Abstract
Bakgrunn
Neoadjuvant cellegift eller strålebehandling (CRT) etterfulgt av kirurgisk reseksjon er standard behandling for lokalavansert endetarmskreft, selv om fullstendig svulst patologisk regresjon er oppnådd i bare opp til 30 % av tilfellene. En clinicopathological og molekylær prediktiv stratifisering av pasienter med avansert kreft i endetarmen mangler fortsatt. Her, c-Met og YKL-40 har blitt studert som mulige prediktorer for CRT respons i endetarmskreft, på grunn av deres rapporterte engasjement i chemoradioresistance i ulike solide svulster.
Materiale og metode
En multicentric studie designet for å vurdere rollen til c-Met og YKL-40 uttrykk i å forutsi chemoradioresistance og å relatere kliniske og patologiske funksjoner med CRT respons. Immunhistokjemi og fluorescerende in situ hybridisering for c-Met ble utført på 81 endetarmskreft biopsier fra pasienter med lokalavansert endetarms adenokarsinom. Alle pasientene gjennomgikk standard (50.4 gy i 28 fraksjoner + samtidig kapecitabin 825 mg /m
2) neoadjuvant CRT eller XELOXART protokollen. CRT respons ble dokumentert på kirurgisk reseksjon prøver og registrert som tumor regresjon Karakter (TRG) i henhold til Mandard kriteriene.
Resultater
En signifikant korrelasjon mellom c-Met og YKL-40 uttrykk ble observert (R = 0,43). Uttrykk for c-Met og YKL-40 ble begge signifikant assosiert med en mangel på fullstendig respons (86% og 87% av c-Met og YKL-40 positive tilfeller, p 0,01 og p = 0,006, henholdsvis). Tretti av de 32 biopsier co-uttrykker begge merkene hadde delvis eller fraværende tumorrespons (TRG 2-5), og befester sin positiv prediktiv verdi (94%). Den eksklusive prediktiv rolle YKL-40 og c-Met ble bekreftet ved hjelp av en multivariat analyse (p = 0,004 og p = 0,007 for YKL-40 og c-Met, henholdsvis). TRG var den eneste morfologiske parameter assosiert med dårlig resultat.
Konklusjon
c-Met og YKL-40 uttrykk er en pålitelig prediktor for delvis /fraværende respons på neoadjuvant CRT i endetarmskreft. Målrettet terapi protokoller kunne dra nytte av tidligere evalueringer av c-MET og YKL-40 uttrykk nivåer for å øke terapeutisk effekt
Citation. Senetta R, Duregon E, Sonetto C, Spadi R, Mistrangelo M, Racca P, et al. (2015) YKL-40 /c-Met Expression in Endetarms Kreft Biopsi Spår Tumor regresjon følgende Neoadjuvant kjemoradioterapi: En Multi-Institutional Study. PLoS ONE 10 (4): e0123759. doi: 10,1371 /journal.pone.0123759
Academic Redaktør: Jose G. Trevino, University of Florida, USA
mottatt: 16 oktober 2014; Godkjent: 21 januar 2015; Publisert: 15 april 2015
Copyright: © 2015 Senetta et al. Dette er en åpen tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres
Data Tilgjengelighet: All relevant data er innenfor papir
Finansiering:. RS har mottatt stipend fra FIRC (Fondazione Italiana per la Ricerca sul Cancro). Den Funder hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet
Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer
Bakgrunn
Neoadjuvant kjemoradioterapi (CRT) etterfulgt av kirurgisk reseksjon i henhold til prinsippet om total mesorectal excision er standard behandling for lokalavansert midten eller lav endetarmskreft, dvs. T3-T4 lesjoner og /eller tilstedeværelse av mistanke om regional metastatiske lymfeknuter [1-4]. Denne tilnærmingen, som gir høy forekomst av svulst resectability og lukkebesparende prosedyrer [5], bestemmer svulst downstaging i 28-62% [5,6] av slike saker og bedrer lokal kontroll [7]. Imidlertid, uavhengig av tumorstadium, er behandlingsrespons meget heterogen, så fullstendig tumor-regresjon patologisk oppnås i 10-30% av tilfellene [6,8] og mange rektale kreftpasienter er motstandsdyktig mot preoperative CRT [9]. Derfor spår neoadjuvant CRT respons kan tillate en mer rasjonell utvalg av pasienter som vil mest sannsynlig dra nytte av denne behandlingen. I løpet av de siste to tiårene, mange kliniske, radiologiske og morfologiske [10-13] parametere, samt molekylære markører [14-21], har blitt undersøkt. Dessverre har ikke etablert et panel av markører eller et gen klassifikator som er nyttig i å forutsi neoadjuvant CRT respons, og en omfattende klinisk validering er fortsatt behov [18,22-27]. Blant mulige markører, glykoprotein YKL-40 [28] og onkogen c-Met reseptortyrosinkinasehemming er prognostiske og lekkasje fra kjemiske og radioresistance relaterte markører [29-34] og er kandidater for målrettet terapi [28,29,31,32 , 35-42]. Videre ble c-Met-hemmere vist seg å øke tumorcelle Radiosensitivity, styrke evnen til stråling for å hemme tumorvekst og invasivitet i tumorxenotransplantater og
