Abstract
Små-celle lungekreft (SCLC) er en av de mest aggressive kreftformer, men de molekylære mekanismene bak dens ødeleggende klinisk utfall forbli unnvikende. I denne studien undersøkte vi om mikroRNA (miRNA) uttrykk profiler kan forutsi den kliniske utfall av SCLC pasienter. Totalt 82 pasienter med begrenset SCLC, som ble behandlet med kirurgisk reseksjon og adjuvant kjemoterapi, ble inkludert i studien. Først undersøkte vi uttrykket av 924 mirnas fra 42 SCLC pasienter å oppdage overlevelse-relevant mirnas og utvikle prognostiske modeller, som så ble validert i en uavhengig kohort av 40 tilfeller ved hjelp av kvantitativ real-time PCR. Vi fant ut at MIR-150 /MIR-886-3p signatur var signifikant korrelert med total overlevelse (OS) av SCLC pasienter (p = 0,02) i treningssettet, og begge miRNA uttrykk nivåer var mye lavere i SCLC prøvene enn normale lunge prøver. Den miRNA signatur også vist seg å være en signifikant prediktor for overlevelse i valideringssettet. Pasienter med høy risiko miRNA signaturer hadde dårlig total overlevelse (p = 0,005) og progresjonsfri overlevelse (p = 0,017) sammenlignet med de med lav risiko score. Disse funnene beholdt statistisk signifikans etter justering for alder, kjønn og røykestatus (HR: 0,26, 95%: CI 0,10 til 0,69, p = 0,007), som foreslo det kan være en uavhengig prediktor for overlevelse. I sammendraget, utviklet vi en prognostisk MIR-150 /MIR-886-3p signatur og validert uttrykk i en uavhengig datasett fra resectable SCLC. Disse foreløpige resultatene indikerte at mirnas kan tjene som lovende molekylære prognostiske markører og nye terapeutiske mål for SCLC
Citation. Bi N, Cao J, Song Y, Shen J, Liu W, Vifte J et al. (2014) En mikroRNA Signatur Spår Overlevelse i Early Stage Små-Cell Lung Cancer behandles med kirurgi og adjuvant kjemoterapi. PLoS ONE 9 (3): e91388. doi: 10,1371 /journal.pone.0091388
Redaktør: Bernard Mari, IPMC, CNRS UMR 7275 UNS, Frankrike
mottatt: 26 november 2013; Godkjent: 10 februar 2014; Publisert: 17 mars 2014
Copyright: © 2014 Bi et al. Dette er en åpen-tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Finansiering:. Dette arbeidet ble støttet av 973 National Key Fundamental Research Program of China (2009CB521801, 2010CB912800) og Natural Science Foundation National of China (81021061, 81071830). Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Innledning
lungekreft er fortsatt den ledende dødsårsaken i verden, og småcellet lungekreft (SCLC) står for 15-25% av tilfellene [1]. Klinisk er SCLC skilles fra ikke-småcellet lungekreft (NSCLC) ved hurtig tumorvekst og tidlig innsettende metastaser. I motsetning til i de fleste vestlige land, er SCLC priser fortsatt øker i Kina, der utbredelsen røyking fortsetter også å øke. Selv SCLC er vurdert som svært lydhør overfor kjemoterapi og strålebehandling, tilbakefall skjer ofte i løpet av to år, og total overlevelse (OS) utover fem år er ca 3% -8%. For å forbedre kliniske utfall, har nye legemidler er utviklet, men det er nedslående at overlevelsen for både lokal og avansert SCLC har flatet ut de siste 20 årene.
SCLC er tenkt å gjennomføre en rekke molekylære forandringer som er ganske forskjellig fra NSCLC. For eksempel, TP53 mutasjoner, Rb inaktivering og c-Myc forsterkning er vanlig i SCLC sammenlignet med NSCLC [2], [3]. I kontrast er epidermal vekstfaktor-reseptor (EGFR) mutasjoner, K-ras-mutasjoner og P16 inaktive ofte funnet i NSCLC, men ikke i SCLC [2] – [4]. Men de underliggende mekanismene som SCLC raskt utvikler seg gjenstår å bli definert, og identifiseringen av disse mekanismene kan fremme utviklingen av nye terapeutiske midler og forbedre styringen av denne utfordrende sykdom.
microRNAs (mirnas) er en klasse av ikke-kodende RNA som er omtrent 22 nukleotider lang og er post-transcriptional regulatorer av genuttrykk. På grunn av deres grunnleggende rolle i utvikling og differensiering, involvering i de biologiske mekanismer som ligger til grunn tumorgenese og progresjon, så vel som lav kompleksitet, stabilitet og enkel deteksjon, mirnas representerer en lovende klasse av vevs- og blodbaserte biomarkører for kreft.
