Abstract
makrofag migrasjon hemmende faktor (MIF) blitt stadig mer involvert i kreftutvikling og progresjon ved å fremme betennelse, angiogenese, tumorcelleoverlevelse og immunsuppresjon. MIF er overuttrykt i et utvalg av solide tumortyper i en del på grunn av sin respons overfor hypoksi induserbar faktor (HIF) som drives transkripsjonen aktivering. MIF sekresjon, men er en dårlig forstått prosess på grunn av det faktum at MIF er en leder polypeptid som følger en ikke-klassisk sekretoriske vei. Bedre forståelse av MIF behandling og utslipp kan ha terapeutiske implikasjoner. Her har vi oppdaget at ioniserende stråling (IR) og andre DNA-ødeleggende påkjenninger kan forårsake robust MIF-sekresjon i flere kreftcellelinjer. MIF sekresjon av IR vises uavhengig av ABCA1, en efflukspumpen kolesterol som har blitt implisert i tidligere MIF sekresjon. Imidlertid er MIF sekresjon robust indusert av oksidativt stress. Viktigere, kan MIF utskillelse observeres både i cellekulturmodeller så vel som i tumorer i mus in vivo. Hurtig uttømming av MIF fra tumorceller observert immunhistokjemisk er sammenfallende med forhøyet sirkulerende MIF detektert i blodet sera av bestrålte mus. Gitt den robuste svulsten fremme virksomheten til MIF, våre resultater tyder på at en medfødt vert respons på gentoksisk stress kan redusere de gunstige effektene av kreftbehandlingen, og at MIF hemming kan forbedre behandlingstiltak
Citation. Gupta Y, Pasupuleti V, Du W, Welford SM (2016) Macrophage Migration Hemmende Factor Sekresjon er indusert av ioniserende stråling og oksidativt stress i kreftceller. PLoS ONE 11 (1): e0146482. doi: 10,1371 /journal.pone.0146482
Redaktør: Ester Hammond, University of Oxford, STORBRITANNIA
mottatt: May 14, 2015; Godkjent: 17 desember 2015; Publisert: 07.01.2016
Copyright: © 2016 Gupta et al. Dette er en åpen tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Data Tilgjengelighet: Alle data som er nødvendige å gjenskape funnene i denne studien er inkludert i papir
Finansiering:. dette arbeidet ble finansiert med tilskudd fra NCI (CA178157), American Cancer Society (RSG-12-097-01-CCG), og AACR (14-60-36WELF). Kjernefasiliteter på saken Comprehensive Cancer Center ble støttet av P30CA043703. Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
Macrophage migrasjon hemmende faktor (MIF) er en pleiotropisk cytokin med proinflammatoriske og prosurvival effekter involvert en rekke menneskelige sykdomstilstander, inkludert kreft [1]. MIF er overuttrykt i mange krefttyper, inkludert kreft i bukspyttkjertelen, oral plateepitelkarsinom, melanom, glioblastom, og klarcellet nyrecellekarsinom (ccRCC) [2-4]. Vurdering av forhøyede MIF nivåer har ført til målretting strategier og biomarkør studier som holder lover å forbedre kreftbehandlingen.
MIF er en pro-tumorigen protein påvirke kreftceller og tumor stroma gjennom flere mekanismer. Fungere som en trimer har MIF vist seg å lokke fram signaliserer gjennom CD74-CD44 reseptor kompleks [5,6] og kjemokinreseptorer CXCR2 og CXCR4 [7] for å signalisere antiapoptotic og prosurvival trasé via MAPK, AKT, og Src i et stort spekter av celletyper [8]. MIF har vist seg å modulere p53-proteinstabilitet [9-11], virkning migrasjon i tumorceller [12], tillempe infiltrering av inflammatoriske /immunundertrykkende celler i tumorer [13,14], og for å fremme vaskulogenese og angiogenese via rekruttering og utvidelse av endoteliale progenitorceller (EPC) [15,16]. Sammen kompleksiteten i MIF-tilknyttede funksjoner i kreftfremheve viktigheten av å forstå nye sider ved MIF biologi.