in vitro product: [30,37,40]. På tilsvarende måte, kombinasjonen av radioterapi og nøytraliserende YKL-40-antistoffer viste en synergistisk virkning ved hemming av tumor vaskularisering og progresjon i
in vivo
modeller av glioblastom [34]. Men deres rolle som prediktive markører har ennå ikke blitt testet i endetarmskreft. Derfor er en multisentrisk studie for å vurdere rollen til c-Met og YKL-40 forutsi kjemo- og radioresistance er designet for 81 pasienter med lokalavansert endetarms adenokarsinom.
Her viser vi at a) c- møtte og YKL-40 er uavhengige prediktorer for dårlig respons på CRT og b) tumor regresjon Karakter (TRG), men heller ikke c-Met eller YKL-40, er den eneste prognostisk markør for kortere samlet og sykdom overlevelse.
Materialer og metoder
Cases samling
åtti-en endetarms kreft før behandlings endoskopiske biopsier og deres matchet kirurgiske prøver ble hentet fra påfølgende kohorter fra arkiver i patologi divisjoner av tre italienske institusjoner mellom januar 2006 og desember 2012: Universitetet i Torino i Città della Salute e della Scienza (Molinette) Sykehuset i Torino (46 tilfeller); San Luigi Hospital of Orbassano (16 tilfeller); og Institutt for kreftforskning og behandling av Candiolo (19 tilfeller). Alle pasientene hadde en lokalavansert endetarms adenokarsinom kvalifisert for neoadjuvant CRT (CT3-T4 scenen). Femtien pasienter (63%) fikk CRT i henhold til en standard kapecitabin regime (50.4 Gy i 28 fraksjoner + samtidig kapecitabin 825 mg /m
2), mens de resterende 30 pasienter (37%) gjennomgikk en XELOXART studie (50 , 4 Gy i 28 fraksjoner + kapecitabin 825 mg /m
2 + Oxaliplatin 60 mg) [4]. CRT har fullført var 92,5% (75/81 pasienter). Seks pasienter avsluttet behandlingen på grunn av gastrointestinal eller kutan toksisitet, og blant dem, 3 pasienter fullførte bare de tre første ukene av behandlingen. I alle tilfeller kirurgi ble planlagt og utført 6-8 uker etter slutten av CRT. Undersøkelsen ble forelagt og godkjent av Ethic Institutional Review Board for «biobanker og bruk av menneskelig vev for eksperimentelle studier» av patologi Service av Azienda Ospedaliera Città della Salute e della Scienza di Torino, Torino, Italia. Prosjektet ga en verbal og ikke skriftlig informert samtykke fra pasientene på grunn av den retrospektive tilnærming av studien, som ikke innvirkning på deres behandling. Alle sakene ble anonymt registrert. The Institutional Review Board godkjent dette samtykket prosedyren
Histopatologisk evaluering
Alle hematoxylin og eosin (H E). -stained Lysbilder tilgjengelig fra biopsier og kirurgiske prøver ble gjennomgått, og en representant parafin blokk ble velges for hvert enkelt tilfelle. Biopsi og kirurgiske eksemplarer av hver pasient ble uavhengig vurdert av to dedikerte patologer (RS og PC), som bekreftet alle diagnoser. På endetarms før behandling biopsier, ble svulsten Karakter (G1-G2-G3) og apoptose evaluert. Apoptose ble bestemt ved å evaluere de apoptotiske legemer langs basalmembranen, og det ble scoret som negativ ( 25% pr 100 levedyktige celler) eller positiv ( = 25% per 100 levedyktige celler). Vaskulær invasjonen var ikke inkludert blant de histopatologiske parametre er analysert etter biopsiprøver er vanligvis overfladisk og liten størrelse og vurderes derfor dårlig pålitelig for tilstedeværelse av neoplastiske emboli. Respons på neoadjuvant CRT ble etablert av en histopatologisk undersøkelse av kirurgisk resected endetarms prøver ved hjelp av tumor regresjon Karakter (TRG), ifølge Mandard kriterier [43], som er klassifisert i fem karakterer fra TRG1 (komplett regresjon) for å TRG5 (ingen regresjon) basert på tilstedeværelsen av gjenværende cancerceller og av graden av fibrotiske endringer. For å forenkle analysen, komplett tumorrespons (TRG1) ble sammenlignet med delvis /fraværende respons (TRG2-5).
