Abstract
Bakgrunn
p16
INK4a er en tumor suppressor protein som blir indusert i celler på samspillet av høyrisiko HPV E7 med retinoblastom protein av en positiv feedback loop, men kan ikke utøve sin dempende. Tidligere rapporter antydet at p16
INK4a farging tillater presis identifisering av selv små CIN eller livmorhalskreft lesjoner i biopsier. Den prognostiske verdien av uttrykt p16
INK4a i livmorhalskreft har blitt evaluert i flere år mens resultatene er fortsatt kontroversielt. Vi utførte en systematisk oversikt og meta-analyse av studier som vurderer den kliniske og prognostiske betydningen av overekspresjon av p16
INK4a i livmorhalskreft.
Metoder
Identifisering og gjennomgang av publikasjoner vurdere klinisk eller prognostisk betydning av p16
INK4a overekspresjon i livmorhalskreft før 1. mars 2014. En meta-analyse ble utført for å klargjøre sammenhengen mellom p16
INK4a overekspresjon og kliniske resultater.
Resultater
i alt 15 publikasjoner oppfylte kriteriene og omfattet 1633 saker. Analyse av disse dataene viste at p16
INK4a overekspresjon var ikke signifikant assosiert med tumor TNM staging (I + II vs. III + IV) (OR = 0,75, 95% konfidensintervall [CI]: 0,35 til 1,63, P = 0,47 ), tumor karakter (G1 + G2 vs. G3) (OR = 0,78, 95% CI: 0,39 til 1,57, P = 0,49), tumorstørrelsen ( 4 vs. ≥4 cm) (OR = 1,10, 95% KI: 0,45 til 2,69, P = 0,83), eller vaskulær invasjon (OR = 1,20, 95% KI: 0,69 til 2,08, P = 0,52). Men i de identifiserte studiene, overekspresjon av p16
INK4a var sterkt korrelert med ingen lymfeknutemetastase (OR = 0,51, 95% KI: 0,28 til 0,95, P = 0,04), økt total overlevelse (relativ risiko [RR]: 0,42, 95% KI: 0,24 til 0,72, P = 0,002) og økt sykdomsfri overlevelse (RR: 0,60, 95% KI: 0,44 til 0,82, P = 0,001)
Konklusjoner
. denne meta-analysen viser overekspresjon av p16
INK4a i livmorhalskreft er forbundet med økt generell og sykdomsfri overlevelse og dermed markerer en bedre prognose
Citation. Lin J, Albers AE, Qin J, Kaufmann AM (2014) Prognostic Betydningen av overexpressed p16
INK4a hos pasienter med livmorhalskreft: A Meta-Analysis. PLoS ONE ni (9): e106384. doi: 10,1371 /journal.pone.0106384
Redaktør: Zhi-Ming Zheng, National Institute of Health – National Cancer Institute, USA
mottatt: 16 mars 2014; Godkjent: 16 mai 2014; Publisert: 04.09.2014
Copyright: © 2014 Lin et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Data Tilgjengelighet:. Den forfatterne bekrefter at alle data som underbygger funnene er fullt tilgjengelig uten restriksjoner. Dataene i denne meta-analysen er fritt og offentlig tilgjengelig i litteratur repositories som er oppført i referansene
Finansiering:.. Forfatterne har ingen støtte eller finansiering for å rapportere
Konkurrerende interesser: The forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer.
Innledning
livmorhals~~POS=TRUNC kreft~~POS=HEADCOMP er den tredje vanligste kreftformen hos kvinner over hele verden og en ledende årsak til kreft dødsfall hos kvinner i utviklingsland [1] . Forholdet mellom utviklingen av livmorhalskreft og vedvarende infeksjon med høy risiko human papilloma virus (HPV-HR) er velkjent [2]. En mengde forskning på utvikling av objektive biomarkører tillater å skille transformasjonen fra produktive HPV-infeksjoner i carcinoma og å forutsi sykdommens alvorlighetsgrad er utført. Den cellulære tumor suppressor protein cyclin-avhengig kinase inhibitor 2A (p16
INK4a) har blitt identifisert som en biomarkør for å transformere HPV-infeksjoner [3]. Det bremser cellesyklus ved inaktivering av cyclin-avhengige kinaser (CDK4 /CDK6) som er involvert i fosforyleringen av retinoblastom protein (pRb) [4]. Denne prosessen fører til begynnende alderdom i normale celler. I nærvær av den HR-HPV E7 onkogen, er p16
INK4a transkripsjonen induseres av histon-demetylase KDM6B [5]. HPV E7 uttrykk fører til en akutt avhengighet KDM6B uttrykk for livmorhalskreft celle overlevelse. Dermed er p16
INK4A tumor suppressor en kritisk KDM6B nedstrøms transkripsjonen målet og dens uttrykk er avgjørende for celleoverlevelse [6].
