Abstract
Motstand mot progestin behandling er et stort hinder i behandling av avansert og reoccurring livmorkreft. Fenretinide er et syntetisk retinoid som har blitt undersøkt i kliniske studier som kreft terapeutisk og chemo-forebyggende middel. Fenretinide er etablert for å være cytotoksisk til mange typer kreftceller. I denne studien, viser vi at fenretinide redusert celle levedyktighet og indusert apoptose i Ishikawa celler, som er en livmorkreft cellelinje, doseavhengig måte
in vitro
. Denne effekten
ble funnet å være
uavhengig av retinsyre nukleær reseptor signalveien.
Videre
, vi har vist at denne induksjon av apoptose ved fenretinide kan være forårsaket av økt retinol opptak via STRA6. Stanse av STRA6 ble vist å redusere apoptose som ble hemmet av knockdown av STRA6 uttrykk i Ishikawa celler. Resultater av en
in vivo
studien viste at intraperitoneale injeksjoner av fenretinide i endometriekreft tumorer (opprettet ved hjelp av Ishikawa-celler) i mus hemmet tumorvekst effektivt. Immunhistokjemi av muse tumorer viste en reduksjon i Ki67-ekspresjon og en økning i spaltet caspase-3-farging etter fenretinide behandling sammenlignet med bærerbehandlede mus. Kollektivt, resultatene er de første til å etablere effekten av fenretinide som et antitumormiddel for livmorkreft både
in vitro Hotell og
in vivo
, sette begrunnelsen for å iverksette flere prekliniske studier og kliniske forsøk med fenretinide for behandling av livmorkreft
Citation:. Mittal N, Malpani S, Dyson M, Ono M, Coon JS, Kim JJ et al. (2014) Fenretinide: A Novel behandling for livmorkreft. PLoS ONE 9 (10): e110410. doi: 10,1371 /journal.pone.0110410
Redaktør: Aamir Ahmad, Wayne State University School of Medicine, USA
mottatt: 19 februar 2014; Godkjent: 15 september 2014; Publisert: 23 oktober 2014
Copyright: © 2014 Mittal et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. De bevilgende myndighet hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet. Disse studiene ble støttet av sjenerøse midler fra John og Diane O’Donnell (til divisjon gynekologisk onkologi, NU) og reproduktiv biologi divisjon, NU. Studiene ble også støttet av K12HD050121 og ASRM Career Development Award som ble delt ut til Mary Ellen Pavone. Senter Support Grant (NCI CA060553) ble brukt for innebygging, seksjonering og farging av tumorvev. NU Cell Imaging Facility var sjenerøst støttet av NCI CCSG P30 CA060553 som ble tildelt Robert H Lurie Omfattende Cancer Center
Konkurrerende interesser:. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning.
Livmorkreft kreft~~POS=HEADCOMP er den mest utbredte gynekologisk kreft i USA, med anslagsvis 49,560 nye tilfeller og 8190 – dødsfall i 2013 [1]. Sannsynligheten for en kvinnelig blir diagnostisert med denne kreftformen i løpet av hennes levetid er om lag én av 38 [2]. Forekomsten av denne reproduktive organ malignitet har økt med et gjennomsnitt på 1,1% per år 2004-2008 og dødelighet har også økt med et gjennomsnitt på 0,3% per år 1998-2007 [3]. Kirurgi, kjemoterapi og strålebehandling er tre hoved etablerte metoder for behandling av endometrial karsinom [4], [5]. Kirurgisk fjerning av terapiresultatet livmor og hjelpestoff i en større enn 90% av fem års overlevelse. Gjentakelse på grunn av motstand mot cellegift eller strålebehandling presenterer en annen stor utfordring for helsepersonell. Derfor er det av største betydning å finne nye og effektive behandlinger for livmorkreft.
Klinisk, progestiner, inkludert megace (megestrolacetat) har blitt brukt til å behandle endometrial ondartede sykdommer på grunn av den antagonistiske virkningen av progesteron på østrogen virkning . Progestiner brukes som primærmidler for å behandle avansert eller residiverende sykdom, de som er dårlige kandidater for kirurgi og hos yngre kvinner som ønsker å bevare sin fremtid fruktbarheten. En komplett respons kan oppnås når progestin terapi brukes hos kvinner med endometriehyperplasi og godt differensiert endometrial adenokarsinom; Men effektiviteten av progestinterapi synker med en økning i sykdommens alvorlighetsgrad. I tillegg kan tilbakefall forekomme en gang progesteron terapi stoppes [6], [7].
