Abstract
VEGF-C regnes som en av de mest effektive faktorene i å regulere lymphangiogenesis. Målet med denne studien var å bedre forstå rollen til VEGF-C i utviklingen av eggstokkreft og å vurdere sin diagnostiske og prognostisk betydning. Totalt 109 pasienter med eggstokkreft, 76 pasienter med godartet eggstokkene sykdommer, og 50 friske kontroller ble rekruttert i denne studien. Serumnivåer av VEGF-C ble bestemt ved hjelp av ELISA-metoden. Resultatene viste at serumnivåene av VEGF-C var signifikant høyere hos pasienter med kreft i eggstokkene enn de med benigne ovarie sykdommer og friske kontroller (
P
0,01). Serumnivå av VEGF-C ble korrelert med FIGO stadium, lymfeknutemetastase, tumor resectability, og overlevelse av pasienter (
P
0,05). Områdene av mottagerdriftskurver for VEGF-C var høyere enn de av CA125 i forskjellige screening grupper. Analyse ved hjelp av Kaplan-Meier metoden viste at pasienter med høyt VEGF-C hadde signifikant kortere total overlevelse tid enn de med lav VEGF-C (
P
0,0001). I en multivariat analyse sammen med kliniske prognostiske parametre ble serum VEGF-C identifisert som en uavhengig negativ prognostisk variabel for total overlevelse. Resultatene indikerte at serum VEGF-C kan være klinisk nyttig indikator for diagnostisk og prognostisk vurdering i eggstokkreft pasienter
Citation. Cheng D, Liang B, Li Y (2013) Serum Vaskulær endotelial vekstfaktor (VEGF C) som en diagnostisk og prognostisk markør hos pasienter med eggstokkreft. PLoS ONE 8 (2): e55309. doi: 10,1371 /journal.pone.0055309
Redaktør: Goli Samimi, Kinghorn Cancer Centre, Garvan Institute of Medical Research, Australia
mottatt: 15 oktober 2012; Godkjent: 20 desember 2012; Publisert: 01.02.2013
Copyright: © 2013 Cheng et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Dette arbeidet ble støttet av en bevilgning fra Liaoning Nature Science Fund (201.102.257). Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
ovarialcancer er en av de vanligste kreftformene hos kvinner og den ledende dødsårsaken av alle gynekologiske svulster. Til tross for nylige fremskritt, har prognosen for en kvinne diagnostisert med avansert stadium eggstokkreft endret seg lite i løpet av de siste tretti årene med en fem-års overlevelse på bare 30% [1], [2]. Den relativt asymptomatisk natur tidlig stadium eggstokkreft, den raske utviklingen av kjemoresistent sykdom, og den høye frekvensen av tilbakefall har tjent eggstokkreft rykte for å være en «silent killer» [3]. Tumor invasjon og metastasering er de kritiske trinn i å bestemme den aggressive fenotype av kreft hos mennesker og de viktigste årsakene til kreft dødsfall. Selv om eggstokkreft kan spres i en rekke måter, er formidling til regionale lymfeknuter via afferente lymfekar et viktig skritt i eggstokkreft metastase og en viktig prognostisk faktor [4].
vaskulær endotelial vekstfaktor (VEGF) genfamilie, som koder for fem polypeptid vekstfaktorer, VEGF-A, -B, -C, -D, og placenta lignende vekstfaktor (PLGF), er særlig viktig på grunn av dens angiogene og lymphangiogenic egenskaper som fremmer vekst og metastasering av svulster . VEGF-C regnes som den mest effektive faktor ved regulering av lymphangiogenesis [5], og det har også vist seg å direkte øke invasivitet av eggstokkreft celler in vitro [6]. Hittil har høy ekspresjon av VEGF-C som finnes i brystcancer, prostatacancer, magekreft, tykktarmskreft, og lungekreft, og er forbundet med lymphangiogenesis, lymfeknutemetastase, og prognose [5], [7] – [10 ].
i utviklingen av eggstokkreft, prediktive faktorer kan brukes til å få innsikt i respons på en bestemt behandling, og prognostiske faktorer kan være nyttig i å gjøre beslutninger om pasienter som skal motta adjuvant behandling. Men den diagnostiske og prognostiske verdi av serum VEGF-C i eggstokkreft er ukjent. Målet med denne studien var å bedre forstå rollen til VEGF-C i progresjon og metastasering av eggstokkreft, og for å vurdere sin prognostisk betydning.