Våre studier har identifisert en avgjørende rolle for MIF i nyrekreft [12,17]. ccRCC er en vanlig svulst fenotype av von Hippel-Lindau sykdom der individer arve heterozygous inaktivering av von Hippel-Lindau tumor suppressor genet (VHL), og utvikle tap av heterozygositet i hele sin levetid. Sporadiske tilfeller av ccRCC også ofte havn defekter i VHL, og understreker dens betydning i nyrekreft [18]. Den mest godt forstått funksjon av VHL er å tjene som en E3 ubiquitin-ligase for å kontrollere stabiliteten av den hypoksi induserbar faktor underenheter HIF 1α og 2α i en oksygenavhengig måte. Tap av VHL fører til konstitutiv aktivering av HIF transkripsjons komplekser, og overekspresjon av kanoniske HIF målgener som GLUT1, VEGF, og Caix Hos nyrekreft. Vi og andre har vist at MIF er en HIF direkte target gen [19,20], som sirkulerer MIF verdiene øker i ccRCC pasienter, og at MIF knockdown svulster vokser mye saktere enn sine kontroller i dyremodeller [17]. De MIF-reseptoren, CD74, har også blitt vist å være oppregulert ved ccRCC [21].
Selv om mekanismene som kontrollerer MIF ekspresjon er dokumentert, oppstår MIF sekresjon gjennom en dårlig beskrevet svei. Stimulering med LPS, hypoksi, UV-stråling og fotodynamisk terapi har vist seg å føre til sekresjon av MIF i celler så varierte som makrofager, T-celler, dendritter, endotelceller og epitelceller [15,22-26]. MIF er en leder polypeptid som utskilles gjennom ikke-klassiske mekanismer potensielt tilsvarende IL-1β og FGF1 og FGF2 [27]. IL-1β blitt foreslått å bli utskilt via inflammasomes, exocytose av sekretoriske lysosomer, mikrovesikler, exosomes og autophagosomes [28]. Inhibering av ATP-bindende kassett transportør (ABCA1) kan svekke sekresjon av IL-1β [29]. Tilsvarende har ABCA1 hemming eksperimenter vist seg å stymie MIF sekresjon [27]. Reduksjon av MIF sekresjon på grunn av 17β-østradiol er vist å korrelere med en reduksjon i ABCA1 mRNA og protein [30]. Hvordan MIF sekresjon er regulert i kreft er ukjent, og målretting MIF på nivå med utskillelsen kunne ha terapeutisk betydning.
I denne studien, oppdaget vi at MIF sekresjon kan være forårsaket av ioniserende stråling (IR) og andre DNA-skadelige stoffer i nyre, bryst og lunge kreftceller. Vi undersøkte sammenhengen mellom den DNA-skade reaksjonsveien og MIF sekresjon, som p53 tumor suppressor blir oppregulert i nærvær av DNA-skade, og er påvist å være inhibert av MIF [11]; men fant ut at MIF sekresjon er p53 uavhengig fordi utskillelsen skjer i p53 mutant eller null-celler. I motsetning til dette ble MIF-sekresjon indusert av oksidativt stress, en felles mediator av en rekke stimulatorer for sekresjon MIF. Til slutt fant vi økt MIF sekresjon i tumorbærende mus etter eksponering for stråling. Derfor foreslår vi at MIF sekresjon i solide svulster kan være en begrensende faktor for tumorkontroll i vanlige kreftbehandlingen.
Metoder
Etikk erklæringen
Alle dyr arbeidet ble utført i henhold til standard retningslinjer, og ble godkjent av case Western Reserve University IACUC, godkjenning 2012-0183. Ketamin /xylazin bedøvelse ble anvendt for å minimalisere dyr ubehag under strålebehandlinger. Mus ble plassert i mikroisolatorbur og ble tatt vare på av CWRU veterinær og dyrehold ansatte i utpekte dyrefasiliteter. Mus ble foret med en normal diett, sterilt vann, og ble gitt standard sengeklær. Etterlevelse Arrive retningslinjer er beskrevet i S1 tabell.
