sterkt assosiert med risiko for CRC ved multippel GWA studier [3], [10]. Broderick et al. først identifiserte rs4939827 i en GWA sett av 620 tilfeller og 960 kontroller og 3 replikering sett av 7377 saker og 5867controls [10], og deretter Tenesa et al. ytterligere raffinert dette funnet i en annen omfattende, faset basert GWA studie bestående av 16759 tilfeller og 15545 kontroller [3]. Interessant, rs4939827 kart til Mødre mot dekapentaplegisk homolog 7 (
SMAD7
), en sterk kandidat genet i den berømte transformasjonen vekstfaktor-β (TGF-β) veien. SMAD7 fungerer som en intracellulær antagonist av TGF-β signalering ved å rekruttere SMURF til reseptorer for inaktivering. Forstyrrelse av SMAD7 og undertrykkelse av TGF-β signale er dokumentert å involvere i CRC [12]. Mye oppmerksomhet har blitt trukket til dette SNP; imidlertid kan flere oppfølgingsstudier ikke replikere krets [13] – [16], som kan være på grunn av prøvestørrelsen. For eksempel, i kinesisk befolkning, Xiong et al. rapportert en signifikant sammenheng med denne SNP med CRC risiko [17], mens Li et al. ikke klarte å gjenskape denne sammenheng [13]. Lignende kontroversielle resultater ble også sett i replikering studier i europeisk [15], [16]. Disse resultatene understreker et behov for ekstra replikering for stor utvalgsstørrelse. Heri, utførte vi en replikering studie bestående 641cases og 1037 kontroller i en kinesisk befolkning. Videre er meta-analyse en metode gre data sammen for å gjøre utvalgsstørrelsen eksponentiell vekst for å få nok kraft til å avklare inkonsistente resultater i genetiske assosiasjonsstudier [18]. Vi videreførte en meta-analyse, som kombinerer dagens og tidligere publiserte studier om rs4939827, for å avklare den reelle forholdet mellom denne SNP og CRC risiko.
Materialer og Metoder
Studie populasjoner
i denne studien, totalt 641 nye CRC tilfeller og 1037 kreftfrie kontroller ble registrert fra mellom 2009 og 2011 fra Tongji Hospital of Huazhong University of Science and Technology, Wuhan, Kina. Tilfeller hadde blitt histopathologically bekreftet med primær kolorektal kreft og hadde ikke fått noen behandling før blodprøver samling. Kontrollene ble tilfeldig valgt fra en gjenstand pool av enkeltpersoner som deltar i helsekontroller opp programmer på samme sykehus i samme tidsperiode som pasientene ble inkludert. Kontrollene ble frekvens tilpasset pasienter etter alder (± 5 år) og kjønn. Alle fag var urelaterte etniske Han-kinesere som bor i Wuhan regionen. Ved rekruttering, ble en 5 ml perifer venøs blodprøve tatt fra hver pasient etter skriftlig informert samtykke ble oppnådd. Denne studien ble godkjent av etniske komité av Tongji Hospital of Huazhong University of Science and Technology.
DNA og genotyping
Genomisk DNA ble ekstrahert fra 5-ml perifer blodprøve bruker RelaxGene Blood system DP319-02 (Tiangen, Beijing, Kina) i henhold til produsentens instruksjoner. De genotyper av rs4939827 ble bestemt ved hjelp av TaqMan SNP genotyping analyse (Applied Biosystems, Foster City, CA) på en 7900HT Fast Real-Time PCR System (Applied Biosystems, Foster City, CA). For kvalitetskontroll, ble 5% dupliseres prøvene tilfeldig valgt for å vurdere reproduserbarhet, med en konkordans hastighet på 100%
Statistisk analyse
Pearson
χ
2
test, fisher eksakte test, og
t
test ble benyttet for å vurdere forskjellene i fordelingen av demografiske karakteristika og genotyper mellom sak og kontrollgrupper, der det er hensiktsmessig. Godhet-of-fit χ
2 test ble vedtatt å vurdere Hardy-Weinberg likevekt (HWE) i kontrollene. Ubetinget multivariate logistisk regresjonsanalyse ble brukt for å estimere odds ratio (ORS) og deres 95% konfidensintervall (CIS) for effekten av rs4939827 genotyper på CRC risiko, etter justering for alder og kjønn. For å unngå de forutsetninger om genetiske modeller, additiv og dominerende modeller for rs4939827 ble også vurdert. Alle statistiske analyser ble utført med SPSS 12,0 programvare. En verdi på