En rekke forskere har vist at avvikende miRNA uttrykk er nært knyttet til utvikling og progresjon av mange kreftformer, oppfører seg som tumor-suppressorer eller onkogener [5] – [10]. Nyere data fra flere studier sterkt støtte potensialet for microRNAs som biomarkører for NSCLC [11] – [17]. I tillegg er endret mikroRNA uttrykk også forbundet med tumorprogresjon og overlevelses i NSCLC kreftpasienter. En global miRNA uttrykksmønster vurderes ved hjelp av det er etablert mikromatrisebasert analyse, og flere NSCLC «miRNA signaturer» er blitt foreslått for forbedret molekyl oppsetning og klassifisering av NSCLC [18] – [21]. Men den kliniske betydningen av miRNAs i SCLC har ikke blitt godt etablert.
For å undersøke hvilken rolle avvik miRNA uttrykk profiler i SCLC, vi først kartlagt 924 kjente mirnas i formalinfiksert parafin-embedded (FFPE) prøver fra 42 pasienter og identifisert en dual-miRNA signatur å forutsi den kliniske utfallet av tidlig stadium SCLC pasienter som behandles med kirurgisk fjerning etterfulgt av adjuvant kjemoterapi. Denne foreningen ble ytterligere validert med kvantitativ revers transkriptase polymerase chain reaction (QRT-PCR) analyse av 40 flere pasientprøver, og den prognostiske verdien av signaturen ser ut til å være uavhengig av alder, kjønn og røykestatus i multivariat Cox regresjonsanalyse.
Materialer og metoder
Etikk erklæringen
Denne retrospektive studien ble godkjent av Institutional Review Board of Cancer Hospital og institutt for Chinese Academy of Medical Sciences og Peking Union Medical College. Alle journalen brukt i denne studien ble gjort anonymt og avidentifisert før analyse.
Pasienter og prøver
Vi retrospektivt studert formalinfiksert parafin-embedded (FFPE) prøver fra pasienter som ble diagnostisert med resektabel begrenset SCLC og gjennomgikk kirurgi etterfulgt av adjuvant kjemoterapi (platinum-baserte regimer som cisplatin /etoposid og carboplatin /etoposid) ved Cancer Hospital og institutt for Chinese Academy of Medical Sciences (Beijing, Kina) mellom januar 2000 og desember 2005. Alle pasientene hadde en ECOG funksjonsstatus på 0-1, og pasienter med blandet liten celle /large-cell carcinoma eller kombinert småcellet karsinom ble ekskludert. I alt ble 82 SCLC pasientprøver analysert, hvorav 42 prøver ble brukt som en screening satt til å identifisere mirnas assosiert med overlevelse ved hjelp av en miRNA microarray. De valgte mirnas ble deretter validert i de resterende 40 pasienter ved hjelp av real-time PCR. Hematoxylin og eosin (H E) deler av alle prøvene ble anmeldt av en patolog for å bekrefte diagnosen. Tre normale lungevev (NL) prøver ble innhentet fra makroskopisk uninvolved områder 2-3 cm fra godartede knuter av pasienter som gjennomgikk kirurgisk reseksjon. Alle vev ble NL histopathologically vurdert og var morfologisk normale.
RNA-ekstraksjon
lav-molekylvekt-RNA ble isolert fra total-RNA, som ble ekstrahert med TRIZOL, ved hjelp av en PEG-oppløsning utfelling metode [22]. I korte trekk, for å oppnå lav molekylvekt RNA, ble total RNA ble utfelt med like mengder av PEG-oppløsning, og supernatanten ble utfelt ved hjelp av isopropanol. Alle de RNA-ekstrakter ble vurdert og viste ingen tegn til RNA degradering.