Reagenser
Camptothecin (C9911), og Adriamycin (D1515) ble kjøpt fra Sigma Aldrich. Menneskelig MIF ELISA ble utført ved hjelp av DuoSet ELISA Development Kit fra R D Systems (DY289, Minneapolis, Minnesota, USA) ved å følge den gitte protokollen
Cells, cellekultur og konstruerer
RCC4. ble 786-0 og MCF7 celler kjøpt fra American Type Culture Collection. Celler ble dyrket i DMEM (Thermo Scientific, Logan, UT) med 10% FBS (Invitrogen), og opprettholdt i 5% CO
2-fuktet inkubator ved 37 ° C. shABCA1 og shGFP ble innhentet fra Open Biosystems (Thermo Scientific, Logan, UT): TRCN0000276420 og RHS4459 hhv. For strålebehandlinger, ble 500.000 celler sådd ut i 6 cm plater og fikk feste seg over natten. 2 timer før bestråling, ble mediet skiftet for å minimalisere bidraget av basal sekresjon MIF. Bestrålinger ble utført i et Shepherd Mark I
137Cs fast kilde irradiator på sak Comprehensive Cancer Center Stråling Resources Kjerne Facility.
Protein separasjon, Western blot analyse, immunhistokjemi
Proteinlysatene ble høstet i 9M Urea, 0,075 M Tris-buffer (pH 7,6) og kvantifisert ved anvendelse av BCA-analyse. Prøvene ble kjørt på SDS-PAGE-geler ved hjelp av standardprotokollen. Antistoffer som ble brukt var: anti-MIF (1: 2500) (Santa Cruz, sc-20121), anti-p53 (1: 500) (Santa Cruz, sc-1315), anti-PS15 p53 (1: 1000) (Cell Signaling ; 9284S), ABCA1 (1: 1000) (GenScript, A00121) og anti-β-Actin (1: 50000) (Santa Cruz, sc-47778). Tumor seksjon farging for MIF ble gjort som beskrevet tidligere [12,17].
Animal Studies
3×10
6 786-0 celler ble subkutant implantert i 40 8-10 uke gammel kvinne NCR nu /nu mus kjøpt fra atymiske Kjerne Facility ved case Comprehensive Cancer Center. Kontroll og eksperimentelle gruppene ble randomisert og bestrålt gang svulster nådde 1 cm
3. Endelige utvalgsstørrelser var kontroll (ingen IR) n = 7, 0,5 timer etter 4 Gy IR n = 7, 2 timer etter IR n = 10, 6 timer etter IR n = 8 og 24 timer etter IR n = 8 . Serum ble samlet ved hjertestans punktering like før ofre ved slutten av hvert tidspunkt.
Statistiske analyser
Statistiske analyser ble utført i GraphPad Prism med studentens t-tester for alle presenterte p-verdier, med unntak for dyret ELISA-dataene i hvilken en enveis ANOVA ble anvendt, som angitt. p-verdier under 0,05 ble betraktet som signifikant. Alle feilfelt indikerer standardavvik. Alle forsøk ble gjentatt minst to ganger, men vanligvis tre eller flere ganger.
Resultater
Ioniserende stråling induserer MIF sekresjon
For å bestemme effekten av stråling på MIF uttrykk i nyrekreftceller, analyser western blot av ccRCC cellelinjer RCC4 og 786-O ble utført. Etter 4 Gy av stråling, har vi funnet en signifikant reduksjon i intracellulære nivåer av MIF i løpet av 15-30 min (Fig 1A og 1B). Nedgangen i MIF nivåer restituert etter 1 time i 786-O-celler, men tok 24 timer i RCC4 celler. Som en kontroll for DNA-skade signalering, evaluert vi p53 fosfoserin- 15 nivåer (pS15-p53) i RCC4 celler. Interessant, MIF og pS15-p53 nivåer syntes å være anticorrelated, både demonstrere raske svar innen minutter av eksponering. For å bestemme skjebnen til MIF etter bestråling, målte vi MIF i den betingede media ved ELISA. Faktisk, en time etter bestråling, fant vi robuste og statistisk signifikant økning i utskilte MIF nivåer i begge cellelinjer (figur 1D og 1E).