I løpet av det siste tiåret, flere studier har evaluert den prognostiske verdien av p16
INK4a protein uttrykk i livmorhalskreft med motstridende resultater. Noen konkluderte med at p16
INK4a uttrykk hadde ingen innflytelse på overlevelse [7] mens andre rapporterte at p16
INK4a uttrykk var prediktiv av bedret overlevelse utfallet for livmorhalskreft [8], [9]. For å vurdere dette spørsmålet, gjennomførte vi en systematisk oversikt og meta-analyse for å fastslå sammenhengen mellom overekspresjon av p16
INK4a og vanlige kliniske og patologiske trekk ved livmorhalskreft.
Materialer og metoder
søke~~POS=TRUNC strategi~~POS=HEADCOMP
En omfattende litteratursøk av elektroniske databaser PubMed (www.pubmed.com), EMBASE (www.embase.com) og Wanfang (www.wanfangdata.com.cn) ble utført opp til 1. mars 2014. følgende søkeord og deres kombinasjoner ble brukt: «cervical cancer», «livmorhalskreft», «karsinom i cervix», «CDKN2A», «p16» og «p16
INK4a». I begrunnelsen lister i forbindelse med alle undersøkelsene hentet i søke ble brukt til å identifisere andre potensielt relevante publikasjoner. Oversiktsartikler ble også skannet for å finne flere kvalifiserte studier, men ingen kunne identifiseres fra referanselistene. Tittelen og sammendrag av hver studie identifisert i søket ble skannet for å utelukke eventuelle klart irrelevante publikasjoner. De resterende artikler ble bladde å avgjøre om de inneholdt informasjon om emnet av interesse.
Utvalgskriteriene
Diagnostisering av livmorhalskreft ble påvist av histopatologiske metoder. Studier av p16
INK4a uttrykk basert på livmorhalskreft vev (etter enten kirurgisk fjerning eller biopsi sampling) ble inkludert. Studier basert på serum eller andre typer prøven ble ekskludert. Alle studier på sammenhengen av p16
INK4a overekspresjon med clinicopathological markører og foreningen av p16
INK4a overekspresjon på total overlevelse (OS) eller sykdomsfri overlevelse (DFS) av livmorhalskreft pasienter ble inkludert. For inklusjon i analysen, var det ingen begrensning på minimum antall pasienter i hver studie. Da var det flere artikler av samme gruppe basert på lignende pasienter og bruker samme deteksjonsmetoder, bare den største eller den nyeste artikkelen ble inkludert.
Data utvinning
Informasjon ble nøye hentet fra alle kvalifiserte publikasjoner uavhengig av to av forfatterne i henhold til inklusjonskriteriene nevnt ovenfor. Uenighet ble løst ved en konsensus diskusjon mellom de to forfatterne. Datatabeller ble komponert for å trekke ut alle relevante data fra tekster, tabeller og figurer av hver inkluderte studien, inkludert forfatter, årstall, land pasientens opprinnelse, tumor stadium, antall pasienter, forskning teknikk som brukes, og cutoff verdi av overekspresjon av p16
INK4a. Dersom prognosen ble bare plottet som Kaplan-Meier kurve i noen artikler, programvaren GetData Graph Digitizer 2,24 (gratis programvare som lastes ned på http: //getdata- graph-digitizer.com) ble brukt for å digitalisere og hente ut data
Statistisk analyse
cut-off for p16
INK4a -positivity ifølge fargede celler er gitt i tabell 1 for hver studie inkludert. ORS med 95% konfidensintervall (KI) ble brukt for å vurdere sammenhengen mellom p16
INK4a overekspresjon og clinicopathological faktorer, inkludert svulst TMN iscenesettelse, svulst klasse, tumor størrelse, vaskulær invasjon og lymfeknute status. Å stratifisere for analysen ble følgende data for p16
INK4a overekspresjon og clinicopathological faktorer sammen til enkle kategorier med sammenlign clinicopathologic relevans: svulst TMN staging (I + II vs. III + IV); svulst Karakter (G1 + G2 vs. G3); tumorstørrelse ( 4 vs. ≥4 cm); vaskulær invasjon eller ikke; lymfeknute negative eller positive.
