Abstract
myeloide avledet suppressor celler (MDSCs) ekspandere i kreft peiling verter og bidra til tumorimmun unnvikelse. M2 makrofager utgjør en stor cellulær komponent av kreft-relaterte inflammasjon. Imidlertid korrelasjonen mellom sirkulerende MDSCs og infiltrerende M2 makrofager i tumorvev fra pasienter med spiserørskreft (ECA), og dens potensielle forhold til polariseringen av Th2-celler er fortsatt uklar. I denne studien, viste vi nivået MDSCs i PBMC og Arg1 i plasma ble betydelig forhøyet i ECA pasienter, og den økte forholdet mellom MDSC i PBMC ble nært knyttet til uttrykk av CD163 i kreftvevet. I tillegg er ECA pasientene viste bemerkelsesverdig økning i mRNA-nivåer av IL-4 og GATA3, så vel som protein nivåene av IL-13 og IL-6, men IFN-γ og IL-12 i perifert blod ble redusert. Våre data viser at den økte Th2-cytokiner er assosiert med MDSCs og M2 makrofager polarisering, og fremme infiltrasjonen av CD163
+ M2 makrofager i kreftvev, som fremmer dannelsen av immunsuppressive mikromiljøet i ECA-pasienter.
Citation: Gao J, Wu Y, Su Z, Amoah Barnie P, Jiao Z, Bie Q, et al. (2014) Infiltrasjon av Alternativt aktiverte makrofager i kreftvev er assosiert med MDSC og Th2 Polarisering hos pasienter med spiserørskreft. PLoS ONE 9 (8): e104453. doi: 10,1371 /journal.pone.0104453
Redaktør: Jacques Zimmer, Centre de Recherche Public de la Santé (CRP-Santé), Luxembourg
mottatt: 04.03.2014; Godkjent: 09.07.2014; Publisert: 21 august 2014
Copyright: © 2014 Gao et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Dette arbeidet ble støttet med tilskudd fra Natural Science Foundation of China (31270947, 31170849 og 30972748, https://www.nsfc.gov.cn/) National Science Foundation i Jiangsu-provinsen (BK2011472) og Foundation of China Postdoktor Natural (2012M511705 ). Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
Esophageal kreft (ECA) er en av de vanligste kreftformer over hele verden og den fjerde ledende kreftdød i Kina [1] – [3]. Det er økende bevis på den avgjørende rollen av immunsystemet i maligne svulster, men de nøyaktige mekanismene for immunmodulering i ECA pasienter forblir unnvikende. I det siste tiåret har rollen som den immunsuppressive og kreft-fremme myelomonocytisk rommet innenfor svulsten miljøet også fått mye oppmerksomhet [4]. Selv om mekanismer er ufullstendig forstått, fremmer akkumulering av en heterogen pool av benmarg-avledede umoden, dårlig differensierte myelomonocytisk celler (monocytter, neutrofiler, umodne makrofager og dendrittiske celler), som kalles myeloide avledet suppressorceller (MDSCs), som er større vert cancer komponent bidrar til immunundertrykkende miljø. I patologiske tilstander, et delvis blokk i differensieringen av umodne myeloide celler til modne myeloide celler resulterer i en utvidelse av MDSCs [5]. Nylig har det blitt klart at den undertrykkende aktivitet av MDSCs krever ulike faktorer som fremmer deres ekspansjon eller induserer deres aktivering. Disse faktorene, som inkluderer IL-4, IL-13, ligander for Toll-lignende reseptorer (TLR), og transformere vekstfaktor-β (TGF-β), aktiverer flere forskjellige signalveier i MDSCs som involverer STAT6 og nukleær faktor-kB (NF-kB).
i likhet med MDSCs, makrofager er en mangfoldig befolkning av myeloide celler som gjennomgår spesifikk differensiering avhengig av stimulerende midler, som dokumentert omfattende. Nyere immunologiske studier har identifisert to forskjellige tilstander av den polariserte makrofagaktivering: klassisk aktivert (eller M1) og alternativt aktivert (eller M2) makro fenotyper. M1 makrofager blir typisk aktivert ved IFN-γ og LPS, mens M2-makrofager blir aktivert ved hjelp av IL-4 og IL-13 [6]. M1 makrofager er tumorici-dal og fremme svulst avvisning, mens M2 makrofager fremme tumorprogresjon [7] – [9]. Begge M2 makrofager og MDSCs er en viktig kilde til immunsuppresjon som gjør at tumor-flukt fra effektive anti-kreft svar, men ingen informasjon om forholdet mellom M2 makrofager og MDSCs i utviklingen av kreftfaren er tilgjengelig for øyeblikket.