A) Western blot av RCC4 celler behandlet med 4 Gy IR og lysert ved forskjellige tidspunkter etter eksponering farget med fosfoserin 15 p53, MIF, og p-aktin-antistoffer. MIF-nivåene ble funnet å redusere innen 0,25 timer og komme seg etter 24 timer. B) Western blot av 786-O-celler behandlet med 4 Gy IR og lysert ved forskjellige tidspunkter etter eksponering. C) Western blot av MCF7-celler behandlet med 4 Gy IR og lysert ved forskjellige tidspunkter etter eksponering. DF) MIF ELISA analyse for celler bestrålt i paneler (AC) på en time tidspunkt.
For å utvide våre observasjoner utover nyrekreft linjer, vi også testet effekten av stråling på MIF nivåer i brystkreft-cellelinje MCF-7 og lungekreft linje H1299. Etter avtale med nyrecellelinjer, fant vi stråling forårsaket en nedgang i mobilnettet MIF nivåer innen 30-60 minutter, og en tilhørende økning i ekstracellulære MIF i media (figur 1C, 1D, 1E og 1 H). Dermed dataene argumentere for en generalisert effekt på MIF sekresjon følgende IR.
MIF sekresjon er forårsaket av DNA-skadelige påkjenninger
For ytterligere å studere sammenhengen mellom utskillelsen av MIF og DNA-ødeleggende påkjenninger, vi utsatt RCC4 celler til ulike cellulære stressfaktorer som er kjent for å forårsake DNA-skader. Celler ble behandlet med 10 uM adriamycin eller 4 um camptothecin, topoisomerase II og I inhibitorer, henholdsvis i fire timer, og deretter høstet for western blot. Som stråling, både adriamycin og camptothecin ført til stabilisering og fosforylering av p53 på serin 15, så vel som en signifikant reduksjon i cellulære nivåer av MIF i forhold til DMSO kontroll-behandlede celler (figur 2A). Fordi 786-O-celler er kjent for å være p53 mutant [31], mistenkte vi at MIF sekresjon følgende DNA-skade er p53 uavhengig. Å formelt teste rollen p53, vi utsatt p53-mangel lungekreft cellelinje H1299 [32] IR og igjen vurderes MIF sekresjon. Som både nyrekreft linjene og MCF7- linje, ble MIF sekresjon effektivt indusert (Fig 2B). Dermed har vi en hypotese om at heller en felles formidler av skade stresset kan være den skyldige av MIF sekresjon. Et utvalg av belastninger har blitt rapportert å føre til MIF sekresjon, inkludert hypoksi [15], LPS [23], fotodynamisk terapi (PDT) [24], UV [25], og nå IR. Et felles tema i alle disse påkjenninger er dannelse av reaktive oksygenforbindelser (ROS), som selv har blitt vist direkte å indusere MIF sekresjon i cardiomyocytes [33]. Spesielt, er adriamycin og camptothecin også kjent for å indusere ROS [34-36]. Vi har derfor testet om MIF sekresjon i tumorceller kan være forårsaket av H
2o
2 mediert oksidativ stress. RCC4, 786-0, og H1299 celler ble stimulert med 10 mM H
2o
2 for 2 timer, en dose relativt tilsvarer 4 Gy ioniserende stråling ved dobbel tråd pause produksjon og overlevelse tiltak [37], etter som media ble oppsamlet og analysert for MIF sekresjon ved hjelp av ELISA. Vi observerte en 6,9 ganger økning i MIF sekresjon fra RCC4 celler, en 5,2 ganger økning 786-0, og en 11,2 ganger økning fra H1299 (Fig 2C). Dermed tumorcelle stress ved cellegift og stråling kan forårsake MIF sekresjon gjennom en oksidativt stress sti.