miRNA microarray analyse
Microarray analyse ble utført som tidligere beskrevet [23]. Kort, RNA ble merket med T4-RNA-ligase merking metode. Hybridisering ble utført ved hjelp av en tilpasset mikroRNA microarray panel (CapitalBio, Beijing, Kina), som inkluderte sonder i tre eksemplarer for 924 modent menneske og mus miRNA sekvenser og åtte korte oligonukleotider som besatt ingen homologi til noen kjent RNA sekvens som eksterne kontroller. De hybridiserte arrays ble skannet med en LuxScan 10K-A laser confocal skanner, og bildene innhentet ble deretter analysert ved hjelp av LuxScan 3.0-programvare (CapitalBio, Beijing, Kina) [6]. For databehandling, ble kun data for de menneskelige mirnas (546 av 924) undersøkt. Først rådata var pre-behandlet for å filtrere ut mirnas med maksimal intensitet mindre enn 300 for å redusere skjevhet i normalisering trinn. Etter filtrering, ble 456 (83,5%) av 546 mirnas inkludert for videre analyse. Da, de gjennomsnittlige verdier av gjentatte stedene for hver miRNA ble bakgrunn-subtrahert, og signalene ble normalisert ved hjelp av median sentrum verktøy for gener med Cluster 3,0 software.
Hazard ratio (HR) fra univariat Cox regresjonsanalyse , en standardmetode i biostatistics for undersøkelse av overlevelsesdata som minimerer forspenningen ved å fjerne sensurerte pasienter, ble brukt til å identifisere hvilke mirnas var korrelert med operativsystemet til pasientene [21]. Vi brukte en P-verdi på 0,1 som cutoff for genet valg. En risiko poengsum for miRNA signaturen overlevelse prognose ble beregnet i henhold til en kombinasjon av ekspresjonsnivået av miRNA vektet etter regresjon koeffisienten avledet ved univariat Cox regresjonsanalyse [21], [24], [25]. En klasse sammenligning med parametriske Mann-Whitney U-test ble også utført for å identifisere ulikt uttrykte mirnas mellom 42 SCLC prøver og de tre NL prøvene.
Alle rådata ble avsatt i et MIAME kompatibel database (ArrayExpress GEO. GSM678225 – GSM678266)
miRNA kvantitativ real-time RT-PCR
cDNA ble fremstilt fra 100 ng av total RNA med spesifikke primere for MIR-886-3p, MIR-150 eller U6 som den interne kontrollen. For påvisning av modne mirnas, ble kvantitativt miRNA RT-PCR utført ved hjelp av stammesløyfe QRT-PCR-metoden [26]. De oligoer brukt omfattet miRNA felles revers primer, GTGCAGGGTCCGAGGT; MIR-150, TCTCCCAACCCTTGTACCAGTG; MIR-150 RT primer, GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACCACTGG; MIR-150 forover primer, GTCTCCCAACCCTTGTACCA; MIR-886-3p, CGCGGGTGCTTACTGACCCTT; MIR-886-3p RT primer, GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACAAGGGT; MIR-886-3p fremover primer, CACGCGGGTGCTTACTGAC; U6 fremover primer, CTCGCTTCGGCAGCACA; og U6 revers primer, AACGCTTCACGAATTTGCGT. QRT-PCR ble utført ved hjelp av en ABI Prizm 7300 Sequence Detection System med LightCycler DNA Master SYBR Grønn Jeg mix (Roche Molecular Biochemicals, Mannheim, Tyskland) etter produsentens anvisninger. Nivået av miRNAs ble bestemt ved hjelp av to
-ΔΔCt metoden med SDS 1.3 software, normalisert til nivået av den interne kontrollen, U6, og plottet for inter-mobilnettet sammenligning.
endepunkter
Det primære endepunktet i studien var OS. Sekundære endepunkter inkluderte progresjonsfri overlevelse (PFS), lokal-regional kontroll (LRC), og fjernmetastaser overlevelse (DMFs). OS ble beregnet fra tidspunktet for diagnose til død uansett årsak eller siste kjente dato at pasienten var i live. PFS ble definert som varigheten fra datoen for diagnose til datoen for svikt enten i thorax eller fjerne områder, dato for død av enhver årsak, eller datoen for den siste pasientoppfølging.
LRC ble beregnet fra tidspunktet for diagnosen til den første lokale regionale (thorax) tilbakefall, og DMFS ble beregnet fra tidspunktet for diagnosen til den første fjernmetastaser, dato for død av enhver årsak, eller datoen for den siste pasienten oppfølging -up.