På jakt etter målrettet terapeutisk middel mot livmorkreft, forrige
in vitro
studier fra vårt laboratorium demonstrerte merket inhibering av proliferasjon av endometrial cancer Ishikawa-cellelinje med retinsyre (RA) og RA agonist-AM580 forbindelse [8]. Imidlertid har deres kliniske bruk vært hittil, begrenset av deres ugunstige bivirkninger profil [9]. RA og deres derivater (enten naturlige eller syntetiske forbindelser) har en anerkjent rolle i regulering av cellevekst, differensiering og apoptose. RA har potensiale for behandling og forebygging av kreft [10], [11]. Retinol (den dominerende form av retinoider i menneskekroppen) må konverteres til retinsyre for å vise dets biologiske aktivitet. Hovedkilden til RA er kost vitamin A, som er tatt opp i tarmen, og pakket som retinylestere i leveren. Disse retinylestere utskilles i sirkulasjonen er bundet til retinol-bindingsprotein (RBP) og deretter tatt inn i celler via
STRA6 plakater (Stimulert av RA 6), et avgjørende celleoverflatereseptor for RBP [12]. Tidligere har vårt laboratorium vist at STRA6 er hovedregulatoren av retinol opptak i endometriet, og at den reduserte ekspresjon av dette gen i endometriose kan bidra til redusert hydroxysteroid (17-beta) dehydrogenase 2 (HSD17β2) mRNA-ekspresjon [13], som fører til vedvarende forhøyede nivåer av østradiol. Vi har også vist at retinoider redusere østrogenproduksjon ved å indusere ekspresjon i HSD17β2 endometrial Ishikawa-celler [14].
STRA6 er hovedcelleoverflate-reseptoren er ansvarlig for retinol-opptak. Inne i cellen, kan retinol oksyderes til den mer biologisk aktive RA av alkohol dehydrogenaser. RA blir deretter rettet fra cytoplasma til bestemte kjerne hormon RA-reseptorer (RARs) og retinoid X-reseptorer (RXRs) av to intra-cytoplasmatiske bærerproteiner, spesielt cellulært RA-bindende protein 2 (CRABP2) og fettsyrebindende protein 5 (FABP5 ) [15]. Til slutt blir den ubrukte RA metabolisert og kastes ut av cellene ved CYP26 familie av enzymer [16].
Fenretinide [N-4-hydroksyfenyl retinamide (4-HPR)], et syntetisk derivat av all-trans retinsyre har evnen til å initiere celle apoptose selv i ATRA-resistente cellelinjer med den ekstra fordelen av å ha en mindre bivirkninger profil. Menneskelige studier har funnet at de store bivirkninger inkluderer redusert tilpasning til mørke øyne, hud og slimhinne tørrhet, kløe, urtikaria, gastrointestinale ubehag og endring på øyets overflate. Disse bivirkningene var relativt hyppig, men mild. Som sådan er det fremstår som en av de mest lovende antitumormidler [17]. Studier har vist at fenretinide kan indusere cytotoksisitet i flere humane kreftcellelinjer
in vitro product: [18] – [23]. Klinisk har fenretinide blitt brukt både som en Kjemopreventivt middel i bryst [24], blære [25] og oral mucosal cancere [26], og som et kjemoterapeutisk middel i pediatriske [27], [28] og voksne cancere [29] – [31]. Virkningsmekanismen av fenretinide indusert celledød har ennå ikke blitt fullstendig belyst. Imidlertid har det blitt foreslått at dets hemmende effekter kan være mediert både av retinsyre-reseptor-avhengig og-Uavhengig mekanismer [17].
Den foreliggende studien undersøkte terapeutiske potensialet av fenretinide som et antitumormiddel samt potensialet sitt virkningsmekanisme mot livmorkreft både
in vitro Hotell og
in vivo.
Materialer og metoder
Etikk uttalelse
Alle dyreforsøk ble godkjent av Northwestern University Animal Care og bruk komité.