Immunohistochemistry
Immunohistochemistry ble utført i alt, men fem tilfeller av forbehandling biopsier , som hadde utilstrekkelig vev fra endetarms biopsi. Resected kirurgiske prøver med rest kreft (TRG2-5) ble analysert i tillegg. Tre im tykke serieparafinsnitt av hvert tilfelle ble behandlet ved immunhistokjemi hjelp av en automatisert immunostainer (Ventana BenchMark Autostainer, Ventana Medical Systems, Tucson, AZ, USA) med antistoffer mot YKL-40 (Quidel Corporation, San Diego, CA, USA, kanin polyklonale, fortynnet 1/400) og c-Met (Abcam PLC, Cambridge, UK, kanin polyklonale, fortynnet 1: 200). Antigenet retriewal trinnet var inkludert i det automatiske program. En biotin-fri, dekstran kjedebasert deteksjon system (EnVysion, Dako, Carpinteria, CA, USA) og diaminobenzidin (Ventana Medical Systems, Tucson, AZ, USA) ble brukt som kromogen, ifølge standardprotokoller. Neoplastiske vev ble montert på microarray, unntatt den primære antistoff og IgG-matchet serum, og ble brukt som positive og negative kontroller.
Farging tolkning og scoring system
Alle immunostained lysbilder ble analysert uavhengig av RS, AC og PC, som var blindet for de kliniske data. YKL-40 og c-Met-farging ble vurdert som både kategorisk (negativ eller positiv dersom de er tilstede i minst 1% av de neoplastiske celler) og kontinuerlige variabler (scoret som antall positive neoplastiske celler). Når positive celler hadde en moderat til sterk cytoplasmatisk reaktivitet for begge antistoffer. Ved avvik, ble lysbilder anmeldt hjelp av en multihode mikroskop, og en enighet ble nådd.
c-Met Fluorescent in situ hybridisering (FISH) analyse
c-Met FISH analyse ble utført ved hjelp av den probe blandinger sett, MET /CEP7 (Abbott Molecular, Des Plaines, IL, USA), i alle biopsier med en positiv c-Met farging. FISH forsøk ble utført i henhold til produsentens instruksjoner som følger: 10 ul av probe blanding ble påført på hvert objektglass, som straks ble dekket med et dekkglass og forseglet med gummisement. Lysbilder ble grundig co-denaturert i Hybrite System (Vysis, Downers Grove, IL, USA) ved 73 ° C i 3 minutter og hybridisert over natten ved 37 ° C. En post-hybridisering vask ble utført i 2xSSC-0,3% NP-40 ved 73 ° C i 3 minutter. Deretter lysbilder var dehydrert og kontra med DAPI I (4,6-diamidine-to-phenylindol, Vysis, Downers Grove, IL, USA). En automatisert skanning stasjon, MethaSystems (Carl Zeiss MetaSystems Gbmh, Altlussheim, Tyskland), utstyrt med en AxioImager-Z1 epifluorescence mikroskop ble brukt til å bestemme c-Met-genet status. Tumor områder med høy signalkvalitet og god kjerner bevaring ble vurdert. Disse områdene ble automatisk skannet, og 10 forskjellige påfølgende fokus flyene ble gjort for hver FISH signal til ett todimensjonale bilde. For tradisjonell lesing, ble automatisk ervervede bildene overføres til Isis programvare (Carl Zeiss MetaSystems Gbmh, Altlussheim, Tyskland) og lagres i egne filer. FISH data ble analysert ved hjelp av tidligere beskrevne kriterier, ifølge Capuzzo et
al
. [44].
