Abstract
Flere genom-wide assosiasjonsstudier (GWAS) har blitt gjennomført for å identifisere vanlige enkeltnukleotidpolymorfi (SNPs) som påvirker risikoen for prostatakreft. Det ble antatt at noen prostata kreft-assosiert SNPs kan relateres til kliniske utfall hos pasienter behandlet for prostatakreft ved hjelp av androgen-deprivasjon terapi (ADT). En kohort av 601 pasienter som har fått ADT for prostatakreft ble genotypet for 29 SNPs som har vært forbundet med prostata kreft i Kreft genetiske markører av følsomhet GWAS, og i løpet av de gener som er involvert i kreft. Prognostisk betydning av disse SNPs om sykdomsprogresjon, ble prostatakreft spesifikk dødelighet (PCSM) og total dødelighet (ACM) etter ADT vurdert av Kaplan-Meier analyse og Cox regresjonsmodell. Tre SNPs, nemlig
CASP3
rs4862396,
BMP5
rs3734444 og
IRS2
rs7986346, ble funnet å være nært knyttet til ACM (
P
≤0.042 ), og
BMP5
rs3734444 og
IRS2
rs7986346 ble også kjent for å være signifikant relatert til PCSM (
P
≤0.032) etter justering for de kjente clinicopathologic prediktorer. Videre kan pasienter som bærer et større antall ugunstige genotyper ved geometriske steder av interesse hadde en kortere tid for å ACM og PCSM under ADT (
P
for trend 0,001). Våre resultater tyder på at
CASP3
rs4862396,
BMP5
rs3734444 og
IRS2
rs7986346 kan påvirke overlevelsen hos pasienter etter ADT for prostatakreft, og analysen av disse SNPs kan hjelpe identifisere pasienter med høyere risiko for dårlig utfall
Citation. Huang SP, Bao BY, Hour TC, Huang CY, Yu CC, Liu CC, et al. (2012) genetiske varianter i
CASP3
,
BMP5
, og
IRS2
Gener kan påvirke overlevelse i prostatakreftpasienter Androgen-deprivasjonsterapi. PLoS ONE syv (7): e41219. doi: 10,1371 /journal.pone.0041219
Redaktør: Giuseppe Novelli, Tor Vergata-universitetet i Roma, Italia
mottatt: 17 april 2012; Godkjent: 18 juni 2012; Publisert: 23.07.2012
Copyright: © 2012 Huang et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Dette arbeidet ble støttet av NSC tilskudd NSC-98-2320-B-039-019-My3, NSC-99-2314-B-037-018-My3, NSC-100-2314-B-039-009-My3, og Kina Medical University gi CMU99-COL-13. Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
Prostatakreft, den hyppigst diagnostisert kreft, er den nest største årsaken til kreft dødsfall blant menn i vestlige land [1], [2]. Siden det ble først innført mer enn 70 år siden, har en androgen-deprivasjon terapi (ADT) vært bærebjelke i behandling for avansert prostatakreft basert på at androgen signal har vært ansett som den viktigste onkogene driver i prostata kreftutvikling. Den første reaksjon frekvensen av prostatakreft til ADT har blitt rapportert å være opp til 80%, men sykdommen i de fleste av de behandlede pasienter har utviklet seg mot kastrering resistent prostatakreft (CRPC). Dessverre er CRPC fortsatt uhelbredelig og median overlevelse for pasienter med CRPC er bare 1-2 år. Ikke desto mindre, dårlig forståelse av de molekylære mekanismer som ligger under CRPC kan være den begrensende faktor for utvikling av effektiv terapi.
Genetiske markører har vist seg å ha potensiale for å muliggjøre anvendelse av mer effektiv tilpasset diagnose, prognose og behandling i klinikker. Nylig, millioner av enkeltnukleotidpolymorfi (SNPs) har blitt identifisert til å være forbundet med risiko for prostatakreft hos flere genom-wide assosiasjonsstudier, slik som kreft genetiske markører av følsomhet (CGEMS) studie [3] – [14]. Likevel, den prognostiske verdien av prostata kreft-assosiert varianter har ikke vært godt dokumentert.