Materialer og metoder
Pasienter
studien inkluderte 109 sammenhengende eggstokkreft pasienter (alder: 61,5 ± 10,2 år), som ble samlet før operasjonen fra Institutt for gynekologi, nr 202 Hospital mellom juli 1999 og september 2001. Kliniske kjennetegn ved pasientene gitt i tabell 1. Alle pasientene ble operert iscenesatt i samsvar med International Federation of gynekologi og fødselshjelp (Figo) kriterier. Pasienter som gjennomgikk preoperativ kjemoterapi og strålebehandling ble ekskludert. I tillegg prøver av 76 alderstilpassede pasienter (alder: 54,1 ± 13,5 år) ble med godartede lesjoner analysert. Av de godartede lesjoner, 23 ble klassifisert som mucinkjertler cystadenomas, 7 som godartet eggstokkene teratomas, 11 som eggstokkene Dermoid cyster, tre som sclerosant svulst, 8 som serøs cystadenomas, 16 som fibroma, og 8 som corpus luteum cyste. Totalt 50 friske kontroller (alder: 58,6 ± 12,3 år) hadde ingen historie med eggstokkreft patologi eller annen systemisk sykdom. Pasienter med eggstokkreft ble overvåket for overlevelse for en median varighet på 49 måneder (range: 1-108 måneder). Oppfølging informasjon var tilgjengelig for 106 kreftpasienter på eggstokkene.
Skriftlig informert samtykke ble innhentet fra alle deltakerne, og studien ble godkjent av Kina Medical University etiske komité [2009] No.48.
Prøvetaking
Serumprøver prøver~~POS=HEADCOMP fra alle pasientene ble samlet presurgically, før behandlingsstart, og lagret ved -80 ° C til vurdering av VEGF-C-nivå. Serum VEGF-C ble bestemt med sandwich-enzyme immunoassay teknikk (Quantikine, R Derfor ble parametriske analyser brukt. Den parametriske Mann-Whitney sum rang U test og Kruskal-Wallis (
x
2) test ble brukt for sammenlikning av variablene i grupper. Sammenhenger mellom VEGF-C og clinicopathological variabler (histologi, tumor stadium, svulst klasse, resttumorstørrelse, lymfeknutemetastase, pasientenes overlevelse, og resectablity av svulster) ble vurdert av chi-kvadrat test. Sensitiviteten og spesifisiteten av VEGF-C ble bestemt ved mottagerdrifts karakteristiske (ROC) kurver, og områdene under kurven ble beregnet [11]. Overlevelsestiden ble målt fra tidspunktet for diagnosen til datoen for død av kreft i eggstokkene eller dato for siste oppfølging. Ved hjelp av median av VEGF-C nivå som en cut-off, ble prognostiske effekten av VEGF-C evaluert av Kaplan- Meier metoden og log-rank test. Videre ble virkningen av serum VEGF-C nivået på pasient total overlevelse vurderes, og beregnes av både univariate og multivariate Cox regresjonsmodeller. En
P
verdi. 0,05 ble betraktet som signifikant
Resultater
Nivåene av VEGF-C og CA125 i sera av ovarian kreftpasienter og godartede eggstokkene sykdommer, så vel som hos friske kontroller ble presentert i tabell 2. Serumnivåer nivåer~~POS=HEADCOMP av VEGF-C og CA125 var signifikant høyere hos pasienter med eggstokkreft enn de i benigne eggstokkene sykdommer og friske kontroller (
P
0,01) . Det var ingen forskjell mellom godartede eggstokkene sykdommer og friske kontroller for serumnivåer av VEGF-C og CA125 (
P
0,05).
Tabell 3 presenteres nivåene av VEGF- C og CA125 i sera av eggstokkreft kreftpasienter i forhold til klinikken-patologisk variabler. Serumnivåer av VEGF-C viste signifikant korrelasjon med FIGO stadium, og var den høyeste i IV undergruppe (
P
= 0,040). Hos pasienter med lymfeknutemetastaser, ble serumnivåer av VEGF-C økte sammenlignet med pasienter uten lymfeknutemetastase (
P
= 0.010). Videre er serumnivået av VEGF-C økt hos pasienter som døde av kreft i løpet av observasjonsperioden (
P
= 0,017). Lignende observasjon for VEGF-C ble gjort i eggstokkreft pasienter med nonresectable svulster sammenlignet med de med resektable de (
P
= 0,013).
Som vist i figur 1 (a) , arealet under mottaker driftskurve (AUROC) analyse vurdere serum VEGF-C som et diagnostisk verktøy for å skille eggstokkreft fra godartet ovarian sykdommer og friske kontroller ble 0,826 (95% CI, 0,773 til 0,879) sammenlignet med 0,760 (95% CI, 0,697 -0,822) for CA125. I tillegg figur 1 (b) viste at AUROC av VEGF-C for å differensiere eggstokkreft fra helsekontroller var 0,862 (95% CI, 0,794 til 0,931), som var høyere enn 0,853 (95% CI, 0,773 til 0,933) av CA125. Figur 1 (c) presenteres som den omtrent AUROC for eggstokkreft versus godartet ovarian sykdommer var 0,802 (95% CI, 0,736 til 0,868) og 0,681 (95% CI, 0,604 til 0,758) for VEGF-C og CA125, henholdsvis. AUROC av VEGF-C var større enn CA125 i ulike screening grupper.