Livmorkreftceller kultur
Livmor epiteliale Ishikawa cellelinjer (en slags gave fra Dr. Masato Nishida Kasumigaura Rikshospitalet , Tsuchiura, Ibaraki, Japan) ble avledet fra humane ondartede endometrial epitelceller [32]. Ishikawa-celler ble dyrket i monolag ved 37 ° C, 5% CO2 inkubator i en blanding av DMEM og F12 (01:01) medium med 5% føtalt bovint serum (FBS), 1% natriumpyruvat, 1% penicillin-streptomycin, hygromycin antibiotika løsning (Life Technologies, Grand Island, New York).
Små interfering RNA (siRNA) knockdown
Ishikawa-celler ble dyrket til omtrent 80% konfluens, deretter tilført med en nontargeting negativ kontroll siRNA (siCTL) eller sirnas mot STRA6 (Life Technologies) på 30 nM konsentrasjon ved hjelp Lipofectamine RNAiMAX i henhold til produsentens anbefalinger (Life Technologies). Transfekterte celler ble behandlet med enten DMSO eller 6 pM fenretinide (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) løsning 60 timer etter transfeksjon. Celler ble samlet etter 24 timer med behandling og behandles for real-time PCR eller Western blotting.
Celleviabilitet analysen
Prestoblue (Life Technologies) celleviabiliteten reagens ble brukt for å estimere celleviabilitet. Prestoblue er et resazurin – basert membran som er gjennomtrengelig løsning som etter reduksjon, kan gjøres om til resorufin, en rød fluorescerende forbindelse som kan kvantitativt måles for å bestemme cellenes levedyktighet [33]. Ishikawa-celler ble sådd ut (5 x 10
3-celler per brønn) i 96-brønners plater og dyrket i 24 timer ved 37 ° C. Cellene ble deretter serum sultet i 16-18 timer [34], [35]. Cellene ble deretter dyrket i friskt medium og behandlet med forskjellige konsentrasjoner av fenretinide og megestrolacetat (Sigma-Aldrich) i 24 timer ved 37 ° C. Cytotoksisiteten av fenretinide og megestrolacetat ble målt ved å tilsette det Prestoblue reagenset i henhold til produsentens instruksjoner. Fluorescens signalet ble målt til å bestemme celleviabilitet på Synergy HT plateleser fra Bio-Tek med KC4 3.4-programvaren på 530/590 nm.
Western blot analyse
Ishikawa celler ble behandlet med forskjellige konsentrasjoner av fenretinide og megestrolacetat (Sigma-Aldrich) eller et kjøretøy, lysert i RIPA [50 mM Tris, pH 8.0,150 mM natriumklorid, 1,0% Triton X-100, 0,5% natriumdeoksykolat, 0,1% SDS (natriumdodecylsulfat ) supplert med protease-inhibitorer og fosfatase (Sigma-Aldrich). Klare lysater ble oppnådd etter sentrifugering ved 14 000 rpm i 15 minutter, og proteinkonsentrasjonen ble målt ved hjelp av Micro BCA kit (Thermo Scientific, Rockford, Illinois). Proteiner ble løst ved natriumdodecylsulfat-polyakrylamidgelelektroforese på NOVEX NuPAGE 4-12% Bis-Tris geler (Life Technologies) og overført til polyvinylidendifluorid membraner (Whatman, GE Healthcare Life Sciences, Piscataway, NJ). Membranene ble blokkert med 5% ikke-fett tørrmelk i en time ved romtemperatur og hybridisert med spesifikke primære antistoffer for total og spaltet PARP [poly (ADP-ribose) polymerase], Caspase-9 0,05 ble brukt som kriterium for statistisk signifikans
Resultater
Fenretinide reduserer celleviabilitet og øker apoptose av endometrial kreft Ishikawa celler
in vitro
behandlingen av Ishikawa celler med fenretinide betydelig hemmet celleviabilitet og økt apoptose på en doseavhengig måte (Fig.1A 1D). Fenretinide på 6 til 20 pM forårsaket en reduksjon på 38% til 99% henholdsvis i celleviabilitet og økning i apoptose som tydelig ved økning i proteinnivåer spaltet kaspase -9 og kløyvet-PARP i forhold til kjøretøy-behandlede celler. Fenretinide ble funnet å være toksisk for cellene ved doser høyere enn 2 uM konsentrasjon etter 24 timers behandling (data ikke vist). For å bestemme effektene av megace, ble Ishikawa-celler behandlet med megace alene ved forskjellige konsentrasjoner og i kombinasjon med fenretinide i 24 timer og cellelevedyktigheten 1E). Disse resultatene tyder på at fenretinide reduserer celleviabilitet og induserer apoptose i Ishikawa celler
in vitro
gjør det til en lovende kandidat til å teste sin effekt
in vivo
.