Formålet med denne studien var å undersøke den prognostiske betydningen av 29 SNPs som var assosiert med gener involvert i kreft progresjon og hadde lave
P
verdier (
P
0,01) i CGEMS (tabell S1) for sykdomsprogresjon, prostatakreft spesifikk dødelighet (PCSM) og total dødelighet (ACM) i en kohort av 601 pasienter behandlet med ADT for prostatakreft.
Metoder
pasient~~POS=TRUNC rekruttering og datainnsamling
pasienter med diagnostisert og patologisk bekreftet prostatakreft ble aktivt rekruttert fra tre medisinske sentre i Taiwan: Kaohsiung Medical University Hospital og Kaohsiung Veterans General Hospital i sørlige Taiwan, og National Taiwan University Hospital i nordlige Taiwan. Skriftlig informert samtykke ble innhentet fra hver deltaker og tillatelse til å gjennomføre denne studien ble gitt av Institutional Review Board av de tre sykehusene. Innsamling av kliniske data og pasientkarakteristika beskrevet som tidligere studie [15] -. [19] er rapportert i metode S1
Genotyping
Genomisk DNA ble ekstrahert fra perifert blod fra hver pasient og genotyping ble utført som beskrevet tidligere [20] med Sequenom iPLEX matrise-assistert laser desorpsjon /ionisering-time of flight (MALDI-TOF) massespektrometri teknologi ved Nasjonalt senter for Genome Medicine, Academia Sinica, Taiwan. Kort fortalt ble primere for locus-spesifikk polymerase chain reaction (PCR) og allel-spesifikk forlengelse designet av MassARRAY AssayDesign 3.0-programvaren (Sequenom, San Diego, CA, USA). For primer sekvenser, se tabell S2. Eksempel DNA ble amplifisert med primere som flankerer målrettede-sekvensen, etterfulgt av defosforylering og allel-spesifikke primer-forlengelse. Forlengelses produkter ble renset, fylt i en 384-format SpectroChip, og underkastet MALDI-TOF-massespektrometri. De resulterende data ble analysert ved Sequenom MassARRAY Typer programvare (Sequenom, San Diego, CA, USA). Den gjennomsnittlige genotype takst for disse SNPs var 99,3% og samstemmighet var 99,8% blant 55 blind duplisert kvalitetskontroll prøver. Hver av SNPs var i Hardy-Weinberg likevekt (
P
0,01).
Sanntids revers transkripsjon-PCR (real-time RT-PCR)
de humane prostatacellelinjer, nemlig LNCaP, DU-145 og PC-3, ble innkjøpt fra Bioresource Collection og Research Center (Hsinchu, Taiwan) og holdt i RPMI 1640 med 10% føtalt bovint serum, 100 U /ml penicillin og 100 U /ml streptomycin (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) ved 37 ° C i en fuktet 5% CO
2-95% luft atmosfære. Total RNA ble ekstrahert fra LNCaP, DU 145 og PC-3 celler ved hjelp Trizol (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA). Revers transkripsjon med høy kapasitet cDNA Reverse Transcription Kit (ABI, Foster City, CA, USA) og PCR presiseringer med Smart Quant Grønn Master Mix (Protech, Taipei, Taiwan) ble utført på en MJ mini og MiniOpticon real-time PCR deteksjon system (Bio-Rad, Hercules, CA, USA). PCR ble utført som følgende sekvens: innledende varmstart aktivering ved 95 ° C i 15 minutter, og 40 sykluser med denaturering ved 95 ° C i 15 s, annealing og forlengelse ved 60 ° C i 1 min. Primer sekvenser var:
caspase 3 plakater (
CASP3
), følelse 5’GACATACTCCTTCCATCAA-3 «og antisense 5’ATTCATAGCACAGCATCA-3»;
benmorfogenetisk protein 5
(
BMP5
), følelse 5’CCGTCTTCTGCTACATCA-3 «og antisense 5’ACAACATCCTCACCGATT-3»;
insulinreseptoren substrat to plakater (
IRS2
), følelse 5’CAGTGTATTGACGCATAT-3 «og antisense 5’AGCATATTATCATCTGTGTA-3»;
glyseraldehyd-3-fosfat dehydrogenase product: (
GAPDH
), følelse 5′-TCACCACCATGGAGAAGGC-3 «og antisense 5′-GCTAAGCAGTTGGTGGTGCA-3». Kvantifisering av hver prøve i forhold til den LNCaP prøve ble beregnet ved bruk av to
-ΔΔCT metoden [21]. De forventede størrelser og fraværet av ikke-spesifikke amplifiseringsprodukter ble bekreftet ved agarosegelelektroforese og smeltekurve analyse.
