Abstract
SRPX2 (Sushi gjenta holdig protein, X-linked to) har nylig dukket opp som en multifunksjonell protein som er involvert i anfall, angiogenese og cellulær vedheft. Her har vi analysert dette proteinet biokjemisk. SRPX2 protein ble utskilt med en meget posttranslasjonell modifikasjon. Kondroitinase ABC-behandling fullstendig reduserte den molekylære massen av renset protein SRPX2 til dens forutsagte størrelse, mens heparitinase, keratanase og hyaluroinidase ikke. Utskilt SRPX2-protein ble også påvist ved anvendelse av et anti-chondroitin sulfat antistoff. Disse resultatene indikerer at SRPX2 er et nytt chondroitin sulfat proteoglykaner (CSPG). Videre, en bindingsanalyse avslørte at hepatocytt-vekstfaktor doseavhengig måte binder seg til SRPX2 protein, og en ligand-interaksjon glykosaminoglykaner ble spekulert å være sannsynlig i proteoglykaner. Angå sin molekylære arkitektur, har SRPX2 sushi gjenta moduler som ligner på fire andre CSPGs /lecticans; imidlertid, den molekylære arkitektur av SRPX2 synes å være helt forskjellig fra den i lecticans. Til sammen fant vi at SRPX2 er en roman CSPG som er overuttrykt i gastrointestinale kreftceller. Våre funn gir viktige glycobiological innsikt i SRPX2 i kreftceller og viser at SRPX2 er et nytt medlem av kreftrelaterte proteoglykan familie
Citation. Tanaka K, Arao T, Tamura D, Aomatsu K, Furuta K, Matsumoto K, et al. (2012) SRPX2 er en roman chondroitin sulfat proteoglykan Som Er overexpressed i Gastrointestinal Cancer. PLoS ONE 7 (1): e27922. doi: 10,1371 /journal.pone.0027922
Redaktør: Hana Algül, Technische Universität München, Tyskland
mottatt: 28 juni 2011; Godkjent: 27 oktober 2011; Publisert: 05.01.2012
Copyright: © 2012 Tanaka et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Dette arbeidet ble støttet av midler til omfattende tredje Term av 10-års strategi for Cancer Control, en Grant-in-Aid for Scientific Research fra departementet for utdanning, kultur, sport, vitenskap og teknologi fra Japan (19209018), og et fond fra Helse- og Arbeiderpartiet Vitenskapelige stipend. Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
Sushi gjenta protein X-linked to (SRPX2) ble først identifisert som et gen oppregulert i pro-B-leukemiceller og er beskrevet som sushi-repeat protein oppregulert i leukemi (SPRUL, [1] ). Flere år senere, SRPX2 ble funnet å være ansvarlig for rolandic anfall assosiert med oral og tale dyspraksi og mental retardasjon [2]. Sykdomsfremkallende mutasjon (N327S) og en andre mutasjon (Y72S) av SRPX2 ble identifisert, og disse mutasjonene resulterte i forsterkning-av-N-glykosylerte form av det muterte proteinet [2]. Selv om de molekylære og biologiske funksjoner av SRPX2 har vært ukjent i lang tid, en nyere studie viste tydelig at SRPX2 bindes til urokinase plasminogen aktivator reseptor (uPAR) i et ligand /reseptor-interaksjon, og at SRPX2 mutasjoner førte til en økning i SRPX2 /uPAR bindingsaffiniteten [3]. I de vaskulære endotelceller, Srpx2 regulerer endotelceller migrasjon og rør formasjon, og samspillet mellom SRPX2 og uPAR er også involvert i de tidlige fasene av endothelial ombygging i løpet av angiogenese [4].
Nylig viste vi at SRPX2 er overuttrykt i magekreft vev og at uttrykket var assosiert med dårlig klinisk resultat [5]. SRPX2 forbedrer cellemigrasjon og heft i mage kreftceller og, interessant, aircondition-medium hentet fra SRPX2 produserende celler økt cellemigrasjon aktivitet og cellulær adhesjon [5]. Vi videre undersøkt SRPX2, med fokus på en biokjemisk analyse i denne studien.