Ishikawa cellene ble behandlet med DMSO (Veh), (A) 2-20μM fenretinide, (B) 0.1-10μM megace eller (C) en kombinasjon av megace + fenretinide i 24 timer og cellenes levedyktighet ble målt ved hjelp av Prestoblue reagens. Data er presentert som gangers endring i relativ fluorescens enheter fra DMSO behandlede prøver og representerer gjennomsnitt ± SEM av 4-5 uavhengige eksperimenter. En stjerne angir en signifikant (*
P
0,05) reduksjon i celleviabilitet i Ishikawa-celler behandlet med fenretinide i forhold til DMSO-behandlede gruppe. (D) Ishikawa-celler ble behandlet med DMSO (Veh) eller 1-10μM fenretinide som induserte apoptose i en doseavhengig måte i løpet av 24 timer med behandling som demonstrert ved en økning i spaltede caspase-9 og spaltet PARP-proteinnivåer ved hjelp av Western blotting. (E) Behandlingen av Ishikawa celler med megace ikke har noen effekt på disse markørene av apoptose. Actin ble brukt som lasting kontroll. Blot er representative for 3 uavhengige eksperimenter.
Fenretinide utøver en økning i retinol opptak via STRA6 og CRBP1
For å bestemme effekten av fenretinide på retinsyre signalveien i livmorkreft, sanntids RT-PCR ble utført. MRNA nivåene av STRA6, CRBP1 og CYP26A1 betydelig øket med den fenretinide behandling [Figur 2 (A-C)]. MRNA fra disse genene forble uendret med megace behandling alene eller i kombinasjon med fenretinide [Fig.3 (A-C]. Imidlertid fenretinide ikke har noen effekt på mRNA-nivåene av nukleære reseptor-gener (RAR-a, RAR-p- , RXR- α), eller intra-cytoplasmatiske bærerproteiner CRABP2 og FABP5 (figur S1).
Total RNA ble isolert fra Ishikawa-celler behandlet med DMSO (Veh) eller 0.25-10μM fenretinide i 24 timer og den ekspresjon av gener som er involvert i retinol-opptaket ble målt ved hjelp av RT-qPCR. data er presentert som gangers endring i relativ mRNA ekspresjon av fenretinide behandlede celler fra DMSO-behandlede prøver celler og representerer gjennomsnitt ± SEM fra 3 uavhengige eksperimenter. en stjerne angir en signifikant ( *
P
0,05) økning i mRNA-ekspresjon av (A) STRA6, (B) CRBP1 og (C) CYP26A1 gener i Ishikawa-celler behandlet med fenretinide i forhold til DMSO-behandlede gruppe
Total RNA ble isolert fra Ishikawa-celler behandlet med DMSO (Vehicle), megace, fenretinide og en kombinasjon av megace og fenretinide begge. Relative mRNA uttrykk for (A) STRA6, (B) CRBP1 og (C) CYP26A1 ble analysert med RT- qPCR. Data er presentert som gangers endring i relative uttrykk for mRNA fra DMSO behandlede prøver og representerer gjennomsnitt ± SEM av 5 uavhengige eksperimenter. En stjerne angir en signifikant (*
P
0,05). Økning i mRNA-ekspresjonen av disse genene i Ishikawa-celler behandlet med fenretinide eller megace + fenretinide celler sammenlignet med DMSO behandlede celler
STRA6 knockdown påvirkninger fenretinide mediert apoptose i endometrial Ishikawa celler
STRA6 er den primære celleoverflaten retinol reseptor i cellene ansvarlig for retinol opptak. For å fastslå om STRA6 er avgjørende for fenretinide indusert apoptose i Ishikawa celler, ble endogen STRA6 uttrykk slått ned ved hjelp av siRNA. Som vist på fig. 4A, kunne vi betydelig knockdown (76%) uttrykk for STRA6 i Ishikawa celler. Knockdown av STRA6 opphever den fenretinide indusert apoptose i Ishikawa-celler (Fig. 4B) som vist ved forminskede nivåer av spaltede caspase-9 og spaltet PARP når STRA6 blir dempet. Disse resultatene sterkt støtte vår hypotese om at STRA6 er avgjørende for fenretinide indusert apoptose i endometrial Ishikawa celler.