Statistisk analyse
Pasient clinicopathologic egenskaper ble oppsummert som antall og prosentandel av pasienter, median eller interkvartilt område (IQR) av verdier. De kontinuerlige faktorer ble dikotomisert ved medianverdien innenfor kullet, med unntak av prostata-spesifikt antigen (PSA) nadir som ble dikotomisert ved 0,2 ng /ml på grunn av dens korrelasjon med sykdomsprogresjon og PCSM [22], [23]. De heterozygote og sjeldne homozygote genotyper ble kollapset i analysen hvis frekvensen av den sjeldne homozygot var for lav (mindre enn 2%), eller hvis de er homozygote og heterozygote genotyper hadde den samme retning av effekt. De sammenslutninger av 29 individuelle SNPs og clinicopathologic egenskaper med tid til progresjon, PCSM og ACM ble vurdert ved hjelp av Kaplan-Meier analyse med log-rank test. Multivariate analyser for å bestemme interdependency av genotyper og andre kjente prognostiske faktorer som alder ved diagnose, klinisk stadium, Gleason score, PSA på ADT initiering, PSA nadir og tid til PSA nadir, ble utført ved hjelp av Cox regresjonsmodellen. Som 29 SNPs ble testet, ble de falske funnrate (
q
verdier) beregnet for å bestemme i hvilken grad tester for foreningen ble utsatt for falske positiver [24].
q
verdier ble beregnet ved hjelp av R
q
verdi-pakken (https://genomics.princeton.edu/storeylab/qvalue/) på den observerte fordelingen av
P
verdier fra log-rank test for 29 SNPs. Statistiske Package for Social Sciences programvareversjon 16.0.1 (SPSS Inc., Chicago, IL) ble brukt til andre statistiske analyser. En tosidig
P
verdien av ≤0.05 ble ansett som statistisk signifikant.
Resultater
Studiepopulasjonen (
N
= 601) er avledet fra en tidligere beskrevet kohort av prostata kreftpasienter behandlet med ADT og dens clinicopathologic egenskaper er presentert i Tabell S3. Kliniske utfall etter ADT ble målt med tid til sykdomsprogresjon, PCSM og ACM. Den kliniske stadium ved diagnose, PSA nadir og tid til PSA nadir under ADT var signifikant assosiert med alle tre kliniske utfall etter ADT (
P
≤0.019). Mens alder ved diagnose var bare forbundet med ACM (
P
= 0,008), Gleason score i diagnose og PSA-nivå på ADT start ble begge assosiert med tid til PCSM og ACM (
P
0,001), men ikke med tid til progresjon
det er totalt 29 SNPs som var assosiert med gener involvert i kreft og hadde lave
P
verdier (
P
0,01) i CGEMS, ble valgt ut. Deres assosiasjoner med sykdomsprogresjon, PCSM og ACM etter ADT ble oppsummert i tabell S1. Vår primære log-rank tester viste at
BMP5
rs3734444,
NCOR2
rs10846667,
IRS2
rs7986346 og
MAP2K6
rs1972933 signifikant relatert til sykdomsprogresjon (nominell
P
≤0.043) med en falsk-funnrate (
q
verdi) på 0,085 (tabell 1). For å evaluere den prognostiske verdien av disse SNPs utover tiden brukes kliniske faktorer, ble en multivariat Cox analyse justert for alder, klinisk stadium, Gleason score på diagnose, PSA nadir, tid til PSA nadir og PSA på ADT innvielse utføres. Korrigert for disse prediktorer, ble det ikke observert statistisk sammenheng mellom noen SNPs og sykdomsutvikling (
P
≥0.084, tabell 1).