A) Western blot av RCC4 celler etter 4 timer med behandling med 10 mm adriamycin, 4 mikrometer camptothecin, eller 4 Gy IR undersøkt med fosfoserin- 15 p53, total p53, MIF, og p-aktin antistoffer. B) MIF ELISA analyse for H1299 celler bestrålt og testet på en time tidspunkt. C) MIF ELISA på RCC4, 786-O, og H1299 cellekondisjonerte medier etter stimulering med 10 mM H
2o
2 i 2 timer. D) Western blot av RCC4 cellelysater med ABCA1 knockdown av shRNA i forhold til å kontrollere shGFP undersøkt med ABCA1 og p-aktin antistoffer. E) Utskillelse av MIF målt med ELISA fra shABCA1 og shGFP RCC4 celler på 30 minutter og 60 minutter etter 4 Gy IR. F) Utskillelse av MIF målt med ELISA fra shABCA1 og shGFP RCC4 celler 60 minutter etter eksponering for 10 mm H
2o
2. G) Utskillelse av MIF målt med ELISA fra RCC4 og 786-O-celler med eller uten VHL resonstitution 60 minutter etter eksponering for 4 Gy IR.
Stråling og ROS indusert MIF sekresjon oppstår uavhengig av ABCA1
MIF har blitt rapportert til å oppholde seg i på forhånd dannede intracellulære bassenger, men mekanismen som MIF utskilles har lenge vært unnvikende [38]. Med den rollen MIF i flere kreftformer, inkludert ccRCC, og dens anvendelse som en diagnostisk markør for prostatakreft [39], som identifiserer den mekanisme kan gi potensielle terapeutiske mål. Siden ABCA1 transporter har vært innblandet i MIF eksportveien, bestemte vi oss for å teste direkte rolle ABCA1 i stråling-indusert sekresjon. ABCA1 ble slått ned ved hjelp av shRNA i RCC4 celler, som bekreftet ved Western blot (Fig 2D). Kontroll shGFP og shABCA1 knockdown RCC4 cellene ble deretter utsatt for fire Gy av stråling, og media ble testet ved 30 minutter og 60 minutter for MIF-sekresjon ved hjelp av ELISA (figur 2E). Resultatene viste MIF-sekresjon ble ikke påvirket av knockdown av ABCA1 transportør. Vi testet videre om H
2o
2 mediert ROS stresset ville påvirke utskillelsen i en ABCA1 avhengig måte. I likhet med IR, synes ROS stress til indusere sekresjon i en ABCA1 uavhengig måte (Fig 2F). Til slutt, fordi MIF uttrykk er kjent for å være forhøyet i ccRCC, blant annet i RCC4 og 786-O-celler som brukes her, på grunn av inaktivering av VHL tumor suppressor og påfølgende hyperaktive av HIF transkripsjonsfaktorer [17], neste spurte vi om konstitutiv aktivering av HIF hadde en innvirkning på MIF sekresjon. RCC4 og 786-O foreldre og VHL rekonstituerte celler ble dermed utsatt for H
2o
2 behandling, og kondisjonert medium ble testet for MIF sekresjon. Annet enn forventet reduserte nivåer av MIF grunnet nedregulering av HIF, sekresjon av MIF var tydeligvis upåvirket av VHL (Fig 2G). Det gjenstår også mulig at MIF produksjonen påvirkes etter den første sekretorisk reaksjon etter oksidativt stress. Dermed i konklusjon, synes MIF sekresjon følgende IR å være ROS avhengig, men ABCA1 og VHL uavhengig.