P
. 0,05 ble ansett som representativ for statistisk signifikans
Meta-analyse av rs4939827 i forbindelse med CRC risiko
For ytterligere å undersøke sammenhengen mellom rs4939827 og CRC risiko, en meta-analyse basert på publiserte studier ble gjennomført i henhold til retningslinjene for Preferred Reporting Varer til Systemiske anmeldelser og Meta-analyser Vern (PRISMA) [19]. Systematisk litteratursøk oppdatert til september 2011 ble utført i PubMed og Embase databaser (Figur S1), ved hjelp av søkestrategi basert på kombinasjoner av søkeordene «rs4939827 eller 18q21» og «tykktarmskreft, tykktarms neoplasi eller kolorektal adenom» uten språkbegrensninger . Referanser som er oppført i de hentede artiklene ble også skannet. Anmeldelser, kommentarer og brev ble også kontrollert for ytterligere studier. Studier ble inkludert hvis de møtte alle av følgende kriterier: (a) vurdering av sammenhengen mellom rs4939827 og CRC risiko; (B) bruk av en case-control studie eller nested case-control studie design; (C) informasjonen som gis på genotype eller allel frekvens for risikoestimater; (D) genotype av kontroller er i Hardy-Weinberg likevekt; (E) studier av mennesker. Dersom undersøkelsene hadde overlappende fag, bare studiet inneholdt den største befolkningen ble endelig inkludert. Tre rapporter ble ekskludert på grunn av mangel på tilstrekkelige data for beregning av ORS etter kontakt med individuelle forfattere via e-post [20] -. [22]
Følgende data ble hentet av to uavhengige forfattere (B. Zhu Q. Song): første forfatterens etternavn, opprinnelsesland, årstall, dominerende etnisitet deltakere, utvalgsstørrelse, studieform og design, kilden til kontrollgrupper (population- eller sykehusbaserte kontroller), genotyping metode. Tellinger av alleler og genotyper i saker og kontroller ble hentet eller beregnet ut fra publiserte data. Sammenslått frekvens av T-allel i forskjellige etniske populasjoner ble beregnet ved hjelp av den inverse variansen fremgangsmåten tidligere beskrevet av Thakkinstian et al [23]. ORS og deres 95% CI’er som beregninger av effektstørrelse ble beregnet på nytt for genotypene TT versus CC og CT versus CC. En dominerende modellen ble antatt for rs4939827, og en additiv «per-allelet» modell og en recessiv modell ble også vurdert. I denne studien har vi brukt Cochran
Q
statistikk for å vurdere heterogenitet (heterogenitet ble betraktet som signifikant på
P
0,1) [24].
I
2
metrisk ble brukt til å kvantifisere heterogenitet uavhengig av antall studier (
I
2
= 0-25%, ingen heterogenitet;
I
2
= 25-50%, moderat heterogenitet;
I
2
= 50-75%, stor heterogenitet;
I
2
= 75-100% , ekstrem heterogenitet) [25]. Et fast effekt-modell, ved hjelp av Mantel-Haenszel metoden [26], ble brukt til svømme data fra studier når heterogenitet var ubetydelig; Ellers ble en tilfeldig effekt-modell, ved hjelp av DerSimonian og Laird metode, anvendt [27]. Stratifisert analysene ble utført, om mulig, i henhold til etnisitet (europeiske, asiatiske og blandet befolkning), utvalgsstørrelse (≤1000 og 1000 pasienter), studere design (GWA og replikering studien) og tumorlokalisering (tykktarm, endetarm og kolorektal kreft ). Sensitivitetsanalyse ble også utført for å vurdere påvirkning av hver enkelt studie på gjennomsnittlige estimater ved sekvensiell fjerning av enkeltstudier [28]. Kumulativ analyse ble utført for å undersøke de dynamiske utviklingen av assosiasjonen mellom SNP og CRC med akkumulering av studier av publiserte år [29]. Publikasjonsskjevhet ble estimert ved trakt tomt og Eegger test [30], [31]. Alle statistiske analyser ble utført av Stata versjon 10.0.
Resultater
Resultater fra case-control studie
Befolknings egenskaper.