BMP5
rs373444,
RXRA
rs3118536,
IRS2
rs7986346 og
ERG
rs2836370 var assosiert med PCSM med nominell
P
≤0.043 og
q
≤ 0,209 (Tabell 2). Seks SNPs, nemlig
CASP3
rs4862396,
BMP5
rs373444,
RXRA
rs3118536,
BMPR1A
rs11597689,
IRS2
rs7986346 og
ERG
rs2836370, også utstilt betydelig innflytelse på ACM (nominell
P
≤0.037), og alle hadde en
q
verdien av ≤0.179 (tabell 3). Korrigert for kliniske prediktorer,
BMP5
rs3734444 og
IRS2
rs7986346 forble signifikant sammenheng med både PCSM (justert
P
≤0.032, tabell 2) og ACM (justert
P
≤0.034, tabell 3). En sterk gen-dose effekt på PCSM under ADT ble notert når
BMP5
rs3734444 og
IRS2
rs7986346 ble analysert i kombinasjon (log-rank
P
0,001, Tabell 2 og figur 1A venstre), og fareforhold (HRS) økte for eksempel antall ugunstige genotyper økt. I tillegg har foreningen av
CASP3
rs4862396 med tid til ACM også forble signifikant (justert
P
= 0,042, Tabell 3) når andre risikofaktorer ble inkludert i multivariat analyse. Antatt tid til ACM redusert gradvis for pasienter med økende antall ugunstige genotyper for
BMP5
rs3734444,
IRS2
rs7986346 og
CASP3
rs4862396 (tabell 3 og figur 1B venstre). Risikoen for ACM økt hos pasienter med en ugunstig genotype (HR 1,43, 95% konfidensintervall [CI] 0,97 til 2,11) og betydelig økt for pasienter med 1 ugunstige genotyper (HR 2,48, 95% KI 1,54 til 3,98) sammenlignet til pasienter uten ugunstige genotyper (
P
for trend 0,001, Tabell 3).
Kaplan-Meier-kurver av (A) på tide å PCSM under ADT for pasienter med 0, 1, eller 2 ugunstige genotyper på to genetiske loci av interesse, og (B) tid til ACM under ADT for pasienter med 0, 1, eller 1 ugunstige genotyper på tre genetiske loci av interesse; målt i alle pasienter (til venstre), hos pasienter uten fjernmetastaser (i midten), eller hos pasienter med fjernmetastaser (til høyre). Tallene i parentes angir antall pasienter.
Siden pasienter med fjernmetastaser anses høy risiko, pasienter ble ytterligere stratifisert basert på deres metastatisk status ved oppstart av ADT for å vurdere den kliniske relevansen av disse SNPs. De kombinerte genotyper fortsatt hadde effekt på PCSM og ACM hos pasienter med eller uten fjernmetastaser, henholdsvis (
P
≤0.052, Figur 1 midtre og høyre). Disse resultatene støtter at disse SNPs kan være uavhengige overlevelse prediktorer følgende ADT, sammen med dagens clinicopathologic prognostiske markører. Integrering av disse SNPs med de kjente prediktorer kan forbedre risikolagdeling og bidra til å gjøre behandling beslutninger.
For å få en første indikasjon på disse kandidatgener i prostatakreft, uttrykket nivåer av
CASP3
,
BMP5 Hotell og
IRS2
i tre mest brukte menneskelige prostata kreft cellelinjer, nemlig LNCaP, DU 145 og PC-3, ble undersøkt ved hjelp av real-time RT-PCR (figur 2). Det har blitt godt etablert at LNCaP-celler uttrykker androgenreseptoren (AR) og er androgen-følsomme med markert mindre invasiv potensiell [25]. DU 145 og PC-3-celler, på den annen side, ikke uttrykker AR og er androgen-insensitive med svært aggressiv oppførsel [26]. mRNA for alle tre gener var i stand til å bli påvist i alle prostatacancercellelinjer.
CASP3
er en av de viktigste arvtakere av apoptose. Uttrykket endogene
CASP3
transkripsjoner ble omvendt korrelert til aggressivitet i menneskelige prostata kreft cellelinjer, viser at det var høyere i LNCaP enn i DU 145 og PC-3. Forhøyet ekspresjon av BMP har vært implisert i prostata cancer, spesielt i sykdomsspesifikk ben-metastase [27]. En positiv korrelasjon ble observert mellom metastatiske potensialet i disse prostatakreftcellelinjer og
BMP5
uttrykk. Selv
IRS2
har blitt positivt assosiert med aggressiv svulst oppførsel [28], har det også blitt identifisert som en primær target gen av AR [29]. Den endogene
IRS2
uttrykt høyere nivåer i AR-positive LNCaP celler enn i AR-negative DU 145 og PC-3 celler. Alle disse uavhengige bevislinjer støtter biologisk plausibilitet av vårt forslag at risiko varianter av prostata kreft kan også påvirke overlevelsen hos pasienter behandlet med ADT for prostatakreft.