Ishikawa celler ble transfektert med 30 nM siCTL (nontargeting negativ kontroll siRNA) eller siSTRA6. (A) Total RNA ble isolert fra ubehandlede Ishikawa-celler på 3 påfølgende dager etter transfeksjon og ekspresjon av STRA6 genet ble målt ved hjelp av RT-qPCR. Data er presentert som gangers endring i relativ mRNA ekspresjon av STRA6 i siSTRA6 transfekterte celler og siCTL transfekterte celler og representerer gjennomsnitt ± SEM av 5 uavhengige eksperimenter. En stjerne indikerer en signifikant (*
P
0,05) reduksjon i mRNA uttrykk for STRA6. (B) transfekterte Ishikawa-celler ble behandlet med DMSO (Veh) eller 6 pm fenretinide i 24 timer etter og immunblotting for apoptotiske markører ble utført. STRA6 genuttrykk knockdown hemmet fenretinide indusert apoptose i Ishikawa celler som demonstrert av en nedgang i proteinnivå kløyvde caspase-9 og kløyvet-PARP. Blot er representative for 3 uavhengige eksperimenter
Fenretinide hemmer tumorprogresjon. En mus xenograft modell
Første
in vitro
observasjoner foreslått at anticancer aktivitet av fenretinide kan oppstå fra dens potensial for å fremme apoptose i tumorceller. For å undersøke dette antitumor aktivitet av fenretinide
in vivo
, ble musene innpodet med subkutane svulster. Fenretinide behandling undertrykte betydelig tumorprogresjon hos mus i forhold til kjøretøy-behandlede mus (figur 5B) basert på ganger endring i tumorstørrelse. De nedgang i tumorvolum var også signifikant i megace behandlet så vel som megace + fenretinide behandlet (figur 5B) i forhold til kjøretøy-behandlede mus. Videre mus syntes å tolerere fenretinide og megace behandlinger uten åpenbare symptomer på forgiftning eller alvorlig tap av kroppsvekt sammenlignet med kjøretøy-behandlede gruppen (Figur S2).
(A) ovariectomized naken CD-1 hunnmus ble injisert med Ishikawa celler i begge flankene og østrogen pellets ble implantert. Tumorene fikk vokse i 2 uker. Etter 2 uker med svulst etablering, ble musene behandlet med kjøretøy (20 mus), megace (19 mus), fenretinide (21 mus) eller megace + fenretinide (20 mus) og svulster ble høstet etter 3 ukers behandling. (B) Bilder av representative skåret svulster fra hver gruppe. (C) The ganger endring i tumorvolum (fra dag en behandling til dag av offer) av kjøretøy, fenretinde, meagce eller begge fenretinide + megace behandlet mus ble plottet etter 3 ukers behandling. Data er vist som gjennomsnitt ± min til maks av to forskjellige eksperimenter. P verdier indikerer en signifikant hemming av fenretinide, megace eller megace + fenretinide både på tumorvekst (* P 0,05). Den største nedgangen i tumorstørrelse ble observert i mus behandlet med fenretinide alene.
Behandling med fenretinide reduserer spredning og øker apoptose i mus svulster
Effekten av fenretinide på celleproliferasjon og apoptose ble evaluert ved immunhistokjemi og H E farging og immunhistokjemisk farging med anti-Ki67 antistoff (markør spredning) og anti-kløyvde caspase -3 (apoptose markør) av hele deler av tumorxenotransplantater. (B) Bildene er på 100
μ
m.
Diskusjoner
Fenretinide har allerede vist seg å være en effektiv terapeutisk og chemopreventive alternativ i bryst og eggstokkreft -kreft [17]. Den foreliggende undersøkelse viser bruken av fenretinide som et mulig antitumormiddel mot livmorkreft ved bruk av både
in-vitro
og
in-vivo-studier
. Fenretinide redusert human endometrial cancer Ishikawa cellelevedyktigheten ved å indusere apoptose som demonstrert ved en økning i celledøds markører (spaltet caspase-9 og spaltet PARP). Det også hemmet tumorvekst
in-vivo
, som vist ved en reduksjon i celleformering (Ki67) og en økning i apoptose (spaltet caspase-3) i mus tumorxenografter. I tillegg har vi vist at antitumor-virkningene av fenretinide blir mediert av en økning i retinol-opptak, med en økt ekspresjon av STRA6 sett i fenretinide behandlede celler.