en spennende observasjon er blitt beskrevet i laboratoriet til dr Teramoto, hvis gruppe viser at samtidig aktivering av Th1 funksjon kan øke styrken av dendrittiske cellebasert cancer immunoterapi [10]. I vår tidligere studie har vi funnet at det er en fremherskende Th2-fenotypen hos pasienter med magekreft [11]. Det er antatt at ubalansen av Th1 /Th2 kan bidra til forekomst og utvikling av tumor. MDSCs og /eller M2-makrofager, som for verts komponenter som bidrar til den undertrykkende miljø av tumorimmunitet [12], deres polarisering bør være relatert til den immun balanse lidelser. I denne studien har vi analysert nivåene av M2 makrofager og MDSCs i ECA pasienter, oppdaget uttrykk for noen relaterte faktorer, inkludert Th1 /Th2 typen cytokiner og vurdert forholdet mellom Th2-celler og M2 makrofager eller MDSCs. Den generelle Målet med studien var å bidra til bedre forståelse av betydningen av MDSCs og M2 makrofager fra pasienter med spiserørskreft i Th2 celle polarisering tilstand.
Materialer og Metoder
Pasienter
Femti nydiagnostiserte ECA pasienter som fikk behandling på Affiliated Folkets sykehus i Jiangsu-universitetet ble inkludert i denne studien: 38 hanner og 12 hunner, med gjennomsnittsalder 61.97 ± 1.24 år. Ingen av pasientene hadde gjennomgått radioterapi eller kjemoterapi før starten av studien. Karakteristikken av ECA pasienter ble oppsummert i tabell 1. Alle primærtumor saker ble iscenesatt klinisk henhold til retningslinjene fra International Union for Cancer Kontroll og amerikanske Joint Committee on Cancer (UICC-AJCC) oppdaterte tumor- node-metastaser (TNM) stadieinndeling system [13]. Tretti friske frivillige uten kronisk betennelsestilstand ble undersøkt samtidig som kontroll, bestående 24 menn og 6 kvinner. Påmelding fant sted mellom mars 2011 og desember 2012. Denne studien ble godkjent av etisk komité i Jiangsu-universitetet og skriftlig informert samtykke ble innhentet fra alle personer.
Cell forberedelse
Tilleggs blodprøver ble samlet fra ECA-pasienter og friske frivillige. Perifere mononukleære blodceller (PBMC) ble isolert ved hjelp av Ficoll-Hypaque-gradientsentrifugering tetthet (GE Healthcare). Cellesuspensjonene ble delt i to like porsjoner; en ble straks anvendt for eksperimentene. Den andre ble fryses ned ved -80 ° C og tint for testing på et senere tidspunkt
Flow cytometri
MDSCs befolkningen ble definert som HLA-DR
-. /CD14
– /CD11b
+ /CD33
+. Heparinisert venøs blod ble nylig hentet fra ECA pasienter eller friske frivillige. PBMC ble isolert ved standard Ficoll-Hypaque densitets-sentrifugering, og farget med de følgende antistoff mix: FITC-konjugert anti-humant HLA-DR, PerCP-Cy5.5-konjugert anti-human CD14, APC-konjugert anti-human CD11b, eller PE-konjugert anti-human CD33. Isotype kontroll-antistoff ble anvendt i alle tilfeller. Datainnsamling og analyse ble utført på en FACSCalibur flowcytometer (Becton Dickinson, CA, USA) ved hjelp Cellquest-programvare (Becton Dickinson, CA, USA).
RNA ekstraksjon og kvantitativ real-time PCR
Etter produsentens anvisninger, ble total RNA ekstrahert fra PBMC ved hjelp Trizol reagens (Invitrogen, Carlsbad, California). Komplementær DNA ble syntetisert fra 1 ug total RNA ved hjelp av RT reagenssett (Takara, Ohtsu, Japan). For kvantitativ real-time PCR, revers transkribert cDNA (2 ul) ble forsterket av real-time PCR med SYBR Grønn Premiks EX Taq kit (Takara, Ohtsu, Japan). Hver prøve ble analysert i duplikat med CFX-96 Cycler (termisk) og den normaliserte signalnivå ble beregnet på grunnlag av dets forhold til den tilsvarende β-aktin rengjøring signal. Primerene anvendt i PCR ble vist i tabell 2.
Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)
For kvantitativ påvisning av IFN-γ, IL-4, IL-6, IL -13 og Arg1 i plasma, ble kommersielt tilgjengelige ELISA kits brukes i henhold til produsentens instruksjoner (Biovender). Alle prøver ble kjørt i grupper for å redusere inter-assay variabilitet og kvantifisert ved hjelp av en standardkurve.
Immunohistochemistry
ECA vev og sammenkoblede tilstøtende vev ble fiksert i 10% bufret formalin løsning og innebygd i parafin . Seriesnitt på 4 um ble skåret ut fra de parafinblokker. CD68 eller CD163 antistoff ble anvendt henholdsvis for å identifisere makrofager og M2 makrofag-undertypen. Som negative kontroller ble de primære antistoffer erstattet med et irrelevant isotype anti-mus lgG1. Immunohistokjemisk påvisning ble utført ved å bruke avidin-biotin-peroksidase-metoden. En mangehodet mikroskop ble anvendt for å lese immunohistokjemisk resultater, ble de detekterte cellene motvirkes ved 10 tilfeldig utvalgte områder av tre forskjellige forskere ved 40 x forstørrelse. Det endelige resultatet ble beregnet i henhold til cellen fargedybde og andelen av fargede celler.
Statistisk analyse
Den statistiske analysen ble utført med GraphPad Prism, versjon 5.0, programvare (San Diego, CA , USA). Sammenhenger mellom variabler ble bestemt av Spearmans korrelasjonskoeffisient. Sammenligninger mellom grupper ble utført ved hjelp av Students uparede eller sammen
t
test. Forskjeller ble vurdert som statistisk signifikant når
P
-verdi. 0,05
Resultater
Forhøyede MDSCs korrelerte med økt plasmanivået av Arg1 i ECA pasienter
MDSCs, definert som HLA-DR
– /CD14
– /CD11b
+ /CD33
+ celler, ble bestemt ved flowcytometri og beregnet som% PBMC. Nivået av individuelle MDSCs ble signifikant forhøyet i ECA pasienter sammenlignet med friske kontroller (
P
0,05, figur 1). Som vist i tabell 3, var andelen MDSCs hos pasienter med fremskreden kreft var signifikant høyere enn i pasienter med tidlig kreft (2,56 ± 0,25% vs. 0,77 ± 0,15%;
P
0,05). Videre er andelen av MDSCs hos pasienter med lymfeknutemetastase var høyere enn de uten lymfeknutemetastaser (3,71 ± 0,34% vs. 1,47 ± 0,13%;
P
0,0001). Men det var ingen signifikante forskjeller mellom andelen MDSCs og pasientenes alder, kjønn, tumor beliggenhet, tumorstørrelse, eller svulst infiltrerende dybde. Vi målte plasmakonsentrasjonen av Arg1, som er en av de viktigste undertrykkende faktorer [14], [15]. Resultatet viste at kontroll plasma hadde minimal Arg1 forhold til ECA pasienter (9,57 ± 1,51 ng /ml vs. 28,28 ± 4,10 ng /ml;
P
0,001). I tillegg ble det en positiv korrelasjon funnet mellom andelen MDSCs fra PBMC og plasmanivået av Arg1 i ECA pasienter i senere tester.
Hyppigheten av MDSCs i PBMC ble analysert ved flowcytometri, pasienter og friske kontroller brukt i dette eksperimentet hadde blitt matchet med kjønn, alder og antall. a: Representant diagram av flowcytometri analyse for å sirkulere MDSCs fra friske kontroller. b: Representant diagram av flowcytometri analyse for å sirkulere MDSCs fra ECA pasienter. MDSCs, myeloide-avledet suppressor celler; ECA, spiserørskreft; FSC, forover scatter; FITC, fluoresceinisotiocyanat; PerCP-Cy5.5, peridinin klorofyll protein-cyanin 5.5; PE, fysoerytrin; APC, allofykocyanin.