Totalt RNA ble preparert fra LNCaP, DU 145 og PC-3 celler, og genekspresjon ble analysert ved hjelp av real-time RT-PCR. Relativ genekspresjon representerer fold endringer i genuttrykk i forhold til LNCaP celler satt til 1,0. Tall på stolpene representerer forskjellen i terskel sykluser mellom gener av interesse og intern kontroll genet. Data er uttrykt som gjennomsnitt ± SE av tre uavhengige eksperimenter.
Diskusjoner
Denne studien hadde som mål å undersøke den prognostiske effekten av 29 prostatakreft-forbundet SNPs valgt fra CGEMS hos pasienter som får ADT for prostatakreft. Våre resultater viser at
CASP3
rs4862396,
BMP5
rs3734444 og
IRS2
rs7986346 var signifikant assosiert med ACM, og
BMP5
rs3734444 og
IRS2
rs7986346 ble også signifikant relatert til PCSM. I tillegg multivariat analyse viste at disse SNPs var uavhengige prognostiske faktorer etter justering for de kjente clinicopathologic prediktorer, inkludert alder, klinisk stadium, Gleason score på diagnose, PSA nadir, tid til PSA nadir og PSA på ADT start. Det foreslås at
CASP3
rs4862396,
BMP5
rs3734444 og
IRS2
rs7986346 kan være nyttige markører for å forutsi overlevelse hos pasienter som fikk ADT for prostatakreft. Så langt vi kjenner til, er dette den første studien for å avgjøre om de genetiske varianter i
CASP3
,
BMP5 Hotell og
IRS
gener har prognostiske effekter på kliniske resultater av pasienter med prostatakreft.
CASP3
koder for et medlem av caspase-familien, som er ansvarlig for apoptose utførelse. Når CASP3 blir proteolytisk aktiveres av initiatorpartiklene caspaser under død reseptor- eller DNA-skade-indusert apoptose, det spalter en stort sett av substrater og resulterer i at demontering av cellen. Selv om de molekylære mekanismer som prostata kreft celler overleve under ADT er ukjente, har feilregulering av overlevelse /apoptose proteiner vært mistenkt for å gjøre kreftceller mindre utsatt for celledød indusert av androgen deprivasjon [30]. rs4862396 ligger 5-kb nedstrøms av
CASP3
genet. Selv om funksjonen spådd for rs4862396 ikke har vært kjent, er flere utypede
CASP3
SNPs tett knyttet (
r
2 0,9) med rs4862396. Ifølge prediksjon av SNP Funksjon Portal [31], er mange av de koblede SNPs er i stand til å endre bindingsseter for transkripsjonsfaktorer (dvs. rs7675251 i hepatocytter nukleær faktor en bindingssetet), måls for microRNAs (dvs. rs8549 i målet stedet hSA-MIR-196a), og aminosyresekvens (dvs. rs1049210 fører til E189D). Derfor ytterligere bot kartlegging av
CASP3
genet kan hjelpe identifisering av de sterkeste merkene og forbedre vår forståelse av bidraget fra
CASP3
rs4862396 til prostatakreft progresjon.
BMP5
koder for et medlem av BMP familien som tilhører den transformerende vekstfaktor-β super. Siden BMP er sterke regulatorer for ben homeostase og prostatacancer er mest sannsynlig å metastasere til ben, er det en økende interesse for å undersøke rollen til BMP i prostatakreft benmetastase. Uttrykket nivåer av flere BMPs i prostatakreft har vært knyttet til oppkjøpet av osteogene egenskaper og tumorprogresjon til bein [32] – [34]. Videre presiseringer av
BMP5
genloci syntes å være mer utbredt i svulster med høyere Gleason score og oppstod i 50% av prostatakreft, som kan redegjøre for de unormale genuttrykksmønster av BMP5 i prostatakreft [ ,,,0],27]. rs3734444 ligger i ekson 1 av
BMP5
genet. Selv om rs3734444 er et synonymt SNP og påvirker ikke aminosyresekvensen, blir det forutsagt til å endre bindingsseter for transkripsjonsfaktoren CP2 og myocyte enhancer faktor 2A. I tillegg er rs3734444 også spådd å finne på bindingssteder for exonic skjøting lyddemper og Enhancer, som spiller viktige roller i konstituerende og alternativ spleising. Derfor er det mulig at rs3734444 kanskje direkte eller indirekte gjennom andre lenkede SNPs, innflytelse BMP5 uttrykk, samspill mellom prostatakreftceller og bein mikromiljøet, og til slutt progresjon til bein metastasering.