RR med 95% KI ble brukt for å vurdere sammenslutning av p16
INK4a og overlevelse utfallet kombinert i løpet av studiene. En observert OR eller RR 1 innebar en bedre prognose for gruppen med p16
INK4a overekspresjon og vil bli ansett for å være statistisk signifikant dersom 95% CI ikke overstige 1. Eksistensen av heterogenitet mellom studiene ble evaluert ved bruk av Dersimonian og Laird Q test [10].
Jeg
2 ble brukt til å kvantifisere heterogenitet og en
Jeg
2 verdi 50% ble ansett å representere betydelig heterogenitet mellom studiene. I forhold til fast-effektmodeller, ble tilfeldig effekt-modeller brukt og var mer passende for den aktuelle studien, på grunn av heterogenitet synlig fra skog tomter som ofte ikke kan bli avslørt av Q-test gitt sin lav effekt. Påvirkningen av individuelle studier på sammendraget effekten anslaget ble vist ved hjelp av sensitivitetsanalysen. I tillegg ble trakt tomter og Egger test som brukes til å anslå mulig publikasjonsskjevhet [11]. Cochrane Review Manager versjon 5.2 (Cochrane Library, Oxford, UK) ble brukt til å beregne ORS eller RR og deres variasjoner fra hver undersøkelse.
Resultater
Beskrivelse av studier
i alt 15 publikasjoner møtte kriteriene for denne analysen [7] – [9], [12] – [23] (fig. 1). Det totale antall pasienter som var 1 633, som strekker seg fra 35 til 275 pasienter pr studien. Hovedtrekkene i de kvalifiserte studiene er oppsummert i tabell 1 inkludert cut-off definisjon for p16
INK4a positivitet. Tretten artikler behandlet clinicopathological faktorer. Åtte studier bestemmes total overlevelse (OS) eller sykdomsfri overlevelse (DFS). Syv studier kun rapportert sammenhengen mellom p16
INK4a overekspresjon og clinicopathological faktorer uten OS eller DFS analyse. Det var bare en metode som brukes for å evaluere p16
INK4a uttrykk i livmorhalskreft prøver dvs. immunhistokjemi (IHC).
En totalt 346 artikler ble valgt for meta-analyse ved å bla databasene PubMed, Embase og Wanfang, hvorav 324 ble ekskludert etter gjennomgang av tittel og abstrakt, syv artikler ble ekskludert etter å ha gjennom full publikasjoner, årsakene til ekskludering var: (a) ikke-assosiasjonsstudier (b) forskere i artikkelen ikke bruke verken histopathologic analyse heller nøye klinisk og bilde oppfølging i minst 6 måneder, (c) assosiasjonsstudier for andre sykdommer (d), ikke-originale artikler, (e) data kunne ikke bli hentet eller (f) gjentatte data fra samme eller lignende befolkningen. Til slutt, totalt 15 studier med 1633 pasienter, som oppfylte alle inklusjonskriteriene, ble ansett for analysen.
Korrelasjonen av p16
INK4a uttrykk med clinicopathological parametre
Sammenhengen mellom p16
INK4a og flere clinicopathological parametre er vist i figur 2. Overekspresjon av p16
INK4a var sterkt korrelert med noen lymfeknutemetastase (OR = 0,51, 95% CI: 0,28 til 0,95, P = 0,04 ) (fig. 2A). Men overekspresjon av p16
INK4a var ikke signifikant assosiert med tumor TNM staging (I + II vs. III + IV) (OR = 0,75, 95% KI: 0,35 til 1,63, P = 0,47) (Fig. 2B), svulsten Karakter (G1 + G2 vs. G3) (OR = 0,78, 95% KI: 0,39 til 1,57, P = 0,49) (figur 2C.), tumorstørrelsen ( 4 vs. ≥4 cm) (OR = 1,10 , 95% KI:. 0,45 til 2,69, P = 0,83) (figur 2D) eller vaskulær invasjon (OR = 1,20, 95% KI: 0,69 til 2,08, P = 0,52) (figur 2E)
Clinicopathological parametre undersøkt er lymfeknutestatus (A), TMN klassifikasjon (B), tumor klasse (C), størrelsen av tumor (D), vaskulær invasjon (E). OR med tilhørende konfidensintervall er vist.
p16
INK4a uttrykk og 5-års overlevelse utfallet
Ved hjelp av metodene beskrevet ovenfor, OS og /eller DFS av 849 pasienter i 8 studier ble analysert. Hovedresultatene fra denne meta-analyse er vist i figur 2. Fem års OS Hastigheten ble ekstrahert fra 5 studier. Meta-analyse av de 5 studiene for den prognostiske verdien av p16
INK4a overekspresjon viste at p16
INK4a overekspresjon var assosiert med en gunstig OS. Dette ble hentet fra DerSimonian-Laird tilfeldig effekt-modell med en verdi på 0,42 (95% KI: 0,24 til 0,72, P = 0,002) (Fig. 3), selv om det var heterogenitet mellom studiene (jeg
2 = 58 %, P
h = 0,05). Faktisk har fire av fem studier også konkludert med p16
INK4a uttrykk som en gunstig prognostisk faktor i livmorhalskreftpasienter (fig. 3A).