Statistical Analysis
Korrelasjoner mellom YKL-40 og c-Met antistoffer ble gjort ved hjelp av Chi-kvadrat test og to-tailed Spearmans test når regnet kategoriske eller kontinuerlige variabler, henholdsvis
. Klinisk-patologisk parametere for univariate analyser for å fastslå prediktorer for respons på CRT inkludert svulst klasse, apoptose, YKL-40 og c-Met fargemønstre. Fishers eksakte eller khikvadrattester ble anvendt. Alle parametre i univariat analyse med en betydelig innvirkning på å forutsi CRT respons ble ansett for multivariat analyse ved hjelp av Cox proporsjonal risikomodell. For å analysere den prognostiske effekten av alle patologiske variabler i betraktning, var den univariate total overlevelse analyse basert på Kaplan-Meier produkt grense estimat av overlevelse distribusjon. Ujusterte forskjeller mellom overlevelseskurver ble testet ved hjelp av log-rank test. Alle testene ble utført ved hjelp av statistikkprogrammet for samfunnsvitenskap versjon 17 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Et signifikansnivå på p 0,05 ble brukt
Resultater
1) Clinicopathological data og patologisk tumorrespons evaluert i henhold til Mandard TRG
De viktigste kliniske og patologiske trekk ved. hel serie av 81 tilfeller er oppsummert i tabell 1.
Ifølge TNM staging, 20 tilfeller (25%) hadde en post-CRT patologisk T scenen ypT0, 4 tilfeller (5%) hadde ypT1, 20 tilfeller hadde (25%) ypT2, 35 tilfeller hadde (43%) ypT3 og 2 tilfeller hadde (2%) ypT4. Lymfeknutemetastaser ble påvist i 22 tilfeller (27%). Den kliniske T trinn (CT) ble erholdt i 74 tilfeller (91%), og et T-downstaging etter RCT ble observert i 48 (65%) av dem. Anvende Mandard kriterier for å definere TRG, 20 tilfeller (25%) hadde en komplett patologisk tumorrespons til neoadjuvant CRT (TRG1-ypT0) på kirurgisk resected endetarms prøver. I de resterende 61 pasienter (75%), ble en delvis eller fraværende tumorrespons observert, med 16 tilfeller (20%) klassifisert som TRG2, 22 tilfeller (27%) klassifisert som TRG3, 21 saker (26%) klassifisert som TRG4 og 2 tilfeller (2%) klassifisert som TRG5 (fig 1).
distribusjon av fullstendig (TRG1)
versus
partielle respondere (TRG2-5) var lik i de to undergrupper behandling (RT + kapecitabin eller XELOXART protokoll).
2) Immunhistokjemi for YKL-40 og c-Met, analyser FISH og clinicopathological korrelerer
Totalt YKL-40 svulst uttrykk ble observert i 47 (62%) tilfeller, med et moderat eller sterk farging lokalisert i cytoplasma av neoplastiske celler (figur 2A og 2B), mens førti-tre (56%) tilfellene var positive for c-Met med en moderat eller sterk cytoplasmisk reaktivitet ( 2A og 2C).
Både YKL-40 og c-Met svulst uttrykk ble beholdt i resected endetarms prøver i henhold til deres uttrykk på endoskopiske biopsier. c-Met FISH analyse ble utført i alle 43 c-Met-positive tilfeller. Ingen c-Met genamplifisering ble funnet, mens ni (21%) tilfeller påvist lav /høy genet polisomy (Fig 2D). Uttrykket av YKL-40 og c-Met var signifikant korrelert da vurderes både kontinuerlige variabler (r = 0,43 og p = 0,001) og kategoriske variabler (χ
2 = 6,96; p = 0,01). YKL-40 var positive i moderat eller dårlig differensierte tilfeller (p = 0,018) og i de som mangler inflammatorisk infiltrat (p = 0,01), mens c-Met var positivt korrelert med fravær av apoptose (tabell 2).