Nylig har studier av Carrera et al har vist rolle STRA6 i p53 mediert celledød responser i normale celler og kreftceller, som ligner på våre forskningsresultater og funnet å være uavhengig av nedstrøms aktivering av RA mål [38]. De viste at transfeksjon med STRA6 induserte en betydelig mengde av apoptose i RA-sensitive eggstokkreft celler (spesielt PA-1 og A1847) samt i RA ufølsom HCT116 tykktarmskreftceller. I tillegg fant forfatterne at STRA6 transfeksjon induserte både en pro-apoptotiske og tumor undertrykkende påvirke. Disse funnene, sammen med funnene i vår studie, tyder på at STRA6 induksjon kan ha en potensiell rolle i tumor undertrykkelse.
Forrige litteratur antyder en interaksjon i vellykket behandling av kreft celler med cellegifter og deres potensial til å utløse apoptotiske veier. Det er ennå ikke klart hvorvidt de biologiske virkningene av kjemoterapeutiske midler blir mediert av en direkte interaksjon med atom retinoid-reseptorer eller via nye nukleære reseptor-uavhengig trasé [39]. Vi fant at behandling av Ishikawa celler med fenretinide resulterte i cellulær apoptose via induksjon av caspase-9, caspase -3 og PARP. Induksjon av disse apoptotic veier har også blitt sett i brystkreft [17] og eggstokkreft [40]. Interessant nok har en fase III bryst kreft forebygging rettssak i premenopausale kvinner viste at behandling med fenretinide redusert forekomsten av andre bryst malignitet og eggstokkreft [41].
I motsetning til vår nåværende studie, andre studier har vist at RA-analoger kan også fungere ved å aktivere kjernereseptorer. Spesielt ble Ishikawa celler spredning redusert og apoptose ble indusert via RA signale involverer RAR /RXR aktivisering [8].
Progestin har lenge vært brukt i reproduktive alderen kvinner som ønsker å bevare sin fruktbarhet, samt i avansert og tilbakevendende endometriekreft saker som ikke kan behandles med legemidler mot kreft, men 30% eller flere pasienter med livmorkreft utstillings motstand mot hormonelle behandlinger, som begrenser bruken av progestin terapi [42]. I denne studien, megace alene induserte ikke noen apoptose i vår livmorkreft modell, heller ikke det forsterke antitumor aktivitet fenretinide
in vitro
eller
in-vivo
.
begrensningene for denne studien er bruk av enkelt musemodell og bruk av dyrkede endometrial Ishikawa-celler i stedet for primær endometrial kreft celler. Ved hjelp av primær kultur er vanskelig på grunn av den manglende evne til å vokse primære kreftceller uten å stromal faktorer. Videre studier er garantert å etablere antitumor kapasitet fenretinide i forskjellige livmorkreft cellelinjer og tumor musemodeller.
I konklusjonen, har vi vist at fenretinide reduserer celleviabilitet, øker apoptose, og fører til en reduksjon i tumorstørrelse. Vi tror at fenretinide indusert apoptose på grunn av en økning i retinol opptak, spesielt ved å øke genuttrykk av STRA6. Vi mener at denne studien er blant de første til å vise at fenretinide har anti-tumor potensial mot livmorkreft. Vi tror at fremtidige prekliniske og kliniske studier er nødvendig for å validere sitt potensial som en ny mulig terapeutisk kandidat for behandling av livmorkreft.
Hjelpemiddel Informasjon
Figur S1.
Behandling av Ishikawa-celler med fenretinide på 0,25 til 10
μ
M konsentrasjoner på 24 timer ikke endret ekspresjon av retinsyre atom reseptorgener. Dataene er representative for middel ± standard feil av tre ulike eksperimenter
doi:. 10,1371 /journal.pone.0110410.s001 plakater (TIF)
Figur S2.
behandlinger med enten fenretinide eller megace har ingen effekt på mus kroppsvekt. De kroppsvekt ble målt fra Vehicle behandlet eller legemiddelbehandlede grupper av mus to ganger i uken under hele forsøket rime
doi:. 10,1371 /journal.pone.0110410.s002 plakater (TIF)