Totalt 641 hendelse tilfeller av tykktarmskreft og 1037 frekvens-matchet kontroller ble inkludert i studien. Som vist i tabell 1, hannene var 59,9% blant tilfeller sammenlignet med 59,1% blant kontroller. Gjennomsnittsalder was56.31 år (± 12,59) for saker og 57.24 år (± 10,86) for kontroller. Det var ingen signifikant forskjell i fordelingen av kjønn (
P
= 0,748) og alder (
P
= 0,119) mellom sak og kontrollgruppe. Av tilfellene, 39% hadde tykktarmskreft og 61% hadde endetarm kreft. Angående svulst staten, 12,9%, 35,6%, 35,4% og 16,1% av tilfellene ble klassifisert som Duke A, B, C og D scenen på diagnosetidspunktet, henholdsvis.
genotyper i kontrollene dannet Hardy-Weinberg likevekt (
P
= 0,214). Det ble ikke observert signifikant forskjell i genotype fordeling mellom saker og kontroller (
χ
2
= 21,25,
P
0,001). I den multivariate logistisk regresjonsmodell, personer med CT genotype hadde en signifikant, 57% økt risiko for CRC (OR = 1,57; 95% CI, 1,27 til 1,94,
P
0,001) sammenlignet med de med CC homozygot. På grunn av den lave frekvens av det TT genotype (3,2% i kontroller og 1,6% i de tilfeller) i denne studiepopulasjonen, en dominerende modellen var utføre, ved å kombinere TT med CT inn i et T bærer (TT pluss CT) gruppe, og resultatet viste at T transportøren også til stede betydelig økt risiko sammenlignet med de som bærer CC genotypen (OR = 1,46; 95% CI, 1,19 til 1,80,
P
0,001). I alleliske modell, T allel bærere viste også betydelig økt risiko sammenlignet med de med C-allelet (OR = 1,26; 95% CI, 1,05 til 1,51,
P
= 0,01). I additiv modell, per-T allelet tilsvardratt en OR på 1,27 (95% KI, 1,05 til 1,52,
P
= 0,01) (tabell 2).
Vi lagdelte data i henhold til de patologiske forhold i henhold til den dominerende modellen. CT pluss TT genotyper ble begge assosiert med økt risiko for tykktarm og endetarm kreft. Interessant, effekten av CT-TT pluss genotyper var større i tykktarmskreft (OR = 1,65; 95% CI = 01/24 til 02/20) enn det i rektum kreft (OR = 1,35; 95% CI = 1,06 til 1,73). Når det gjelder Duke etappe, ble CT pluss TT genotyper assosiert med økt risiko i tidlig fase (A + B: OR = 1,67; 95% CI, 1.28 til 2.17), men ikke i avansert kreft (C + D: OR = 1,28; 95 % KI, 0,98 til 1,67, tabell 2)
Resultater fra meta-analyse
studie~~POS=TRUNC egenskaper
i alt 11 publikasjoner pluss studien, som består av 25 tilfelle.. -Control studier av 34313 saker og 33251 kontroller, til slutt ble inkludert i denne meta-analyse [3], [10], [13] – [17], [32] – [35], hvorav 19 studier ble gjennomført i Europeisk [3], [10], [16] – [17], [32] – [34], 5 i asiatiske [3], [13], [14], [35], og en i den blandede populasjon [15] (Tabell 3). Rapporten fra Broderick et al. bare gitt opplysninger om allelfrekvenser og dermed ble bare med i den samlede analysen av allel OR [10].
Frekvens av risiko allel kontroll befolkningen.
Både betydelig mellom-studie heterogenitet ble observert i europeiske og asiatiske grupper (
P
for heterogenitet 0,001). Under tilfeldig effekt-modell, den samlede hyppighet av T-allelet var 51,2% (95% CI, 50,1% -52,2%) i europeiske kontroller, som var vesentlig høyere enn for 23.4% i asiatiske kontroller (95% CI, 18,4% -28,3%) (figur S2). Disse sammenslåtte frekvensene var lik de som ble rapportert i HapMap database over 0,508 og 0,256 for europeisk og asiatisk, henholdsvis.
Generelt meta-analyse av rs4939827 i forbindelse med CRC.
Som vist i tabell 4 , betydelig bevis for heterogenitet ble observert i alle genetiske modeller (alle
P
for heterogenitet 0,05), og ORS for alle genetiske modellene ble sammenslått i henhold tilfeldig effekt modell. I alleliske modell, T allele overdragelse en sammenslått OR på 1,18 sammenlignet med C-allelet (95% CI, 1.14 til 1.22; figur 1). Genotypiske Ors av TT versus CC og CT versus CC var 1,33 (95% KI, 1,21 til 1,47) og 1,17 (95% CI, 01.09 til 01.26), henholdsvis. Tilsvarende dominerende, recessive og additive modeller var alle assosiert med signifikant økt risiko for CRC.