Forest tomt på RR for OS (A) og DFS ( B) blant inkluderte studiene. Kombinert RR ble beregnet ved en tilfeldig modus.
p16
INK4a uttrykk og DFS i livmorhalskreft
Meta-analyse av 4 aktuelle studier viste at p16
INK4a uttrykk var forbundet med gunstig DFS (RR: 0,60, 95% CI: 0,44 til 0,82, p = 0,001, fig 3B.). Ingen heterogenitet ble observert mellom disse studiene (jeg
2 = 0%, p
h = 0,78).
Følsomhetsanalyse
For å teste for en skjevhet introdusert av lavt antall tilgjengelige kvalifiserte publikasjoner vi utført en sensitivitetsanalyse. For dette er en enkelt studie involvert i meta-analysen ble utelatt for hver runde av analyse for å undersøke påvirkning av de enkelte datasett av den aktuelle studien til de sammenslåtte ORS. Vi fant ut at de tilsvarende samlede ORS ikke ble vesentlig endret ved subtraksjon av et studie (data ikke vist), noe som indikerer at resultatene var statistisk robust.
publikasjonsskjevhet
Begg trakten og Egger test var utført for å vurdere publikasjonsskjevhet i denne meta-analysen. Formen av trakten plott avdekket ikke åpenbare tegn på asymmetri. Egger test viste ingen signifikant publikasjonsskjevhet for svulst Karakter (P = 0,18), TMN klassifisering (P = 0,835), tumorstørrelse (P = 0,851), lymfeknutestatus (P = 0,051), vaskulær invasjon (P = 0,142), DFS (P = 0,602) og OS (P = 0,624) (tabell 2).
Diskusjoner
p16
INK4a protein er en cyclin-avhengig kinase inhibitor som regulerer G1 /S cellesyklus sjekkpunkt ved å inaktivere cyclin D1-CDK4 /6 kompleks aktivitet og dermed styrke pRb aktivitet og undertrykke cellevekst [24]. Det ble nylig vist seg at HPV-transformerte cervikale kreftceller er avhengig av dets ekspresjon og slå ned vil føre til redusert spredning [6]. Mange IHC-studier har vist at p16
INK4a protein er sterkt overuttrykt i dysplastiske epitelceller i livmorhalsen, og at det er forbundet med HR-HPV-infeksjon. Samtidig sitt uttrykk er basal i normal epitel og godartede lesjoner på grunn av noen spontane senescent celler [25]. Videre overekspresjon av p16
INK4a ser ut til å korrelere med graden av cervikal neoplasi, noe som kan forbedre histologisk diagnose og dermed forvaltningen av livmorhalskreft [26]. Tsoumpou et al [27] utførte en meta-analyse av 61 publiserte studier på sammenhengen av p16
INK4a farging til graden av cytologisk eller histologisk unormalt. De rapporterte at andelen av livmorhalsflekker overekspresjon p16
INK4a økte med økende grad av cytologisk unormalt. I histologi viste bare 2% av de normale biopsier og 38% av CIN1 diffus farging for p16
INK4a sammenlignet med 68% av CIN2 og 82% av CIN3 [27]. Dermed er p16
INK4a anse et surrogat biomarkør for cervikal intraepitelial neoplasi.
Nylig, den kliniske betydningen av p16
INK4a overekspresjon i livmorhalskreft har blitt rapportert av mange etterforskere. Men resultatene av disse rapportene er fortsatt motstridende. For å møte den prediktive verdien av p16
INK4a overekspresjon i livmorhalskreft, utførte vi en meta-analyse av publiserte studier for å få en mer presis estimering av ovenstående forening. Denne meta-analysen oppsummerer alle tilgjengelige og relevante data om virkningen av p16
INK4a overekspresjon på prognosen for livmorhalskreft inkludert 1633 tilfeller. Til sammen våre resultater ved å bruke felles RR av OS indikerer at en lav p16
INK4a uttrykk indikerer en dårligere prognose for pasienter diagnostisert med livmorhalskreft enn p16
INK4a overekspresjon. Våre funn var i samsvar med teorien om at HR-HPV er en utløsende faktor i utviklingen av livmorhalskreft, men ville samtidig indusere en p16
INK4a formidlet beskyttelsesmekanisme [28]. Årsaken er ikke klar i dag, men antagelig overekspresjon av p16
INK4a kan gjenkjennes av immunsystemet som et antigen av naturlig lav uttrykte protein. Dette p16
INK4a protein kan eventuelt sette i gang en antitumor respons i livmorhalskreftpasienter [29].