Materialer og metoder
Cell kultur
HEK293 ble opprettholdt i DMEM medium og SNU-16 og MKN7 var opprettholdt i RPMI1640 medium supplementert med 10% FBS. HUVEC (human umbilikalvene endotelceller) ble opprettholdt i Humedia-EG2 (KURABO, Tokyo, Japan) medium med 1% FBS under tilsetning av EGF og FGF-2. Cellene ble holdt i en 5% CO
2-fuktet atmosfære ved 37 ° C. Disse cellelinjene ble hentet fra den japanske Innsamling av Forsknings Bioressurser Collection (Sennan-shi, Osaka).
Western blotting-analyse
Den vestlige blotting analyse har tidligere blitt beskrevet [6]. I tro, ble cellepelletene lysert i RIPA-buffer (Tris-HCl: 50 mM, pH 7,4; NP-40: 1%, Na-deoksykolat: 0,25%, NaCl: 150 mM; EDTA 1 mM, fenylmetyl-sulfonyl-fluorid: 1 mM; aprotinin, leupeptin, pepstatin: 1 mg /ml hver, Na3VO4: 1 mM, NaF: 1 mM). Celleekstrakter ble underkastet elektroforese på 7,5% (vekt /volum) polyakrylamidgeler og overført til en polyvinyliden-di-fluor-membran (Nihon Millipore, Tokyo, Japan). Membranen ble inkubert i Tris-bufret saltvann inneholdende 0,5% Tween 20 med 3% BSA og deretter omsatt med de primære antistoffer og HRP-konjugert sekundært antistoff i 90 minutter hver. Visualisering ble oppnådd med en forsterket kjemiluminescerende deteksjonsreagensen (Amersham Biosciences, Buckinghamshire, UK). Følgende antistoffer ble brukt. Anti-HA høy affinitet (Roche Applied Science, Mannheim, Tyskland), anti-SRPX2 [5] og anti-chondroitin sulfate (CS-56, Seikagaku Kogyo, Tokyo, Japan)
Påvisning av endogent protein SRPX2
Dyrkningsmediet mediet~~POS=HEADCOMP ble dialysert mot 50 mM ammoniumbikarbonat og frysetørket. Resten ble oppløst i 50 mM Tris-HCl (pH 7,4) og sentrifugert ved 20000 rpm i 30 min. Supernatanten ble filtrert gjennom et 0,22 um-filter. Filtratet ble utsatt for rask protein væskekromatografi (FPLC, GE Healthcare UK Ltd. Buckinghamshire, England) separasjon på HiTrap Q HP kolonner (5 ml, GE Healthcare). Kolonnene ble ekvilibrert med 50 mM Tris-HCl (pH 7,4). Prøvene ble deretter injisert i kolonnene, som ble vasket med den samme buffer og eluert ved en strømningshastighet på 4 ml /min ved anvendelse av en lineær gradient bestående av 0-2 M NaCl i 50 mM Tris-HCl (pH 7,4) over 45 min. Den SRPX2 proteinholdige fraksjoner ble deretter utført ved anvendelse av gel-filtrering kromatografi (Superdex200 kolonne, 16 mm x 60 mm; GE Healthcare).
ekspresjonskonstruksjoner og rensing av SRPX2-HA /His protein
Fremgangsmåten for fremstilling av de ekspresjonskonstruksjoner ble tidligere beskrevet [5]. Tomme og SRPX2-HA /Hans vektorer ble deretter transfektert inn i HEK293-celler ved anvendelse FuGENE6 transfeksjon reagens (Roche Diagnostics, Basel, Sveits), og cellene ble deretter valgt med hygromycin. De stabile transfektant HEK293 celler ble utpekt som HEK293-Mock og HEK293-SRPX2-HA /Hans. Det kondisjonerte medium av HEK293-Mock og HEK293-SRPX2-HA /Hans-celler ble utsatt for FPLC lasting på 3 mL /min på en 5 ml HisTrap HP-kolonnen (GE Healthcare). Det bundne protein ble vasket med 15 ml vaskebuffer (WB: 50 mM Na
2HPO
4, 10 mM Tris-HCl, 20 mM imidazol [pH 8,0], og 600 mM NaCl,) og eluert i elueringsbufferen (EB: WB + 230 mM imidazol). De SRPX2-HA /Hans proteinholdige fraksjonene ble applisert på en FPLC Superdex200 kolonne (16 mm x 60 mm; GE Healthcare) ekvilibrert med 0,15 M ammoniumbikarbonat. Eluering ble utført ved anvendelse av den samme buffer ved en strømningshastighet på 1 ml /min. Den SRPX2-HA /Hans-inneholdende fraksjoner ble bekreftet ved hjelp av Western blotting og frysetørket.