Stratifisert analyse.
For å undersøke potensiell kilde til mellom-studie heterogenitet , lagdelt analyse ble utført (tabell 5). Etter stratifisering av etnisitet, betydelig heterogenitet fortsatt eksisterte i europeisk, mens i Asia heterogenitet ble effektivt redusert. I europeiske befolkningen, presenterte varianten i alle genetiske modeller betydelig økt risiko for CRC. I asiatiske befolkningen, ble alle de genetiske modeller unntatt for TT genotypiske og recessive modeller assosiert med økt risiko for CRC, potensielt tyder på at T varianten handle på ulike måter mellom ulike etniske populasjoner. Når stratifisert etter utvalgsstørrelse, definert vi den store gruppen når størrelsen på utvalget var mer enn 1000, ellers var liten gruppe, heterogenitet ble nesten fjernet i liten prøve gruppen, men ikke stort utvalg gruppen. Signifikant sammenheng med CRC risiko med den varianten forble i store eksempelstudier for alle genetiske modeller, mens bare den recessive modellen viste signifikant resultat i liten prøve undergruppe. Ifølge tumorlokalisering, bare dataene på dominerende modellen var tilgjengelig. For tykktarmskreft, ble heterogenitet fortsatt observert og ingen signifikant sammenheng ble funnet, mens den dominerende modellen ble signifikant assosiert med økt risiko for endetarmskreft uten tegn på heterogenitet. Når det gjelder studiedesign, ble GWA studier bare samlet i allel modell på grunn av begrensede studier for å vurdere genotypisk modell. Heterogenitet ikke endre seg etter stratifisering av GWAS og replikering og signifikant sammenheng fortsatt eksisterte.
Sensitivitetsanalyser og kumulativ meta-analyse.
På grunn av den betydelige mellom-studie heterogenitet for all genetisk modeller, sensitivitetsanalyse ble utført, ved å fjerne de individuelle studiene sekvensielt etter tilfeldig effekt modellen, for å vurdere effekten av hver studie på den samlede anslaget. Som vist i tabell 6, viste den samlede OR for alleliske modellen var lik før og etter eliminering av hver studie. Lignende resultater ble sett for andre genetiske modeller som ikke enkelt studie dramatisk endre de samlede ORS, indikerer robust stabilitet dagens resultater.
Akkumulert meta-analyse ble utført via et utvalg av studier ved publisering tid. Som vist i figur 2, i alleliske modell, 95% CI’er for den sammenslåtte OR ble stadig smalere med hver opphopning av flere studier, som viser gradvis økt presisjon av estimering av kontinuerlig å legge til flere prøver. Samtidig dragning mot signifikant sammenheng var tydelig over tid. Lignende resultater ble sett i andre genetiske modeller.
publikasjonsskjevhet.
Som reflektert av trakten plot (Figur S3.) Og Egger test, ble det ikke observert tegn på publikasjonsskjevhet i alle genetiske modeller (alle
P
for egger test 0,05).
Diskusjoner
rs4939827 ligger på 18q21 ble avslørt for å være assosiert med CRC risiko ved to GWA studier, men inkonsistente resultater har blitt rapportert av flere følgende replikering studier. I denne studien, vi først funnet en signifikant sammenheng mellom variant 4939827 og økt risiko for CRC i en case-kontroll sett en kinesisk befolkning. Deretter følgende meta-analyse, først å integrere GWA og replikering av data fra 25 case-control studier av 34313 tilfeller og 33251 kontroller, konsekvent indikerte signifikant sammenheng av rs4939827 med risiko for CRC. Denne betydelige foreningen ble ytterligere bekreftet ved kumulativ meta-analyse, presentere virkningen av varianten har økende betydning med hvert akkumulere av mer data over tid. rs4939827 er plassert i intron 3 av
SMAD7
, som koder for et inhiberende SMAD protein som virker som en negativ feedback regulator av TGF-β signaler [36]. Det var bevis for at overekspresjon av SMAD7 kunne fremme tumorigenesis via forstyrre TGF-β-indusert veksthemming og apoptose. Selv om vi her bekreftet sammenhengen mellom rs4939827 og CRC risiko, enten dette SNP er utløsende var fortsatt usikkert. Forbløffende nok Houlston et al. har identifisert en roman C til G SNP unoterte i dbSNP (MAF = 0,47), gjennom re-sekvensering av koblingsulikevekt (LD) region tagget av rs4939827 i 2532 CRC tilfeller og 2607 kontroller, ble maksimalt assosiert med CRC risiko [37]. Følgende funksjonsmodeller videre gitt bevis for rollen som denne SNP i transkripsjon faktor bindende, foreslår at dette funksjonelle SNP var sannsynlig å være en av de årsaks varianter i mottakelighet loci tagget av rs4939827.