Statistisk analyse
de kliniske kjennetegn ved ulike grupper ble sammenliknet med den uavhengige studentens t test, χ
2 test, eller Fishers eksakte test. Korrelasjonen mellom microarray data og QRT-PCR data ble analysert med Spearman korrelasjon. OS, PFS, LRC og DMFS ble estimert med Kaplan-Meier metoden og log-rank test. HRS ble beregnet med Cox regresjonsanalyse. En multivariat Cox regresjonsmodell ble brukt til å teste om miRNA signatur var en uavhengig prognostisk faktor når justert for alder, kjønn og røykestatus. Alle analysene ble utført ved bruk av SPSS programvarepakke (versjon 11,5, SPSS Inc., Chicago, IL). En tosidig p-verdi på mindre enn 0,05 ble ansett for å være statistisk signifikant.
Resultater
De kliniske kjennetegn ved de 82 SCLC pasienter er listet opp i tabell 1. Median oppfølging tid var 57,2 måneder. Førti-fire pasienter er fortsatt i live. Førtito pasientene hadde tilbakevendende sykdom, og median tid til en diagnose av tilbakefall var 12,3 måneder.
I treningssettet, identifiserte vi to mirnas, MIR-150 og MIR-886-3p, som var assosiert med dårlig OS bruker Cox proporsjonale hazard regresjonsmodell. Begge var beskyttende (tabell 2). Sammenligningen mellom NL og SCLC vev også bekreftet at MIR-150 og MIR-886-3p uttrykk nivåer i SCLC svulster var mye lavere enn i NL prøver (figur 1).
Vi utledet en formel for å beregne risikoen poengsum for hver pasient fra uttrykket nivået av de to mirnas forbundet med OS, vektet etter Cox regresjonskoeffisientene: Risk Score = (0,545 × uttrykk nivå av MIR-150) + (0.617 x uttrykk nivå av MIR -886-3p). Pasienter i treningssettet ble delt inn i høy-risiko eller lav-risikogrupper ved å bruke median miRNA signatur risikoscore som cutoff. Pasienter med høyere risiko score forventes å ha dårlig OS. Sammenlignet med pasienter med lav-risiko miRNA signatur, pasienter med høy risiko signatur hadde signifikant kortere median OS (12.6 måneder sammenlignet med ikke nådd, p = 0,02) (fig. 2A). Likeledes pasienter i høyrisikogruppen hadde kortere PFS og DMFs ganger enn de i lav-risikogruppe (begge p-verdier var 0,045) (Fig. 2B-C). Men LRCs var like i de to gruppene (p = 0,36) (fig. 2D).
For å validere microarray hybridisering uttrykk data, uttrykket nivåer av de to mirnas forbundet med OS ble kvantifisert ved hjelp QRT-PCR i 10 SCLC vev tilfeldig valgt fra treningssettet. Signifikant korrelasjon ble observert mellom log 2-transform array-signalintensitet og QRT-PCR Ct-verdiene for både MIR-150 (r = 0,94, p 0,001) og Mir-886-3p (r = 0,75, p = 0,01) (fig. 3).
(C) Sammenheng mellom uttrykk av U6 RNA ved QRT-PCR og logge 2-forvandlet global middeltemperatur rekke uttrykk. (D) Ekspresjon av U6 RNA i human normal lunge (NL, n = 3) og småcellet lungekreft (SCLC, n = 42) prøver med mikromatrisemetoden. Whiskers skildre de 10 og 90 prosentiler. p-verdi er beregnet ved hjelp av Mann-Whitney U-test.
Deretter brukte vi den samme risikoen poengsum formel hentet fra trening satt til å beregne miRNA signatur risiko score for 40 pasienter i testsettet, for hvilke miRNA nivåer i FFPE- prøvene ble bestemt ved QRT-PCR. Igjen, høy miRNA signatur risiko scorer pasienter utstilt kortere overlevelse enn i lav-risikogruppe (median OS 18,9 måneder sammenlignet med ikke nådd, p = 0,005) (fig. 4A). PFS, DMFs, og LRC var også vesentlig kortere i høy enn i lav risikogruppe (PFS p = 0,017, DMFs p = 0,019 og LRC p = 0,031, fig. 4B, 4C og 4D). Den multivariate Cox-regresjonsanalyse ble utført for å ytterligere vurdere om dual-miRNA signatur er en uavhengig prognostisk faktor assosiert med overlevelse i denne testingen settet. Våre resultater viste at miRNA signaturen forble en uavhengig prognostisk faktor for OS (HR: 0,26, 95%: CI 0,10 til 0,69, p = 0,007), PFS (HR: 0,36, 95%: CI 0,15 til 0,86, p = 0,02) , DMFS (HR: 0,34, 95%: CI 0,13 til 0,86, p = 0,02), og LRC (HR: 0,26, 95%: CI 0,07 til 0,99, p = 0,05) etter justering for alder, kjønn og røykestatus (tabell 3).