Fordøyelse av SRPX2 ved spesifikke gag-nedbrytende enzymer
Renset SRPX2-HA /His protein ble spaltet med flere bestemt enzymer, inkludert kondroitinase ABC og kondroitinase AC II (0,1 enheter i 40 mM Tris-HCl, 40 mM natriumacetat [pH 8,0] ved 37 ° C i 2 timer), kondroitinase B (0,02 enheter i 20 mM Tris-HCl, 0,25 uM kalsium acetat [pH 7,5] ved 37 ° C i 2 timer), heparinase i og heparinase II (0,05 enheter i 5 mM kalsium- acetat, 50 mM natrium-acetat, [pH 7,0] 37 ° C i h), keratanase (0,1 enheter i 7,5 pM Tris-HCl [pH 7,4] ved 37 ° C i 2 timer), og hyaluroinidase (0,02 M acetat-buffer, 0,15 M NaCl [pH 6,0] ved 60 ° C i 2 timer). Enzymer ble kjøpt fra Seikagaku Kogyo. Prøvene ble deretter analysert ved hjelp av western-blotting.
Bindingsanalyser
An IAsys resonans speil biosensor (Affinity sensorer, Cambridge, UK) med en karboksymetyl dekstran-sensing kyvette ble anvendt for å bestemme de kinetiske konstantene av hepatocytt-vekstfaktor (HGF) binding til immobilisert SRPX2-HA /His. SRPX2-HA /His ble oppløst i 10 mM natriumformat (pH 4,0) og immobilisert på den karboksymetyl dekstran overflate av kyvetten, i henhold til produsentens instruksjoner. Bindingsforsøk ble utført i PBS. Endringer i resonansvinkel ble overvåket i 1-s intervaller i ca. 600 s. Forsøk ble utført ved 25 ° C med en rørehastighet på 80 rpm. Bindingsparametrene ble beregnet fra foreningen og dissosiasjon faser av bindingsreaksjoner ved bruk av ikke-lineær kurvetilpasnings FastFit (Affinity sensorer). Bovint serumalbumin (BSA) ble anvendt som en kontroll.
Microarray data
De kliniske prøver av sammenkoblede kolorektal kreft (CRC), har mikroarray prosedyre og analysemetode som er beskrevet tidligere [7] . Denne studien ble godkjent av Institutional Review Board, og skriftlig informert samtykke ble innhentet fra alle pasientene. All microarray data har blitt avsatt til senter for informasjonsteknologi Biology genekspresjon database (CIBEX, https://cibex.nig.ac.jp/index.jsp) som tiltredelse nummer # CBX205. Alle data er MIAME kompatibel og at rådata har blitt deponert i en MIAME kompatibel database (CIBEX), som beskrevet på MGED Society nettstedet https://www.mged.org/Workgroups/MIAME/miame.html.
Pasienter og prøver
30 CRC og 10 sammenkoblede ikke-kreft colonic slimhinnen prøvene ble analysert ved hjelp av real-time RT-PCR. RNA ekstraksjon fremgangsmåte og kvalitetskontrollen protokollen er tidligere blitt beskrevet [7]. Denne studien ble godkjent av Institutional Review Board of National Cancer Center Hospital, og skriftlig informert samtykke ble innhentet fra alle pasientene.
Sanntids revers transkripsjon PCR og Western blot analyse
metodene som brukes i denne delen har tidligere blitt beskrevet [5].
Resultater
Overuttrykte SRPX2 i CRC vev
Vi har evaluert mRNA uttrykk for
SRPX2
i kliniske prøver av CRC i tillegg til sin homolog
SRPX
(
SRPX1
) ved hjelp av microarray data.
SRPX2
uttrykk var markert oppregulert (20,5 ganger, p = 0,00014) i kreftvev, sammenlignet med sammenkoblede noncancerous slimhinner prøver, mens den antatte tumorsuppressorgenet
SRPX
ble nedregulert ( 0,7 fold, p = 0,029) i kreft (fig. 1). Resultatet indikerer at
SRPX2
er overuttrykt i CRC under kreftutvikling og tumorprogresjon, i motsetning til
SRPX
. Real-time RT-PCR for 30 CRC og 10 paret ikke-kreft colonic slimhinnen prøvene bekreftet at
SRPX2
mRNA ble markert overexpressed i CRC prøvene, men ble bare uttrykt på et svært lavt nivå i ikke-cancerous colonic slimhinnen (figur 1B).