IRS2
koder for et medlem av en familie av intracellulære signal adapter proteiner som koordinere mange biologisk viktige ekstracellulære signaler i cellen, inkludert insulin, insulin-like growth factor 1 (IGF1), hormoner, cytokiner og inte. Endringer i ekspresjon IRS har vært knyttet til ikke bare metabolske sykdommer, men også mange typer kreft [35] – [37]. Ved ligand-binding, er insulinreseptoren og IGF1 reseptor autofosforyleres og nåværende tilkoblingssteder for IrSS, som fosforyleres av den reseptor-tyrosin-kinase. Den fosfor-IrSS rekruttere og aktivere mange nedstrøms veier: de to beste studerte blir phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) /fosfatase og tensin homolog (PTEN) og ekstracellulære signalregulerte kinase veier. Sletting av
IRS2
har vist seg å undertrykke prostatakreft cellevekst, spredning og invasjon i
PTEN
+/- mus ved å redusere MYC uttrykk og DNA-syntese [28]. Mens ADT styrer prostatakreft vekst, er det også forbundet med et mønster av metabolske forandringer, slik som hyperinsulinemi [38]. Disse høye sirkulerende nivåer av seruminsulin har vist seg å virke direkte på CRPC celler, og for å forbedre
de novo syntese
androgen ved oppregulering av IRS2 og flere nedstrøms steroidogenic enzymer [39]. rs7986346 ligger på 15 kb oppstrøms for
IRS2
genet ble spådd til å endre CCAAT /enhancer bindende protein γ av SNP Funksjon Portal. Derfor rs7986346 kan regulere IRS2 uttrykk og påvirke prostata kreft progresjon å kastrere motstand.
I konklusjonen, lyser denne studien opp flere veier for å påvirke overlevelsen etter ADT, for eksempel
CASP3
i apoptose,
BMP5
i bein homeostase og
IRS2
i steroidogenesis, og celleoverlevelse.
CASP3
rs4862396,
BMP5
rs3734444 og
IRS2
rs7986346 ble funnet å være de uavhengige prognostiske markører for pasienter som fikk ADT for prostatakreft. Det tyder på at i tillegg til de for tiden anvendte clinicopathologic prediktorene, kan testen av de tre SNP bidra til å identifisere undergrupper av pasienter har høyere risiko for dårlig resultat, hvilket bidrar til å skreddersy individuelle terapeutiske intervensjoner for prostatakreft. Imidlertid er denne undersøkelsen fortsatt begrenset av prøvestørrelsen i undergruppe analyser og multiple sammenligninger. I tillegg kan våre homogen kinesiske Han befolkning gjør våre funn mindre generaliseres til andre etniske grupper. Videre funksjonelle analyser og store uavhengige studier i andre etniske populasjoner er nødvendig for å validere relevansen av de observerte assosiasjoner til effekten av ADT for prostatakreft.
Hjelpemiddel Informasjon
Metode S1.
Pasient rekruttering og datainnsamling.
doi: 10,1371 /journal.pone.0041219.s001 plakater (DOC)
Tabell S1.
genotypet SNPs og
P
verdier av deres tilknytning til tid til progresjon, PCSM, ACM under ADT.
doi: 10,1371 /journal.pone.0041219.s002 plakater (DOC)
Tabell S2.
Oligonukleotider brukes for genotyping analyse.
doi: 10,1371 /journal.pone.0041219.s003 plakater (DOC)
tabell S3.
Fordeling av clinicopathologic egenskaper og deres foreninger med sykdomsprogresjon, PCSM, og ACM i prostatakreftpasienter ADT.
doi: 10,1371 /journal.pone.0041219.s004 plakater (DOC)
Takk
Forfatterne ønsker å takke for den tekniske støtten fra National Center for Genome Medicine, National Science Council (NSC) i Taiwan.