Diskusjoner
i denne studien har vi startet en discovery fasen øvelse for å identifisere viktige mirnas ved oppmåling uttrykket av 924 kjente miRNAs i FFPE prøver fra 42 SCLC saker. Vi oppdaget at en dual-miRNA signatur, MIR-150 og MIR-886-3p, var assosiert med OS og PFS. Disse funnene ble senere bekreftet i en uavhengig kohort av 40 SCLC pasienter ved hjelp av QRT-PCR-metoden, og det overensstemmelse mellom disse to plattformene var høy.
Bruk av en optimal normalisering fremgangsmåte er spesielt viktig for miRNA profilering for å minimalisere teknisk variasjoner og for å få meningsfulle biologiske forandringer. Men det er ingen konsensus normalisering metode og anbefalinger i dag for enten microarray eller QRT-PCR-metoder i form av miRNA profilering. I denne studien brukte vi en global normalisering metode i opplæringen sett, som er ansett som mer egnet for storskala miRNA-profilering datasett [27]. I testsettet, brukte vi U6 RNA for å normalisere data fordi det er den hyppigst rapporterte referanse genet for miRNA uttrykket studier i lungekreft i litteraturen [21], [28] – [30]. Vi har også korrelert uttrykk for de to mirnas på QRT-PCR med matriseuttrykk, og bekreftet at ulike miRNA-profilering metoder ikke påvirker resultatene av MIR-150 og MIR-886-3p uttrykk (Fig.3A-B). I tillegg ble korrelasjonen av U6 uttrykk på QRT-PCR med midlere globale matrise ekspresjon observert (r = 0,71, p 0,001, Fig. 3C). U6 RNA viste absolutt fold endrer lavere enn 1,2 ganger og hadde ingen signifikante forskjeller mellom NL og SCLC prøver (p = 0,96, Fig. 3D).
Foreløpig er det bare to publiserte studier som undersøker miRNA uttrykket i humane SCLC-prøvene [31], [32]. Lee et al. undersøkt uttrykk for et panel av syv mirnas (MIR-21, MIR-29b, MIR-34a /b /c, MIR-155, og la 7a) i 31 SCLC svulster [31]. De rapporterte at uttrykket av disse syv mirnas var relatert til den kliniske kjennetegn ved SCLC pasienter og var ikke prognostisk i form av OS eller PFS, heller ikke var uttrykk nivå prediktiv av behandlingsrespons. Disse data var i samsvar med våre funn. Ranade og kolleger evaluert uttrykk av 880 validerte menneskelige modne mirnas med ytterligere 473 validert human pre-mirnas i 34 formalinfikserte, parafininnstøpte SCLC vevsprøver og funnet ut at Mir-92a-2 * var uavhengig assosiert med overlevelse. Selv om denne studien viste for første gang at mirnas kan være prognostisk for SCLC, det inkludert tilfeller med både begrenset stadium (12,1%) og omfattende scenen (87,9%) kreft ved diagnose, og pasienter med omfattende stadium sykdommen har kreft som anses mer heterogene. Videre er det i denne studien, ble tumorvev samlet ikke bare fra primære tumorer, men også fra lymfeknuter og fjerne metastaser, som ville skamme evalueringsresultatene fordi miRNA uttrykk er ansett å være vevsspesifikke. I tillegg, bare halvparten av pasientene i denne studien fikk stråling under førstelinjebehandling. Dette er viktig fordi strålingen kan i betydelig grad påvirke overlevelse i både Co-trinns [33] og omfattende trinns SCLC [34]. Til dags dato er vår studie den første som viser at i tidlig stadium SCLC pasienter som behandles med kirurgi og adjuvant kjemoterapi, spår en MIR-150 /MIR-886-3p signatur OS og PFS i både trening og testing sett. Denne foreningen var uavhengig av alder, kjønn og røykestatus. Disse funnene tyder på at MIR-150 /MIR-886-3p signatur kan være en god kandidat som en molekylær prognostisk markør og ville potensielt hjelpe leger til å identifisere pasienter med høy risiko som kan ha nytte av mer omfattende adjuvant behandling.