Forbedret M2 makrofager i ECA pasienter
CD163 er et åtseldyr reseptor, oppregulert av makrofager i anti-inflammatoriske miljøer [16] og regnes som et svært spesifikk monocytt /makrofag-markør for M2-makrofager [17] – [19]. De fleste avisene i meta-analysen brukes CD68 som en markør for tumor-assosiert makrofager (TAM) [20]. CD68, men anerkjenner både M1 og M2 makrofager [21]. Derfor brukte vi CD68 og CD163 som markører for makrofager og M2 makrofager hhv. For å analysere om lokalisering av CD163
+ og CD68
+ makrofager hadde en korrelasjon til kliniske egenskaper, fordeling av CD163
+ og CD68
+ makrofager i tumor og tumor-fri vev ble evaluert separat (Figur 2). De fargekategorier ble først et innlegg fra 0 til 3 i makrofagin tetthet. Resultatene viste at de fleste tumorvev hadde høyere tettheter av CD163
+ og CD68
+ makrofager infiltrasjon enn de i tumorfrie vev. De positive ekspresjonshastigheter av CD163
+ og CD68
+ var 68% og 78% henholdsvis i kreftvevet sammenlignet med 4% og 6% i de tilstøtende cancervev. Videre er øket forhold av MDSC i PBMC fra ECA pasienter var nært knyttet til ekspresjonen av CD163 i kreftvev (tabell 4-5).
Representative immunhistokjemiske bildene viste ekspresjon av CD68 i en kreft-vev tilstøtende (en). og en kreftvev (b). Representative immunhistokjemiske bildene viste ekspresjon av CD163 i en kreft-tilstøtende vev (c). og en kreftvev (d). Normal esophageal plateepitel (haematoxylin-eosin /HE-farging) (e). Plateepitelkarsinom spiserørskreft (HE flekker) (f). Analyse av antall CD68
+ makrofager (g). og CD163 + makrofager (h). i kreft og kreftfrem tilstøtende vev, viste resultatene at de fleste kreftvevet hadde større antall CD68 + og CD163 + makrofager infiltrasjon enn i de kreft tilstøtende vev.
Økt IL -4 og GATA3 mRNA ble redusert mens IFN-γ mRNA i PBMC fra ECA pasienter
De relative uttrykk nivåer av cytokin-gener som koder for IL-4, IL-6, IL-12, IL-13 og IFN-γ, samt transkripsjonsfaktorer GATA3 og T-bet ble vurdert ved hjelp av real-time PCR. Som vist i figur 3, hadde ECA pasienter økt uttrykk av IL-4 og GATA3 mRNA sammenlignet med friske kontroller (
P
0,05). IFN-y, IL-12 og IL-13 mRNA uttrykk i ECA-gruppen var signifikant lavere enn de i kontrollgruppen (all
P
0,05). Men ingen signifikant forskjell ble funnet i form av T-bet mRNA uttrykk mellom de to gruppene (
P
0,05).
mRNA nivåer av IFN-γ (a), T- bet (b), IL-4 (c), GATA3 (d) og IL-12 (e) ble bestemt ved sanntids-PCR. Data ble analysert ved t-test. *
P
0,05, ***
P
0,001 vs. kontrollgruppen. NS, ingen signifikant forskjell. ECA, spiserørskreft; PCR, polymerase kjedereaksjon; IFN, interferon; IL, interleukin. De pasienter og friske kontroller som brukes i dette forsøket hadde blitt matchet med kjønn, alder og antall.
Økt IL-6, IL-13, Arg1 i plasma fra ECA pasienter
Plasma IFN-γ, IL-4, IL-6, IL-13, og Arg1 ble bestemt ved hjelp av ELISA. Som vist i figur 4, IL-6 og IL-13 konsentrasjonene var signifikant høyere i ECA pasientene sammenlignet med kontrollpersoner (
P
0,05 og
P
0,001). I tillegg ble et høyere nivå av Arg1 funnet i plasma fra pasienter ECA. Men det var ingen signifikante forskjeller i IFN-γ eller IL-4-konsentrasjon mellom de to gruppene.
De pasienter og friske kontroller som brukes i dette forsøket hadde blitt matchet med kjønn, alder og antall. Plasmakonsentrasjonene av IFN-γ (a), IL-4 (b), IL-6 (c), Arg1 (d) og IL-13 (e) ble bestemt ved hjelp av ELISA. Data ble analysert ved t-test. *
P
0,05, ***
P
0,001 vs. kontrollgruppen. NS: ingen signifikant forskjell, ECA: spiserørskreft, ELISA: enzymbundet immunosorbent assay, IFN: interferon, IL: interleukin, Arg1: arginase 1.