3) Korrelasjonen av Mandard TRG med morfologisk, immunhistokjemiske og molekylære funksjoner (Tabell 3)
i en univariat analyse oppdeling hele serien i fullstendig (TRG1) eller ikke-komplett respons (TRG2 -5), ble verken svulst klasse eller tilstedeværelse av apoptose oppdaget på endetarms før behandling biopsier med TRG, noe som indikerer at ingen av disse histologiske funksjonene vist seg effektiv i å forutsi CRT respons. Omvendt, YKL-40 og c-Met ble uttrykt forskjellig i de fem TRG underklasser (figur 3A og 4A).
I TRG1 gruppen, den YKL-40 svulst uttrykk varierte fra 0 til 30% (gjennomsnitt: 7,7; middelverdi: 0), og at av c-Met varierte fra 0 til 50% (gjennomsnitt: 12,5; median: 0); spesielt YKL-40 og c-Met-immunoreaksjonsprodukt var fraværende i 67% og 62% av tilfellene TRG1, respektivt. I gruppen av partielle respondere (TRG2-5), den YKL-40 ekspresjon varierte fra 0 til 80% (gjennomsnitt: 17,65; middelverdi: 10), og at av c-Met varierer fra 0 til 60% (gjennomsnitt: 23,3; middelverdi: 20). Selv når betraktet variabler dikotomert, ble ekspresjonen av begge biomarkører signifikant assosiert med en mangel på fullstendig tumorregresjon: 87% av YKL-40-positive tilfeller, og 86% c-Met-positive tilfellene hadde en TRG2-5. Overekspresjon av YKL-40 og c-Met i den ikke-responder gruppe (TRG2-5) sammenlignet med responder gruppe (TRG1) var statistisk signifikant, når det anses både kontinuerlig (p = 0,01 og p = 0,05 eller YKL-40 og c-Met ekspresjon henholdsvis figurene 3B og 4B) og kategoriske variabler (p = 0,006 og p = 0,01, henholdsvis) (figur 3C og 4C), og den hadde høye positive prediktiv verdi (PPV = 87% og 86% for YKL40 og c-Met, henholdsvis) (tabell 4).
for å verifisere om YKL-40 og c-Met co-uttrykk kan korrelere med en delvis eller mangel på respons på neoadjuvant behandling, alle tilfellene var stratifisert i tre undergrupper, i henhold til ekspresjonen av YKL-40 og c-Met på tumorbiopsi: i: YKL-40-negative /c-Met-negative (13/65 tilfeller, 20%), ii: YKL-40- positive /c-Met-negative eller YKL-40-negative /c-Met-positive (20/65 tilfeller, 30%) og iii: YKL-40-positive /c-Met-positive (32/65 tilfeller, 50% ) (fig 5).
Interessant, 30 av de 32 endetarms biopsier co-uttrykker både biomarkører var TRG2-5 på kirurgiske prøver (delvis /fraværende respons). Dette funnet styrker deres positiv prediktiv verdi (94%).
Når sakene ble stratifisert som TRG1-2 vs. TRG3-5 de to biomarkører beholdt sin prediktiv verdi, selv om lavere. I detalj, 68% av YKL-40-positive tilfeller (p = 0,03) og 65% av c-Met-positive tilfeller (p = 0,01) hadde en TRG3-5. Stratifisering av TRG3, bare c-Met beholdt sin verdi (p = 0,03).
multivariat analyse bekreftet YKL-40 og c-Met som uavhengige prediktive faktorer for dårlig respons på CRT (p = 0,004 og p = 0,007 for YKL-40 og c-Met, henholdsvis).
4) korrelasjon mellom YKL-40 og c-Met uttrykk med sykdom utfallet
Oppfølgings data, alt fra 6 til 79 måneder (median: 40), var tilgjengelig for alle, men tre pasienter. Ved tidspunktet for analyse, 75 (96%) av pasientene var i live, men de resterende tre (5%) var død. Overall, tilbakevendende sykdom etter neoadjuvant CRT og kirurgi forekom hos 21 pasienter (28%) (tab 1). I tillegg 11 pasienter (14%) opplevde et lokalt tilbakefall med en median oppfølging på 16 måneder.