Men mangelen på standardiserte cut-off poeng for positivt uttrykk kunne ha ført til undervurdering av den sanne prognostisk betydning av p16
INK4a overekspresjon. Ingen klare retningslinjer er tilgjengelig om deres bruk i rutinemessig praksis [30]. Tsoumpou
et al product: [27] anmeldt 40 publikasjoner hvor 35 brukes Klaes «scoring system. Prosentandelen av p16
INK4a positivitet av høy klasse plateepitel intraepitelial lesjon varierte mellom 44% og 92%. Derfor, for å en prediktiv evaluering av scoring systemer nå en enighet på terskelen til positivitet er nødvendig.
Sterk p16
INK4a uttrykk er en bevist nyttig surrogatmarkør for svulster med transkripsjonelt aktiv HR-HPV, som er kjent for å være assosiert med mindre genetisk endrede og mindre komplekse svulster som reagerer bedre på behandlingen og har bedre resultater. Den positivitet for p16
INK4a er foreslått som en prognostisk markør for en mer gunstig utfall i hode og nakke plateepitelkarsinom og i lungekreft [31], [32]. Noen forfattere har antydet at p16
INK4a spiller en stor rolle ikke bare i undertrykkelse av celledeling, men også i undertrykkelse av lymphangiogenesis og lymfatiske metastase [30].
Vår analyse er støttet av de kliniske observasjoner av Riou et al [33] som rapporterte at HPV-negative livmorhalskreftpasienter hadde signifikant høyere risiko for generelle tilbakefall og en høyere risiko for fjernt metastatisk tumor enn HPV-positive pasienter. Svulster som mangler HR-HPV positivitet kan ha et større antall mutasjoner i gener som koder for proteiner som regulerer cellesyklusen som skal transformeres, og således kan være mer motstandsdyktig terapi [34]. Dette bekreftes av det faktum at HR-HPV positive karsinom generelt er mer utsatt for radiochemotherapy enn HPV-negative kolleger [35].
Denne meta-analysen har visse begrensninger som bør vurderes ved tolkning av resultatene. Først er våre resultater basert på ujusterte estimater. En mer presis analyse kan gjennomføres ved hjelp av de opprinnelige enkelte datasett som imidlertid ikke er tilgjengelig for oss. Likevel vil en slik tilnærming åpner for justering av andre co-variates inkludert alder, etnisitet, familiehistorie, miljøfaktorer, behandling og livsstil [36]. For det andre er heterogenitet et potensielt problem ved tolkning av resultatene av meta-analyser. Vi minimert sannsynligheten for dette problemet ved å utføre en grundig søk etter publiserte studier med eksplisitte kriterier for studien inkludering, presise data utvinning, og streng dataanalyse. Men betydelig heterogenitet mellom studiene eksistert i noen sammenligninger. Tilstedeværelsen av heterogenitet skyldes forskjeller i mange faktorer, blant annet aldersfordeling, livsstilsfaktorer og standarden på IHC teknikk som brukes spesielt om positivitet terskel. Tredje, bare publiserte fulltekst studier ble inkludert i denne meta-analysen. Ikke-signifikante eller negative funn kan ikke publiseres eller bare publisert som abstract på konferanser og kunne derfor ikke bli vurdert. Vi inkluderte data fra 1633 pasienter som er tilgjengelige i denne meta-analyse som skal legge grunnlaget for å utføre en større og prospektiv studie.
I konklusjonen, til tross for begrensningene i denne meta-analyse, antyder studien at p16
INK4A overekspresjon er signifikant assosiert med bedre prognose i form av lengre DFS og OS hos pasienter med livmorhalskreft. Forhåpentligvis vil denne analysen vil stimulere til videre forskning med stive kriterier og store studiepopulasjoner for å løse eventuelle gjenværende uenighet om hvilken rolle p16
INK4A uttrykk for prognosen for pasienter med livmorhalskreft.
Hjelpemiddel Informasjon
Sjekkliste S1.
PRISMA sjekkliste
doi:. 10,1371 /journal.pone.0106384.s001 plakater (DOC)