(A) mRNA uttrykk for
SRPX2 Hotell og dens homolog
SRPX
i 15 CRC og sammenkoblede normal colonic slimhinnen prøver. Verdiene angir den normaliserte signalintensiteten oppnådd fra mikroarray data. (B) mRNA uttrykk nivåer av
SRPX2
bestemmes ved hjelp av real-time RT-PCR. CRC: tykktarmskreft, Rel mRNA. Normalisert mRNA uttrykk nivåer (
SRPX2 Twitter /
GAPD
× 10
6)
Utskilt SRPX2 protein er mistenkt å bli endret posttranslationally
Den antatte molekylvekt på SRPX2 protein var 53 kDa; imidlertid, western blotting viste at den molekylære massen av det utskilte SRPX2 proteinet var sterkt øket, med flekkete bånd ved en tilsynelatende molekylvekt på 100-150 kDa i SNU-16 og MKN7 cellelinjer (Fig. 2A). Neste, vi evaluert eksogent uttrykte SRPX2 protein fra HEK293-Mock og HEK293-SRPX2-HA /Hans celler. Den molekylære massen av intracellulær SRPX2 protein var lik den forutsagte størrelse, mens den molekylære massen av det utskilte protein-SRPX2 var sterkt øket (100-150 kDa). Utflytende band ble også oppdaget ved hjelp av både anti-HA og anti-SRPX2 antistoffer (Fig. 2B). Den ikke-utflytende band på 120 kDa i cellelysat er endogene SRPX2. Disse resultatene antydet at utskilt SRPX2 protein kan gjennomgå posttranslational modifikasjoner.
(A) Utskilt form av endogent SRPX2 protein hentet fra kulturmedium (CM) i SNU-16 og MKN7 celler. CM ble underkastet ionebytterkromatografi og anvendt for western blotting analyse ved anvendelse av anti-SRPX2 antistoff. (B) Western blotting for eksogent SRPX2 protein oppnådd fra cellelysat og CM ved bruk av anti-SRPX2 og anti-HA-antistoff. Stabile transfektant HEK293-celler, innføring av den full-lengde cDNA-fragment som koder for human SRPX2 med HA og den His-tag vektor eller tom vektor, ble benyttet for analyse. Den ikke-utflytende band på 120 kDa i cellelysat er endogene SRPX2. Mock: HEK293-Mock celler, SRPX2: HEK293-SRPX2-HA /Hans celler. IB: immunoblotting, Lysate: cellelysat, CM: dyrkingsmedium
SRPX2 er en roman chondroitin sulfate proteoglykan
Basert på utseendet på de utflytende band på et høyt økt molekylvekt. , hypotese vi at SRPX2 er et proteoglykan med glycosaminoglycan (GAG) kjeder. Følgelig vi behandlet renset-SRPX2 protein hentet fra kulturmediet HEK293-Mock (tom kontroll) eller HEK293-SRPX2-HA /Hans celler med kondroitinase ABC, heparitinase 1, heparitinase 2, keratanase, kondroitinase AcII, kondroitinase B, og hyaluroinidase . Western blotting viste at den molekylære massen av det utskilte SRPX2 proteinet var tydelig redusert med kondroitinase ABC fordøyelse, men ikke med heparitinase eller keratanase eller hyaluroinidase (Fig. 3A, 3B). Videre kondroitinase behandling viste at kondroitinase ABC og kondroitinase AcII helt fordøyd gags på SRPX2, men det kondroitinase B delvis fordøyd disse kjedene (Fig. 3B). En liten fordøyd SRPX2-protein ble også påvist ved anvendelse av anti-SRPX2-antistoff (Fig. 3C, 3D). Disse resultatene indikerer at SRPX2 inneholder chondroitin sulfat GAG-kjeder, og er et nytt chondroitin sulfat proteoglykaner (CSPG). I tillegg er en delvis spalting med kondroitinase B antyder at en dermatansulfat komponent kan inkluderes i chondroitin sulfat GAG-kjeder. Deretter vi bekreftet resultatene av enzymatisk fordøyelse mot endogen SRPX2 fra HUVEC ved hjelp av Western-blotting med anti-SRPX2 antistoff, og et lignende resultat ble oppnådd (fig. 4A). Anti-chondroitin sulfate antistoff (CS-56) også oppdaget chondroitin sulfate GAG på SRPX2 (Fig. 4B). Den ikke-utflytende bånd ved 120 kDa i cellelysat er endogene SRPX2.