Alle de 20 pasientene som er identifisert som komplett respons (TRG1) ble i live ved siste oppfølging ( gjennomsnittlig oppfølging 52 måneder), som var 15 av de 16 pasientene klassifisert som TRG2 (gjennomsnittlig oppfølging 33 måneder); en pasient i TRG2 gruppen var tapt. De tre avdøde pasienter hadde ufullstendig tumorrespons ved kirurgiske endetarms prøven (TRG 3, 4 og 5, henholdsvis), etterfulgt av svulst tilbakefall. Univariat overlevelse analyse viste at høyt TRG var den eneste parameter signifikant korrelert med kortere total overlevelse (p = 0,01) og sykdomsfri overlevelse (p = 0,004).
Diskusjoner
I denne studien fant vi at YKL-40 og c-Met immunhistokjemisk uttrykk i pre-behandling endetarmskreft biopsier spår pålitelig en delvis eller manglende respons på neoadjuvant CRT hos pasienter med lokalavansert endetarms adenokarsinom. Videre viste vi at c-Met og YKL-40 er uavhengige prediktorer for dårlig respons til CRT og at Mandard TRG er den eneste prognostisk faktor for dårlig overlevelse.
Logisk rollen YKL-40 og c-Met
til dags dato, er neoadjuvant CRT standarden på omsorg for pasienter med lokalavansert (trinn II og III) rektal adenokarsinom. Imidlertid er dens effekt ganske uforutsigbar, med en komplett patologisk respons (ypT0) i opptil 30% av tilfellene [25,45,46]. En slik heterogen individuell respons hos pasienter med samme pT scene antyder en sentral rolle iboende biologiske egenskaper neoplastiske lesjoner i å bestemme CRT mottakelighet og understreker behovet for en clinicopathological og molekylær prediktiv lagdeling [25]. c-Met proto-onkogen kodifiserer kinase tyrosin reseptoren hepatocytter vekstfaktor (HGFR). Dets genetiske endringer har blitt identifisert i et bredt spekter av faste kreftformer, og dets ekspresjon blir øket i metastatiske lesjoner [47] og i kreft i ukjent primær opprinnelse [48]. Som et onkogen, har c-Met en dobbel effekt på kreftceller [49]. På den ene siden er det en hoveddriver for langvarig opprettholdelse av transformerte neoplastiske fenotype, noe som gjør kreftceller avhengig av dets signalering for deres vekst og overlevelse. På den annen side, virker den som en tjenlig for kreft overlevelse og spredning, på grunn av dets overekspresjon i ugunstige microenvironmental tilstander, så som hypoksi [50] og terapeutiske ioniserende stråling [30,37,40,51]. I denne forbindelse flere forfattere viste en forbedring i cellulær følsomheten for stråling med c-Met-inhibitorer og siRNA [30,37,52,53]. YKL-40, også betegnet kitinase-3-like-en, er et utskilt glykoprotein som regulerer flere cellulære funksjoner, inkludert celleproliferasjon og differensiering, beskyttelse mot apoptose, stimulering av angiogenese, betennelse og ombygging ekstracellulære vev. Høye plasmanivåer av YKL-40 ble funnet i et bredt spekter av kroniske inflammatoriske sykdommer og maligniteter [54]. Det uttrykkes ved både tumorceller og deres omkringliggende tumor-infiltrerende makrofager, stimulere produksjonen av forskjellige tumorvekstfaktorer, inkludert angiogene faktorer, cytokiner og kjemokiner. Selv om den generelle patologiske rolle og molekylære mekanismer av YKL-40 i tumorgenese gjenstår å fastslås, har sin angiogene signatur blitt rapportert å regulere tumorutviklingen i brystkreft, tykktarmskreft og glioblastom [54,55]. Interessant nok ble ioniserende stråler vist seg å øke YKL-40 ekspresjon og angiogenese i et glioblastoma cellelinje, og denne tilstanden er reversert med en nøytraliserende YKL-40-antistoff [31]. Dessuten, ioniserende stråling og nøytraliserende YKL-40-antistoff synergistisk hemmet tumorvekst i xenopodet hjernetumormodeller [34]. Målet med dette multicentric studien var å verifisere nytten av c-Met og YKL-40 uttrykk i å identifisere de pasientene som vil neppe /ikke dra nytte av neoadjuvant CRT. c-Met og YKL-40 uttrykk i biopsiprøver hadde en svært positiv prediktiv verdi, som de ble forbundet med mangel på komplett tumorrespons i 86% og 87% av tilfellene, henholdsvis
(
p = 0,01 og p = 0,006). Interessant, denne observasjonen ble ytterligere forsterket da bare co-uttrykk ble ansett: 94% av endetarms biopsier co-uttrykker både biomarkører viste TRG2-5
stratifying pasienter i henhold til TRG2, både YKL-40 og C-. Met beholdt sin prediktiv verdi (p = 0,03 og p = 0,01 for henholdsvis YKL-40 og c-Met), mens stratifisering av TRG3 c-Met bare viste seg å forutsi terapi effekt (p = 0,03).