Vi fant også at både MIR-150 og MIR-886-3p var negativt assosiert med OS. Sammenligning av miRNA nivåer mellom NL og SCLC vev også bekreftet at MIR-150 og MIR-886-3p uttrykk nivåer i SCLC var mye lavere enn i NL prøver. På grunn av den lille NL utvalgsstørrelsen, var vi ikke i stand til å identifisere et mønster av vedvarende små p-verdier. Men disse data sammenhengende antydet at MIR-150 og MIR-886-3p kan tjene som viktige tumor suppressors i utvikling og progresjon av SCLC og kan fungere med potensielle kreft mål. Vår tidligere eksperimentell studie har vist en roman MIR-886-3p-mediert mekanisme som ligger til grunn avvikende uttrykk for i polo-lignende kinase 1 (PLK1) og transformerende vekstfaktor beta 1 (TGF-β1) i SCLC [23]. Den 3-utranslaterte regioner av PLK1 og TGF-β1 inneholder svært konservert MIR-886-3p bindende motiver, og direkte interaksjon med MIR-886 nedregulerer endogen PLK1 og TGF-P1 protein nivåer. Vi viste også at MIR-886-3p over-ekspresjon inhibert proliferasjon, migrering og invasjon i SCLC-celler, i tillegg til å undertrykke vekst og metastasering av SCLC xenotransplantater i nakne mus. Til slutt, vi avslørte at mekanismen bak nedregulert uttrykk for MIR-886-3p i SCLC ble formidlet av DNA hypermethylation av sin promoter. Til sammen disse funnene etablere en MIR-886-3p-PLK1 /TGF-b1 nexus som en roman regulator og lovende terapeutisk mål for SCLC.
Observasjonen av MIR-150 som en tumor suppressor i SCLC er konsistent med lignende observasjoner i bukspyttkjertelkreft [35], leverkreft [36], tykktarmskreft [37], NSCLC [38], malignt lymfom [39] og akutt leukemi [40]. Imidlertid har sitt engasjement i SCLC ikke blitt rapportert, og de nøyaktige molekylære mekanismene bak sin endrede uttrykket er uklart. Jiang et al. nylig funnet ut at MIR-150 modning blir undertrykt av MYC i MLL-assosiert leukemi. I tillegg er MIR-150 rapportert å være en beskyttende miRNA som direkte er rettet mot c-Myb og andre faktorer [36], [40]. MIR-150 kommuniserer med 3’UTR av c-Myb mRNA, og over-uttrykk for MIR-150 nedregulerer c-Myb protein nivåer [36]. Interessant nok, begge MYC familiemedlemmer og den c-Myb gen er to velkjente og dominerende proto-onkogener som ofte funnet å bli amplifisert eller over-uttrykt i SCLC [41]. Samlet utgjør disse nylig publiserte data sammen med oss, antyder at MIR-150 har en tumor suppressor effekt i SCLC fordi lave nivåer av Mir-150 uttrykk ble korrelert med dårlig overlevelse. Imidlertid er flere studier for å belyse de molekylære mekanismene for både årsak og virkning av endret Mir-150 uttrykk i utvikling og progresjon av SCLC.
Begrensninger av denne studien omfatter sin relativt liten utvalgsstørrelse, en nødvendighet fordi bare et lite antall pasienter (mindre enn 5%) med tidlig perifer sykdom [42] er kirurgiske kandidater. Mer enn åtte hundre SCLC pasienter ble behandlet med kjemoterapi ved vårt sykehus i løpet av samme periode. Som et resultat av analyser biomarkør fra SCLC pasienter er rapportert mye mindre hyppig sammenlignet med NSCLC. I tillegg, på grunn av dette faktum, multitest korreksjoner ikke ble anvendt i denne studien fordi rettelser forebygge type I-feil på bekostning av en økning i type II-feil. Likevel, sammenhengen mellom miRNA signatur og kliniske resultater ble uavhengig bekreftet i en andre pasient sett. Større skala studier er nødvendig for å bekrefte våre funn. En annen begrensning er den retrospektive design. Men alle målinger ble utført på en blind måte. Til slutt bør den potensielle interaksjonen mellom MIR-150 og MIR-886-3p undersøkes nærmere for å belyse mekanismen bak prognostisk rolle denne dual-miRNA signatur.
I konklusjonen, våre foreløpige resultatene antydet at Mir -150 /MIR-886-3p signatur kan forutsi kreft progresjon og overlevelse i tidlig stadium SCLC pasienter og kan være en lovende prognostisk biomarkør og potensielle terapeutiske mål for SCLC pasienter.
Takk
Denne studien ble akseptert for muntlig presentasjon på den 15. verdenskonferansen om Lung Cancer, Sydney, Australia, oktober 27 til oktober 31, 2013.