(A, B) Renset SRPX2 protein erholdt fra dyrkede medium fra HEK293-Mock eller HEK293-SRPX2-HA /Hans-celler ble behandlet med kondroitinase ABC, heparitinase 1, heparitinase 2, keratanase, kondroitinase AcII, kondroitinase B og hyaluroinidase. Effekten av fordøyelse av glykosaminoglykanet kjedene ble påvist ved hjelp av Western-blotting ved anvendelse av anti-HA (A, B) og anti-SRPX2 (C, D) antistoff. IB: immunoblotting, CM: dyrkingsmedium. Mock: HEK293-Mock celler, SRPX2. HEK293-SRPX2-HA /Hans celler
(A) Kondroitinase ABC fordøyelsen for endogen SRPX2 protein fra HUVEC (human navlevene endotelceller). Den SRPX2-proteinet ble påvist ved anvendelse av anti-SRPX2 antistoff. (B) Western blotting for SRPX2 protein ved hjelp av anti-chondroitinsulfat antistoff (CS-56). Den ikke-utflytende band på 120 kDa i cellelysat er endogene SRPX2. IB: immunoblotting, Lysate: cellelysat, CM: dyrkingsmedium. Mock: HEK293-Mock celler, SRPX2:. HEK293-SRPX2-HA /Hans celler
HGF binder seg til SRPX2
Det er vel kjent at flere ligander inkludert HGF, heparin-bindende EGF-lignende vekstfaktor, fibroblast vekstfaktor 2 og vaskulær endotelial vekstfaktor er i stand til å binde seg til det GAG-kjeden og at slike interaksjoner er ansett for å være en unik karakteristikk av GAG og proteoglykaner [8]. Ifølge en rapport om CSPG endocan og HGF binding [9], vi undersøkt samspillet mellom HGF og gags ved hjelp av en IAsys resonant speil biosensor. HGF doseavhengig bundet til gags av SRPX2, mens kontroll BSA ikke (Fig. 5A).
K
d
verdien av dette samspillet, beregnet ut fra forholdet mellom
K
diss /K
ass
, var 5,6 nM; Disse dataene var lik dem for tidligere rapporterte data på HGF og endocan [9]. Deretter undersøkte vi den biologiske funksjonen til SRPX2 på HGF. HGF økt spredning av HUVECs, og tilsetning av renset SRPX2 protein inn i mediet betydelig økt HGF-indusert proliferasjon (figur 5B). Disse resultater antyder at interaksjonen av HGF med SRPX2 har en positiv effekt på angiogenese.
(A) IAsys resonans speil biosensor ble benyttet for analyse. Bovint serumalbumin (BSA) ble anvendt som en negativ kontroll. (B) celle proliferasjon av HUVECs evaluert ved å bruke et MTT-assay. Den HUVECs ble stimulert med eller uten 10 ng /ml HGF og 5 ug /ml av renset SRPX2 protein i 72 timer. *, SRPX2 (-) vs (+), p 0,05
SRPX2 har unike molekylære arkitekturer sammenlignet med andre sushi gjenta modul inneholder CSPG
Data fra offentlig tilgjengelige databaser. (https://smart.embl-heidelberg.de/) og en tidligere rapport [10] viste at SRPX2 har tre sushi gjenta moduler (også kjent som utfyller kontroll protein moduler eller korte konsensus repetisjoner) og en hyaline domene (fig. 6 ). Interessant, fire CSPG (agrrecan, versican, neurocan og brevican, også kjent som lecticans) er til stede blant sushi gjenta modulen inneholder familie, og deres felles molekylære arkitekturer består av en immunoglobulin-lignende domene, 2~4 LINK domener, en EGF -lignende domene, en C-type lektin, og en sushi gjenta modul (fig. 6). Tilstedeværelsen av en sushi gjenta modul og klassifisering som en CSPG er de samme for SRPX2 og lecticans, men de andre molekylære arkitekturer av SRPX2 er ganske annerledes
Dataene ble hentet fra den offentlige databasen SMART (http: /. /smart.embl-heidelberg.de/). SRPX2 har tre sushi gjenta moduler og en hyaline domene. Fire sushi gjenta modul inneholder CSPG (agrrecan, versican, neurocan og brevican, også kjent som lecticans) er også vist. SP: signalpeptider, AA: aminosyrer. Sushi: sushi gjenta moduler /CCP /korte konsensus repetisjoner, hyaline: hyaline domene, IG: immunglobulin-aktig, LINK: hyaluronan-bindende, EGF-l: EGF-lignende (Ca