(a-b) ROC analyse inkluderte pasienter med godartet eggstokkene sykdommer og friske kontroller som en negativ gruppe og pasienter med eggstokkreft som en positiv gruppe. (C-d) kreftpasienter på eggstokkene
vs
friske kontroller; (E-f) kreftpasienter på eggstokkene
vs
godartet ovarian sykdommer. AUROC. Arealet under mottaker ende kurve
Analyse ved hjelp av Kaplan-Meier metoden viste at pasienter med høyt nivå av VEGF-C (≥10200 pg /ml) hadde betydelig kortere total overlevelse enn de med lav nivået av VEGF-C ( 10 200 pg /ml), som vist i figur 2 (
P
0,0001). Kurven indikerte at høy grad av VEGF-C er signifikant assosiert med en økt risiko for død. For å vurdere faktorer som påvirket total overlevelse, ble de fem kliniske faktorer og VEGF-C nivå er oppført i tabell 4 med i analysen. Univariat analyse viste at tumorstadium (III og IV) (
P
0,0001), lymfeknutemetastase (
P
0,001), og høye nivåer av VEGF-C (
P
= 0,001) var signifikant assosiert med overlevelse av pasienter med eggstokkreft. Av disse tumorstadium (III og IV) (
P
= 0,006), lymfeknutemetastase (
P
= 0,021), og høye nivåer av VEGF-C (
P
= 0,01) forble signifikant på multivariat analyse. Blant faktorene studert, VEGF-C-nivå var en uavhengig prediktor for dårlig pasient overlevelse.
Diskusjoner
metastatisk spredning av kreftceller er ansvarlig for de fleste av kreft dødsfall. Lymphangiogenesis og vedvarende angiogenese er viktige skritt i tumorprogresjon. I likhet med angiogenese, kan en svulst indusere sitt eget nettverk av lymfekar som forbinder med de omkringliggende lymfekar. Til dags dato, kliniske og patologiske resultater indikerer at den metastase av tumorceller ved lymfekar er den vanligste vei av første formidlings for mange karsinomer. Lymphangiogenesis ble rapportert å spille en rolle i progresjon av kreft i eggstokkene både klinisk og i eksperimentelle modeller [12], [13].
Som et medlem av VEGF-familien, er VEGF-C først påvist å indusere lymphangiogenesis og fremmer metastase i dyrestudier, og uttrykkes også i en rekke humane voksent vev, inkludert hjerte, morkake, muskel, ovarier, tynntarm og [14], [15]. Tidligere studier har vist at VEGF-C /VEGFR3 signalanlegget er ansett som den mest effektive veien i å regulere lymphangiogenesis. VEGF-C utskilles av tumorceller spesifikt kan virke på reseptor VEGFR-3 på overflaten av lymfatisk endotel-celler, og dermed aktivering av signaleringssystemet for tumor lymphangiogenesis. Clinicopathological korrelasjoner har vist at det er en sterk korrelasjon mellom VEGF-C /VEGFR3 signalering og lymfeknutemetastase i forskjellige humane cancere [16], [17]. Nakazato T,
et al
. rapportert at VEGF-C uttrykk i muntlig plateepitelkarsinom utløser lymphangiogenesis, noe som kan resultere i en høy risiko for livmorhalslymfeknutemetastase [18]. Schietroma C
et al
, viste at VEGF-C positiv lymfatisk tettheten økes rundt malignt melanom og assosiert med kreftceller invasjon av lymfeknute [19]. Nyere studier identifiserte VEGF-C som en prognostiske faktorer for dårlig prognose i gastrisk adenokarsinom [20], kolangiokarsinom [21], brystkreft [22], og lungekreft [23].