IR eksponering for ccRCC tumorxenotransplantater fører til forhøyede nivåer av sirkulerende MIF
Serum nivåer av MIF i kreft har blitt av betydelig interesse i klinisk setting [40]. Våre observasjoner tyder på kreftterapi kan påvirke funksjonelle MIF nivåer utover enkel heving av kreftutvikling, og ikke minst kan potensielt føre til reduksjon av tumorici-dal effekter. For å validere vår
in vitro
funn av ioniserende stråling-indusert sekresjon av MIF, vi brukte en mus subkutan xenograft modell. Tumorigene 786-O-cellene ble implantert i nakne mus på grunn av deres raske tumorvekst og rikelig MIF uttrykk og tillatt å vokse til en størrelse på 1 cm ~
3. Dyrene ble deretter randomisert og bestrålt med 4,0 Gy IR. Ved 0,5, 2, 6 og 24 timer etter bestråling, ble dyrene avlivet og sera og tumorvev ble oppsamlet. Tumor vevssnitt farget for MIF viste en dramatisk nedgang i MIF farging 30 minutter og 2 timer i forhold til ubestrålte svulster, med en retur til baseline nivå på 24 timer (figur 3A). Vi testet deretter blodsera for påvisning av sirkulerende MIF. Vi har funnet, i en tidsmessig koordinert måte, at det var en økning i sirkulerende MIF i 2 timer, redusert med 6 timer og tilbake til basislinjenivåer ved 24 timer, effektivt speiler effekten på tumorvevet nivå (figur 3B). Således analyse av svulstene viser at effekten av stråling på MIF sekresjon ikke er begrenset til celler i kultur, men er rekapitulert i tumorer in vivo.
A) Immunohistokjemisk farging MIF på 786-O-tumorseksjoner 0.5, 2, 6 eller 24 timer etter 4 Gy IR. Forskjellige tumorer ble anvendt for hvert tidspunkt. Målestokk = 50 um B) ELISA av sirkulerende humane MIF-nivåer i musesera fra 786-O tumorbærende mus ved 0,5, 2, 6 eller 24 timer etter 4 Gy IR. Antall dyr for hvert punkt er indikert. Statistisk signifikans målt ved enveis ANOVA.
Diskusjoner
Tilbakefall av svulster etter stråling er en viktig terapeutisk hinder som kan tilskrives flere faktorer, blant overlevelse av radioresistant tumorceller, inflammatoriske responser og immunsuppresjon, og revaskularisering av det bestrålte feltet [41]. Den pleiotropisk natur MIF signale innebærer en bred rolle for MIF i å fremme kreft, og i kreft tilbakefall. I dagens papir, har vi oppdaget nye stimuli av MIF sekresjon i kreft som kan ha kliniske implikasjoner. Vi finner at ioniserende stråling og andre DNA-ødeleggende midler kan føre til dramatiske reduksjon i cellulære MIF-nivåer ved å indusere sekresjon inn i det ekstracellulære miljø. Sekresjon kan bli indusert i celler på minst klar nyrecellekarsinom, brystkreft, lungekreft og opprinnelse, og oppstår både in vitro og in vivo. Sekresjon ser ut til å være både p53 og ABCA1 uavhengig, men våre bevis tyder på en felles av anerkjente stimuli av MIF sekresjon å være en oksidativt stress mediert mekanisme. I sammenheng med kreft terapi, kan forhøyede MIF sekresjon fremme potent tumor-celleoverlevelse, betennelse, og angiogene komplikasjoner. Dataene derfor markere den potensielle nytten av adjuvant MIF hemming for å realisere det fulle potensialet av kreftbehandling.
Interessant, mens vi observerte MIF sekresjon i flere cellelinjer etter IR, andre har ikke sett slike reduksjoner i mobilnettet MIF. Youn et al. nylig har undersøkt effekten av stråling på samspillet mellom MIF med rp53 i A549, og NCI-H358 lungekreftceller, og ikke observere nedgang i celle MIF etter eksponering [42]. Denne motsetningen antyder genetiske parametre kan føre til forskjeller i MIF-nivåer eller sekret som ytterligere kan belyse mekanismen av MIF sekresjon. Likeledes observasjonen her at ABCA1 regulerer ikke MIF-sekresjon ved hjelp av IR eller ROS stress i våre eksperimenter antyder en enda mer komplisert MIF sekresjon mekanisme eksisterer, og kan være avhengig av sammenheng og spenning, selv om det fortsatt er formelt mulig at de resterende ABCA1 nivåer etter knockdown finnes involvert. Tyde mediatorer av MIF sekresjon kan ha viktige implikasjoner i en rekke innstillinger og klart fortjener større etterforskning.