korrelasjonsanalyse mellom ulike cytokiner i ECA pasienter
de korrelasjoner mellom de ulike cytokiner i ECA pasienter ble analysert. Som vist i figur 5, var det en signifikant positiv korrelasjon mellom nivåene av Arg1 (MDSCs og M2 tilhørende cytokin) og IL-13 (Th2 cytokin typen) i plasma fra pasienter ECA. IL-4, som et cytokin av Th2 ble mRNA uttrykket økt etter at plasma Arg1 ekstrautstyr, men en negativ korrelasjon ble funnet mellom IFN-γ og Arg1. I tillegg er konsentrasjonen av IL-13 på plasma viste positiv korrelasjon med mRNA-nivået av IL-4 i PBMC (r = 0,45,
P
0,05)
A.: Korrelasjon mellom plasmakonsentrasjonen av Arg1 og prosentandelene av sirkulerende MDSCs i ECA-pasienter. Positiv korrelasjon ble funnet mellom Arg1 og MDSCs (r = 0,493,
P
= 0,006). b: Korrelasjon mellom plasmakonsentrasjonen av Arg1 og mRNA-nivået av IL-4 fra ECA pasienter. Positiv korrelasjon ble funnet mellom Arg1 og IL-4 mRNA (r = 0,510,
P
= 0,009). c: Korrelasjon mellom plasmakonsentrasjonen av Arg1 og IL-13 fra ECA pasienter. Positiv korrelasjon ble funnet mellom Arg1 og IL-13 (r = 0,455,
P
= 0,017). d: Korrelasjon mellom mRNA-nivået av IL-4 og plasmanivået av IL-13 fra ECA pasienter. Positiv korrelasjon ble funnet mellom IL-4 og IL-13 (r = 0,484,
P
= 0,016). e: Korrelasjon mellom mRNA-nivået av IFN-γ og plasmanivået av Arg1 fra ECA pasienter. Negativ korrelasjon ble funnet mellom IFN-γ og Arg1 i ECA pasienter (r = -0,381,
P
= 0,038). f: Sammenheng mellom antall CD163
+ makrofager i kreftvev og prosenter av sirkulerende MDSCs i PBMC fra ECA pasienter (r = 0,410,
P
= 0,003). g: korrelasjon mellom antall CD163
+ makrofager i kreft vev og plasmakonsentrasjonen av IL-13 fra ECA pasienter (r = 0,405,
P
= 0,036)
diskusjon
MDSCs, under normale forhold migrere til forskjellige perifere organer og differensiere til dendrittiske celler, makrofager og /eller granulocytter. Imidlertid faktorer produsert i svulsten mikromiljøet, alene eller i kombinasjon, fremme akkumulering av MDSCs, forhindre deres differensiering og indusere deres aktivering. I tumormiljøet, kan også MDSCs differensiere i TAM, som er et unikt fenotype hvis funksjon er forskjellig fra MDSCs [5]. Makrofager er plast celler, som de kan bytte fra en aktivert M1 staten tilbake til en M2 /TAMs tilstand, og vice versa, ved induksjon av bestemte signaler. Makrofager infiltrerende i kreftvev er referert til som TAMs, som er nært involvert i utviklingen av tumoren mikromiljøet. Heterogenitet av fenotyper er observert blant TAMs i forskjellige ondartede tumorer, og en betydelig del av TAMs /M2 fenotype er forbundet med en dårligere prognose klinisk og høy grad av malignitet [22]. I 2007 Sinha et al. [23], brukte spontant metastatisk 4T1 mus brystkreft, og viste at MDSCs nedsatt tumorimmunitet ved å undertrykke T-celleaktivering, så vel som i samspill med makrofager for å øke IL-10 og redusere IL-12-produksjon, og dermed fremme en tumorfremmende typen 2 svaret, en prosess som kan bli delvis reversert av gemcitabin. Basert på dette, vår studie målrettet ECA og undersøkt MDSCs i perifert blod, makrofager i tumorvev og nivåene av noen relaterte faktorer. Som forventet ble økt MDSCs funnet i perifert blod, og en viss mengde av M2-makrofager infiltrert i tumor områder, noe som indikerte at disse cellepopulasjoner var involvert i patogenesen av ECA. I tillegg økte plasmanivået av Arg1, som ble korrelert med MDSCs og M2 makrofager funksjoner, ble også funnet i ECA-pasienter. Spesielt den økte forholdet mellom MDSCs i PBMC fra ECA pasienter var nært knyttet til uttrykk av CD163 i kreftvevet.