Likevel, den åpenbare bevis av mellom-studie heterogenitet i denne meta-analysen skal utstedes. Vi har brukt en omfattende lagdelt analyse for å avhøre potensiell kilde til heterogenitet. Etter stratifisering av etnisitet, ble heterogenitet i stor grad redusert i asiatisk, noe som reflekterer etnisitet kan delvis forklare heterogenitet. Den videre støtte av som kom fra bevis for at ulike måter T varianten sannsynligvis handle på og ulike allelfrekvenser mellom europeiske og asiatiske populasjoner. Når stratifisert etter kreft områder, gjorde endetarm kreft gruppen ikke vise heterogenitet lenger, noe som tyder på svulst nettsteder kan også være en potensiell kilde til heterogenitet. I tillegg signifikant sammenheng presenteres kun for endetarmskreft, som var i strid med våre case-control studie, muligens på grunn av vår lille utvalgsstørrelse for stratifisering av tumor nettsteder. Når det gjelder utvalgsstørrelse, ble heterogenitet nesten fjernet i små prøve studier, men ikke stort utvalg undergruppe, muligens på grunn av mer komplekse konfunderende faktorer introdusert i stor prøve. Signifikant sammenheng forble i store eksempelstudier for alle genetiske modeller, mens bare den recessive modellen viste signifikant resultat i liten prøve undergruppe, noe som reflekterer den begrensede makt liten sample size til å oppdage den beskjedne effekten av varianten. Til sammen har vi avdekket at etnisitet, svulst nettsteder, og utvalgsstørrelse kan utgjøre kilde til heterogenitet i denne meta-analysen. Mens, den betydelige sammenslutning av rs4939827 presentert i undergruppen av replikering studier, i samsvar med resultatet fra GWA studie undergruppe, foreslo denne meta-analysen lykkes i å forsterke makt for å oppdage den beskjedne effekten av denne varianten ved å samle data på tvers av studier. Videre sensitivitetsanalyse og publikasjonsskjevhet vurdering indikert dagens resultater fra denne meta-analysen var stabile.
Til tross for klar styrke med denne studien som gjaldt en omfattende analyse strategi, bør flere begrensninger bli regnet ut. Først utvalgsstørrelsen av våre case-control studien var relativt liten. Likevel har følgende meta-analyse med nok kraft trukket konsistent resultat med vår case-control studie. Sekund, analyse av egen kraft for kolorektalcancer kreft tillagt begrenset makt, og flere studier er nødvendig. I tillegg er CRC en kompleks egenskap selskapsmessig påvirket av genetiske og miljømessige faktorer; men mangler miljø data begrenset oss til å vurdere gen-miljø interaksjon videre.
I konklusjonen, vår studie i en kinesisk befolkning, og dette meta-analyse kollektivt bekrefte signifikant sammenheng mellom SNP rs4939827 og tykktarmskreft i europeiske og asiatiske populasjoner. Imidlertid, selv om en ny SNP i høyt LD med rs4939827 blitt foreslått å være årsakssammenheng, er ytterligere fin-kartlegging av CRC følsomhet loci tagget av rs4939827 garantert å avdekke flere årsaks varianter, spesielt for de lavfrekvente eller sjeldne funksjonelle varianter.
Hjelpemiddel Informasjon
Figur S1.
Flytskjema studievalg.
doi: 10,1371 /journal.pone.0033318.s001 plakater (TIF)
Figur S2.
Felles frekvens på T allel i europeiske og asiatiske befolkningen.
doi: 10,1371 /journal.pone.0033318.s002 plakater (TIF)
Figur S3.
Trakt tomt på publikasjonsskjevhet i henhold allel modell.
doi: 10,1371 /journal.pone.0033318.s003 plakater (TIF)