En slik et resultat er i tråd med «stress-svar» rollen de to molekyler: svulster sterkt uttrykker c-Met og YKL-40 vil mest sannsynlig ikke ha nytte av CRT fordi disse kreftcellene har allerede slått på en transkripsjonen tilpasning til ugunstige microenviromental forhold . Beslutningen om å bruke en immunhistokjemisk tilnærming i stedet for en molekylær analyse gir praktiske fordeler. Genomisk og proteomikk analyser er kostbare, og spesielt utstyr og høyt utdannede teknikere er pålagt å utføre visse molekylære analyser, mens immunhistokjemi er mye brukt i diagnostiske rutiner og har en gunstig kost-nytte-balanse. Basert på den forrige ekstern validering av disse multi-institusjonelle resultater, innføring av en immunhistokjemi-panel bestående av YKL-40 /c-Met i endetarmskreft diagnostisk-rutine i parallell til H kunne E-fargede slides brukes for å unngå uforholdsmessige omkostninger selv i laboratorier håndtere et høyt antall kirurgiske prøver.
Prognostic rolle kliniske og patologiske variabler
rollen c-Met i prognosen har blitt rapportert å korrelere med sin overekspresjon i forskjellig faste tumorer (slik som gastrisk adenokarsinom [51], eggstokk [56] og ikke-liten lungecancer [57]; overekspresjon av YKL-40, særlig som et sirkulerende markør [54], er likeledes korrelert med dens rolle i prognose. likevel gjør våre resultater støtter ikke rapportert prognostisk rolle for c-Met og YKL-40 [58] i tykk- og endetarmskreft [32,39,41,59], selv om sistnevnte ble beskrevet bare på serumnivået. Vi fant ut at TRG , kvantifisert i fem karakterer i henhold til Mandard skala [43], var den eneste parameter som påvirker pasientens utfallet i form av både total overlevelse og sykdomsfri overlevelse, som tidligere rapportert [60-62]. Følgelig pasienter klassifisert som TRG1 (fullstendig tumorrespons) og TRG2 (enkle celler eller små grupper av kreftceller) viste en bedre total overlevelse (100% ved tidspunktet for siste oppfølging i begge grupper) og kontroll av sykdomsutvikling (84, 2% i TRG1 gruppen og 80% i TRG2 gruppe). Selv om den prognostiske og prediktive betydning TRG er fortsatt påvirket av de begrensede endepunktene og kvaliteten og heterogenitet av histologiske data, TRG følgende preoperativ kjemoradioterapi for endetarmskreft har en solid prognostisk bevis. En framtidig utfordring gjenstår å finne en surrogat-invasiv metode for å kirurgi for å nøyaktig identifisere pasienter som har fått en gunstig TRG og å bruke TRG å velge pasienter for postoperativ adjuvant kjemoterapi følgende preoperative CRT [63].
Konklusjon
YKL-40 og c-Met uttrykk i pre-neoadjuvant endetarmskreft biopsi er et pålitelig verktøy for å forutsi den delvise eller mangel på tumor respons på CRT. Følgelig kan en «immunhistokjemi-beriket» diagnostisk tilnærming til endetarms biopsier, med sikte på å øke CRT følsomheten med spesielt utvalgte målrettet terapi for de som forventes å være dårlig respondere, gi prediktiv informasjon med kost-nytte-effekt og legge til rette for ytterligere terapeutiske utvalg av pasienter.
til slutt, prospektive randomiserte studier er nødvendig for å validere rollen YKL-40 /c-Met forutsi svulst motstand; hvis så, ville effekten av neoadjuvant CRT hos disse pasientene ha nytte av terapi allergifremkallende, dvs. målrettede c-met-hemmere, for å bedre reaksjonsevne.