Tidligere viste vi at det var en dominerende Th2 fenotype i magekreftpasienter, og det ble antatt at de Th2 tilhørende cytokinene IL-4, IL-13, IL-6 og transkripsjonelle faktorer GATA3 kan nøye være relatert til polarisasjonen av M2 og MDSCs, og fostret et immunsuppressivt miljø hos kreftpasienter. I foreliggende studie demonstrerte vi at ECA pasienter viste bemerkelsesverdig økning i mRNA-nivåer av IL-4 og GATA3, samt plasmanivået av IL-13 og IL-6. I motsetning til dette, var plasmanivået av IFN-γ og mRNA-nivåer av IFN-γ og IL-12 redusert. Det var en positiv korrelasjon mellom mRNA-nivået av IL-4 og plasmanivået av IL-13, og disse to cytokiner økt etter at Arg1 forbedring i plasma. I mellomtiden ble en negativ korrelasjon finnes mellom IFN-γ og Arg1. De foreliggende data indikerer at det er en fremherskende Th2-fenotypen i ECA-pasienter, og det var i samsvar med øket nivå av Arg1, som var MDSCs og M2 tilhørende cytokin. Nylig, Gabitass et al. [24], rapporterte at MDSCs ble forhøyet i bukspyttkjertelen og magekreft, og viste at de var en selvstendig prognostiske faktorer og forbundet med betydelig heving av Th2 cytokin IL-13. Disse resultatene var delvis i samsvar med våre data. Det bør nevnes at den IL-4-mRNA ble øket i PBMC, mens ekspresjon av IL-4-protein i plasma var uforandret hos kreftpasienter. Det var ikke en helt konsistent resultat, som kan grunnet IL-4-gen-transkripsjon og dets proteinutskillelse var ikke synkron, videre forskning var nødvendig for å undersøke dette i mer detalj.
Enkelte forskere mener at IL-4 og IL-13 er nok til å spille en viktig rolle i aktivering M2 makrofager [6]. I tillegg Gabitass RF et al. [24] og Pesce JT et al. [25], indikerte at Th2-cytokiner: IL-4 og IL-13 kan oppregulere arginase aktivitet for derved å øke den undertrykkende funksjon av MDSCs og M2 makrofager. Derfor foreslår vi at IL-4, IL-13 og Arg1 er viktige faktorer som medierer fordelingen av MDSCs og M2 makrofager, og er nært knyttet til Th2-celle polarisering. Ostrand-Rosenberg et al. [26], viser at krysstale mellom MDSCs og makrofag fremmer synergi mellom disse cellene og dermed forsterker de immunsuppressive effekten av de enkelte cellepopulasjoner. Som et resultat, er MDSCs og makrofager i svulsten mikromiljøet uløselig forbundet med hverandre, slik at funksjonene til en populasjon er påvirket av mengden av de andre populasjoner [27] – [30]. I en nylig gjennomgang av overlevelsesanalyser, ble det funnet at mange studier har indikert kliniske og patologiske karakteristika for pasienter med spiserørskreft som forklarings variabler med hensyn til overlevelse, og viste en bedre overlevelse for kvinner eller unge pasienter. Årsakene til dette er sannsynlig å inneholde en kombinasjon av bedre generell helse og mer effektiv immuntilstand [31] – [32]. Det var imidlertid begrensninger med denne studien, hvor sammenhengen mellom MDSCs% og kliniske patologiske faktorer av ECA pasienter ikke ble analysert, bør det vurderes i det videre arbeidet.
Konklusjon
Vi avdekket en interessant sammenheng mellom Th2-celler forbundet cytokiner og MDSCs eller M2 makrofager i ECA. Endringene oppdaget i IL-4, IL-6, IL-13 og GATA3 nivåer positivt korrelert med MDSCs og M2 makrofager aktivisering, men IFN-γ spilte motsatt effekt. Det nære forholdet mellom sirkulerende MDSCs og vev infiltrasjon av M2 makrofager indikerte at infiltrasjon av M2 makrofager i ECA vev kan være relatert til MDSCs polarisering involverer Th2 fordel. Disse resultatene gir bedre forståelse av systemisk immunosuppresjon slik som interaksjonen mellom T-celler og MDSCs eller M2 makrofager, systemiske cytokiner og deres signalveier, og kan bidra til å utløse en ny strategi for anticancerterapi, som er basert på modulering av de immunosuppressive virkninger av tumor -associated MDSCs, M2 makrofager og Th2-celler.
Takk
forfatterne er takknemlige for Zhijian Zhang, Sheng Xia, Qixiang Shao og Peifang Yang for utmerket teknisk hjelp. Dette arbeidet ble støttet med tilskudd fra Natural Science Foundation National of China (31270947, 31170849 og 30972748), Science Foundation i Jiangsu-provinsen (BK2011472) og Foundation of China Postdoktor Natural (2012M511705).