MIF er en godt beskrevet overlevelse signal for en rekke celletyper, og bevis har faktisk foreslått sin rolle i formildende gentoksisk spenning [43]. MIF er også en potent pro-inflammatorisk og angiogen molekyl. MIF effektivt kan motvirke anti-inflammatorisk effekt av glukokortikoider. I nærvær av bakteriell infeksjon for eksempel inflammasjon normalt utløst, og den etterfølgende frigjøring av MIF gjør det mulig for lengre tids betennelse gjennom frigjøring av andre pro-inflammatoriske cytokiner som TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-8, IL-2 og IFN-γ [22,44]. I forbindelse med tumorbiologi har MIF vist å indusere infiltrasjon av flere celletyper inn i tumorer, inkludert myeloide avledet suppressorceller (MDSC) [13], neutrofiler [45] og mastceller [46], så vel som for å påvirker polarisasjonen av tumorassosierte makrofager [47]. Svulsten mikromiljøet blir immunsupprimerte, redusere vertsantitumor responser.
En frontlinjen terapi for ccRCC er VEGF-hemming, men pasientens reaksjoner forbli relativt dårlig med median overlevelse på 7-11 måneder, og bare 10% levende siste 5 årene [ ,,,0],48]. Svar på VEGF-hemmere kan også delvis tilskrives de proangiogenic effektene av MIF, som bevis har vist at utskillelsen av MIF kan indusere rekruttering av endoteliale progenitor celler, som kan drive utviklingen av nye blodkar. Stimulering med MIF har vist seg å direkte påvirke endothelial celledifferensiering, indusere tube-formasjonen i
in vitro Hotell og
in vivo
Matrigel analyser [49]. Myeloide avledet suppressorceller har også blitt stadig mer implisert i utvikling av nye blodårer som de skiller ut angiogene faktorer. Kozin
et al
. viste at rask infiltrasjon av MDSCs tilrettelagt svulst tilbakefall [50], og faktisk Finke
et al
. har direkte innblandet MDSC infiltrasjon med motstand mot Sunitinib [14].
Andre modi for MIF handling har nylig blitt rapportert. Det har vist seg at MIF kan binde ribosomalt protein S3 og dissosierer ved eksponering IR [51]. MIF dissosiasjon aktivert NF-kB, økt sekresjon av pro-inflammatoriske cytokiner, og regulert ekspresjon av epitel-mesenchymale overgangs markører. Funnene ble bekreftet med
in vivo
xenograft data som viser økt metastaser, ytterligere knytter MIF i sin rolle som tumorigent protein. Gitt de mange moduser av MIF handling, er det klart at MIF hemming kan ha store implikasjoner om kreftbehandling og tumorresidiv.
I sammendraget, dataene viser at MIF sekresjon som svar på kreftbehandling kan ha betydelige negative effekter på pasientens utfall. Vi hypotese at effektive MIF-målsøkende midler kan forbedre effekten av stråling og potensielt andre kjemoterapeutiske midler ved å redusere protumorigenic virkningene av MIF signalering. Overvåking MIF sekresjon etter stråling kan også ha nytte i å forutsi pasientens utfall, og derfor har prognostisk betydning i tidligere unappreciated måter.
Hjelpemiddel Informasjon
S1 Table. . ANKOMMER retningslinjer
Etterlevelse ANKOMMER retningslinjer er beskrevet
doi:. 10,1371 /journal.pone.0146482.s001 product: (PDF)
Takk
Stråling Resources Kjerne Facility av saken Comprehensive Cancer Center ble brukt i denne studien.