Neoplastisk angiogenese og lymphangiogenesis er avgjørende for vekst av svulstvevet i både primær- og metastaser. Dette innebærer at påvisning av angiogene og lymphangiogenic faktorer kan indikere tilstedeværelse av ondartet svulst på et tidlig stadium. Data med fokus på lymphangiogenesis i eggstokkreft er snaut. Men Sinn BV,
et al
, viste at VEGF-C mRNA er assosiert med aggressiv svulst atferd i eggstokkreft [24]. Selv om det ble observert en økning av VEGF-mRNA C, forholdet mellom serum VEGF-C-nivåer og tumor oppførsel er ikke ennå blitt bestemt ved en kvantitativ metode in vivo. I vår studie har vi analysert serum VEGF-C nivå i et stort antall eggstokkreft prøver ved hjelp av ELISA-metoden og fokus på ulike undergrupper, serøs-papillær adenokarsinom, mucinous adenokarsinom, endometroide svulst, klarcellet ovarian tumor og andre, som skiller seg vesentlig i en rekke genetiske, biologiske, patologiske og kliniske egenskaper. Resultatene viste at nivåene av VEGF-C ble forhøyet i eggstokkreft pasienter sammenlignet med benigne ovarie sykdommer og friske kontroller. Derfor, for ytterligere å evaluere klinisk verdi av VEGF-C, vi bestemt og sammenlignet den diagnostiske nytte av VEGF-C og CA125 i forskjellige screening grupper. Serum VEGF-C nivåer tegnes eggstokkreft pasienter fra normale individer og /eller godartet ovarian sykdom pasienter svært pålitelig. Serum VEGF-C var en betydelig bedre prediktor for eggstokkreft enn CA125 i dette studerte populasjonen.
Nivåene av VEGF-C i sera av 109 kreftpasienter på eggstokkene ble vurdert i forhold til clinicopathological på tumor som FIGO stadium, gradering, tumor beliggenhet, lymfeknutemetastase, tumor resectability, og overlevelse av pasienter. I tillegg økte serum VEGF-C signifikant med FIOGO stadium, lymfeknutemetastase, overlevelse av pasienter, og tumor resectablility. Våre resultater er i overensstemmelse med funnene i Huang KJ,
et al product: [25], som avdekket signifikant forskjell på VEGF-C i lymfeknutemetastase. Som beskrevet ovenfor, tyder det på at forhøyede nivåer av VEGF-C kan reflektere rollen dette proteinet som en stimulator av lymphangiogenesis og tumorcellemetastase i progresjon av kreft i eggstokkene.
Endelig overlevelsesanalyse av ovarian kreftpasienter ble undersøkt i denne studie basert på nivåene av VEGF-C. En tidligere studie har vist den potensielle nytten av VEGF-C som en prognostisk markør i brystkreftpasienter [26]. I vår studie, overlevelsen av pasienter med høyt VEGF-C nivået var betydelig lavere enn pasienter med lav VEGF-C nivå (
P
0,0001). Av notatet, gjorde preoperative nivåer av CA125 i disse pasientene ikke korrelerer med dårlig resultat (data ikke vist). Foruten den allerede etablerte prognostisk indikator, slik som FIGO stadium og lymfeknutemetastase, ble serum VEGF-C uavhengig av hverandre forbundet med prognosen hos alle pasienter med kreft i eggstokkene. Dermed kan serum VEGF-C identifisere tidlig stadium pasienter som er sykdomsrelatert død. Dette kan godt påvirke behandlingsavgjørelser.
Resultatene antydet at VEGF-C kan være involvert i utviklingen av kreft i eggstokkene, og det høye nivå av VEGF-C i sera kan være relatert til lymphangiogenesis av tumoren i tillegg som invasjonen av lymfekar i eggstokkreft. Som et ikke-invasiv markør, har VEGF-C potensiale til å fremskynde klinisk diagnose av ovariekreft og for å hjelpe til med deteksjonen av lymfeknutemetastase hos kvinner for hvem CA125 er ikke nyttig. Samlet, tillegg av VEGF-C til diagnostisk verktøy i tilfeller med mistanke om omfattende eggstokkreft kan bidra til nøyaktigheten av diagnose, sparsom intensiv endoskopisk søk for spredte foci. Det kan også bli brukt for oppfølging av disse pasientene, og forutsi utfallet av pasientene.
Vårt funn har flere begrensninger. Først validering av prediktiv betydningen av VEGF-C krever store studier på homogene populasjoner. Det er usannsynlig at clinicopathological undergrupper av tilstrekkelig størrelse kunne bli slått sammen i et enkelt institusjon. For det andre, er VEGF-C ikke er spesifikk for eggstokk-kreft, og de er innblandet i både tumor- og betennelse-indusert lymphangiogenesis. Tredje, om evnen til VEGF-C for å diskriminere mellom tidlig eggstokkreft og godartede sykdommer, mindre vanlige histologiske typer, og tilfeller der CA125 er lav, må vi rekruttere flere kliniske tilfeller og gjøre en analyse av forskjellen i dybden. Til slutt, den optimale metode for evaluering av serum VEGF-C ennå ikke har blitt standardisert og de «normale» nivåer er ukjent. Ytterligere valideringer er nødvendig i store studier for å bedre undersøke kliniske implikasjoner av serum VEGF-C nivå, og for å finne ut om serum VEGF-C kan gi mer nyttig informasjon om tilstedeværelse av tidlig stadium eggstokkreft, fjernmetastaser, og prognostisk verdi av eggstokkreft .