2 + -binding), Ct-L .: C-type lectin
samlet utgjør disse funnene tyder på at SRPX2 er en roman CSPG som er overuttrykt i gastrointestinale kreftceller
Diskusjoner
Den omfattende. bruke og strukturelle mangfoldet av sushi gjenta moduler gjenspeiler antagelig allsidigheten til en strukturell stillaset som har blitt bearbeidet av evolusjonen å passe mange formål, både arkitektonisk og funksjonell, for eksempel formidling av spesifikke protein-protein og protein-karbohydrat interaksjoner [10] – [12]. I mellomtiden har SRPX2 en hyaline domene, som ser ut til å være involvert i cellulære heft. Hyaline domener har blitt identifisert i flere eukaryote proteiner og er ofte forbundet med sushi gjenta moduler eller arrangert i flere kopier [13]. Disse egenskapene ved de molekylære arkitekturer av SRPX2, basert på kjennskap til protein-protein interaksjoner, kan bidra til ligand /reseptor interaksjoner mellom SRPX2 og uPAR, med implikasjoner for forstyrrelser i det språket cortex, kognisjon, og angiogenese [3], [4] .
Vi har vist at SRPX2 er en ny CSPG, noe som tyder på at SRPX2 kan ha ytterligere hittil ukjente biologiske funksjoner som et proteoglykan, inkludert interaksjoner med forskjellige ekstracellulære signalmolekyler slik som vekstfaktorer, morphogens, enzymer og kjemokiner og /eller kan opptre ved celle-ekstracellulær matriks-grensesnitt for å modulere cellesignalisering. Det kondisjonerte-medium av SRPX2-produserende celler markert forbedret cellulær adhesjon i forskjellige kreftcellelinjer [5]; Dette resultat kan forklares ved den biologiske funksjon av SRPX2 som et proteoglykan. I tillegg, selv om vi har vist at bare HGF kan binde seg til SRPX2 Våre resultater tyder på at andre kjente GAG-interaksjon ligander kan være i stand til å binde til det GAG-kjeden av SRPX2. Derfor er funksjonen av ligand-SRPX2 binding kan vidt påvirke virksomheten til signalveien kritisk for kreftceller, inkludert cellulær proliferasjon, apoptose, migrasjon og overlevelse [14]. I tillegg ble SRPX2 funnet å bli utskilt, og kan virke som en ekstracellulær matriks-protein lik andre proteoglykaner; faktisk belegging av kulturskål med SRPX2 protein markert forbedret cellulær adhesjon [5], som støtter denne ideen.
vaskulære endotelceller HUVEC markert uttrykkelig SRPX2 i samme grad som høy-uttrykkende kreftcellelinjer [5]. En fersk rapport viser at Srpx2 er en ny mediator av angiogenese, og en nøkkel-molekyl som er involvert i den invasive migrering av angiogen endotel gjennom sin rolle som en ligand for vaskulær uPAR [4]. Våre funn støtter også involvering av SRPX2 i angiogenese fra et annet aspekt av proteoglykaner. Siden endocan er godt kjent som en vaskulære endotelceller-spesifikke CSPG [8], SRPX2 kan bli kategorisert som en vaskulær relaterte CSPG lik endocan.
I konklusjonen, fant vi at SRPX2 er en roman chondroitin sulfate proteoglykan som er overuttrykt i gastrointestinal kreft. Våre funn gir viktige glycobiological kunnskap om dette proteinet i kreftceller.
Takk
Vi takker Mrs. Eiko Honda (Life Science Center, Kinki University School of Medicine) for henne teknisk assistanse og Mr. Kiyotaka Okada (Department of Physiology, Kinki University School of Medicine) for teknisk rådgivning.
